Name: Fundición cerebrovascular del ratón adulto de imágenes en 3D y el análisis morfológico (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-11-30T12:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 42 s
Description: Aprende a realizar fundición cerebrovascular en ratones adultos para visualizar la vasculatura cerebral en 3D mediante microscopía de campo claro y micro CT. Este método versátil permite analizar la morfología vascular sin materiales radiactivos.

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Los autores agradecen a Voltaire Gungab de asistencia con la preparación del manuscrito. Este trabajo fue apoyado en parte por subvenciones de: los Institutos Nacionales de Salud (T32 GM008440 a EJ Walker, R01 NS27713 a WL Young, P01 NS44155 a WL jóvenes y Su H.), y el R21 NS070153 de H. Su, y el americano Heart Association (AHA 10GRNT3130004 de H. Su).

1. Limpieza de sangre de la vasculatura <ol><li> Anestesiar a ratones mediante la inyección intraperitoneal de 100 mg / kg de ketamina con 10 mg / kg de xilazina diluida en solución salina 0,25 ml. </li><li> Una vez que la anestesia ha sido confirmado por no responder a una pizca de la pata, utilizar tijeras para hacer una incisión en el pecho con unas tijeras justo debajo de la apófisis xifoides, corte a través del diafragma, y ​​cortada entre el segmento dorsal y ventral de la caja torácica para exponer la cavidad torácica. Exponer el corazón doblando el esternón y la pared torácica adyacente y seguro con pinzas hemostáticas. Abrir el saco pericárdico con pinzas para exponer el corazón. </li><li> Encienda la bomba de perfusión (100 mmHg de presión) conectado a PBS caliente más heparina (5 unidades / ml) en un baño de agua caliente a 37 ° C y el tubo con una aguja de calibre 22 en la contundente salida. </li><li> Insertar la aguja en el ventrículo izquierdo, cerca del ápice del corazón. Inmediatamente abrieron la aurícula derecha para permitir flujo arterial sistémica y continuar el lavado hasta la sangre is retiró de la circulación. </li></ol> 2. La perfusión de agente de casting en el sistema vascular <ol><li> Prepare Microfil (Flow Tech, Inc. Carver, MA) solución de fundición por el protocolo del fabricante: Mezclar 5 ml de diluyente MV con 4 ml de compuesto MV filtrado. Agregar 450μl (5%) de catalizador (MV agente de curado). Tiempo de solución de trabajo es de 20 minutos, pero la mezcla inmediatamente antes de su uso para asegurar la viscosidad adecuada. </li><li> Retirar de fundición solución del agente en una jeringa de 10 ml, adjuntar un contundente 20 aguja a la jeringa y la aguja de llenado con la solución. </li><li> Insertar la aguja en el ventrículo izquierdo a través del mismo agujero utilizado para la irrigación de la sangre. Aguja asegura en su lugar con la pinza hemostática en el corazón. </li><li> Inyectar la solución de fundición agente lentamente hacia el ventrículo izquierdo a aproximadamente 3 ml / min. El exceso de presión puede conducir a un flujo incorrecto de agente de casting o de ruptura de los vasos potencial. </li><li> Busque signos de perfusión con éxito, incluyendo: Visualización del repartoción del agente en la vasculatura intestino y el hígado, decoloración de la extremidad distal, y la nariz y la decoloración de la lengua. Reajustar la aguja, si es necesario para lograr una perfusión adecuada. </li></ol> 3. Recolección y procesamiento de tejidos <ol><li> Quitar el cerebro y el lugar en paraformaldehído al 4% durante la noche a 4 ° C. </li><li> Deshidratar el cerebro mediante la colocación de paraformaldehído directamente en EtOH concentra cada vez más a temperatura ambiente: 25% EtOH, 1 día, 50% de EtOH, 1 día, 75% de EtOH, un día, y el 95% de EtOH, 2 días, y el 100% EtOH, 2 días . </li><li> Aclarar el tejido cerebral alrededor de los vasos sanguíneos del cerebro mediante la inmersión de perfusión en salicilato de metilo durante 2 días a temperatura ambiente. </li><li> Vasos sanguíneos de todo el cerebro unsectioned aclarado se pueden visualizar con el cerebro inmerso en salicilato de metilo bajo un microscopio de disección (Fig. 1) (Leica MZFL microscopio III, Leica Microsystems, Bannockburn, IL) o microscopio de campo claro (Fig. 2) (Leica DM / LS, Leica Microsystems). </li><li> Reclarificationse puede hacer si el tejido no esté completamente curada. Del cerebro de la transferencia de salicilato de metilo, el 95% de EtOH durante 2 días, 100% EtOH durante 2 días, y salicilato de metilo durante 2 días. </li></ol> 4. Micro-TC o la preparación histológica de aplicación de tejidos <ol><li> El cerebro se pueden visualizar mediante micro-CT directamente después de la aclaración o después de la re-hidratación (Fig. 4). </li><li> Para preparar el tejido cerebral para el análisis histológico, rehidratar el cerebro a través de EtOH diluida en serie: EtOH al 100%, un día, y el 95% de EtOH, 1 día, 75% de EtOH, 1 día, 50% de EtOH, 2 días, 25% de EtOH, 2 días y almacenar en PBS. El cerebro entonces puede ser embebido en parafina utilizando un procedimiento estándar. </li></ol> 5. Resultados representante Después de fundición vascular, la cerebrovasculature se puede ver macroscópicamente en la superficie del cerebro (Fig. 1A). Del árbol vascular en el interior del parénquima se puede visualizar la siguiente aclaración (Fig. 1B). La estructura vascular detalladapueden ser reflejados y analizados bajo un microscopio de campo claro (Fig. 2), la disección de alcance (Fig. 3), y con micro-TC (Fig. 4). Mediante microscopía de campo claro, los vasos se pueden ver en diferentes planos focales sin seccionar el cerebro (Fig. 2A), así como microvasos individuales a mayores aumentos (Fig. 2B). Bajo un microscopio de disección, se puede ver toda la estructura vascular en un plano focal, lo que permite una mejor visualización de la estructura tridimensional de la cerebrovasculature (Fig. 3). Las imágenes tomadas con un microscopio de disección puede mostrar la morfología de los vasos grandes y vasos de todo el cerebro, pero carecen de los datos que aparecen en las imágenes tomadas con el microscopio de campo claro (Fig. 2B). Esta técnica nos ha permitido detectar embarcaciones irregulares en nuestro modelo de ratón experimental BAVM adulto 2. La Figura 5 muestra un ejemplo de las mismas embarcaciones irregulares detectados por micro-TC (Fig. 5) y el microscopio de campo claro (Fig. 5B). En conjunto, estos datos muestran que se puede analizar tque muestra lo mismo con las herramientas de imágenes múltiples después de la fundición vascular. <img alt="Figura 1" src="/files/ftp_upload/2958/2958fig1.jpg"> Figura 1. Cerebro de ratón toda la nueva fundición vascular. Antes (A) y después (B) la clarificación salicilato de metilo solvente. Los buques pueden ser claramente visualizado en la superficie del cerebro (A) y en el procedimiento de parénquima siguiente aclaración (B). <img alt="Figura 2" src="/files/ftp_upload/2958/2958fig2.jpg"> Figura 2. Microscopio de campo claro imágenes aclaró cerebro vascular fundido. El cerebro se pueden obtener imágenes en diferentes planos y en diferentes niveles de ampliación. Barra de escala 200μm (A) y 50 micras (B). <img alt="Figura 3" src="/files/ftp_upload/2958/2958fig3.jpg"> Figura 3. Disección de imagen microscópica muestra a 1x ratón adulto cerebrovasculature todo el cerebro de una vista dorsal. &lt;img alt = "Figura 4" src = "/ files/ftp_upload/2958/2958fig4.jpg" /&gt; Figura 4. Micro-TC imagen de la misma de todo el cerebro del ratón adulto se muestra en la Figura 3 a partir de una vista dorsal. <img alt="Figura 5" src="/files/ftp_upload/2958/2958fig5.jpg"> Figura 5. Aplicación del método de fundición vascular para detectar una malformación arteriovenosa cerebral. A) Micro-TAC de cerebro vascular fundido muestra ampliada de la región, irregular AVM-como los vasos en el hemisferio derecho de una vista ventral. Imagen ampliada de la región (caja blanca) se muestra a la derecha. B) Lo mismo que los vasos irregulares visualizaron bajo microscopio de campo claro con un aumento de 50x. Barra de escala 50 micras.

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Los procedimientos experimentales para el uso de animales de laboratorio fueron aprobados por el Cuidado de Animales institucional y el empleo de la Universidad de California, San Francisco (UCSF).

Presentamos aquí un método para la fundición de cerebrovasculature ratón adulto que puede ser fotografiada con diversas modalidades. La aplicación de este método a la BAVM modelo de la enfermedad permite el análisis en 3D de los vasos irregulares. Potencial de los futuros estudios incluyen la cuantificación de micro-CT imágenes, el análisis histológico de los tejidos, y el diagnóstico de la progresión de la enfermedad vascular. Problemas comunes y Sugerencias Perfusión completa de la vasculatura del cerebro no siempre se logra. Tener la presión suficiente para llegar a los vasos sanguíneos distal sin romper la aurícula izquierda o en la aorta es un reto. Para superar esto, aplique una presión constante de aproximadamente 100 mmHg. Además, ajuste de posición de aguja para asegurar flujo adecuado de fundición de agente en la aorta. Es importante que las arterias carótidas no se limitan por lo que el agente de casting puede llegar a los vasos cerebrales. Los procedimientos fundamentales que se relacionan con la mejora pequeña embarcación porde fusión son: (1) limpieza adecuada de la sangre de los vasos, (2) la filtración de la agente de casting, y (3) colocación de la aguja durante la inyección de agente de casting. Se debe tener cuidado para evitar la inyección de agente de fundición en la aurícula izquierda y el pulmón. Otros investigadores han logrado perfundidos ratón de 3 y 4 cerebrovasculature rata sin utilizar procedimientos adicionales. Análisis manual de los vasos perfundidos Microfil contrastados con hematoxilina mostró 93% del lumen de perfusión vaso 5. Siempre deseche o completamente limpia cualquier herramienta que se pone en contacto con el agente de casting, ya que se polimeriza rápidamente, y las herramientas no se puede utilizar para varios temas. Aclaración del tejido del cerebro del ratón rodea puede ser un reto. Después de la inmersión en salicilato de metilo, el tejido puede aparecer opaco, lo que hace difícil imágenes embarcación. Garantizar la correcta deshidratación y aclaración debe resolver este problema. La colocación de tejido cerebral en una mecedora en alcohol metílico y el salicylate tratamiento puede mejorar la clarificación de tejidos. Inconvenientes de la técnica Las limitaciones de esta técnica son: (1) es necesario para inyectar la solución de agente de casting inmediatamente después de mezclarlo, ya que se espesa rápidamente después de que el catalizador se agrega, (2) el agente de casting llena de grandes vasos de conductancia con facilidad, pero no fiable llenar recipientes más pequeños, tales como las arteriolas (vasos de resistencia) y capilares (vasos nutritivos), y (3) no es el mejor contraste radio-opaco para las micro-TC, aunque algunos grupos prefieren Microfil de micro-TC 1,6. Sin embargo, a raíz de las sugerencias propuestas por encima, incluso colocación de la aguja, la posición del buque y la presión de perfusión, la fundición completa de los buques más pequeños se puede lograr. La adaptabilidad a las diferentes herramientas de análisis que hace este agente en una herramienta valiosa para el análisis de la estructura cerebral, incluyendo la circulación arterial y venosa, con variosperspectivas. Aplicaciones de la técnica La ventaja de este método es su potencial de aplicación general. El reparto se llena todos los buques, incluyendo las arterias, venas y capilares de todos los tejidos dentro del cuerpo, por lo que las estructuras vasculares en múltiples órganos de diferentes especies pueden ser analizados. Anteriormente, otros grupos han usado esta perfusión de grandes 7 y pequeños 8 buques en humanos, el mono 9, 10 ovejas, ratas 4,11,12, y el ratón 3,13. Vamos a demostrar la evidencia de la utilización de esta técnica en el análisis de la estructura de la microvasculatura del cerebro del ratón, en los estados sanos y enfermos 2. Además, hay soluciones Microfil con viscosidades disponibles para perfundir los vasos de diferentes tamaños y diferentes colores para mejorar la visualización de los vasos en varios órganos. Por ejemplo, el rojo puede verse fácilmente en el parénquima cerebral pálido y amarillo contrasta conde color rojo oscuro miocardio. Por otra parte, ya que el material es radiopaco, vasos se pueden crear imágenes con micro-tomografía computarizada para obtener una imagen en 3D rotativo. El tejido también se puede utilizar para cortes de parafina y el análisis histológico después de ser fotografiado. Conclusión Estamos aquí demostrar un protocolo para hacer un reparto vascular de los vasos sanguíneos del cerebro del ratón adulto, que puede ser adaptado con una variedad de técnicas de análisis para estudiar la estructura morfológica de la cerebrovasculature. También hemos proporcionado evidencia de la aplicación de este método a un modelo de estado de la enfermedad BAVM, representado por los buques ampliada, de forma irregular que la derivación de sangre arterial a la circulación venosa. Hay una variedad de métodos de fundición disponibles vascular. El protocolo simple que ofrecemos aquí un elenco vascular puede ser utilizado como una herramienta para examinar el sistema vascular del cerebro del ratón adulto utiliza diversas modalidades de imagen.

<table border="1"><tbody><tr><td> Nombre </td><td> Empresa </td><td> Número de catálogo </td><td> Notas </td></tr><tr><td> Microfil </td><td> Flowtech, Inc. </td><td> MV130 </td><td> 4 meses de vida útil </td></tr><tr><td> Salicilato de metilo </td><td> Fisher Scientific </td><td> O3695-500 </td><td> para aclarar el tejido </td></tr></tbody></table>

fundición cerebrovascular del ratón adulto de imágenes en 3d y el análisis morfológico

Cerebrovascular Casting of the Adult Mouse for 3D Imaging and Morphological Analysis

Vascular imagen es crucial en el diagnóstico clínico y el tratamiento de las enfermedades cerebrovasculares, tales como las malformaciones arteriovenosas cerebrales (BAVMs). Los modelos animales son necesarios para el estudio de la etiopatogenia y el potencial de las terapias de las enfermedades cerebrovasculares. Imágenes de la vasculatura en animales grandes es relativamente fácil. Sin embargo, el desarrollo de métodos de imagen buque de modelos murinos de enfermedades cerebrales es deseable debido al coste y la disponibilidad de líneas de ratones modificados genéticamente. Imágenes de la murino árbol vascular cerebral es un reto. En los seres humanos y animales de mayor tamaño, el estándar de oro para evaluar la angioarquitectura en el macrovascular (conductancia) es el nivel de rayos X del catéter de contraste basado en la angiografía, un método no es adecuado para pequeños roedores. En este artículo, presentamos un método de fundición cerebrovascular que produce un esqueleto resistente del lecho vascular completo, incluyendo las arterias, venas y capilares que pueden ser analizados usando muchos dmodalidades ifferent. Fundición completa de los microvasos de la cerebrovasculature ratón puede ser difícil, sin embargo, estos desafíos se abordan en este protocolo paso a paso. A través de la perfusión intracardíaca del material de fundición vascular, todos los vasos del cuerpo están fundidas. Entonces, el cerebro se puede quitar y aclarado con el salicilato de metilo orgánico solvente. Imágenes tridimensionales de los vasos sanguíneos del cerebro se puede visualizar sencilla y económica con cualquier microscopio de campo claro convencional o un microscopio de disección. El cerebrovasculature fundido también se pueden visualizar y cuantificar el uso de micro-tomografía computarizada (micro-CT) 1. Además, después de haber sido fotografiado, el cerebro fundido puede ser embebido en parafina para su análisis histológico. La ventaja de este método de fundición vascular en comparación con otras técnicas es su amplia adaptación a diversas herramientas de análisis, incluyendo el análisis de campo claro microscópica, la TC debido a las características radiopacaspropias de la materia, así como el análisis histológico e inmunohistoquímico. Este uso eficiente de los tejidos puede salvar el uso de los animales y reducir los costos. Recientemente hemos demostrado la aplicación de este método para visualizar los vasos sanguíneos irregulares en un modelo murino de BAVM adultos a nivel microscópico 2, y ofrecer más imágenes de los vasos malformados fotografiada por micro-TAC. Aunque este método tiene sus inconvenientes y no puede ser ideal para todo tipo de análisis, es una técnica sencilla, práctica que puede ser fácilmente aprendido y aplicado ampliamente a la fundición vascular de los vasos sanguíneos en todo el cuerpo.

En este artículo presentamos una técnica sencilla y práctica para la fundición cerebrovascular que es fácil de realizar y pueden ser utilizados para obtener imágenes del árbol vascular del cerebro del ratón adulto.

Fundición cerebrovascular del ratón adulto de imágenes en 3D y el análisis morfológico

La imagen vascular es fundamental para el diagnóstico clínico y el manejo de las enfermedades cerebrovasculares, tales como las malformaciones arteriovenosas cerebrales (MAVC).

El objetivo general de este procedimiento es visualizar la vasculatura cerebral del ratón adulto en 3D. Esto se logra primero abriendo la cavidad torácica y eliminando toda la sangre de la vasculatura mediante una perfusión oral de PBS con heparina. Posteriormente a la perfusión, se inyecta un agente de moldeo en el ventrículo izquierdo para perfundir todo el sistema circulatorio. Luego se extrae el cerebro perfundido y se fija en paraformaldehído.El paso final del procedimiento consiste en deshidratar y aclarar el tejido cerebral con etanol y salicilato de metilo. Finalmente, se pueden obtener resultados que muestran un cerebro transparente de ratón cuyo árbol vascular puede visualizarse mediante microscopía de campo brillante o microscopía estereoscópica, así como mediante tomografía computarizada micro-CT. Hola, mi nombre es Spen Walker en la Universidad de California en San Francisco.Hoy vamos a realizar una reproducción vascular del cerebro de ratón adulto. Las principales ventajas de esta técnica frente a métodos existentes como la angiografía son que puede aplicarse a animales pequeños como el ratón, no requiere material radiactivo y es un procedimiento relativamente sencillo de realizar.Ha permitido la adaptación a diversas herramientas analíticas, incluyendo el análisis en campo claro, microscópico, escaneo de tomografía computarizada debido a la característica radiopaca del material, así como análisis histológico e inmunohistoquímico. Bien, comencemos. Anestesie el ratón mediante inyección intraperitoneal de ketamina y xilacina diluidas en solución salina y confirme la anestesia completa mediante el pellizco en la pata.Una vez confirmada la anestesia, use tijeras para realizar una incisión a través del tórax justo por debajo del proceso xifoides. A continuación, corte el diafragma y luego suba entre los segmentos dorsal y ventral de la caja torácica. Para exponer la cavidad torácica, levante el esternón y la pared torácica adyacente y sujételos con un hemostato para exponer la bolsa pericárdica.Luego, abra el saco pericárdico con pinzas si es necesario para exponer el corazón. Con la bomba de perfusión ajustada a 100 milímetros de mercurio, comience a perfundir PBS más cinco unidades por mililitro de heparina tibio a 37 grados Celsius. Introduzca la aguja roma de calibre 22 conectada a la salida de la bomba en el ventrículo izquierdo cerca del ápice del corazón. Corte inmediatamente.Abrir la aurícula derecha para permitir el flujo sanguíneo sistémico y continuar lavando hasta eliminar la sangre de la circulación. Primero, preparar una solución de agente de moldeo mezclando cinco mililitros del diluyente con cuatro mililitros del compuesto filtrado. A continuación, añadir 450 microlitros del agente de curado y asegurarse de utilizar la solución de agente de moldeo dentro de los 20 minutos.Mezcle la solución del agente de moldeo justo antes de usarla. Para asegurar la viscosidad adecuada, aspire la solución del agente de moldeo en una jeringa de 10 mililitros. Coloque una aguja roma de calibre 20 en la jeringa y llene la aguja con la solución.Introduzca la aguja en el ventrículo izquierdo a través del mismo orificio utilizado para lavar la sangre y luego asegure la aguja en su lugar con una pinza hemostática. Inyecte lentamente la solución del agente de moldeo manualmente en el ventrículo izquierdo a aproximadamente tres mililitros por minuto, ya que una presión excesiva podría provocar un flujo incorrecto o la posible ruptura de los vasos durante la inyección. Observe signos de perfusión exitosa, como la visualización del agente de moldeo en la vasculatura del intestino y del hígado, decoloración en las extremidades distales y decoloración de la nariz y la lengua. Ajuste nuevamente la aguja si es necesario para lograr una perfusión adecuada.Retire el cerebro y colóquelo en paraformaldehído al 4 % durante la noche a cuatro grados Celsius. A continuación, deshidrate el cerebro durante el transcurso de siete días colocando el cerebro directamente en etanol de concentración creciente a temperatura ambiente, comenzando el primer día con etanol al 25 %. Una vez que el cerebro esté deshidratado, aclare el tejido cerebral alrededor de los vasos sanguíneos sumergiendo el cerebro perfundido en salicilato de metilo durante dos días a temperatura ambiente. Después de dos días, la vasculatura de todo el cerebro aclarado puede visualizarse sin seccionar mediante inmersión en salicilato de metilo bajo un microscopio de campo brillante, así como con un microscopio estereoscópico o una tomografía computarizada microscópica. Mediante microscopía de campo brillante, la vasculatura puede observarse en diferentes planos focales sin seccionar el cerebro, así como los vasos microscópicos individuales a mayor aumento.Se muestra aquí en el panel inferior. Bajo un microscopio estereoscópico, se puede observar toda la estructura vascular cerebral en un solo plano focal, lo que permite una mejor visualización de su estructura tridimensional. Esta imagen muestra la morfología de los vasos grandes y la vasculatura completa del cerebro, pero carece de los detalles mostrados en las imágenes tomadas con microscopía de campo claro.El escaneo de micro-TC permite la visualización tridimensional de la vasculatura y la construcción de modelos 3D rotacionales. Para visualizar la vasculatura, aquí se muestra una estructura vascular cerebral anormal detectada mediante micro-TC, que se correlaciona con una imagen de microscopio de campo brillante de la misma malformación vascular. Conjuntamente, estos datos demuestran que la misma muestra puede analizarse utilizando múltiples herramientas de imagen después del moldeado vascular.Después de ver este video, debería tener una buena comprensión de cómo moldear los vasos sanguíneos del cerebro de ratón adulto utilizando una solución de Microfil. Este procedimiento incluye la eliminación de la sangre de la vasculatura, la inyección intraventricular de la solución de Microfil, la recolección y procesamiento del cerebro de ratón adulto, y la obtención de imágenes de la vasculatura cerebrovascular mediante microscopía de campo claro. El objetivo general de este procedimiento es visualizar la vasculatura cerebral del cerebro de ratón adulto en tres dimensiones.

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Investigación

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Neurociencia

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Fuente: Choi, J. P. et al. Imágenes de inducción y micro-TC de malformaciones cavernosas cerebrales en modelo de ratón. J. vis. exp. ( 2017)Este video demuestra el uso de imágenes de micro-CT para visualizar lesiones de malformación cavernosa cerebral (CCM) en el cerebro de un ratón. En él se detallan los pasos para la preparación de la muestra, la obtención de imágenes y la reconstrucción de imágenes en 3D para evaluar la densidad y la ubicación de las lesiones de la MCC en el tejido cerebral.

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Modificación de un Colliculo-tálamo-cortical del ratón Cerebro Loncha, incorporación de la impresión 3-D de la Cámara Componentes e Imagen óptica multi-escala

Este manuscrito describe un procedimiento para realizar un seguimiento de la remodelación de la vasculatura cerebral durante la acumulación de placa amiloide in vivo usando longitudinal microscopía de dos fotones. Una preparación-cráneo adelgazada permite la visualización de los tintes fluorescentes para evaluar la progresión del daño cerebrovascular en un modelo de ratón de la enfermedad de Alzheimer.

Longitudinal<em&gt; En Vivo</em&gt; Obtención de imágenes de la vasculatura cerebral: Importancia de las enfermedades del sistema nervioso central

Este protocolo demuestra la inducción de la enfermedad de malformación cavernosa cerebral en un modelo de ratón y utiliza contraste realzado micro tomografía para medir la carga de lesión. Este método aumenta el valor de modelos de ratón establecido para estudiar la base molecular y terapias potenciales para la malformación cavernosa cerebral y otras enfermedades cerebrovasculares.

Inducción y Micro-CT en la proyección de imagen de malformaciones cavernosas cerebrales en modelo murino

El objetivo de esta técnica es la visualización ex vivo de redes arteriales pulmonares de ratones postnatales y adultos tempranos a través de la inflación pulmonar y la inyección de un compuesto radioopaco a base de polímeros a través de la arteria pulmonar. También se discuten las posibles aplicaciones para los tejidos fundidos.

Fundición vascular de pulmones de ratón postnatales tempranos y adultos para imágenes micro-CT

Este estudio describe los pasos para obtener imágenes de alta resolución de cerebros de ratones neonatos mediante la combinación de microtomografía computarizada (micro-CT) y un agente de contraste en muestras ex vivo . Describimos análisis morfométricos básicos para cuantificar el tamaño y la forma del cerebro en estas imágenes.

Imágenes de micro-TC y análisis morfométrico de cerebros neonatales de ratones

Se propone el método de aguja para la estenosis bilateral asimétrica de la arteria carótida común para crear un modelo de ratón para el deterioro cognitivo vascular y la demencia. Da lugar a resultados a largo plazo en comparación con los modelos establecidos anteriormente y es compatible con la resonancia magnética en vivo. La representación visual que demuestra el procedimiento proporciona orientación para dominar la cirugía.

Un modelo murino para el deterioro cognitivo vascular y la demencia basado en la estenosis bilateral asimétrica de la arteria carótida común guiada por aguja

La microscopía intravital permite el estudio de procesos biológicos dinámicos como la regeneración de tejidos y el desarrollo de tumores. La médula ósea del calvario, un tejido altamente dinámico, ofrece información sobre la hematopoyesis y la función vascular. El uso de un implante de fijación de cabeza biocompatible impreso en 3D permite obtener imágenes longitudinales repetitivas, lo que mejora nuestra comprensión de la dinámica de los tejidos y el microambiente tumoral.

Imagen longitudinal intravital de la dinámica vascular en la médula ósea del calvario

Aprende a realizar fundición cerebrovascular en ratones adultos para visualizar la vasculatura cerebral en 3D mediante microscopía de campo claro y micro CT. Este método versátil permite analizar la morfología vascular sin materiales radiactivos.

Fundición cerebrovascular del ratón adulto de imágenes en 3D y el análisis morfológico

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