Name: La leishmaniasis cutánea en la piel dorsal de los hámsteres: un modelo útil para la selección de fármacos antileishmania (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-04-21T14:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 36 s
Description: Aprende a optimizar el modelo de hámster para leishmaniasis cutánea mediante inyección intradérmica de promastigotes de Leishmania. Este método mejora la caracterización de lesiones y la aplicación de tratamientos antileishmania preservando el bienestar animal.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Este estudio fue apoyado por becas de la Comisión de Investigación de la Universidad de Antioquia (CODI), el Instituto Colombiano para el Desarrollo de la Ciencia y la Tecnología - COLCIENCIAS y el Centro para el Desarrollo de Productos contra las Enfermedades Tropicales - CIDEPRO.

<ol><li>WHO. Control of the leishmaniasis. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Report+of+a+Meeting+of+the+WHO+Expert+Committee+on+the+Control+of+Leishmaniasis+WHO%22">Report of a Meeting of the WHO Expert Committee on the Control of Leishmaniasis WHO</a>. 949, (2010).</li>
<li>Titus, R. G., Marchand, M., Boon, T., Louis, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+limiting+dilution+assay+for+quantifying+Leishmania+major+in+tissues+of+infected+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Parasite+Immunol%22%5BJournal%5D)">A limiting dilution assay for quantifying Leishmania major in tissues of infected mice.</a> Parasite Immunol. 7, 545-555 (1985).</li>
<li>Reynolds, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Kodak+Ektachem+dry+layer+technology+for+clinical+chemistry%5BTitle%5D)+AND+%22Upsala.+J.+Med.+Sci%22%5BJournal%5D)">The Kodak Ektachem dry layer technology for clinical chemistry.</a> Upsala. J. Med. Sci. 91, 143-146 (1986).</li>
<li>Handman, E., Ceredig, R., Mitchell, G. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+cutaneous+leishmaniasis%3A+disease+patterns+in+intact+and+nude+mice+of+various+genotypes+and+examination+of+some+differences+between+normal+and+infected+macrophages%5BTitle%5D)+AND+%22Australian+J.+Exp.+Biol.+Med.+Sci%22%5BJournal%5D)">Murine cutaneous leishmaniasis: disease patterns in intact and nude mice of various genotypes and examination of some differences between normal and infected macrophages.</a> Australian J. Exp. Biol. Med. Sci. 57, 9-29 (1979).</li>
<li>Hanson, W., Chapman, W., Waits, V., Lovelace, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+Leishmania+%28Viannia%29+panamensis+lesions+and+relationship+of+numbers+of+amastigotes+to+lesion+area+antimony-treated+and+untreated+hamsters%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Parasitol%22%5BJournal%5D)">Development of Leishmania (Viannia) panamensis lesions and relationship of numbers of amastigotes to lesion area antimony-treated and untreated hamsters.</a> J. Parasitol. 77, 780-783 (1991).</li>
<li>Henao, H. H., Osorio, Y., Saravia, N. G., Gómez, A., Travi, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficacy+and+toxicity+of+pentavalentantimonials+%28Glucantime+and+Pentostam%29+in+an+American+cutaneous+leishmaniasis+animal+model%3A+luminometry+application%5BTitle%5D)+AND+%22Biom%C3%A9dica%22%5BJournal%5D)">Efficacy and toxicity of pentavalentantimonials (Glucantime and Pentostam) in an American cutaneous leishmaniasis animal model: luminometry application.</a> Biomédica. 24, 393-402 (2004).</li>
<li>Travi, B. L., Martinez, J. E., Zea, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antimonial+treatment+of+hamsters+infected+with+Leishmania+%28Viannia%29+panamensis%3A+assessment+of+parasitological+cure+with+different+therapeutic+schedules%5BTitle%5D)+AND+%22Trans.+R.+Soc.+Trop.+Med.+Hyg%22%5BJournal%5D)">Antimonial treatment of hamsters infected with Leishmania (Viannia) panamensis: assessment of parasitological cure with different therapeutic schedules.</a> Trans. R. Soc. Trop. Med. Hyg. 87, 567-569 (1993).</li>
<li>Hommel, M., jaffe, C. L., Travi, B., Milon, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+models+for+leishmaniasis+and+for+testing+anti-leishmanial+vaccines%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+Trop.+Med.+Parasitol%22%5BJournal%5D)">Experimental models for leishmaniasis and for testing anti-leishmanial vaccines.</a> Ann. Trop. Med. Parasitol. 89, 55-73 (1995).</li>
<li>Travi, B. L., Osorio, Y., Saravia, N. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+inflammatory+response+promotes+cutaneous+metastasis+in+hamsters+infected+with+Leishmania+%28Viannia%29+panamensis%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Parasitol%22%5BJournal%5D)">The inflammatory response promotes cutaneous metastasis in hamsters infected with Leishmania (Viannia) panamensis.</a> J. Parasitol. 82, 454-457 (1996).</li>
<li>Travi, B. L., Osorio, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Failure+of+Albendazole+as+an+alternative+treatment+of+cutaneous+Leishmaniasis+in+the+hamster+model%5BTitle%5D)+AND+%22Memorias+Instituto+Oswaldo%22%5BJournal%5D)">Failure of Albendazole as an alternative treatment of cutaneous Leishmaniasis in the hamster model.</a> Memorias Instituto Oswaldo. 93, 515(1998).</li>
<li>Travi, B. L., Osorio, Y., Melby, P. C., Chandrasekar, B., Arteaga, L., Saravia, N. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gender+is+a+major+determinant+of+the+clinical+evolution+and+immune+response+in+hamsters+infected+with+Leishmania+spp%5BTitle%5D)+AND+%22Infect+Immun%22%5BJournal%5D)">Gender is a major determinant of the clinical evolution and immune response in hamsters infected with Leishmania spp.</a> Infect Immun. 70, 2288-2296 (2002).</li>
<li>Osorio, Y., Melby, P. C., Pirmez, C., Chandrasekar, B., Guarín, N., Travi, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+site+of+cutaneous+infection+influences+the+immunological+response+and+clinical+outcome+of+hamsters+infected+with+Leishmania+panamensis%5BTitle%5D)+AND+%22Parasite+Immunol%22%5BJournal%5D)">The site of cutaneous infection influences the immunological response and clinical outcome of hamsters infected with Leishmania panamensis.</a> Parasite Immunol. 25, 139-148 (2003).</li>
<li>Osorio, Y., Bonilla, D. L., Peniche, A. G., Melby, P. C., Travi, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pregnancy+enhances+the+innate+immune+response+in+experimental+cutaneous+leishmaniasis+through+hormone-modulated+nitric+oxide+production%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Leukoc.+Biol%22%5BJournal%5D)">Pregnancy enhances the innate immune response in experimental cutaneous leishmaniasis through hormone-modulated nitric oxide production.</a> J. Leukoc. Biol. 83, 1413-1422 (2008).</li>
<li>Espitia, C. M., Zhao, W., Saldarriaga, O., Osorio, Y., Harrison, L. M., Cappello, M., Travi, B. L., Melby, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Duplex+real-time+reverse+transcriptase+PCR+to+determine+cytokine+mRNA+expression+in+a+hamster+model+of+New+World+cutaneous+leishmaniasis%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Immunol%22%5BJournal%5D)">Duplex real-time reverse transcriptase PCR to determine cytokine mRNA expression in a hamster model of New World cutaneous leishmaniasis.</a> BMC Immunol. 22, 11-31 (2010).</li>
</ol>

No hay conflictos de interés declarado.

La leishmaniasis cutánea es endémica en los trópicos y el Neotrópico. Se refiere a menudo como un grupo de enfermedades debido a la variada gama de manifestaciones clínicas, que van desde pequeños nódulos cutáneos a la destrucción bruta tejido mucoso. Mayoría de los fármacos disponibles son costosas, requieren tratamientos largos de tratamiento y se están convirtiendo cada vez más ineficaz, lo que exige el descubrimiento de nuevos fármacos. El modelo de ratón se utiliza ampliamente, pero tie...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nombre del reactivo </td><td> Tipo </td><td> Empresa </td><td> Número de catálogo </td></tr><tr><td> La ketamina </td><td> Reactivo </td><td> Holliday-Scott SA </td><td></td></tr><tr><td> Xilacina </td><td> Reactivo </td><td> Síntesis </td><td></td></tr><tr><td> PBS </td><td> Reactivo </td><td> GIBCO </td><td> 14190-136 </td></tr><tr><td> Digital pinza </td><td> Equipo </td><td> Pescador </td><td> 15-077-958 </td></tr><tr><td> Giemsa </td><td> Reactivo </td><td> SIGMA </td><td> GS1L-1L </td></tr><tr><td> Formalina </td><td> Reactivo </td><td> Nova de laboratorio </td><td> 11273 </td></tr><tr><td> Parafina </td><td> Reactivo </td><td> Pechiney Plastic Packaging </td><td> AM-996 </td></tr><tr><td> Haemotoxilin </td><td> Reactivo </td><td> Nova de laboratorio </td><td&gt; 10870103 </td></tr><tr><td> Eosina </td><td></td><td> Nova de laboratorio </td><td> 10870203 </td></tr><tr><td> Kodak Ektachem de química seca </td><td> Equipo </td><td> Kodak Ektachem </td><td> DT-60 </td></tr><tr><td> antimoniato de meglumina </td><td> Reactivo </td><td> Aventis </td><td></td></tr><tr><td> Microscopía </td><td> Equipo </td><td> Nikon </td><td> YS2-T </td></tr></tbody></table>

la leishmaniasis cutánea en la piel dorsal de los hámsteres: un modelo útil para la selección de fármacos antileishmania

Cutaneous Leishmaniasis in the Dorsal Skin of Hamsters: a Useful Model for the Screening of Antileishmanial Drugs

Tradicionalmente, los hámsters son inoculados experimentalmente en el hocico o la pata de la. Sin embargo, en estos sitios no siempre se produce una úlcera, la medición del tamaño de la lesión es un procedimiento difícil y animales presentan dificultad para comer, respirar y moverse a causa de la lesión. Con el fin de optimizar el modelo de hámster de la leishmaniasis cutánea, hombre adulto joven y las mujeres hámsters dorados (Mesocricetus auratus) se inyecta por vía intradérmica en la piel dorsal con 1 a 1,5 x l0 7 promastigotes de las especies de Leishmania y la progresión de las lesiones posteriores fueron evaluados durante un máximo de 16 semanas después de la infección. El hámster dorado fue elegido porque se considera adecuada la bio-modelo para evaluar los medicamentos contra la Leishmania, ya que son susceptibles a la infección por diferentes especies. La infección cutánea de los resultados de hámsters en las lesiones crónicas, pero controlada, y una evolución clínica con signos similares a los observados en seres humanos. Por lo tanto, el establecimiento of el alcance de la infección mediante la medición del tamaño de la lesión de acuerdo con el área de induraciones y úlceras es factible. Este enfoque ha demostrado su versatilidad y fácil manejo durante la inoculación, el seguimiento y la caracterización de las lesiones típicas (úlceras), la aplicación de tratamientos a través de diferentes maneras y la obtención de muestras clínicas después de los tratamientos diferentes. Mediante el uso de este método, la calidad de vida de los animales en relación con la locomoción, la búsqueda de alimentos y el agua, el juego y las actividades sociales también se conserva.

Optimización del modelo de hámster experimental para la leishmaniasis cutánea por inyección intradérmica de<em&gt; Leishmania</em&gt; Promastigotos en la piel dorsal. Este enfoque es útil durante la inoculación, el seguimiento, la caracterización de las lesiones, la aplicación de los tratamientos y la obtención de muestras clínicas. Locomotion, la búsqueda de comida y agua, actividades lúdicas y sociales se conservan.

La leishmaniasis cutánea en la piel dorsal de los hámsteres: un modelo útil para la selección de fármacos antileishmania

Tradicionalmente, los hámsters se inoculan experimentalmente en el hocico o en la almohadilla plantar. Sin embargo, en estos sitios no siempre se produce una úlcera, y la medición de...

Con el fin de optimizar el modelo de hámster para leishmaniasis cutánea, aquí describimos un enfoque que utiliza la inoculación intradérmica de promastigotes en la piel dorsal. Este enfoque ha demostrado su versatilidad y facilidad de manejo en el momento de la inoculación, el seguimiento y la caracterización de lesiones típicas, la aplicación de tratamientos mediante diferentes vías, la obtención de muestras paraclínicas, y la recopilación de datos sobre diversos compuestos prometedores, sin que ello implique un deterioro significativo en la calidad de vida del modelo.En cuanto a la locomoci&oacute;n, al buscar alimento y agua, jugar y realizar actividades sociales con movimientos cuidadosos, seguros y estables, el animal debe restringirse por la base del cuello utilizando los dedos, aprovechando la gran cantidad de piel que posee el h&aacute;mster. Se utiliza la palma de la mano para proporcionar al animal una superficie de apoyo en la que se sienta c&oacute;modo. Una vez que el animal se siente relajado, la piel del cuello y las bolsas puede estirarse con el dedo &iacute;ndice y el pulgar, y con el resto de los dedos se sostiene firmemente la piel de la bolsa contra la palma, de modo que el animal quede completamente inmovilizado.Una característica distintiva en la hembra es la visualización de la línea Mi Mary, que está bien evidenciada desde la primera semana de edad. Otra característica es la corta distancia anogenital. En cuanto a la determinación del sexo del macho, puede observarse la bolsa escrotal que contiene los testículos.Además de esto, y como consecuencia de ello, existe una mayor distancia entre el ano y la piel cuatro. El animal se sujeta agarrando firmemente la base del cuello y colocándolo en una trampa o caja que está colocada sobre una balanza previamente calibrada, esperando unos segundos. Cuando el animal está cómodo en este espacio, se realiza la lectura del peso y se registra inmediatamente en el formato correspondiente.Los métodos más comunes para la identificación de hámsteres son la tinción de un área de la piel con ácido pírico y el perforado de orejas para la tinción. Con el ácido pírico, el procedimiento es el siguiente: sujete al animal como se mencionó anteriormente y, con un hisopo empapado en ácido pírico, impregne la región que se desea marcar, generalmente la extremidad anterior o posterior izquierda o derecha, con una cantidad suficiente para asegurar que la marca dure hasta el final del experimento. Para este método de identificación, se recomienda mantener al animal bajo sedación o anestesia.Aunque no es estrictamente necesario, se selecciona la U para etiquetar y se desinfecta con alcohol. Después de esto, se selecciona la zona a perforar, evitando la región con vasos sanguíneos. Luego, se perfora el pabellón auricular utilizando un perforador para roedores; el procedimiento debe realizarse rápidamente, pero de forma firme y segura.Dado que en una jaula deben haber de dos a tres animales. Se pueden hacer hasta dos orificios por año. Para aplicar el anestésico al animal, debe sujetarse como se indicó al principio, de manera que se evite el movimiento del hámster con el animal.En posición supina, se desinfecta la zona abdominal en la que se aplicará el fármaco utilizando alcohol al 70 % y se seca con algodón limpio. Se utiliza la vía intraperitoneal con el animal ligeramente inclinado hacia la cabeza para que ocurra el desplazamiento visceral. La aguja se introduce completamente un poco paralela a la columna vertebral.Se realiza una aspiración inicial para confirmar que no se han perforado órganos, y luego se aplica el fármaco para afeitar la zona de piel que se va a inocular en el animal. Con mejor posición, se marca un punto a dos centímetros de la base de la cola. Con ayuda de tijeras, se elimina todo el vello, despejando cuidadosamente un área de aproximadamente dos centímetros cuadrados para evitar lesiones, dentro de una cabina de seguridad biológica y con el hámster anestesiado; en una jeringa de un mililitro, se colocan 100 microlitros de la cantidad conocida de fase logarítmica.Se administra pro maus de leishmania. La aguja debe fijarse firmemente en la jeringa como medida de precaución para evitar accidentes. Se utiliza algodón con solución salina estéril para limpiar la zona afeitada del animal en un solo sentido.Posteriormente, con la bisel de la aguja hacia arriba, se penetra la piel del hámster, asegurándose de que la aguja entre en el tejido subdérmico de forma lenta y gradual. Se inyecta el inóculo para formar una pápula subdérmica, luego se retira ligeramente girando la aguja y se extrae. Todo el material utilizado se desecha.Después de seguir las normas de bioseguridad para monitorear las lesiones cutáneas producidas por leishmania, se recomienda la inmovilización inicial del animal en una trampa para facilitar el proceso de medición precisa de una lesión. Se realiza la palpación del área cutánea inoculada para delimitar la induración y la úlcera formada con la ayuda de un calibrador digital, se cubre el ancho de la úlcera y se registra la medición en milímetros en un formato diseñado para el monitoreo clínico. De manera similar, se mide la longitud de la úlcera, que también debe registrarse tras la inoculación subdérmica.Hay un tiempo de espera de entre cuatro y cinco semanas para obtener lesiones típicas comparables a las presentadas en humanos. El animal se inmoviliza en un dispositivo especial que permite exponer la espalda donde se encuentra la lesión.Usando un gotero, se agrega el compuesto sobre la lesión y se deja secar el líquido antes de devolver el animal a su jaula. Con el animal firmemente sujeto como se ilustra arriba, se utiliza la mano más hábil para desinfectar el área con alcohol y algodón en una sola dirección. Luego, se usa la misma mano para manipular la jeringa que contiene el fármaco a utilizar, en un volumen máximo de 200 microlitros.El fármaco se inyecta a través del músculo semitendinoso o semimembranoso de las patas traseras. Si el fármaco debe administrarse durante varios días, se debe alternar entre las extremidades para evitar molestias y daños al animal. Con una mano menos hábil, el animal se sujeta como se indicó previamente. La otra mano se utiliza para manipular la sonda orogástrica.14 jeringas que se conecta a una jeringa de un mililitro para proporcionar cómodamente una cantidad no mayor de 200 microlitros. El hámster se sujeta firmemente con un dispositivo inmovilizador que expone la zona a tratar, la cual se limpia con algodón estéril y solución salina con un solo movimiento en una dirección. Con una jeringa de un mililitro, con la bisel hacia abajo y un volumen no mayor de 100 microlitros, se realiza una única punción subdérmica en un vértice de las lesiones y gradualmente se deposita el fármaco, cubriendo toda el área de la lesión antes del sacrificio. Los animales se anestesian como se describió anteriormente para el procedimiento de eutanasia.El hámster se lleva a una cámara de acrílico sellada que está conectada a un cilindro o a una red de dióxido de carbono. La válvula se abre lentamente durante varios minutos para muestrear los hámsters sacrificados, que están fijados sobre una superficie de disección. Se necesitan lámparas de vidrio para obtener impresiones de la piel y de los órganos internos.Tubos Falcon de 15 mililitros con formalina al 10 % para muestras de histopatología, y el material incluye disección, tijeras, pinzas, bisturí, mango y cuchillas. Finalmente, la presencia de leishmania en muestras de lesión cutánea o cicatriz, hígado, bazo, riñón y ganglios linfáticos linfáticos se determina directamente mediante el examen de frotis teñidos con Giemsa y el examen histopatológico de estos tejidos. Una muestra de biopsia se fija en formalina al 10 % e incluye en parafina.Secciones de cinco micrómetros de los tejidos fijados fueron teñidas con hematoxilina, eosina y examinadas bajo un microscopio óptico utilizando inmersión en aceite a 1000 aumentos. Para estudiar la microarquitectura, las características del infiltrado celular y la presencia o ausencia de parásitos. Se tomaron fotomicrografías y se capturaron imágenes digitales.Todos los materiales deben desecharse siguiendo las regulaciones de bioseguridad para la eliminación de desechos biológicos. El hámster dorado Mi ha demostrado ser particularmente útil para estudiar lesiones cutáneas causadas por especies de Leishmania del Nuevo y del Viejo Mundo. La inoculación de pro magos es capaz de provocar lesiones cutáneas entre uno y dos meses después de la inoculación.El hámster presenta una evolución predecible de la enfermedad tras la infección experimental, caracterizada por el desarrollo de lesiones similares a las observadas en seres humanos. Debido al carácter crónico de las lesiones cutáneas en el modelo del hámster, es posible realizar un seguimiento de las intervenciones terapéuticas durante largos períodos. Tradicionalmente, los hámsters se inoculan experimentalmente en el hocico o en la almohadilla del pie; sin embargo, en estos sitios las lesiones no siempre se producen. Además, la medición del tamaño de la lesión es difícil de realizar y los hámsters presentan dificultades para comer, respirar y moverse.En resumen, este enfoque demuestra que las características patológicas clínicas de las leishmaniasis cutáneas inducidas en la piel dorsal de hámsteres son notablemente similares a la enfermedad humana, pero sorprendentemente diferentes del modelo marino comúnmente utilizado. Por lo tanto, la infección experimental en la piel dorsal de hámsteres representa un modelo útil para validar el potencial de compuestos que son candidatos a fármacos contra la leishmaniasis humana.

cutaneous-leishmaniasis-dorsal-skin-hamsters-useful-model-for

Research

Investigación

JoVE Journal

Immunology and Infection

Inmunología e Infección

Imágenes in vivo de los cultivos transgénicos parásitos Leishmania en un host en vivo

Un ensayo parásito-rescate y la transformación con células THP1...

A Parasite Rescate y Transformación de ensayo para la detección antileishmanial contra intracelular<em&gt; Leishmania donovani</em&gt; Amastigotes en THP1 Humanos aguda línea celular de leucemia monocítica

Este artículo informa sobre un método detallado para la medición dinámica y cuantificación de la velocidad del flujo sanguíneo dentro de los vasos sanguíneos individuales de la vasculatura hepática del ratón utilizando imágenes de microscopía intravital en combinación con una metodología específica para la adquisición y análisis de imágenes.

Microscopia intravital de imágenes del hígado después<em&gt; Leishmania</em&gt; Infección: Una Evaluación de Hemodinámica hepática

Aquí, presentamos un protocolo compilado para evaluar la infección cutánea de ratones con Leishmania amazonensis. Este es un método confiable para estudiar la virulencia del parásito, permitiendo una visión sistémica de la respuesta del huésped vertebrado a la infección.

In Vivo infección con Leishmania amazonensis para evaluar la virulencia del parásito en ratones

En este trabajo se describe la metodología utilizada para generar cepas de L. panamensis y L . donovani que expresan el gen de eGFP como un transgén integrado estable utilizando el sistema pLEXSY. Los parásitos transfectados se clonaron limitando la dilución, y se seleccionaron los clones con la mayor intensidad de fluorescencia en ambas especies para su posterior uso en ensayos de detección de fármacos.

Desarrollo de cepas de especies de Leishmania con expresión constitutiva de eGFP

En este trabajo presentamos una evaluación longitudinal de hámsters dorados infectados por vía intraperitoneal (IP) o intragingival (IG) con L. infantum-Luc mediante imagen bioluminiscente y por PCR. Los hámsters fueron evaluados 1 día después de la infección (1 dpi), 1 semana después de la infección (8 dpi) y 3 semanas después de la infección (22 dpi) y se les practicó la eutanasia a los 50dpi y 8 meses después de la infección.

In vivo Imágenes de hámsters infectados con Leishmania infantum mediante inoculación gingival de amastigotes axénicos que expresan luciferasa

Trasplante de médula ósea murina es una técnica ampliamente utilizada para estudiar los mecanismos inmunológicos que regulan injerto contra huésped enfermedad en los seres humanos. La capacidad para monitorear los patrones de tráfico de células...

La inducción de la enfermedad de injerto contra huésped y<em&gt; En Vivo</em&gt; T Monitoreo Celular Utilizando un modelo murino MHC de concordancia

Un nuevo método de evolución dirigida específicamente al ámbito de la ingeniería termoestabilidad fue desarrollado y validado tanto para las enzimas bacteriolíticas. Después de sólo una ronda de mutagénesis al azar, una enzima bacteriolítica evolucionado, PlyC 29C3, muestra mayor que el doble de la actividad residual en comparación con la proteína de tipo salvaje después de incubación a temperatura elevada.

Un método de screening para la evolución dirigida de enzimas termoestables bacteriolítica

Inducida por el virus de silenciamiento génico es una herramienta útil para la identificación de genes implicados en la resistencia de las plantas hospedantes. Se demuestra el uso de patógenos bacterianos que expresan GFPuv en la identificación de genes silenciados plantas susceptibles a los agentes patógenos no hospedantes. Este método es fácil, rápido y facilita la detección a gran escala y protocolo similar se puede aplicar al estudio de otras interacciones planta-microorganismo.

VIGS mediada por delante de detección genética para la identificación de genes implicados en la resistencia no huésped

Este protocolo describe la visualización del desarrollo de biopelículas después de la exposición a factores del huésped utilizando un modelo de cámara de portaobjetos. Este modelo permite la visualización directa del desarrollo de la biopelícula, así como el análisis de los parámetros de la biopelícula mediante programas informáticos.

La visualización de los Efectos de esputo en el desarrollo del biofilm mediante un modelo de Septadas cubreobjetos

Aprende a optimizar el modelo de hámster para leishmaniasis cutánea mediante inyección intradérmica de promastigotes de Leishmania. Este método mejora la caracterización de lesiones y la aplicación de tratamientos antileishmania preservando el bienestar animal.

La leishmaniasis cutánea en la piel dorsal de los hámsteres: un modelo útil para la selección de fármacos antileishmania

Explorar más videos