18 de noviembre de 2012
Este protocolo describe un mantenimiento regular y el cuidado para mantener las condiciones óptimas para la cría de peces cebra. El vídeo muestra el protocolo para el mantenimiento del sistema, la vivienda, la alimentación, la reproducción, y la crianza de larvas de pez cebra.
Este protocolo describe el cuidado y mantenimiento rutinarios de un laboratorio de peces cebra. Debido al creciente interés en la investigación con peces cebra, la necesidad de establecer y mantener una instalación para su alojamiento también va en aumento. Aunque existe literatura sobre el mantenimiento de un laboratorio de peces cebra, falta un protocolo en video conciso.
Este video explica el mantenimiento del sistema, la alimentación, la reproducción y el criado de larvas de pez cebra. Hola, soy ABH de la Escuela de Ciencias Médicas de la Universidad. Hola, soy Manchi del Instituto Thee.
Hoy vamos a mostrarle los cuidados y mantenimiento regulares de un laboratorio de pez cebra. El pez cebra se está volviendo popular en la investigación genética, farmacológica y conductual. Debido a su fácil mantenimiento y desarrollo rápido, es altamente adecuado para la modulación genética y apropiado para cribados de fármacos a gran escala.
Esta sección proporciona ideas sobre el cuidado de peces cebra a aquellos usuarios y científicos que están considerando establecer una nueva instalación para peces. Comencemos. Varias empresas ofrecen sistemas para peces, pero nosotros utilizamos sistemas de Aquatic Habitats.
En nuestro laboratorio, los peces cebra se mantienen a una temperatura de 26 a 28,5 grados Celsius y un ciclo de luz-oscuridad de 14 a 10 horas. Los peces cebra se alojan en un sistema de circulación que filtra y airea continuamente el agua del sistema. Para mantener la calidad del agua necesaria para un entorno acuático saludable, el sistema utiliza un conjunto de filtros de diferentes tipos dentro de nuestro sistema.
El agua de los tanques pasa a través de una almohadilla de filtración, filtro de cartucho, filtro biológico, filtro de carbón activado y filtro UV antes de recircularse de nuevo al tanque. En el sistema de pez cebra se utiliza agua desclorada o envejecida. El agua puede desclorarse mediante envejecimiento durante al menos 48 horas.
Verifique diariamente el pH del agua del sistema y manténgalo entre 6,8 y 7,5. Utilizando bicarbonato de sodio, los acuarios deben limpiarse regularmente. Para limpiar un acuario, cierre el flujo de agua hacia este tanque, drene el exceso de agua inclinando el tanque hacia atrás y retire cuidadosamente el tanque del sistema.
Prepare un tanque limpio y llénelo con agua del sistema. Transfiera cuidadosamente los peces a este tanque usando una red para peces. Cierre la tapa y sustituya con cuidado la etiqueta con el nombre del tanque.
Coloque el tanque en el sistema. Vuelva a colocar el tubo dentro del tanque y encienda el suministro de agua. Descontamine la red para peces y el tanque con etanol al 70%.
Lave con agua y deje secar. Antes de reutilizar, los filtros del sistema de circulación deben revisarse y cambiarse regularmente para garantizar su funcionamiento adecuado.
El filtro de 120 micrones se verifica y reposiciona hacia el flujo de agua todos los días antes de ser reemplazado. El filtro de cartucho debe cambiarse semanalmente. Para cambiar el filtro de cartucho, retírelo con una llave inglesa o con las manos.
Coloque una lámina de plástico o una toalla debajo para evitar derrames de agua. Inserte un nuevo cartucho, filtro y coloque nuevamente la unidad en el sistema. Ajuste cuidadosamente con las manos y con una llave inglesa.
Si es necesario, el filtro de carbón debe cambiarse cada dos semanas. Para cambiar el filtro de carbón, retírelo con cuidado. Con una llave en la mano, deseche el carbón activado del filtro y reemplácelo con carbón activado nuevo.
Vuelva a colocar el soporte de carbón y colóquelo nuevamente en la unidad de filtro. Instale la unidad de filtro de nuevo en el sistema. Encienda el sistema y verifique si el agua está fluyendo hacia el filtro.
El filtro biológico debe limpiarse cada seis meses. Para cambiar el filtro biológico, retire el filtro del sistema. Libere la presión del filtro presionando el botón de liberación de presión.
Saque el filtro y retire la tapa. Vacíe el contenido en un recipiente tamizador para separar el Cy Oex del agua. Si el Cy Oex está muy sucio, reemplácelo.
Llene el filtro con el nuevo citrato de ax. Llene la unidad con agua del sistema. Cierre la tapa del filtro, vuelva a colocar la unidad y enciéndala.
Los filtros UV se utilizan para controlar los contaminantes biológicos y deben reemplazarse cada nueve a diez meses. Los peces cebra pueden alimentarse con alimento seco o alimentos vivos como camarones de salmuera; los huevos de camarón de salmuera están disponibles en tiendas locales de mascotas y pueden eclosionarse en el laboratorio siguiendo los sencillos pasos descritos aquí. Disuelva sal marina roja en agua del sistema para obtener una solución de 30 a 35 gramos por litro.
Llene el criadero de artemias con agua salada y agregue los huevos de camarón a una concentración de 1,2 cucharadas por litro. Aere el criadero vigorosamente con una bomba de aire y deje que los huevos de artemia se fertilicen durante aproximadamente 48 horas. Retire el tubo de aire y deje reposar la cultura durante cuatro a cinco minutos.
Los camarones de salmuera fertilizados se reúnen en el fondo del incubador; utilizando la llave situada en la parte inferior del incubador, deseche el primer flujo, que contiene los huevos no fertilizados. A continuación, recolecte los camarones de salmuera fertilizados. Separe los camarones de salmuera del agua salada.
Utilizando una red de recolección de camarones de salmuera, enjuague los camarones hacia un recipiente usando agua del sistema. Los camarones de salmuera quedan concentrados en elevada cantidad en el fondo del recipiente y ya están listos para alimentar a los peces cebra. Alimente a los peces con los camarones de salmuera utilizando una pipeta o un gotero.
La cantidad de alimento dispensado depende del tamaño de la población de los tanques individuales. Después de inyectar alimento en el agua, los peces hambrientos nadan para atrapar los camarones de salmuera, lo cual es importante para su ejercicio regular. La alimentación seca puede realizarse ya sea utilizando hábitats acuáticos, un dispensador de alimento para peces, o mediante una cuchara sencilla.
Los peces cebra inician el desove al comienzo de la luz. Los huevos se pueden obtener mediante desove colectivo o por parejas. Aunque el desove colectivo es más eficiente en mano de obra y se utiliza en la recolección habitual de embriones, se prefiere el desove por parejas cuando se deben analizar genes o mutaciones en el desove en tanque; arme el reproductor en el tanque y colóquelo lentamente dentro del tanque.
Después del encendido de la luz, deje el conjunto de apareamiento en el tanque durante aproximadamente 15 minutos para permitir que los peces se reproduzcan antes de retirar al reproductor del tanque y recolectar los huevos. El apareamiento por pares se establece a última hora de la tarde ensamblando el tanque de reproducción y llenándolo con agua del sistema. Transfiera una hembra y un macho a lados opuestos del tanque.
Las hembras pueden distinguirse de los machos por su vientre más grande. Retire el divisor a la mañana siguiente. Poco después del inicio de la luz, deje que los peces se reproduzcan sin molestias durante 20 minutos o hasta que se hayan depositado cantidades suficientes de embriones en el fondo del tanque.
Después del apareamiento, devuelva los peces a sus tanques. Recoja los huevos con un colador. Lave cuidadosamente los embriones.
Con agua del sistema. Transfiera los embriones a una placa de Petri enjuagando el colador con medio para embriones. Los embriones pueden observarse bajo un microscopio.
Los embriones no fertilizados deben separarse de los embriones fertilizados utilizando una aguja y una pipeta. Después de separar los huevos fertilizados de los no fertilizados, se mantienen en una incubadora a aproximadamente 28,5 grados Celsius durante 72 horas, hasta que las larvas eclosionen. Ahora las larvas han salido de los COR y nadan libremente.
Las larvas deben alimentarse a partir de los cinco días posteriores a la fertilización y mantenerse en agua estancada durante unos días antes de transferirlas al sistema. Transfiera suavemente las larvas a un tanque que contenga una malla de tamaño pequeño de aproximadamente entre 300 y 400 micrones. Después de 14 días, los tanques con larvas pueden colocarse en el sistema y abastecerse con un pequeño flujo de agua en circulación.
Se deben utilizar deflectores de diferentes tamaños según el tamaño de las larvas y los peces adultos. Por lo general, los embriones tardan tres meses en desarrollarse hasta convertirse en adultos sexualmente maduros. Gracias por ver el menú y buena suerte en sus experimentos.
Este protocolo describe el mantenimiento y cuidado rutinarios necesarios para una cría óptima de pez cebra. Incluye procedimientos detallados para el mantenimiento del sistema, alojamiento, alimentación, reproducción y cría de larvas de pez cebra.
El establecimiento de protocolos sólidos de cría de pez cebra favorece modelos preclínicos confiables para la investigación farmacológica y genética. Prácticas estandarizadas de alojamiento, alimentación y reproducción reducen la variabilidad biológica y mejoran la reproducibilidad de los datos en flujos de trabajo de descubrimiento temprano. Esto permite un cribado fenotípico consistente y la validación de dianas en sistemas relevantes para enfermedades.
La cría de pez cebra se integra en el continuo de descubrimiento desde la validación inicial de objetivos hasta la identificación de compuestos líder y el perfilado preclínico, al proporcionar una plataforma biológica estable y escalable.