Un sencillo método de intubación ratón de pulmón

El objetivo general de este procedimiento es intubar un ratón para permitir la ventilación mecánica o la instalación de líquidos. Esto se logra ensamblando primero la cánula y la fuente de luz. El segundo paso es colgar el ratón verticalmente por los incisivos superiores.

Después de manipular la cabeza y el cuerpo para permitir un camino recto para la intubación, inserte el introductor de fibra óptica y la cánula a través de las cuerdas vocales. En última instancia, se retira la fibra óptica y el ratón con la cánula en su lugar se coloca en posición supina para la ventilación o la instalación. Bien, hoy vamos a demostrar un procedimiento simple para intubar un pulmón de ratón.

La visualización es importante porque a menudo la posición del mouse es un paso crítico en términos de inserción de la cánula, por lo que con un poco de práctica, se necesita un poco de práctica. Debería ser posible para cualquiera hacer esto repetidamente en un tiempo relativamente corto demostrando el procedimiento hoy en día es el Dr. Sandy Doss, quien es miembro junior de la facultad en la división de Medicina Pulmonar y la escuela de medicina. El primer paso es prepararse.

Prepare la cánula para ratones adultos, se utiliza un catéter intravenoso de calibre 20 de uno a 1.5 pulgadas de largo. A continuación, prepare el cable de fibra óptica cortando una longitud de cable óptico de 0,5 milímetros para suavizar el borde. Después de cortar, sostenga la fibra en el extremo y haga pequeños círculos para que las puntas toquen un trozo de papel de lija de grano 1000.

El otro extremo se inserta en un tapón de caucho de silicona del tamaño adecuado para adaptarse a la abertura de la fuente de luz. Primero, empuje a través de una aguja de calibre 18. A continuación, inserte la fibra óptica a través del orificio de la aguja y retire la aguja.

A continuación, el tapón de goma se conecta a una fuente de luz halógena de 150 vatios. A continuación, inserte el cable de fibra óptica a través de un trozo corto de tubo de goma de silicona. Asegure el tubo en su lugar mientras permite ajustar el cable de fibra óptica.

Una vez en su lugar, inserte el tubo de silicona cómodamente en el extremo del señuelo de la cánula. Ajuste la posición del cable de fibra óptica para que se extienda a través de la cánula y unos cuatro milímetros por delante de la punta. Una vez que todo esté preparado, coloca un ratón anestesiado en un soporte vertical suspendiendo cuidadosamente al animal por sus incisivos superiores.

Una vez asegurado, muy suavemente, saca la lengua y sujétala con el pulgar y el índice. Coloque el dedo medio entre el cuello y la tracción de soporte de plástico en la lengüeta con el índice. El dedo y el pulgar se utilizan para abrir la boca y enderezar la vía de intubación.

El ángulo de la cabeza se ajusta con el dedo medio detrás del cuello, como se muestra aquí. A continuación, visualiza las cuerdas vocales. Si los cordones no son visibles, tire suavemente con más fuerza de la lengua usando el dedo medio como apoyo.

Una vez visualizado, utilice el cable de fibra óptica como fuente de luz e introductor y empújelo a través de las cuerdas vocales. Una indicación de que la cánula está en la tráquea es que el ratón puede jadear cuando se inserta la cánula por primera vez. Una vez insertada, avance la cánula unos cinco milímetros más, luego teniendo cuidado de no mover la cánula, retire el cable de fibra óptica, acueste el mouse y asegure la cánula con un trozo de cinta adhesiva y apoye el cubo de la cánula sobre un trozo de arcilla para modelar.

Se puede usar un pequeño espejo dental guardado en el congelador para confirmar que la cánula está en la tráquea y no en el esófago. Coloque el espejo frente al cubo de señuelo del catéter. Si el catéter está en la posición correcta, el aliento exhalado formará condensación en el espejo.

Si el procedimiento de intubación se realiza solo para la instalación de agentes en aerosol en el pulmón, esto se puede hacer mientras el ratón está acostado en decúbito supino. En esta posición, sin embargo, las instalaciones líquidas se realizan de manera más eficiente mientras el mouse aún está suspendido en la posición vertical, seguidas de la extracción inmediata de la cánula para medir la función pulmonar. A continuación, el ratón anestesiado intubado se conecta a un ventilador mecánico, como se muestra aquí.

Los ajustes del ventilador deben realizarse antes de comenzar la intubación, para que no haya demora en la ventilación. Se muestra un registro de la presión y el volumen de ventilación de este ratón intubado. Evaluamos la capacidad del método para obtener mediciones reproducibles de la resistencia de las vías respiratorias durante un período de cinco semanas.

Los datos de este gráfico muestran que no hay ningún efecto de realizar mediciones repetidas, ya que la resistencia de referencia permanece relativamente constante. En cada uno de los cuatro ratones estudiados a intervalos semanales, evaluamos la estanqueidad del sello entre la tráquea y la cánula de intubación inyectando bolos de aire en los pulmones después de sacrificar al ratón. Aunque puede haber una fuga muy lenta después del estrés, la recuperación de la relajación, las fugas de presión parecen ser mínimas.

Al intentar este procedimiento, es muy importante tener cuidado al retirar el mouse del soporte de soporte, ya que es muy fácil sacar la cánula accidentalmente.