Journal
/
Biología
/
שיטה ללא טיהור חלבונים של קביעת זיקה מחייבת ידי thermophoresis Microscale
JoVE Revista
Biología
Se requiere una suscripción a JoVE para ver este contenido.  Inicie sesión o comience su prueba gratuita.
JoVE Revista Biología
Protein Purification-free Method of Binding Affinity Determination by Microscale Thermophoresis
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

שיטה ללא טיהור חלבונים של קביעת זיקה מחייבת ידי thermophoresis Microscale

DOI:
10.3791/50541-v

•

10:22 min

•

August 15, 2013

•

, , , , , ,
1Cancer and Inflammation Program,National Cancer Institute, 2Basic Science Program,SAIC-Frederick, Inc., 3Departments of Oncology and Radiation Medicine,Georgetown University Medical Center, 4Structural Biophysics Laboratory,National Cancer Institute

Capítulos

  • 00:05Título
  • 01:43Preparation of Cell Lysate
  • 03:20Determination of Optimal Lysate Dilution
  • 04:02Microscale Thermophoresis Binding Studies
  • 07:05Microscale Thermophoresis Data Analysis
  • 08:25Results: Measuring the Affinity of Non-phosphorylated STAT3 Protein Binding to Oligonucleotides
  • 09:40Conclusion

Summary

Traducción Automática

Traducción Automática

thermophoresis microscale (MST) יכול להיות בשימוש נרחב לקביעת זיקה מחייבת ללא טיהור של חלבון המטרה מlysates התא. הפרוטוקול כולל ביטוי יתר של החלבון ה-GFP-התמזגו, תמוגה תא שבאינו denaturing תנאים, וזיהוי של אות MST בנוכחות ריכוזים שונים של ליגנד.

Tags

Protein PurificationMicroscale ThermophoresisBinding AffinityKD DeterminationGFP-fused ProteinSTAT3Cell LysateNon-denaturing ConditionsDrug DiscoveryProtein Interactions

Article

Embed

Añadir a la lista de reproducción

Usage Statistics

Videos relacionados

ריכוז חלבון Microvolume קביעת באמצעות 2000c NanoDrop ספקטרופוטומטר

חשיבותה של ריכוז חלבון נכון עבור קינטיקס וקביעת זיקה בניתוח מבנה פונקציה

בידוד יציב Multi-חלבון על ידי תסביכים In vivo מבוקר נייד חוצה קישור חיסונית מגנטי כרומטוגרפיה זיקה

PAR-Clip - שיטה לזהות Transcriptome רחב אתרי קישור של חלבונים RNA הכבילה

שלפוחיות בתיווך זיקה ליפידים כרומטוגרפיה באמצעות Cell מגנטי מיון פעיל (LIMACS): שיטה חדשה לנתח חלבון, שומנים אינטראקציה

חלבון טיהור אורתוגונלית בהנחיית תג זיקה קטנים Bispecific

זיהוי שותפים חלבון אינטראקציה באמצעות טיהור טנדם זיקה

ניתוח בזמן אמת של תעבורת רטינול ידי הקולטן ממברנה של חלבון מחייב פלזמת רטינול

שיטת Quantitation רגישה וספציפית לקביעת חלבון-C שרירן לב סרום הכבילה ידי Immunoassay Electrochemiluminescence

זיהוי אינטראקציה בין חלבונים ב<em> דרוזופילה</em> ראשי מבוגרים טנדם זיקה טיהור (TAP)

Read Article