Dynamic Contrast mejorada de imagen de resonancia magnética de un modelo ortotópico de cáncer pancreático del ratón

El objetivo general de este procedimiento es aplicar imágenes de resonancia magnética mejorada con contraste dinámico o D-C-E-M-R-I a xenoinjertos de tumores pancreáticos ortotópicos en ratones. Esto se logra primero extirpando el páncreas del abdomen y luego infundiendo lentamente células de cáncer de páncreas humano en la cola del páncreas. Luego, el páncreas ha regresado al abdomen, y cuando el tumor tiene de cinco a siete milímetros de diámetro, se coloca una tabla de plástico y una bobina de superficie sobre la masa de tejido humas.

En última instancia, el microvascular del xenoinjerto tumoral puede ser visualizado por D-C-E-M-R-I. La principal ventaja de esta técnica frente al método convencional como el D-C-M-R-I, de xenoinjerto tumoral subcutáneo, es que los modelos ortotópicos de tumor pancreático permiten evaluar el microambiente tumoral primario, incluyendo la neovascularización, el riego sanguíneo y la invasión de células tumorales. El procedimiento será demostrado por Sharon Samuel, investigadora asociada, y Marie Warren, técnica de investigación, ambas de nuestro laboratorio.

Comience colocando un ratón de mar con válvula de deslizamiento hembra anestesiado de ocho semanas de edad en una almohadilla térmica después de confirmar el nivel adecuado de sedación mediante un pellizco en los dedos de los pies. A continuación, retire el pelo del cuadrante superior izquierdo del abdomen del animal y administre un fármaco analgésico en la piel con unas tijeras rectas de iris. Haga una incisión de un centímetro en la piel y el peritoneo, y levante suavemente el páncreas a través de la incisión.

A continuación, utilice una jeringa de insulina de 0,5 mililitros, equipada con una aguja de calibre 28 para infundir lentamente 2,5 millones de células de cáncer de páncreas humano en 30 microlitros de DMEM en la cola del páncreas. Confirme que la solución crea una pequeña ampolla en la cabeza del páncreas. A continuación, vuelva a colocar suavemente el páncreas en el abdomen y cierre el peritoneo de la piel en una capa con dos suturas interrumpidas de cinco prolina cero.

Revise el tamaño del tumor diariamente con dos dedos a palpación del área quirúrgica. Por lo general, los tumores se sienten más densos y abultados que los tejidos y órganos circundantes. Monitoree a los animales diariamente para detectar signos de enfermedad también.

Cuando el tumor alcance de cinco a siete milímetros de diámetro, inserte una aguja afilada de calibre 30 en un extremo de un tubo de micropolietileno y una punta roma de aguja de calibre 30 en el otro. Conecte una jeringa de un mililitro que contenga un agente de contraste para resonancia magnética recién preparado a la punta roma de la aguja y presione lentamente el émbolo para llenar todo el tubo. Luego, dilate las venas de la cola del animal bajo una lámpara de calor y usa pinzas Kelly para agarrar el eje de la aguja afilada de calibre 30.

Inserte con cuidado la aguja en una de las venas dilatadas de la cola y pegue tanto la cola como el tubo en un trozo de plástico de 10 por 100 milímetros para mantener la cola recta. A continuación, coloque al ratón en decúbito supino en una cama de animales equipada con agua tibia circulante para regular la temperatura corporal del animal durante la toma de imágenes. Inserte una sonda de temperatura rectal en este momento también.

Cuando el animal esté en posición, aplique una tabla de plástico doblada ortogonalmente en el área abdominal, asegurándose de que el tumor esté ubicado detrás del extremo superior de la tabla, y luego tire de la tabla hacia abajo unos dos milímetros para asegurarse de que el tumor se atrape firmemente. Luego, pegue un transductor de almohadilla respiratoria en el área del pecho para monitorear la respiración del animal durante la toma de imágenes. Ahora coloque la bobina de superficie en la parte superior de la región tumoral, pegándola firmemente al lecho del animal.

A continuación, empuje el lecho del animal en el escáner de resonancia magnética hasta que la región tumoral esté en el centro de la bobina de volumen. Aplique una resonancia magnética ponderada T dos para localizar el tumor, seguida de una resonancia magnética ponderada T one con varios ángulos invertidos para el mapeo T uno. Luego, para la toma de imágenes D-C-E-M-R-I, aplique una resonancia magnética ponderada con un ángulo de giro fijo de forma continua antes, durante y después de la inyección del contraste de resonancia magnética a base de gadolinio.

Controle la respiración y la temperatura corporal del animal continuamente durante la toma de imágenes al final de la imagen, retire la aguja y otras sondas y coloque al animal bajo una lámpara de calor mientras masajea suavemente el área abdominal inferior. Hasta que el animal despierta cuantitativamente. D-C-E-M-R-I se puede aplicar con éxito para xenoinjertos ortotópicos de tumores pancreáticos.

Usando el modelo de región de referencia, por ejemplo, estos mapas de contraste muestran la región tumoral en una escala de colores un minuto antes de la inyección de la RM. Agente de contraste. Y a los cinco y 40 minutos después se superpusieron con T dos imágenes de resonancia magnética de peso en escala de grises. El ratón de este experimento tenía un xenoinjerto ortotópico de tumor de páncreas humano.

Estas curvas de realce del contraste se promediaron a partir de la región tumoral y la región del músculo paravertebral. Estos mapas kts y KEP para el tumor demuestran la tasa de lavado y lavado del agente Mr.Contrast Al intentar este procedimiento de TCMI, es importante asegurarse de que el tumor esté ubicado detrás del extremo superior de la placa.