Un método no invasivo para generar el modelo de lesión de cartílago intraarticular inducida por carga cíclica de la rodilla de rata

Este protocolo muestra que es posible causar daño al cartílago en animales, animales más grandes sin ninguna intervención quirúrgica o destrucción estructurada de la rodilla del animal. La mayor ventaja es que resulta ser repetitivo en los operadores incluso sin experiencia, lo que es difícil de lograr con cualquier método quirúrgico. Comience montando la rata anestesiada en el dispositivo de fijación.

Coloque la rata anestesiada acostada sobre su vientre en la placa base con su rodilla derecha unida a un pequeño trozo de resina con un surco cóncavo. Coloque la extremidad posterior derecha en las posiciones de extensión de cadera, flexión de rodilla y extensión de tobillo con la rodilla flexionada a aproximadamente 140 grados. Acomode el talón de la rata en la ranura en forma de cuña en el accesorio móvil.

Mueva el dispositivo de fijación al instrumento de prueba de tensión y tracción y asegúrese de que no haya contacto con la célula de carga. Abra el software de control del instrumento de prueba de tensión y tracción y haga clic en el botón de calibración. Después de la calibración, fije con cuidado la parte superior del bastidor a la célula de carga.

Encienda la perilla giratoria del panel operativo principal móvil lentamente hasta que la precarga alcance los cinco Newtons para mantener la articulación de la rodilla estrechamente unida al marco. En el menú principal, haga clic en crear un nuevo método y etiqueta del sistema. Establezca el modo de prueba en ciclo y el tipo de prueba en compresión.

Haga clic en la etiqueta del sensor y seleccione la pestaña de prueba para comprobar que el límite está dentro de 60 Newtons. A continuación, seleccione la pestaña trazo y compruebe que el límite está dentro de los 500 milímetros. En la etiqueta de control de pruebas, seleccione el origen del crecimiento para iniciar el programa principal con 0,3% o escala completa.

Establezca la velocidad de carrera en control en la primera y tercera sección a un milímetro por segundo, luego establezca la fuerza de prueba máxima en la segunda sección en 20 Newtons y la fuerza de prueba mínima en la cuarta sección en cinco Newtons. Establezca la duración de entero en 0,5 segundos para la carga máxima y 10 segundos para la carga mínima. En la pestaña de precarga en la parte inferior de la página, asegúrese de que la opción de encendido esté marcada, que la velocidad de eliminación de la desviación se establezca en 100 milímetros por minuto y que la fuerza máxima sea de cinco Newtons.

Coloque el material como metal en la etiqueta de la muestra. En el menú principal, en la sección seleccionar método y prueba, seleccione el método que se acaba de crear y haga clic en iniciar para comenzar la prueba. Establezca el número de ciclos en 60.

Devuelva a la rata a su jaula después de la carga y mantenga un horario de oscuridad clara de 12-12 horas en una jaula con suficiente espacio y comida ad libitum hasta que sea el momento del análisis. Se estudiaron los cambios a corto plazo en la viabilidad de los condrocitos en muestras sometidas a 20 Newtons de carga cíclica. El número de condrocitos muertos aumentó a las 12 horas después del trauma.

Por el contrario, el número de condrocitos vivos continuó disminuyendo. El cartílago articular de las rodillas de rata que se sometieron a 20 Newtons de carga dinámica se dañó y se confirmó una zona de lesión focal en el cóndilo femoral lateral en todas las muestras. El tamaño de la lesión no aumentó progresivamente durante el período de observación de ocho semanas.

El borde correspondiente a la interfaz de la lesión y el cartílago no afectado se pudo observar en el área afectada. Lo más importante es la configuración adecuada de la fuerza de prueba y el número de ciclos. Con esta técnica, se puede controlar la carga mecánica a la cobertura articular de la sangre, allanando el camino para explorar cómo la carga mecánica afecta el desarrollo o la prevención de la osteoartritis.