Le "Rotifer Polyculture Méthode" complète et à jour pour élever un poisson zèbre Première Nourrir

Résumé

Les larves de poisson-zèbre sont adaptées pour se nourrir de zooplancton. Il est possible de tirer parti de cette caractéristique naturelle en laboratoire en grandissant d’abord en nourrissant les poissons ensemble dans le même système avec des rotifères d’eau salée vivants. Cette stratégie de « polyculture » favorise une croissance et une survie élevées avec un minimum de travail et de perturbation des larves.

Résumé

Le poisson-zèbre (Danio rerio) est un organisme modèle d’importance croissante dans de nombreux domaines scientifiques. L’un des aspects techniques les plus exigeants de l’élevage de cette espèce en laboratoire est l’élevage des larves qui se nourrissent en premier jusqu’au stade juvénile avec des taux de croissance et de survie élevés. Le principal défi de gestion de cette période de développement consiste à fournir aux poissons des aliments hautement nutritifs de façon presque continue sans compromettre la qualité de l’eau. Parce que les larves de poisson-zèbre sont bien adaptées pour se nourrir de petit zooplancton dans la colonne d’eau, les proies vivantes telles que les rotifères brachionidés, les artémias et les paramécies sont largement reconnues comme les aliments de choix, au moins jusqu’à ce que les poissons atteignent le stade juvénile et soient capables de se nourrir efficacement de régimes transformés. Ce protocole décrit une méthode par laquelle des larves de poisson-zèbre nouvellement écloses sont élevées avec des rotifères d’eau salée vivants (Brachionus plicatilis) dans le même système. Cette approche de polyculture fournit aux poissons une source de nourriture vivante riche en nutriments « à la demande », sans produire de déchets chimiques à des niveaux qui limiteraient autrement leur performance. Il est important de noter que, parce que le système exploite à la fois la productivité élevée naturelle des rotifères et les préférences comportementales des poissons, la main-d’œuvre impliquée dans l’entretien est faible. Le protocole suivant détaille une procédure mise à jour, étape par étape, qui intègre la production de rotifères (évolutive à n’importe quel niveau souhaité) pour une utilisation dans une polyculture de larves de poissons-zèbres et de rotifères qui favorise une performance maximale pendant les 5 premiers jours d’alimentation exogène.

Introduction

Le poisson zèbre (Danio rerio) est un animal de laboratoire prééminente utilisé dans un nombre croissant de disciplines scientifiques, y compris mais non limité à la génétique du développement, de la toxicologie, de comportement, de l'aquaculture, de la biologie régénérative, et la modélisation de nombreux troubles ^humains 1 ^{- 5.} Bien que l'espèce est relativement facile à maintenir dans le laboratoire, il ya un certain nombre de défis de gestion associés à leur culture ^6. Le plus important d'entre eux est l'élevage des larves, en particulier lorsque le poisson commence d'abord à nourrir à la su....

Protocole

1. Rotifer Culture

1. Composants de base d'un système de culture à l'aide d'un navire de 100 L Culture
   1. Rassemblez tous les composants nécessaires à l'installation de culture de rotifères. L'installation de culture de rotifères se compose d'un récipient de culture (CV) pour faire croître les rotifères; un navire similaire à maintenir rotifères avance matière (avance matière de navires de la culture, FCV); un pot à fond rond éclosion (Flux Reservoir, FR) pour le stockage du mélange d'alimentation des algues (AFM); une alimentation en air (AS) pour aérer le CV, CVF et le FR; une pompe péristaltique avec un te....

Résultats

Le système de culture de rotifères continu décrit ici est dynamique, et il est normal pour les numéros de rotifères de fluctuer dans une faible mesure au fil du temps si il ya des variations dans les taux d'alimentation et de récolte quotidienne. La population de rotifères dans l'une des cultures actives dans les installations d'aquaculture à l'Hôpital pour enfants de Boston, maintenue de la manière décrite ci-dessus, a été surveillée pendant 30 jours (figure 3). La dens.......

Discussion

Mise en œuvre réussie de la méthode de polyculture de rotifères pour alimenter début poisson zèbre larvaire nécessite des protocoles efficaces pour deux tâches: la mise en place et la maintenance d'un système de culture de rotifères continue de nourrir les poissons, et la culture de la première alimentation larves de poisson zèbre avec rotifères dans le même réservoir.

L'installation d'un système de production d'eau salée de rotifères continue pour les laboratoires de poisson.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Rotifer Culture Infrastructure
100 L Récipient de culture	Aquaneering	Récipient de	culture en polycarbonate personnalisé, à fond conique, avec vanne de vidange
Kit de seau de culture de 5 gallons	Mariculture à roseaux	Kit de démarrage CCS Récipient	de culture de petit volume pour petites installations
Tube transparent rigide 1/2" de diamètre extérieur, 36 pouces	Pentair Aquatic Ecosystems	16025	Tube rigide transparent pour distribution d’air
Tube en maille	Pentair Aquatic Ecosystems	RT444X	Support de tube en maille pour filtre à fil
dentaire Rotifer Floss	Reed Mariculture	Rotifer floss 12 » x 42 »	Piège à particules
Pompe de mesure péristaltique, 5 GPD	Grainger	38M003  ;	Pompe doseuse avec minuterie pour le dosage de l’alimentation des rotifères
Pompe de mesure péristaltique à minuterie, 1-100 mL/h (pour la culture à plus petite échelle)	Coral Vue	SKU : IC-LQD-DSR	Pompe doseuse avec minuterie pour le dosage de l’alimentation des rotifères
Tube en silicone  ;	Cole Parmer		Tube pour l’apport d’algues au récipient rotifère
Tube rigide transparent " O.D.,36 »	Pentair Aquatic Ecosystems	16025	Tube transparent rigide pour l’alimentation en air de la pâte d’algues
Tube transparent rigide D.O., 36"	Pentair Aquatic Ecosystems	16025	Tube transparent rigide pour la livraison d’algues
Rotifers
Live Rotifers Brachionus plicatilis Type L	Mariculture de	roseaux Type L 5 millions	Rotifer stock culture pour le démarrage du système
Rotifer Feed
Hydroxyméthylsulfonate de sodium	Mariculture des roseaux	ClorAm-X® ; Pot de 1 lb	Réducteur d’ammoniac pour mélange d’aliments à base d’algues
Bicarbonate de sodium Fisher	Scientific	S25533B	Tampon de pH pour mélange d’aliments à base d’algues
Concentré de microalgues	Mariculture de roseaux	Rotigrow Plus® ; Sachet de 1 litre	Aliment pour rotifères optimisé sur le plan nutritionnel
RG Complete	Reed Mariculture	RG Complete Bouteille complète de 6 oz	Aliment tout-en-un à base de microalgues pour les cultures à petite échelle
Water Preparation
; Cristaux de récif Sel de récif	que les poissons placent	198210	Sel pour la fabrication de l’eau d’élevage (REMARQUE : cet article n’est qu’un exemple ; toute formulation de sel sans contaminant peut être utilisée).  ;
Réfractomètre	Pentair Aquatic Ecosystems	SR6	mesurant la salinité
Rotifer Matériel de culture
Plankton Collecteurs 12" Dia, 53 microns	Pentair Aquatic Ecosystems	BBPC20	Grillage pour la collecte des rotifères
Scrub Pads	Pentair Aquatic Ecosystems	SCR-58	Tampon à récurer pour le nettoyage de l’intérieur des cuves d’élevage
			récurer
Seau	Grainger Supply  ;	43Y530	Godet gradué pour le mélange de l’eau de culture
Bocal d’éclosion	Pentair Aquatic Ecosystems	J30	Stockage des mélanges d’aliments pour algues
Lugol' s Solution, Dilué	Fisher Scientific	S99481	Agent utilisé pour immobiliser les rotifères vivants pour le comptage
plancton Sedgewick-Rafter lame de comptage avec grille  ;	Pentair Aquatic Eco-Systems	M415	Comptage des rotifères
Miscelleneous
Tea Strainer	Kitchenworks	971972	Utilisé pour la collecte d’embryons de poisson-zèbre après le frai