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Behavior

वृद्ध चूहों में लघु सत्र उच्च तीव्रता अंतराल प्रशिक्षण और ट्रेडमिल मूल्यांकन

Published: February 2, 2019 doi: 10.3791/59138

Summary

लघु सत्र (≤ 10 मिनट) उच्च तीव्रता अंतराल प्रशिक्षण (HIIT) अब व्यायाम विधियों के लिए एक विकल्प के रूप में उभर रहा है, अभी तक छोटे वेरिएंट शायद ही कभी पशु अध्ययन में मॉडलिंग कर रहे हैं । यहां, हम एक 10 मिनट, 3 दिन एक सप्ताह, कठिन ट्रेडमिल HIIT प्रोटोकॉल है कि पुरुष और महिला वृद्ध चूहों में शारीरिक प्रदर्शन को बढ़ाता है का वर्णन ।

Abstract

उच्च तीव्रता अंतराल प्रशिक्षण (HIIT) एक चिकित्सकीय दृष्टिकोण को रोकने के लिए, देरी, या उंनति दायित्व निभाने एकदम के रूप में उभर रहा है । विशेष रूप से लघु सत्र HIIT में, कम या 10 मिनट के बराबर के साथ विशेष ब्याज की है के रूप में कई मानव अध्ययन के रूप में कुछ मिनट एक दो बार एक सप्ताह के रूप में छोटी दिनचर्या सुविधा । हालांकि, वहां एक पशु अध्ययन की धनाभाव है कि मॉडल लघु सत्र HIIT के प्रभावों । यहां, हम 10 मिनट के एक व्यक्तिगत सिलवाया और प्रगतिशील लघु सत्र HIIT आहार के लिए एक पद्धति का वर्णन 3 दिन एक सप्ताह के वृद्ध चूहों एक झुका ट्रेडमिल का उपयोग कर के लिए दिया । हमारी कार्यप्रणाली में ट्रेडमिल मूल्यांकन के लिए प्रोटोकॉल भी शामिल हैं । चूहों शुरू में ट्रेडमिल को acclimatized और फिर आधारभूत फ्लैट और कठिन ट्रेडमिल मूल्यांकन दिया जाता है । व्यायाम सत्र एक 3 मिनट वार्म अप के साथ शुरू, तो एक तेज गति से 1 मिनट के तीन अंतराल, एक सक्रिय वसूली की गति से 1 मिनट के बाद । इन अंतरालों के बाद, चूहों एक अंतिम खंड है कि तेज गति से शुरू होता है और 1 मिनट के लिए बढ़ौतरी दी जाती है । HIIT प्रोटोकॉल व्यक्तिगत गति और प्रत्येक माउस के लिए तीव्रता के रूप में सिलवाया है प्रारंभिक anaerobic मूल्यांकन स्कोर पर आधारित निर्धारित कर रहे हैं । इसके अतिरिक्त, हम बढ़ाने या प्रदर्शन के आधार पर व्यक्तिगत चूहों के लिए तीव्रता को कम करने के लिए शर्तों का विस्तार । अंत में, सभी चूहों हर दो सप्ताह के लिए तीव्रता बढ़ जाती है । हम पहले इस प्रोटोकॉल में सूचना दी वृद्ध पुरुष चूहों में शारीरिक प्रदर्शन बढ़ाया और यहां यह भी वृद्ध महिला चूहों में ट्रेडमिल प्रदर्शन बढ़ जाती है दिखाते हैं । हमारे प्रोटोकॉल के लाभ कम प्रशासन समय शामिल है (के बारे में 15 6 चूहों प्रति मिनट, एक सप्ताह में 3 दिन), बेहतर मॉडल निर्धारित व्यायाम करने के लिए चूहों के लिए individualizing के लिए रणनीति, और एक मॉड्यूलर डिजाइन है कि जोड़ने या संख्या और की लंबाई के हटाने के लिए अनुमति देता है अनुमापन व्यायाम लाभ के लिए अंतराल ।

Introduction

नियमित व्यायाम को रोकने या sarcopenia और दायित्व निभाने एकदम1,2,3,4जैसे कई उंर से जुड़े रोगों में देरी पर प्रभावी है । हालांकि, से कम 15% उन ६५ और पुराने की सिफारिशों को पूरा १५० मिन मध्यम तीव्रता व्यायाम प्लस शक्ति के एक सप्ताह
प्रशिक्षण5,6. समय और लंबा सत्र की कमी के रूप में व्यायाम करने के लिए आम बाधाओं रहे हैं, उच्च तीव्रता अंतराल प्रशिक्षण (HIIT) पारंपरिक परहेजों के लिए एक विकल्प के रूप में उभर रहा है । HIIT तीव्र गतिविधि है कि सक्रिय वसूली की संक्षिप्त अवधि के साथ interspersed है की कई छोटी फटने सुविधाएं, और वहां सबसे कम परहेज है कि अभी भी लाभप्रद परिणाम उपज की पहचान करने में हाल ही में रुचि है । इस तरह के अध्ययनों में शामिल 3 दिन एक सप्ताह 4 मिनट7, 2-3 ंयूनतम8, १.५ मिनट9, एक एकल10, और भी ४० एस11के कुल सत्र टाइंस की विशेषता परहेज ।

इसी तरह, HIIT पशु मॉडल में पर्याप्त रुचि है । अध्ययन के बहुमत चूहों12,13,14,15,16,17,18,19,20, इस्तेमाल किया 21 या22चूहों,23,24,25 और एक ट्रेडमिल का उपयोग कर प्रदर्शन किया गया, हालांकि कुछ अंय तैराकी प्रोटोकॉल का इस्तेमाल किया26,27 , 28. इन अध्ययनों के बहुमत का उपयोग करें VO2अधिकतम व्यायाम13,14, 19,21,24के प्रारंभिक तीव्रता निर्धारित करने के लिए । इसके अतिरिक्त, हालांकि एक अक्सर वर्णित लाभ HIIT के छोटे परहेजों रहा है, लगभग इन की पहचान की अध्ययन सुविधा के सभी परहेजों कि पिछले 30 मिनट या अब11,12,13,14 ,15,18,19,21, एक के साथ एक के अपवाद के साथ एक से थोड़ा लंबा 10 मिनट आहार20, और 19 मिनट के साथ एक और तीन अलग भर में तीव्रता16। हमारे ज्ञान के लिए, वहां कोई रिपोर्ट पशु अध्ययन कर रहे है कि एक 10 मिनट या कम HIIT आहार की जांच, या व्यक्तिगत पशुओं के लिए आहार दर्जी, हमारे प्रकाशित अध्ययन के अपवाद के साथ17 कि इस प्रोटोकॉल के लिए आधार के रूप में कार्य करता है ।

यहां, हम HIIT के लिए एक प्रोटोकॉल का वर्णन वृद्ध चूहों में व्यक्तिगत रूप से मॉडल, लघु सत्र (≤ 10 मिनट) हाल ही में मानव अध्ययन में प्रयुक्त वेरिएंट7,8,9,10,11। विधि एक झुका (25 डिग्री) एक 3 मिनट के साथ गर्म ट्रेडमिल पर एक 10 मिनट के आहार भी शामिल है, और चार उच्च तीव्रता पर 1 मिनट के अंतराल, तीन 1 मिनट के साथ सक्रिय वसूली क्षेत्रों interspersed । प्रोटोकॉल का लाभ अधिक से अधिक नैदानिक प्रासंगिकता के रूप में यह व्यक्तिगत पशुओं को तीव्रता सिलाई के लिए रणनीतियां सुविधाएं शामिल है, तीव्रता कि VO2मैक्स पर आधारित नहीं हैं, जिससे चयापचय ट्रेडमिल के लिए की आवश्यकता से बचने, और मॉड्यूलर की स्थापना डिजाइन जिससे अंतराल और समय की संख्या आसानी से समायोज्य रहे हैं । इसके अतिरिक्त, इस प्रोटोकॉल के भीतर हम ट्रेडमिल आकलन है, जो फ्लैट सतत और कठिन अंतराल, धीरज की जांच करने के लिए शामिल करने के लिए दो रणनीतियों के लिए निर्देश प्रदान करते हैं । इन तरीकों का उपयोग करना, हम अपने पिछले निष्कर्ष है कि लघु सत्र HIIT आयु वर्ग के पुरुष चूहों में कार्यात्मक क्षमता वृद्धि हुई17, और अब HIIT वृद्ध महिला चूहों में वृद्धि ट्रेडमिल प्रदर्शन का प्रदर्शन ।

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Protocol

सभी अध्ययनों और प्रायोगिक प्रोटोकॉल द्वारा अनुमोदित किया गया और अनुपालन में भैंस और VA पश्चिमी ंयूयॉर्क पशु देखभाल और उपयोग समितियों में विश्वविद्यालय के दिशा निर्देशों के साथ ।

1. प्रयोग सेटअप और सामांय सलाह

नोट: एक C57BL/6J पृष्ठभूमि पर कुल चौबीस मादा चूहों का इस्तेमाल इस प्रोटोकॉल में किया गया था जो 23 महीने की उम्र से शुरू होता है । चूहों एक सशर्त SIRTloxp-exon4-loxp उत्परिवर्तन29, तथापि, इस प्रयोग में प्रेरित नहीं किया गया ।

  1. सुनिश्चित करें कि चूहे कान टैग, आरएफआईडी चिप्स, या पूंछ टैटू जैसे स्थाई पहचानकर्ता प्राप्त करते हैं ।
    नोट: यह भी आकलन अवधि के दौरान त्वरित पहचान के लिए अस्थाई चिह्नों का उपयोग करने के लिए सिफारिश की है (जैसे, पूंछ निशान के लिए स्थाई मार्कर) ।
  2. दिन के अंत में या ७०% (v/v) इथेनॉल 0.25-0.5% ब्लीच (v/v) या प्रायोगिक परीक्षणों के बीच मल या मूत्र को हटाने के साथ ट्रेडमिल साफ । एक नए परीक्षण की शुरुआत करने से पहले सूखी समाधान पूरी तरह से ।
    नोट: इथेनॉल ट्रेडमिल बेल्ट को पहनने में वृद्धि हो सकती है । यह सिफारिश की है कि ट्रेडमिल प्रत्येक चलाने के बीच साफ हो अगर समूह के साथ काम कर रहे पुरुष चूहों घर में आदेश को पिंजरे में लड़ाई में कम करने के लिए । यह अनुदैर्ध्य अध्ययन30,31,३२में प्रत्येक समय बिंदु पर दिन के एक ही समय में ट्रेडमिल आकलन करने की सिफारिश की है, और अगर अंय आकलन किया जा रहा है, आदेश एक ही रहना चाहिए । प्रयोग चलाने वाले जांचकर्ता को चूहों के समूह पदनामों के लिए अंधा भी होना चाहिए ।

2. ट्रेडमिल तंत्र को Acclimatizing चूहों

नोट: आधारभूत प्रयोगों से 1 महीने पहले चूहों की acclimatization आरंभ करें.

  1. मैनुअल मोड (चित्रा 1 और तालिका 1) में ट्रेडमिल सॉफ्टवेयर (वी 3.4.7) का उपयोग कर प्रारंभिक प्रशिक्षण कार्यक्रम की स्थापना की ।
    1. ट्रेडमिल सॉफ्टवेयर खोलो । फिर, फ़ाइल पर क्लिक करें और प्रयोग खोलें ।
    2. Acclimationके अंतर्गत मैन्युअल टैब (चित्र 1) पर तालिका 1 में इंगित मान इनपुट करें.
    3. इनपुट सत्र संख्या 1 के रूप में, 1 से 6 के रूप में सक्रिय चैनलों की संख्या चूहों की संख्या के आधार पर, 10 के रूप में ग्रिड के लिए यात्राओं की संख्या, और झटके की संख्या के रूप में 20.
      नोट: इस प्रारंभिक रन के लिए सदमे की तीव्रता स्तर 1 (०.४६ mA) पर सेट है ।
  2. 0 ° (फ्लैट) के लिए ट्रेडमिल का झुकाव निर्धारित करें ।
  3. पूंछ द्वारा चूहों पकड़ो जब ट्रेडमिल में रखने और जगह चूहों सदमे ग्रिड पर चूहों शुरू करने से बचने के लिए बेल्ट पर सीधे ।
  4. प्रशिक्षण या आकलन शुरू होता है जब चूहों सदमे ग्रिड से दूर रखने के लिए एक ब्रश या जीभ अवसादग्रस्तता का प्रयोग करें । अवांछित झटके से बचने के लिए चलने शुरू करने के लिए चूहों नज.
  5. प्रत्येक माउस के बाद प्रारंभिक प्रशिक्षण कार्यक्रम दिया जाता है, के रूप में झटका तीव्रता के साथ ऊपर के रूप में कार्यक्रम दोहराने 2 स्तर (०.५९ mA) के साथ प्रशिक्षण के बीच कम से 15 मिनट के लिए वृद्धि हुई ।
  6. एक दो दिनों के आरंभिक प्रशिक्षण कार्यक्रम के बाद कठिन ट्रेडमिल acclimatization प्रशासन ।
    1. ट्रेडमिल सॉफ्टवेयर खोलो । फिर फ़ाइल पर क्लिक करें और फिर प्रयोग खोलें ।
    2. Acclimationअंतर्गत तालिका 2 में इंगित के रूप में मूल टैब पर मान इनपुट करें ।
    3. सदमे का पता लगाने के तहत, इनपुट सत्र संख्या 1 के रूप में, 1 से 6 के रूप में सक्रिय चैनलों की संख्या चूहों की संख्या के आधार पर, 10 के रूप में ग्रिड के लिए यात्राओं की संख्या, और 20 के रूप में झटके की संख्या.
    4. प्रोफ़ाइल मोड टैब पर क्लिक करें (चित्रा 2) और चरण 1 के लिए, इनपुट 0 m/मिनट की एक शुरुआत की गति और 5 एस की अवधि के साथ 5 एम/
      1. 5 एम की शुरुआत की गति के साथ एक गर्म चरण 2 जोड़ें/मिनट और 30 सेकंड के लिए 5 m/ 5 s के लिए 5 m/min और 6 m/min की समाप्ति गति पर प्रारंभ होने वाला कोई संक्रमण चरण जोड़ें ।
      2. 6 m/min पर शुरू होता है और 20 एस के लिए 6 मीटर/मिनट में समाप्त होता है कि एक परीक्षण गति कदम जोड़ें । 6 m/min में शुरू होता है और 5 m/min पर समाप्त होता है एक संक्रमण चरण जोड़ें ।
      3. 5 m/min पर प्रारंभ होता है और 20 s (चित्रा 2) के लिए 5 m/min पर समाप्त होता है एक पुनर्प्राप्ति अंतराल जोड़ें ।
    5. चरण 2.6.4 acclimation अंतर्गत तालिका 2 में इंगित किया गया के रूप में परीक्षण गति चरण जोड़ने के लिए दोहराएँ ।
  7. दो हफ्ते पहले आधारभूत आकलन करने के लिए, दो ट्रेडमिल फ्लैट एरोबिक क्षमता आकलन प्रदान करने के रूप में खंड 3 में वर्णित है, लगातार दिनों पर दिया द्वारा acclimatization जारी है ।
  8. एक दो दिन के बाद दूसरा धीरज प्रशिक्षण, दो ट्रेडमिल कठिन anaerobic क्षमता आकलन प्रदान करने के रूप में खंड 4 में वर्णित है, एक ही दिन पर प्रशिक्षण के बीच 30 मिनट की एक ंयूनतम के साथ दिया ।

3. फ्लैट सतत ट्रेडमिल मूल्यांकन

  1. चरण २.१ में वर्णित के रूप में एक ट्रेडमिल कार्यक्रम बनाएं, मूल्यांकनके तहत तालिका 1 में संकेत मूल्यों का उपयोग कर । शॉक डिटेक्शनके तहत, सत्र संख्या 1 के रूप में सेट करें, 1 से 6 के रूप में सक्रिय चैनलों की संख्या चूहों की संख्या के आधार पर, 10 के रूप में ग्रिड के लिए यात्राओं की संख्या, और 20 के रूप में झटके की संख्या ।
  2. परीक्षण भर में चूहों की निगरानी और समापन बिंदु मानदंडों तक पहुँचने कि साधन से चूहों को हटा दें.
    नोट: यह कदम चूहों अनजाने पड़ोसी चूहों के सदमे ग्रिड को छूने और डेटा को प्रभावित करने से बचने के लिए है । मापदंडों बेल्ट पर कुल समय शामिल हैं, दूरी की यात्रा की, और झटके अनुपात का दौरा करने के लिए । यह हर समय बिंदु पर दो आकलन प्रदर्शन करने के लिए सिफारिश की है, आकलन के बीच कम से कम एक दिन से अलग.

4. कठिन अंतराल ट्रेडमिल मूल्यांकन

  1. चरण २.६ में वर्णित के रूप में एक ट्रेडमिल कार्यक्रम बनाएं, मूल्यांकनके तहत तालिका 2 में संकेत मूल्यों का उपयोग कर । शॉक डिटेक्शनके तहत, सत्र संख्या 1 के रूप में सेट करें, 1 से 6 के रूप में सक्रिय चैनलों की संख्या चूहों की संख्या के आधार पर, 5 के रूप में ग्रिड के लिए यात्राओं की संख्या, और 10 के रूप में झटके की संख्या ।
  2. ०.५ करने के लिए ट्रेडमिल कार्यक्रम में अंतराल क्षेत्र सेट करें ।
    नोट: यह डेटा बिंदुओं के लिए प्रत्येक मिनट के बजाय हर दूसरे एकत्र किया जा करने के लिए अनुमति देता है, जो प्रत्येक माउस के लिए समापन बिंदु पर गति की पहचान करने में एड्स । कार्यक्रम स्वचालित रूप से सॉफ्टवेयर सीमाओं के कारण ५० मीटर के बाद बंद हो जाएगा/ पैरामीटर्स पर समय बेल्ट, दूरी यात्रा, और अंतिम सफलतापूर्वक पूर्ण अवस्था का परीक्षण गति समापन बिंदु से पहले शामिल हैं । उत्तरार्द्ध चरण 5 में वर्णित HIIT आहार के लिए आधारभूत तीव्रता निर्धारित करने के लिए उपयोग किया जाता है । यह समय बिंदु प्रति दो आकलन प्रदर्शन करने के लिए सिफारिश की है, से अलग कम 30 मिनट.

5. लघु सत्र उच्च तीव्रता अंतराल प्रशिक्षण

  1. ट्रेडमिल कठिन (25 डिग्री) सेट और प्लास्टिक कवर हटा दें ।
  2. प्रत्येक माउस के लिए तीव्रता का निर्धारण । अंतिम सफलतापूर्वक पूर्ण चरण (चरण ४.५) की गति का उपयोग करें और तालिका 3का उपयोग करते हुए तीव्रता समूह और इसी आधार, स्प्रिंट, और डैश गति ढूँढें ।
  3. ट्रेडमिल सॉफ्टवेयर खोलें और एक नया प्रोग्राम बनाने के लिए फ़ाइल पर क्लिक करें ।
    1. प्रोफ़ाइल मोड टैब पर क्लिक करें और चरण 1 के लिए, 0 m/min की शुरुआत गति और 5 s की अवधि के साथ तालिका 3 में इंगित किया गया के रूप में आधार गति के अंतर्गत इंगित के रूप में एक समाप्ति गति इनपुट ।
    2. १८० s के लिए आधार गति पर प्रारंभ गति और समाप्ति गति के साथ एक वार्म अप चरण 2 जोड़ें ।
    3. इनपुट 3 अंतराल के साथ प्रत्येक 1) एक संक्रमण कदम है कि आधार से 5 एस के लिए स्प्रिंट करने के लिए चला जाता है, 2) 60 के दशकों के लिए स्प्रिंट गति पर एक कदम, 3) एक संक्रमण कदम है कि "स्प्रिंट" से चला जाता है पर आधार करने के लिए 5 s, और 4) पर एक वसूली अंतराल के c15 > बेस स्पीड फॉर ६० एस.
    4. एक संक्रमण कदम है कि आधार से 5 एस से अधिक स्प्रिंट गति के लिए चला जाता है और एक अंतिम कदम है कि स्प्रिंट से ६० s पर डैश गति के लिए चला जाता है जोड़ें ।
      नोट: प्रोग्रांस को सहेजा, संशोधित, और पुनः लोड किया जा सकता है ।
  4. सत्र (यानी, सोमवार, बुधवार, शुक्रवार) के बीच आराम के कम से एक दिन के साथ सप्ताह में तीन दिन व्यायाम करें ।
  5. बेस, स्प्रिंट, और डैश गति 1 m/मिनट हर दो सप्ताह बढ़ाने के लिए व्यायाम प्रोग्राम पुनर्लेखन ।
    नोट: कवायद के दौरान न बिजली के झटके दिए जाते हैं ।
  6. चूहों को प्रेरित करने के लिए एक मेकअप ब्रश का उपयोग कर चलाने के लिए (अनुशंसित) या जीभ अवसादग्रस्तता के पास या सदमे ग्रिड पर गिर चूहों कि प्रेरित करने के लिए । यदि कोई माउस 5 s में पुन: प्रयास करें प्रतिसाद नहीं देता है, तो 10 s, और उसके बाद प्रत्येक 30 s या एक पुनर्प्राप्ति अंतराल के दौरान सत्र के अंत तक पुनर्प्रयास करें ।
    नोट: किसी भी तीव्रता पर ट्रेडमिल पर नहीं चलने वाले अध्ययन से चूहों को हटाने पर विचार करें या सबसे कम तीव्रता वाले समूह (तालिका 3) के लिए निर्धारित तीव्रता पर पहले तीन अंतरालों को पूरा करने में असमर्थ हैं
  7. माउस को ले जाएं जो कम तीव्रता समूहों (तालिका 3) के लिए लगातार दो अभ्यास सत्रों में पहले तीन अंतराल को पूरा करने के लिए प्रेरित नहीं किया जा सकता है ।
  8. दो लगातार व्यायाम सत्र में उच्च तीव्रता समूहों (तालिका 3) के लिए प्रेरणा की आवश्यकता नहीं है कि चूहों ले जाएँ.
  9. ट्रेडमिल के बगल में पिंजरों जगह में आसीन नियंत्रण चूहों ले के रूप में यह चलाता है । वैकल्पिक रूप से, आसीन नियंत्रण एक गैर की गलियों में रखा जा सकता है 10 मिनट के लिए ट्रेडमिल चलती ।

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Representative Results

कुल पच्चीस मादा चूहे के घर में नस्ल और वृद्ध हुई. C57BL/6J पृष्ठभूमि चूहों एक SIRT1loxp-exon4-loxp उत्परिवर्तन29ले; हालांकि, इस सशर्त नॉकआउट प्रेरित नहीं था और इसलिए सभी चूहों पूरी लंबाई Sirtuin1 प्रदर्शित (डेटा नहीं दिखाया गया है) । उम्र के 24 महीनों में, चूहों HIIT व्यायाम (n = 14), या शेष पिंजरे आसीन (एन = 11) के दो महीने के प्रशासन के पहले और बाद के लिए ट्रेडमिल धीरज और कठिन स्प्रिंट क्षमता के लिए मूल्यांकन किया गया. हमारे डेटा HIIT समूह में सभी 14 चूहों शो SED चूहों के 11 में से 7 की तुलना में बेल्ट पर ट्रेडमिल समय में वृद्धि (चित्रा 4a, HIIT के लिए युग्मित छात्र टी परीक्षण पी < ०.०००१ और पी के लिए < ०.१४ SED). कुल HIIT चूहों में दो परीक्षणों (HIIT की बेहतरी के आधार पर बेल्ट पर समय में अधिक से अधिक सुधार का प्रदर्शन किया: १८.२ ± १०.५ मिनट ३१.८ ± १३.७ मिनट, डेल्टा १३.६ ± ७.५ मिनट SED बनाम: १९.९ ± १०.० मिनट के लिए २५.३ ± ७.३ मिनट, डेल्टा ५.३ ± ११.४ मिनट, बिगड़ा छात्र टी परीक्षण पी < ०.०३९१) ।

इसके अतिरिक्त, हम के रूप में कठिन ट्रेडमिल क्षमता में अधिक से अधिक वृद्धि का पता लगाया 14 HIIT चूहों के 12 के रूप में अधिक से अधिक गति वृद्धि हुई है, जबकि हम 11 SED चूहों की 8 में गिरावट देखी (चित्रा 4B, छात्र टी परीक्षण पी < HIIT और पी के लिए ०.००२२ ०.८५ < SED के लिए) । HIIT चूहों भी दो परीक्षणों (HIIT के बेहतर के आधार पर SED चूहों की तुलना में अधिक से अधिक गति में सुधार का प्रदर्शन किया: १४.६ ± ४.३ m/न्यूनतम करने के लिए १७.६ ± ५.५ m/मिनट, डेल्टा ३.० ± ३.० m/min बनाम SED: १६.९ ± ३.८ m/मिनट करने के लिए १६.५ ± ५.० एम मिनट/ , डेल्टा ०.५ ± ५.० m/मिन, ख़राब छात्र टी परीक्षण पी = ०.०४४१) । सदमे सहिष्णुता चूहों के दो समूहों के बीच समान था (ग्रिड यात्रा अनुपात को झटका आधारभूत-SED: १.२ ± ०.१ बनाम HIIT: १.४ ± ०.४, पी = 0.24; समापन बिंदु-SED: १.२ ± ०.४ बनाम HIIT: १.३ ± ०.४, पी = 0.46) ।

Figure 1
चित्र 1: ट्रेडमिल धीरज आकलन के लिए सॉफ्टवेयर मैनुअल मोड मापदंडों । ट्रेडमिल सॉफ्टवेयर मैनुअल मोड सतत बेल्ट त्वरण शामिल प्रोटोकॉल के लिए समायोजन की अनुमति देता है । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 2
चित्रा 2: कठिन स्प्रिंट मूल्यांकन के लिए ट्रेडमिल सॉफ्टवेयर प्रोफ़ाइल मोड कार्यक्रम मापदंडों । ट्रेडमिल सॉफ्टवेयर प्रोफ़ाइल मोड, मैनुअल मोड टैब (चित्रा 1) पर विकल्पों के साथ संयोजन के रूप में इस्तेमाल किया, कस्टम गति अंतराल के साथ प्रोटोकॉल बनाने की क्षमता की अनुमति देता है । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 3
चित्रा 3: उच्च तीव्रता अंतराल प्रशिक्षण आहार योजनाबद्ध । आधार, स्प्रिंट, और डैश गति तालिका 3में इंगित किए गए हैं । हर दो सप्ताह में 1 m/ कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 4
चित्र 4. वृद्ध चूहों में ट्रेडमिल प्रदर्शन पर HIIT के प्रभाव । चौबीस माह पुरानी मादा चूहों को HIIT (एन= १४) दी गई या २ माह तक आसीन (SED, एन= ११) बनी रही. ट्रेडमिल धीरज (एक) से पहले और दो एक सपाट ट्रेडमिल पर लगातार दिनों पर दिए गए परीक्षणों का एक सबसे अच्छा के रूप में व्यायाम के हस्तक्षेप के बाद मूल्यांकन किया गया था । कठिन स्प्रिंट क्षमता () दो परीक्षण के सर्वश्रेष्ठ के रूप में एक झुका (25 डिग्री) ट्रेडमिल पर नहीं आराम की कम से 30 मिनट के साथ प्रशासित का मूल्यांकन किया गया । लाइनें व्यक्तिगत चूहों को इंगित करती हैं. B आधार रेखा है और समापन बिंदु है, * * * एक p-मान < ०.००१ और * * * * इंगित करता है p < ०.०००१ के रूप में आधार रेखा और समापन बिंदु के बीच समूह परिवर्तन की तुलना एक युग्मित विद्यार्थी के T-परीक्षण द्वारा निर्धारित है । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

तालिका 1: ट्रेडमिल धीरज acclimatization और मूल्यांकन के लिए कार्यक्रम मापदंडों ।

प्रोग्राम पैरामीटर Acclimation मूल्यांकन
अंतराल 1 ०.५
अवधि 5 ९०
प्रोफ़ाइल मोड सक्षम करें अनियंत्रित अनियंत्रित
Accel कदम १.० m/मिनट 1 m/
Accel Int ६० सेकंड १२० सेकंड
अधिकतम गति 10 m/min ३५ m/मिनट
S_speed 5 m/ 5 m/
सदमे प्रतिनिधि दर 1 हर्ट्ज 1 हर्ट्ज
सदमे की तीव्रता 1 तो 2 3

तालिका 2: कठिन स्प्रिंट acclimatization और आकलन के लिए कार्यक्रम मापदंडों ।

प्रोग्राम पैरामीटर Acclimation मूल्यांकन
अंतराल ०.५ ०.५
अवधि 10 ९०
प्रोफ़ाइल मोड सक्षम करें जाँच जाँच
Accel कदम N/A N/A
Accel Int N/A N/A
अधिकतम गति 15 m/ ३५ m/मिनट
S_speed 5 m/ 5 m/
सदमे प्रतिनिधि दर 1 हर्ट्ज 1 हर्ट्ज
सदमे की तीव्रता 2 3
प्रोफ़ाइल मोड (प्रोग्राम पैरामीटर सेट करने के लिए 1 और 2 के आंकड़े देखें)
परीक्षण अंतराल 8, 10, 10, 10 मीटर/ 6, 8, 10, 11, 12... ५१, ५२ मी/

तालिका 3: HIIT व्यायाम चूहों के लिए तीव्रता पदनाम ।

तीव्रता समूह आधारभूत कठिन स्प्रिंट स्कोर प्रारंभिक व्यायाम गति
आधार स्प्रिंट डैश
0 < 8 m/ 5 m/ 7 m/ 10 m/min
1 8-16 m/मिनट 5 m/ 10 m/min 15 m/
2 17-25 m/मिनट 8 m/min 13 m/ 18 m/मिनट
3 > 25 m/ 11 मीटर/ 16 m/मिनट 21 m/min

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Discussion

लघु सत्र से लाभ उच्च तीव्रता अंतराल प्रशिक्षण है कि वैज्ञानिक और सार्वजनिक हित कब्जा का एक महत्वपूर्ण पहलू हैं । हालांकि, पशु अध्ययन शायद ही कभी HIIT परहेजों की जांच है कि 10 मिनट या उससे कम हैं । यहां, हम एक 10 मिनट के लघु सत्र HIIT कठिन ट्रेडमिल व्यायाम आहार है कि वृद्ध महिला चूहों में बढ़ाया ट्रेडमिल प्रदर्शन और जो हम पहले वृद्ध पुरुष चूहे17में शारीरिक प्रदर्शन को बढ़ाने के लिए दिखाया गया है के लिए एक प्रोटोकॉल का वर्णन । हमारे प्रोटोकॉल की एक ताकत यह है कि केवल 10 मिनट की लंबाई में किया जा रहा प्रोटोकॉल के अलावा, डिजाइन मॉड्यूलर है कि अंतराल की संख्या जोड़ा जा सकता है या प्रोटोकॉल है कि लंबाई में भी एक मिनट कर रहे है हटा दिया । इसके अतिरिक्त, अंतराल की लंबाई अनुमापन व्यायाम और प्रभावों का मूल्यांकन करने के लिए कई रणनीतियों प्रदान संशोधित किया जा सकता है ।

इस प्रोटोकॉल की एक और ताकत यह है कि हम एक प्रणाली के लिए व्यक्तिगत चूहों, जो हमारे ज्ञान केवल एक ही अंय अध्ययन३३ वृद्ध पुरुष चूहों में हमारी रिपोर्ट से एक तरफ के शारीरिक क्षमताओं के लिए व्यायाम आहार दर्जी शामिल17 का इस्तेमाल किया है । हालांकि व्यक्तिगत रूप से एक व्यायाम हस्तक्षेप सिलाई प्रयोगात्मक डिजाइन, इस विधि का एक महत्वपूर्ण लाभ में परिवर्तनशीलता का परिचय है कि यह बेहतर मॉडल मानव नैदानिक सेटिंग्स में निर्धारित व्यायाम के प्रशासन । इसके अलावा, जानवरों की तीव्रता है कि बहुत आसान है या मुश्किल है, जो प्रयोगों में एक महत्वपूर्ण कारक है जहां पशु जनसंख्या व्यायाम क्षमता में विविधता (उंर बढ़ने के दौरान यानी प्रदर्शित) हो सकता है पर ट्रेन नहीं है । इस पद्धति का एक अंय लाभ यह है कि यह चयापचय ट्रेडमिल के उपयोग की आवश्यकता नहीं है VO2अधिकतम निर्धारित करने के रूप में व्यायाम तीव्रता पशु के प्रदर्शन के अनुरूप है, एक अवधारणा है कि आगे Picoli एट अल.३४द्वारा जांच की है ।

इस प्रोटोकॉल ट्रेडमिल प्रदर्शन के लिए दो आकलन भी शामिल है, एक धीरे तेजी से सपाट ट्रेडमिल परीक्षण और एक झुका ट्रेडमिल वृद्धि अंतराल परीक्षण, क्रमशः के रूप में । वहां कई प्रोटोकॉल है कि एक जौव लेख३६सहित16,३४,३५, ट्रेडमिल का उपयोग चूहों में निरंतर ट्रेडमिल प्रदर्शन का निर्धारण करने के लिए प्रकाशित किया गया है । एकाधिक पैरामीटर इन अध्ययनों में और साहित्य के पार, सहित: झुकाव (आमतौर पर 0 ° या 5 डिग्री धीरज परीक्षण के लिए), सदमे की तीव्रता (0.25-1.12 mA से लेकर), और थकावट को परिभाषित करने के लिए नियम अलग । यह भी पाया गया कि 5 लगातार झटके सामांयतः कई अध्ययनों में थकावट को परिभाषित करने के लिए इस्तेमाल किया गया था । हालांकि इस रणनीति के नियमों हम अपने अध्ययन और इस प्रोटोकॉल में इस्तेमाल किया है से अधिक थकावट पैदा हो सकता है, इस प्रणाली को भी सभी चूहों समान दर्द थ्रेसहोल्ड है, जो प्रयोगात्मक शर्तों के आधार पर सही नहीं हो सकता है मानता है । 10 यात्राओं या 20 कुल झटके के निकास की हमारी परिभाषा अगर वहाँ अलग दर्द थ्रेसहोल्ड का आकलन करने के लिए एक रूपरेखा प्रदान करता है. अंत में, वहां दोनों रणनीतियों और समापन बिंदु को परिभाषित करने के लिए निर्णय के लिए लाभ और नुकसान कर रहे है सबसे अच्छा अध्ययन के लक्ष्यों के साथ गठबंधन किया जाना चाहिए । इसके अतिरिक्त, चूहों के लिए कुछ ट्रेडमिल मूल्यांकन प्रोटोकॉल एक उत्तेजना३७के रूप में झटके के उपयोग के बिना डिजाइन किया गया है । हालांकि इस दृष्टिकोण३७के लिए लाभ कर रहे हैं, कुछ कमियां पर विचार करने के लिए थकावट का निर्धारण है कि व्यक्तिपरक है और एक साथ कई चूहों का आकलन करने की क्षमता कठिनाई का उपयोग शामिल हैं ।

इसके अतिरिक्त, दूसरों के काम और शक्ति पैरामीटर के रूप में इस्तेमाल किया है ट्रेडमिल प्रदर्शन३५,३८,३९का वर्णन । त्वरण की बेल्ट और दर की गति भी विविध रूप से साहित्य में दर्शायी गई है । सबसे प्रोटोकॉल गति बढ़ाने की सुविधा के रूप में, परिणाम माउस में एरोबिक और anaerobic क्षमता का एक मिश्रण है, धीमी एरोबिक घटक पर अधिक ध्यान देने के प्रोटोकॉल के साथ उपज जाएगा । इसलिए हम anaerobic घटक17पर अधिक से अधिक ध्यान देने के लिए हमारी कठिन ट्रेडमिल अंतराल परीक्षण बनाया है । इस लक्ष्य को हासिल करने के लिए, हमारे प्रोटोकॉल परीक्षण के बीच सक्रिय वसूली के साथ कम परीक्षण अंतराल सुविधाएं, चूहों के लिए उच्च गति और इसलिए अधिक से अधिक anaerobic उपयोग हमारे फ्लैट सतत ट्रेडमिल धीरज मूल्यांकन के सापेक्ष प्राप्त करने के लिए अनुमति देता है । हमारे प्रोटोकॉल के लिए हम अंतराल के बीच 20 एस की एक सक्रिय वसूली की अवधि का इस्तेमाल किया, मानव ऊतक४०में मांसपेशियों के ऊतकों के पुनर्ऑक्सीजन के लिए आधा समय । हालांकि, हम इस विधि की एक सीमा ध्यान दें कि anaerobic चयापचय पर विशिष्ट प्रभावों अभी तक का आविर्भाव होना है, और इस तरह के glycolytic चयापचय, phosphocreatine उपयोग के रूप में anaerobic मानकों की एक परीक्षा सहित, और स्तनपान कैनेटीक्स इस विधि को मजबूत बनाएंगे । इसके अलावा, नए अध्ययन है कि बदलते मंच और सक्रिय बाकी अवधि, झुकाव, और अलग गति वेतन वृद्धि के प्रभावों की जांच भी इस विधि को मजबूत करेगा ।

इस पद्धति में वर्णित इस प्रोटोकॉल, दो ट्रेडमिल मूल्यांकन सहित, विशेष रूप से पुराने पशुओं के लिए डिज़ाइन कर रहे हैं, और जैसे प्रोटोकॉल के लिए चूहों के acclimation के लिए अधिक से अधिक समय शामिल है । उचित acclimation प्रयोगात्मक डिजाइन करने के लिए एक महत्वपूर्ण कदम अंतिमबिंदु थकावट के कारण है और माउस से अपर्याप्त सीखने नहीं है सुनिश्चित करने के लिए है । अनुचित acclimation संभावना अनुदैर्ध्य अध्ययन में स्पष्ट है-अभी तक, महत्वपूर्ण बात, crosssectional अध्ययन में नहीं देखा जा सकता है । हालांकि, छोटे साथियों के लिए कम acclimation प्रोटोकॉल संभव हो सकता है, हमारे अनुभव में बड़े चूहों में अधिक से अधिक acclimation और वृद्ध चूहों में व्यायाम प्रशिक्षण के लिए एक प्रकाशित प्रोटोकॉल की आवश्यकता होती है acclimation 1 महीने पहले 10 कुल दिनों के साथ के लिए दिए गए शुरू ट्रेडमिल acclimatization४१. हालांकि, हम कास्त्रो एट अल के साथ सहमत है कि अत्यधिक acclimation प्रदान करने के व्यवहार और चूहों पर प्रभावों को प्रभावित कर सकते है३५ और 3 से 10 दिन कुल३५की अपनी सिफारिश, जिसके लिए हमारे acclimatization प्रोटोकॉल इन के साथ कतार में है सिफारिशें कीहैं । इसके अलावा, पुराने जानवरों को भी व्यायाम के प्रदर्शन में अधिक से अधिक विविधता का प्रदर्शन और इस कारण हम आकलन समय बिंदु के अनुसार दो परीक्षणों में शामिल हैं । युवा जानवरों के प्रदर्शन में अधिक से अधिक एकरूपता प्रदर्शन और इसलिए एक भी परीक्षण पर्याप्त हो सकता है । इसके अलावा, वृद्ध जानवरों की विविधता एक हस्तक्षेप की व्याख्या करने के लिए मुश्किल के प्रत्यक्ष पार अनुभागीय तुलना कर सकते हैं, और अधिक सफलता आधार रेखा से परिवर्तन की तुलना द्वारा प्राप्त किया जा सकता है के रूप में वृद्ध महिला चूहों के विश्लेषण में किया गया था । हम यह भी एक चेतावनी के रूप में संकेत मिलता है कि हम छोटे चूहों, जहां यह संभव है एक छत के प्रदर्शन में प्रभाव हमारे छोटे सत्र HIIT प्रोटोकॉल का लाभ मुखौटा हो सकता है में हमारे छोटे सत्र HIIT प्रोटोकॉल का परीक्षण नहीं किया है । प्रोटोकॉल भी C57BL/6J माउस तनाव में ही इस्तेमाल किया गया था, और इसलिए अंय माउस उपभेदों में इस अभ्यास के प्रभाव का आविर्भाव होना रहता है । इसके अतिरिक्त, इस प्रयोग में प्रयुक्त C57BL6/जे चूहों एक SIRT1loxp-exon4-loxp उत्परिवर्तन29, कि प्रेरित नहीं किया गया । इन चूहों के जन्म से घर में वृद्ध हुई; हालांकि, अपर्याप्त संख्या 24 महीने की उंर के 4 समूहों के सत्ता में उपलब्ध थे । इसलिए हम सिर्फ HIIT और गतिहीन समूहों पर प्रयोग केंद्रित । हम ध्यान दें कि वृद्ध महिला चूहों और हमारे वृद्ध पुरुष चूहों के पहले प्रकाशित पलटन के दोनों वर्तमान पलटन17 दोनों शारीरिक प्रदर्शन में सुधार इस छोटे सत्र HIIT प्रोटोकॉल का उपयोग कर ।

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Disclosures

लेखकों का खुलासा करने के लिए कुछ नहीं है ।

Acknowledgments

हम भैंस पशु प्रयोगशाला पशु सुविधा में विश्वविद्यालय में पशु देखभाल कर्मियों को धंयवाद देना चाहता हूं । इस शोध को एक वयोवृद्ध मामलों के पुनर्वास अनुसंधान और विकास अनुदान RX001066 और भारतीय ट्रेल फाउंडेशन द्वारा समर्थित किया गया था ।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Exer-3/6 Open Treadmill w/ Shock, Detection, auto-calibration and PC Interface/Software Columbus Instruments 1055-SDRM The Columbus Instruments 3/6 treadmill allow up to 6 mice or 3 rats simultaneously.
The device comes with controllers to allow manual control of treadmill belt speed and shock intensity, or connections to a computer and software to run and control these elements. 
Bleach Varies Varies 0.25-0.5% Bleach solution (V/V) is used to clean the treadmill belt between sessions
Ethanol Varies Varies 70% ethanol solution (V/V) can alternatively be used to clean treadmill belt between runs and sesions.
Make-up Brush (large) Varies Varies A make-up brush provides a soft surface and ample length to motivate mice to continue exercise.

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Seldeen, K. L., Redae, Y. Z.,More

Seldeen, K. L., Redae, Y. Z., Thiyagarajan, R., Berman, R. N., Leiker, M. M., Troen, B. R. Short Session High Intensity Interval Training and Treadmill Assessment in Aged Mice. J. Vis. Exp. (144), e59138, doi:10.3791/59138 (2019).

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