Summary
짧은 세션 (≤ 10 분) 높은 강도 간격 훈련 (총에) 더 이상 운동 형식 대신 신흥 아직 짧은 변종 동물 연구에서 거의 모델링 됩니다. 여기, 우리 10 분 설명 하 고 3 일간 주, 오르막 디딜 방 아 총 프로토콜을 남성에 물리적 성능을 향상 하 고, 여성 세 쥐.
Abstract
고 강도 간격 훈련 (총에) 방지, 지연, 또는 나 약함을 개량 하는 치료 접근으로 떠오르고 있다. 특히 짧은 세션 총, 여러 인간 연구 기능 루틴 짧은 몇 분 일주일에 몇 번으로 10 분 보다 작거나 특정 관심의 이다 식이요법과. 그러나, 거기에 짧은 세션 총의 영향을 모델링 하는 동물 연구의 부족이입니다. 여기, 우리가 10 분 주 세 쥐를 경사 디딜 방 아를 사용 하 여 3 일을 주어진의 개별적으로 맞춤 및 진보적인 짧은 세션 총 처방을 위한 방법론을 설명 합니다. 우리의 방법론은 또한 디딜 방 아 평가 대 한 프로토콜을 포함 한다. 마우스는 디딜 방 아에 acclimatized 처음을 다음 주어진 기준 평면 및 오르막 디딜 방 아 평가 합니다. 3 분 워밍업, 빠른 1 분 간격으로 다음 세 가지 운동 세션 시작 속도, 속도 활성 복구에 1 분 뒤. 이러한 간격에 따라 쥐 빠른에서 시작 하는 마지막 세그먼트 주어진 속도 1 분에 대 한 가속. 총 프로토콜은 속도 각 마우스에 대 한 강도 초기 혐 기성 평가 점수에 따라 결정 되는 개별적으로 지어진 다. 또한, 우리는 증가 또는 감소 하는 성능에 따라 개별 마우스에 대 한 강도 조건 선발. 마지막으로, 강도 2 주마다 모든 쥐에 대 한 증가 된다. 우리 세 남성 쥐에서이 프로토콜 향상 된 물리적 성능에 이전에 보고 된 그리고 여기 그것 또한 성능이 디딜 방 아에 쇼 세 여성 쥐. 우리의 프로토콜의 장점 낮은 관리 시간 (약 15 분 당 6 쥐, 주 3 일), 더 나은 모델을 마우스에 대 한 개별화 전략 처방 운동, 및 추가 또는 제거의 수와 길이 대 한 수 있는 모듈형 디자인 적정 운동 혜택을 간격입니다.
Introduction
규칙적인 운동은 sarcopenia과 나 약함1,2,,34등 많은 나이 관련 된 질병을 지연 또는 방지에 효과적입니다. 그러나, 150 분의 그 65와 더 오래 된만 나 권고의 15% 미만 온건한 강렬의 주 강도 플러스 운동
훈련5,6. 시간과 긴 세션의 부족은 일반적인 장벽을 운동, 고 강도 간격 훈련 (총에) 전통적인 식이요법 대 안으로 떠오르고 있다. 총 활성 회복의 짧은 기간으로 산재 된 강렬한 활동의 여러 짧은 버스트 기능과 최근 관심이 여전히 유익한 결과 생성 하는 짧은 regimens 식별 되었습니다. 이러한 연구 4 분7, 2-3 분8, 1.5 분9, 단일 분10, 심지어 40 s11의 총 세션 시간을 갖춘 주 식이요법 3 일을 포함 합니다.
마찬가지로, 총 동물 모델에 상당한 관심이 되었습니다. 연구의 대부분 사용 마우스12,13,14,15,,1617,18,19,20, 21 또는 쥐22,23,,2425 몇 가지 다른 수영을 사용 하지만, 디딜 방 아를 사용 하 여 수행 되었다26,27 프로토콜 , 28. 이러한 연구의 대부분 운동13,14,19,,2124의 초기 강도를 VO2의 최대를 사용. 또한, 비록 총의 자주 설명된 혜택 짧은 regimens 하는 데, 거의 모든 이들의 식별 연구 기능 regimens 그 마지막 30 분 또는 더 긴11,12,13,14 ,15,18,19,21, 약간 긴 하나 제외 하 고 10 분 처방20, 그리고 또 다른 세 가지에 걸쳐 19 분 보다 농도16. 우리의 지식을 하려면, 아무 보고 동물 연구를 10 분 또는 더 적은 총 처방 또는 처방이이 프로토콜에 대 한 기준 역할을 우리의 출판된 연구17 제외한 개별 동물에 맞게 있다.
여기, 우리 세 쥐 모델, 개별화 하도록 짧은 세션 (≤ 10 분) 변종 인간 연구7,8,9,,1011에 최근에 사용한 총에 대 한 프로토콜을 설명 합니다. 메서드 3 분 워밍업, 함께 경사 (25 °) 밟아 10 분 처방 4 1 분 간격으로 고 강도, 3 1 분 활성 복구 세그먼트 interspersed에 포함 되어 있습니다. 프로토콜의 장점 큰 임상 관련성으로 개별 동물, VO2최대, 그로 인하여 대사 러닝에 대 한 필요성을 피하고 및 모듈형를 기반으로 하지 농도 설정에 강도 조정 하기 위한 전략을 보유 하 고 있습니다. 디자인에 의하여 간격 및 타이밍의 수는 쉽게 조절. 또한,이 프로토콜 내에서 제공 두 전략에 대 한 지침 디딜 방 아 평가, 평면 연속 하 고 오르막 간격, 지구력 검사를 포함 합니다. 이러한 방법을 사용 하 여, 우리는 확장 우리의 이전 연구 결과 그 짧은 세션 총 세 남성 쥐17, 기능적 능력을 증가 하 고 지금 나이 든된 여성 쥐에 있는 총 증가 디딜 방 아 성과 설명.
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Protocol
모든 연구 및 실험 프로토콜 그리고 대학 버팔로 버지니아 서 부 뉴욕 동물 관리 및 사용 위원회의 지침에 따라 승인 되었다.
1. 실험 설치 및 일반 상담
참고: C57BL/6J 배경에 24 여성 쥐의 총 23 개월의 나이에 시작이 프로토콜에서 사용 되었다. 그러나 생쥐는 조건부loxp-exon4-loxp SIRT 돌연변이29,,이 실험에서 유도 되었다.
- 쥐 귀 태그, RFID 칩, 등 영구 식별자를 수신 또는 문신 꼬리를 확인 합니다.
참고: 또한 평가 기간 동안 빠른 확인을 위해 임시 표시 (예, 꼬리를 영구 마커)를 사용 하는 것이 좋습니다. - 0.25-0.5와 디딜 방 아를 청소 % 표 백제 (v/v) 또는 70% (v/v) 에탄올 하루 또는 대변 또는 소변 실험 실험 사이 제거 끝. 새로운 재판을 시작 하기 전에 솔루션을 완전히 건조.
참고: 에탄올은 디딜 방 아 벨트를 착용을 증가할 수 있습니다. 디딜 방 아 청소 각 실행 사이 남성 쥐 그룹 보관 케이지 싸움에 최소화 하기 위해 작업 하는 것이 좋습니다. 경도 연구30,,3132, 각 시간 지점에서 하루 중 같은 시간에 디딜 방 아 평가 수행 하는 것이 좋습니다 그리고 순서는 동일 하 게 유지 해야 다른 평가 수행 하는 경우. 실험을 실행 하는 수 사관 장 님 쥐의 그룹 지정 되어야 합니다.
2. 디딜 방 아 장치를 마우스 acclimatizing
참고: 순응 쥐의 1 개월 기준 실험 전에 시작 합니다.
-
(그림 1 및 표 1) 수동 모드에서 디딜 방 아 소프트웨어 (v3.4.7)를 사용 하 여 초기 훈련 프로그램을 설정 합니다.
- 디딜 방 아 소프트웨어를 엽니다. 다음, 파일을 클릭 하 고 실험을 엽니다.
- 새 환경 순응 수동 탭 (그림 1)에서 표 1 에 표시 된 값을 입력 합니다.
- 1 세션 번호, 쥐의 수에 따라 1 ~ 6으로 활성 채널 수, 10, 그리드를 방문 수 및 20으로 충격의 수를 입력 합니다.
참고: 이 초기 실행에 대 한 충격 강도 수준 1에서 설정 됩니다 (0.46 mA).
- (평면) 0 °에 디딜 방 아의 기울기를 설정 합니다.
- 디딜 방 아에 배치 하면 쥐 꼬리 잡고 고 충격에 마우스를 시작 하지 않으려면 벨트에 직접 마우스를 놓습니다.
- 브러시 또는 혀 억압 물을 사용 하 여 훈련 할 때 충격 표에서 마우스를 계속 또는 평가 시작. 의도 하지 않은 충격을 피하기 위해 실행 하려면 마우스를 슬쩍 찌 르다.
- 후 각 마우스는 초기 훈련 프로그램, 프로그램 위에서와 반복 충격 강도 수준 2 (0.59 mA)와 교육 사이 적어도 15 분.
-
1 ~ 2 일 후에 초기 훈련 프로그램 관리 오르막 디딜 방 아 순응 합니다.
- 디딜 방 아 소프트웨어를 엽니다. 다음 파일을 클릭 한 다음 실험을 엽니다.
- 새 환경 순응아래 표 2 에 표시 된 기본 탭에 값을 입력 합니다.
- 충격 감지 에서 세션 번호 1로, 쥐의 수에 따라 1 ~ 6으로 활성 채널 수, 10, 그리드 방문 수 및 20으로 충격의 수를 입력합니다.
- 프로필 모드 탭 (그림 2)에서 클릭 하 고 단계 1 0 m/min의 시작 속도 5의 기간으로 5 m/min의 최종 속도 입력 s.
- 30 초 동안 따뜻한 단계 2 5 m/min의 속도 5m/min와 끝의 시작 속도와 최대를 추가 합니다. 5m/min와 5 6 m/min의 최종 속도에서 시작 하는 전환 단계를 추가 s.
- 6 m/min에서 시작 및 끝 6 m/분 20 미 추가 대 한 전환 단계 6 m/min에서 시작 하 여 5 m/분에 종료 하는 테스트 속도 단계를 추가 합니다.
- 5m/min에서 시작 하 여 5 m/20 분 끝나는 복구 간격 추가 (그림 2).
- 2.6.4 새 환경 순응 아래 표 2 에 표시 된 대로 테스트 속도 단계를 추가 하려면 단계를 반복 합니다.
- 초기 평가, 이전 2 주 연속 일에 주어진 섹션 3에서에서 설명 된 대로 두 디딜 방 아 플랫 에어로빅 용량 평가 제공 하 여 순응을 계속 합니다.
- 두 번째 지구력 훈련 후 1 ~ 2 일 두 디딜 방 아 오르막 혐 기성 능력 평가 교육 사이 30 분의 최소와 같은 날에 주어진 섹션 4에서에서 설명한 대로 제공 합니다.
3. 평면 연속 디딜 방 아 평가
- 평가아래 표 1 에 표시 된 값을 사용 하 여 단계 2.1에에서 설명 된 대로 디딜 방 아 프로그램을 만듭니다. 충격 감지에서 세션 번호 1로, 쥐의 수에 따라 1 ~ 6으로 활성 채널 수, 10, 그리드 방문 수 및 20으로 충격의 수를 설정 합니다.
- 재판 내내 마우스를 모니터 하 고 끝점 기준에 도달 하는 악기에서 쥐를 제거.
참고: 이 단계는 실수로 마우스를 인접 하 고 데이터에 영향을 미치는의 충격 그리드를 감동 하는 쥐를 방지 하는. 벨트, 여행, 거리 및 방문 수 비율에 대 한 충격에 총 시간을 포함 하는 매개 변수. 구분 하 여 평가 사이 적어도 1 일 각 시간 지점에서 두 가지 평가 수행 하는 것이 좋습니다.
4. 오르막 간격 디딜 방 아 평가
- 평가아래 표 2 에 표시 된 값을 사용 하 여 단계 2.6에에서 설명 된 대로 디딜 방 아 프로그램을 만듭니다. 충격 감지에서 세션 번호 1로, 쥐의 수에 따라 1 ~ 6으로 활성 채널 수, 5, 그리드 방문 수 및 10 충격의 수를 설정 합니다.
- 디딜 방 아 프로그램을 0.5 간격 필드를 설정 합니다.
참고: 1 분 마다 각 마우스에 대 한 끝점에서 속도 식별에서 에이즈 대신 매초를 마다 수집 데이터 요소에 대 한 있습니다. 프로그램은 소프트웨어 제한으로 인해 50 m/분 단계 후 자동으로 중지 됩니다. 벨트, 여행, 거리와 끝점 전에 성공적으로 완료 된 마지막 무대의 테스트 속도에 시간을 포함 하는 매개 변수. 후자는 단계 5에서에서 설명한 총 처방에 대 한 초기 강도 결정 하는 데 사용 됩니다. 적어도 30 분을 구분 하는 시간 포인트 당 2 개의 평가 수행 하는 것이 좋습니다.
5. 짧은 세션 고 강도 간격 훈련
- 디딜 방 아 오르막 (25 °)를 설정 하 고 플라스틱 덮개를 제거 합니다.
- 각 마우스에 대 한 강도 결정 합니다. 성공적으로 완료 된 마지막 단계 (단계 4.5)의 속도 사용 하 여 고 강도 그룹 및 해당 기본, 스 프린트및 표 3를 사용 하 여 대시 속도.
-
디딜 방 아 소프트웨어를 열고 새 프로그램을 만드는 파일을 클릭 합니다.
- 1 단계에 대 한 프로 파일 모드 탭을 클릭, 입력 0 m/min와 끝 속도 기간 5와 표 3 에 표시 된 대로 기본 속도 아래 표시 된 대로의 시작 속도 s.
- 180에 대 한 기본 속도와 끝 속도 기본 속도로 시작 속도와 2 단계 워밍업 추가 s.
- 입력 3 간격 각 1) 전환 단계 5에 대 한 스 프린트 자료 에서는 s, 60, 5 이상 자료 를 "스 프린트"에서는 3) 전환 단계에 대 한 스 프린트 에서 단계 2)는 속도 및 4) 단계에서 복구 간격에 대 한 < c15 > 자료 속도 60에 대 한 s.
- 스 프린트 속도 이상 5 기지 에서는 전환 단계를 추가 s와 대시 에 스 프린트 에서 마지막 단계 속도 이상 60 s.
참고: 프로그램은 저장, 수정, 고 다시 로드 될 수 있습니다.
- (즉, 월요일, 수요일, 금요일) 세션 사이 휴식의 하루와 일주일에 3 일 운동을 수행 합니다.
- 재작성 운동 프로그램 자료, 스 프린트, 그리고 대시 증가 속도 1 m/분 매 2 주.
참고: 아니 전기 충격 운동을 하는 동안 제공 됩니다. - 가볍게 근처 또는 충격에가 쥐를 움직이게 하는 메이크업 브러쉬 (권장) 또는 혀 억압 물을 사용 하 여 실행 하는 생쥐에 동기를 부여. 마우스 5에서 재시도 응답 하지 않으면 다음 10 s, 및 다음 다시 시도 모든 30 s 또는 세션이 끝날 때까지 복구 간격 동안.
참고: 어떤 강도에 디딜 방 아에서 실행 되지 않는 또는 낮은 강도 그룹 (표 3)에 대해 정의 된 강도에서 처음 세 개의 간격을 완료할 수 없습니다 연구에서 쥐를 제거 - 낮은 강도 그룹 (표 3) 두 개의 연속 운동 세션에서 처음 세 개의 간격을 완료 하는 동기가 될 수 없는 마우스를 이동 합니다.
- 높은 강도 그룹 (표 3) 두 개의 연속 운동 세션에서 동기 부여를 필요로 하지 않는 마우스를 이동 합니다.
- 그것은 실행 디딜 방 아의 옆에 연습장에 앉아있는 컨트롤 마우스를 가져가 라. 또는 10 분에 대 한 비 움직이는 디딜 방 아의 차선에 앉아있는 컨트롤을 배치할 수 있습니다.
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Representative Results
25 여성 쥐의 총 사육 되었고 집 세. C57BL/6J 배경 쥐 실시 SIRT1loxp-exon4-loxp 돌연변이29; 그러나,이 조건부 녹아웃 하지 유도 되었다 하 고 따라서 모든 마우스 전시 전체 길이 Sirtuin1 (데이터 표시 되지 않음). 나이의 24 개월, 마우스는 디딜 방 아 지구력 및 오르막 스 프린트 용량 이전 및 총 운동 2 개월 관리 후 평가 했다 (n = 14), 또는 앉아 있는 나머지 케이지 (n = 11). 총에 모든 14 쥐 그룹 벨트 SED 쥐의 11의 7에 비해 시간 증가 디딜 방 아 우리의 데이터 표시 (그림 4A, 스튜던트 T-검정 한 쌍 총 및 p < 0.14 SED에 대 한에 대 한 p < 0.0001). 총 총 마우스 전시 두 시험의 더 나은에 따라 벨트에 시간에 큰 개선 (총: 18.2 ± 31.8 ± 13.7 분, 델타 13.6 ± SED 대 7.5 분 10.5 분: 19.9 ± 10.0 분 25.3 ± 7.3 분, 델타 5.3 ± 11.4 분, 짝이 없는 학생의 T-검정 p < 0.0391).
또한, 우리 감지 큰 증가 오르막 디딜 방 아 용량에 우리가 관찰 하는 동안 최대한 속도 증가 하는 14 총 마우스의 12 11 SED 쥐의 8에서 (그림 4B, 짝 스튜던트 T-검정 p < 0.0022 총 및 p < 0.85 SED에 대 한에 대 한). 총 마우스 또한 시연 SED 쥐 두 시험의 더 나은 기반에 비해 최대 속도에 큰 개선 (총: 14.6 ± 4.3 m/분 17.6 ± 5.5 m/min, 델타 3.0 ± SED 대 3.0 m/min: 16.9 ± 16.5 ± 3.8 m/분 5.0 m/분 델타 0.5 ± 5.0 m/min, 짝이 없는 학생의 T-검정 p = 0.0441). 충격 허용 마우스의 두 그룹 사이 유사 했다 (눈금 충격 방문 비율 기준-SED: 1.2 ± 0.1 총 대: 1.4 ± 0.4, p = 0.24; 끝점-SED: 1.2 ± 0.4 총 대: 1.3 ± 0.4, p = 0.46).
그림 1: 디딜 방 아 디딜 방 아 지구력 평가 대 한 소프트웨어 수동 모드 매개 변수. 디딜 방 아 소프트웨어 수동 모드에서는 연속 벨트 가속을 포함 하는 프로토콜에 대 한 조정. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 2: 오르막 스 프린트 평가 대 한 디딜 방 아 소프트웨어 프로필 모드 프로그램 매개 변수. 디딜 방 아 소프트웨어 프로필 모드, 수동 모드 탭 (그림 1)의 옵션을 함께 사용, 사용자 정의 속도 간격으로 프로토콜을 만들 수가 있습니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 3: 고 강도 간격 훈련 처방 도식. 베이스, 스 프린트, 그리고 대시 속도 표 3에 표시 됩니다. 속도 증가 1 m/분으로 매 2 주. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 4입니다. 세 쥐에서 디딜 방 아 성능에 총의 영향. 20-4 달 오래 된 여성 쥐 주어진 총 (n= 14) 앉아 있는 유지 또는 (SED, n= 11) 2 개월 동안. 디딜 방 아 지구력 (A) 평면 디딜 방 아에 연속적인 일에 주어진 두 재판의 최고의 운동 개입 전후를 평가 했다. 오르막 스 프린트 용량 (B) 경사 (25 °) 디딜 방 아에 나머지 30 분 미만으로 관리 하는 두 재판의 베스트로 평가 했다. 라인 개별 마우스를 나타냅니다. B 기준 이며 E는 끝점, * * * 표시는 p-값 < 0.001와 * * * p < 0.0001 짝된 스튜던트 T-검정 기준선 사이의 끝점 그룹 변경 내 비교 하 여 결정을 나타냅니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
표 1: 디딜 방 아 지구력 순응 및 평가 대 한 프로그램 매개 변수.
| 매개 변수 프로그램 | 새 환경 순응 | 평가 |
| 간격 | 1 | 0.5 |
| 기간 | 5 | 90 |
| 프로필 모드를 사용 하도록 설정 | 확인 되지 않은 | 확인 되지 않은 |
| Accel 단계 | 1.0 m/분 | 1 m/분 |
| Accel Int | 60 초 | 120 초 |
| 최대 속도 | 10 m/분 | 35 m/분 |
| S_speed | 5 m/분 | 5 m/분 |
| 충격 담당자 속도 | 1 hz | 1 hz |
| 충격 강도 | 1 다음 2 | 3 |
표 2: 프로그램은 오르막 스 프린트 순응 및 평가 대 한 매개 변수입니다.
| 매개 변수 프로그램 | 새 환경 순응 | 평가 |
| 간격 | 0.5 | 0.5 |
| 기간 | 10 | 90 |
| 프로필 모드를 사용 하도록 설정 | 확인 | 확인 |
| Accel 단계 | N/A | N/A |
| Accel Int | N/A | N/A |
| 최대 속도 | 15 m/분 | 35 m/분 |
| S_speed | 5 m/분 | 5 m/분 |
| 충격 담당자 속도 | 1 hz | 1 hz |
| 충격 강도 | 2 | 3 |
| 프로필 모드 (참조 그림 1과 2에 프로그램 매개 변수를 설정) | ||
| 테스트 간격 | 8, 10, 10, 10 m/분 | 6, 8, 10, 11, 12... 51, 52 m/분 |
표 3: 강도 총에 대 한 지적 쥐 운동.
| 강도 그룹 | 기준선 오르막 스 프린트 점수 | 초기 운동 속도 | ||
| 자료 | 스 프린트 | 대시 | ||
| 0 | < 8 m/분 | 5 m/분 | 7 m/분 | 10 m/분 |
| 1 | 8-16 m/분 | 5 m/분 | 10 m/분 | 15 m/분 |
| 2 | 17-25 m/min | 8 m/분 | 13 m/분 | 18 m/분 |
| 3 | > 25 m/min | 11 m/분 | 16 m/분 | 21 m/분 |
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Discussion
짧은 세션에서 혜택을 과학 고 강도 간격 훈련 및 공익의 핵심 부분입니다. 그러나, 동물 연구는 거의 10 분을 총 식이요법을 조사이. 여기, 우리는 10 분 짧은 세션 총 오르막 디딜 방 아 운동 처방 하는 향상 된 나이 든된 여성 쥐에 있는 디딜 방 아 성능 그리고 우리는 이전 세 남성 쥐17물리적 성능을 향상 시키기 위해 나타났습니다에 대 한 프로토콜을 설명 합니다. 우리의 프로토콜의 강도 길이에서 불과 10 분 되 고 프로토콜 이외에 디자인은 모듈 간격의 수를 추가 하거나 길이 한 분도 있는 프로토콜을 제거할 수 있는 그런. 또한, 적정 운동에 미치는 영향을 평가 하는 여러 전략을 제공 하는 간격의 길이 수정할 수 있습니다.
이 프로토콜의 또 다른 힘은 우리가 우리의 지식 하나만 다른 연구33 세 남성 쥐17 우리의 보고서 이외에도 사용 되는 개별 마우스의 물리적 기능을 운동 처방에 맞게 시스템을 포함 하는 것 이다. 비록 실험 디자인에 다양성을 소개 하는 개별적으로 맞게 운동 개입,이 방법의 중요 한 이점 그것은 더 나은 인간의 임상 설정에서 정해진 운동 관리 모델입니다. 동물 훈련 하지 않습니다 또한, 너무 쉽게 또는 어려운 농도에서 될 수 있는 실험에서 중요 한 요소 어디 동물 인구 다양성에서에서 전시 운동 능력 (즉 중 노화). 이 방법론의 다른 장점 중 하나입니다 확인 VO2최대 운동 강도 동물, 더 Picoli 외.34에 의해 검사 하는 개념의 성능에 맞게 대사 treadmills 사용 하 여 필요 하지 않습니다.
이 프로토콜에에서 포함 됩니다 디딜 방 아 성능에 대 한 두 가지 평가 천천히 가속 플랫 디딜 방 아 시험 및 경사 디딜 방 아 증가 간격 테스트, 각각. 러닝16,,3435, 정돈 제36를 포함 하 여를 사용 하 여 마우스에 연속 디딜 방 아 성능을 결정 하기 위한 게시 된 여러 프로토콜을 확인 하 고 있습니다. 여러 매개 변수 다 이러한 연구와 문학을 통해 등: 성향 (일반적으로 0 °, 5 ° 지구력 테스트에 대 한) 충격 강도 (0.25-1.12에서 배열 mA), 그리고 피로 정의 하기 위한 규칙. 그것은 또한 5 연속 충격 일반적으로 여러 연구를 통해 피로 정의 하 사용 했다 발견 되었다. 이 전략은 우리가 우리의 연구에이 프로토콜 사용 하는 규칙 보다 더 큰 피로 유도 수 있습니다, 하지만이 시스템은 또한 모든 마우스는 실험 조건에 따라 사실이 되지 않을 수 있습니다 비슷한 통증 임계값 가정. 10 방문 또는 20 총 충격의 고갈의 우리의 정의 경우 다른 통증 임계값을 평가 하는 프레임 워크를 제공 합니다. 궁극적으로, 거기 장점과 단점 모두 전략 및 끝점을 정의 하기 위한 결정을 최고의 연구의 목표와 정렬 있습니다. 또한, 마우스에 대 한 일부 디딜 방 아 평가 프로토콜 자극37로 충격의 사용 하지 않고 설계 되었습니다. 이 접근37에 이점이 있다, 하지만 고려해 야 할 몇 가지 단점이 주관적 피로의 결정과 여러 마우스를 동시에 평가의 잠재적인 어려움의 사용을 포함.
또한, 다른 사람 사용 작업 및 전력 매개 변수 디딜 방 아 성능35,,3839를 설명 하기 위해입니다. 벨트와 가속의 속도의 속도 또한 diversely 문학에서 표현 됩니다. 대부분 프로토콜 기능 속도 증가, 결과 느린 프로토콜 에어로빅 구성 요소에 더 많은 초점을 제공 하는 마우스에 호 기성 및 혐 기성 용량의 조화를 얻을 것입니다. 우리는 따라서 혐 기성 부품17에 큰 초점을 제공 하기 위해 우리의 오르막 디딜 방 아 간격 테스트를 설계 되었습니다. 이 위해 우리의 프로토콜 테스트, 더 높은 속도 및 따라서 혐 기성 활용도 우리의 평면 연속 디딜 방 아 지구력 평가 기준으로 마우스에 대 한 허용 사이의 활성 복구와 짧은 테스트 간격을 갖추고 있습니다. 우리의 프로토콜에 대 한 사용 하는 20의 활성 회복 기간 간격, 근육 조직의 인간 조직40에 reoxygenation에 대 한 30 시간 사이 s. 그러나, 우리는이 방법의 한계는 혐 기성 물질 대사에 특정 영향 아직 해명 될 참고 혐 기성 매개 변수 glycolytic 대사, phosphocreatine 사용률 및 젖 산 속도 론 등의 검사를 포함 이 방법을 강화 하는 것입니다. 또한, 새로운 연구 단계 및 활성 나머지 기간, 성향, 그리고 다른 속도 증가 변경의 영향을 조사 하는 것 또한이 방법을 강화 한다.
두 디딜 방 아 평가 포함 하 여이 프로토콜에서 설명 하는 방법론 오래 된 동물을 위해 특히 디자인 되 고 같은 프로토콜에 쥐의 새 환경 순응에 대 한 큰 시간을 포함. 적절 한 새 환경 순응 하도록 끝점 피로 인해 및 마우스 학습 하지 부족 한 실험 설계에 중요 한 단계입니다. 부적 절 한 새 환경 순응은 경도 연구-명백한 그러나, 중요 한 것은, 수 발견 되지 않을 crosssectional 연구에서. 비록 짧은 새 환경 순응 프로토콜 젊은 동료에 대 한 수 있습니다, 우리의 경험에 이전 마우스 큰 새 환경 순응을 요구 하 고 운동 훈련에 대 한 게시 된 프로토콜에 대 한 주어진 10 총 일 쥐 시작 새 환경 순응 1 개월 이전 세 디딜 방 아의 순응41. 그러나, 우리 동의 카스트로 외.과는 과도 한 새 환경 순응을 제공 영향을 줄 수의 동작 및 마우스35 3 ~ 10 일 총35,이 대 한 우리의 순응 프로토콜 이다이의 그의 권고에 영향 추천입니다. 또한, 더 오래 된 동물 또한 운동 성능에서 및 평가 시간 포인트 당 2 시도 포함 하는 이런 이유로 더 큰 다양성을 전시 한다. 젊은 동물 성능에 더 많은 동질성을 표시 하 고 따라서 단일 재판 충분 한 수 있습니다. 또한, 세 동물의 다양성, 해석 하기 어려운 개입의 직접적인 횡단면 비교를 할 수 있습니다 그리고 더 많은 성공을 기준으로 나이 든된 여성 쥐의 분석에에서 변화를 비교 하 여 얻을 수 있습니다. 우리는 또한 우리가 어디 그것은 가능한 성능에 천장 효과 우리의 짧은 세션 총 프로토콜의 혜택을 마스크 수 있습니다 젊은 쥐에서 우리의 짧은 세션 총 프로토콜을 테스트 하지 않았습니다 경고로 나타냅니다. 프로토콜도 C57BL/6J 마우스 긴장에서 서만 사용 되었다 그리고 따라서 다른 마우스 긴장에 있는이 운동의 영향을 해명 될 남아 있습니다. 또한,이 실험에 사용 된 C57BL6/J 쥐 SIRT1loxp-exon4-loxp 돌연변이29, 유도 되었다 그 실시. 이 마우스 탄생;에서 집 세 했다 그러나, 부족 한 숫자를 4 그룹 24 개월에서 사용할 수 없었습니다. 우리는 그러므로 단지 총에 앉아있는 그룹 실험을 집중. 우리는 나이 든된 여성 쥐의 현재 코 호트와 세 남성 쥐17 두의 우리의 이전 게시 된 코 호트가 짧은 세션 총 프로토콜을 사용 하 여 물리적 성능에서 향상을 주의.
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Disclosures
저자는 공개 없다.
Acknowledgments
버팔로 동물 실험실 동물 시설에서 대학에서 동물 보호 직원에 게 감사 하 길. 이 연구는 베테랑 일 재활 연구 및 개발 그랜트 RX001066와 인도 트레일 재단에 의해 지원 되었다.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Exer-3/6 Open Treadmill w/ Shock, Detection, auto-calibration and PC Interface/Software | Columbus Instruments | 1055-SDRM | The Columbus Instruments 3/6 treadmill allow up to 6 mice or 3 rats simultaneously. The device comes with controllers to allow manual control of treadmill belt speed and shock intensity, or connections to a computer and software to run and control these elements. |
| Bleach | Varies | Varies | 0.25-0.5% Bleach solution (V/V) is used to clean the treadmill belt between sessions |
| Ethanol | Varies | Varies | 70% ethanol solution (V/V) can alternatively be used to clean treadmill belt between runs and sesions. |
| Make-up Brush (large) | Varies | Varies | A make-up brush provides a soft surface and ample length to motivate mice to continue exercise. |
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