Cet article fournit une description détaillée de la façon de construire un modèle animal de la phase anhépatique (ischémie hépatique) chez les rats pour faciliter la recherche fondamentale sur les lésions ischémiques-reperfusion après la transplantation hépatique.
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Article de méthode
Lésion d’ischémie-reperfusion d’organe en simulant des changements hémodynamiques dans le modèle de greffe de foie de rat
Dans cet article
Résumé
Résumé
La transplantation orthotopique de foie (OLT) chez les rats est un modèle animal éprouvé utilisé pour des études préopératoires, peropératoires, et postopératoires, y compris des dommages d’ischémie-reperfusion (IRI) des organes extrahépatiques. Ce modèle nécessite de nombreuses expériences et dispositifs. La durée de la phase anhépatique est étroitement liée au temps de développement de l’IRI après transplantation. Dans cette expérience, nous avons employé des changements hémodynamiques pour induire des dommages extrahepatic d’organe chez les rats et avons déterminé le temps maximum de tolérance. Le temps jusqu’à ce que la blessure d’organe la plus grave variait pour différents organes. Cette méthode peut facilement être reproduite et peut également être utilisée pour étudier l’IRI des organes extrahépatiques après la transplantation hépatique.
Introduction
La lésion d’Ischemia-reperfusion (IRI) est une complication commune après transplantation de foie. L’IRI hépatique est un processus pathologique impliquant des dommages cellulaires ischémiques et une détérioration anormale de la réperfusion hépatique. L’IRI hépatique et la réponse immunitaire innée locale peuvent être divisés en IRI chaud et froid, selon les différences dans l’environnement clinique1. L’IRI chaud est induit par des dommages de cellules souches, habituellement en raison de la transplantation de foie, du choc, et du trauma2. L’IRI froid est une complication de la transplantation hépatique provoquée par des....
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Protocole
Le Comité d’éthique animale a approuvé l’expérience de l’Université médicale du Guangxi (No20190920). Tous les animaux ont été fournis par le Animal Experiment Center de l’Université médicale du Guangxi. Nous avons utilisé des rats Sprague Dawley mâles fpS (200-250 g, 10-12 semaines), maintenus sous la température ambiante de 25 ± 2 °C et l’humidité de 50 ± 10 %. L’alimentation a été interrompue 24 heures avant l’opération; toutefois, de l’eau a été fournie.
REMARQUE : Un opérateur peut effectuer toutes les opérations sans microchirurgie ni microscope chirurgical.
1. Opération
- Après pesage, anesthésier ....
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Résultats
Tolérance des rats à l’ischémie hépatique
Dans ce modèle animal, les sites où les vaisseaux sanguins ont été ligatés pendant l’exploitation sont indiqués à la figure 1. Les rats ont été répartis au hasard en 5 groupes pour l’ischémie pendant 15 minutes (groupe I15), 30 minutes (groupe I30), 45 minutes (groupe I45), 60 minutes (I60) et un groupe factice, avec 10 rats dans chaque groupe. Le taux de survie de chaque groupe a été observé 14 jours après l’opération. Tous les r.......
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Discussion
OLT chez les rats est un modèle idéal pour étudier la préservation des organes dans la transplantation hépatique, IRI, rejet de greffe, tolérance immunitaire, pathologie de transplantation et pharmacologie, homotransplantation, et la xénotransplantation. À l’heure actuelle, il est largement utilisé dans la recherche expérimentale de la transplantation hépatique.
Au cours d’études pilotes, nous avons d’abord administré l’anesthésie intraperitoneal pentobarbital de sodium et avons constaté que c.......
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Déclarations de divulgation
Les auteurs de ce manuscrit n’ont aucun conflit d’intérêts à divulguer.
Remerciements
Nous tenons à souligner les suggestions utiles faites par le Dr Wen-tao Li et le Dr Ji-hua Wu du deuxième hôpital affilié de l’Université médicale du Guangxi. Les auteurs remercient nos coéquipiers pour leurs commentaires et discussions utiles. Les auteurs aimeraient également remercier les critiques anonymes et les éditeurs de JoVE pour leurs commentaires. Nous remercions tout remercie tout œux les parents du Dr Yuan pour leur soutien et leurs encouragements continus. Les travaux ont été soutenus par la Ningbo Natural Science Foundation (2014A610248).
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Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| Solution de paraformaldéhyde à 4 % | Shanghai Macklin Biochemical Co., Ltd | P804536 | |
| four de séchage à air | Shanghai Binglin Electronic Technology Co., Ltd. | BPG | |
| Alanine aminotransférase (ALT)Kit | Elabscience Biotechnology Co.,Ltd | E-BC-K235-S | |
| ammoniac | Sinopharm Chemical Reagents Co. Ltd | 10002118 | |
| amylase Kit | Elabscience Biotechnology Co.,Ltd | E-BC-K005-M | |
| éthanol anhydre | Sinopharm Chemical Reagents Co. Ltd | 100092183 | |
| Animal appareil d’anesthésie | Shenzhen Ruiwode Life Technology Co. Ltd | R640 | |
| aspartate aminotransférase (AST)kit | Rayto Life and Analytical Sciences Co., Ltd. | S03040 | |
| . | SIEMENS AG FWB :SIE, NYSE :SI Co., Ltd. | 2400 | |
| Biosystems (quand nessary) | Chengdu Taimeng Electronics Co., Ltd. | Centrifugeuse BL-420F | |
| Baiyang Medical Instrument Co., Ltd. | Verre de couverture BY-600A | ||
| Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co. Ltd | 10212432C | ||
| kit de créatinine | Rayto Life and Analytical Sciences Co., Ltd. | S03076 | |
| machine d’assèchement | Hongrie 3DHISTECH Co., Ltd | Donatello Series 2 | |
| machine d’enrobage | Hubei Xiaogan Kuohai Medical Technology Co., Ltd. | KH-BL1 | |
| machine congelée | Wuhan Junjie Electronics Co., Ltd | JB-L5 | |
| solution de colorant d’hématoxyline-éosine | Wuhan Saiwell Biotechnology Co., Ltd | G1005 | |
| cire de paroftine à haute efficacité | Shanghai huayong paraffine wax co., Ltd | Q / YSQN40-91 | |
| acide chlorhydrique | Sinopharm Chemical Reagents Co. Ltd | 10011018 | |
| lentille intraoculaire (LIO)pince | Guangzhou Guangmei Medical Equipment Co., Ltd. | JTZRN | |
| Isoflurane | Shenzhen Ruiwode Life Technology Co. Ltd | &mdash ; | |
| micro ciseaux (quand nessary) | Shanghai Surgical Instrument Factory | WA1010 | |
| porte-aiguilles | Surgical Instrument Factory | J32010 | |
| gomme neutre | Shanghai Huashen Healing Equipment Co., Ltd. | &mdash ; | |
| microscope optique normal | Nikon Instrument Shanghai Co., Ltd | Nikon Eclipse CI | |
| pince ophtalmique | Shanghai Surgical Instrument Factory | J3CO30 | |
| pince ophtalmique | Surgical Instrument Factory | JD1060 | flexion |
| ciseaux ophtalmiques | Shanghai Surgical Instrument Factory | J1E0 | |
| trancheuse pathologique | Shanghai Leica Instrument Co., Ltd | RM2016 | |
| pipettes | Dragon Laboratory Instruments Co., Ltd. | ||
| enrouleurs | Beijing Jinuotai Technology Development Co., Ltd. | Scanner JNT-KXQ | |
| Hongrie 3DHISTECH Co., Ltd | Pannoramic 250 | ||
| lame | Wuhan Saiwell Biotechnology Co., Ltd | G6004 | |
| xylène | Sinopharm Chemical Reagents Co. Ltd | 1330-20-7 |
Références
- Dar, W. A., Sullivan, E., Byon, J. S., Eltzschig, H., Ju, C. Ischaemia reperfusion injury in liver transplantation: Cellular and molecular mechanisms. Liver International. 39 (5), 788-801 (2019).
- Qiao, P. F., Yao, L., Zhang, X. C., Li, G. D., Wu, D. Q.
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Réimpressions et autorisations
