Summary
이 논문은 간 이식 후 허혈 재관류 손상에 대한 기본 연구를 용이하게하기 위해 쥐에서 간 형 편 (간 허혈)의 동물 모델을 구축하는 방법에 대한 자세한 설명을 제공합니다.
Abstract
쥐의 직소 간 이식 (OLT)은 수술 전, 수술 내 및 수술 후 연구에 사용되는 시도되고 입증 된 동물 모델이며, 비형 기관의 허혈 재관류 손상 (IRI)을 포함합니다. 이 모델에는 수많은 실험과 장치가 필요합니다. 간 단계의 기간은 이식 후 IRI를 개발하는 시간과 밀접한 관련이 있습니다. 이 실험에서, 우리는 쥐에 있는 외간 기관 손상을 유도하기 위하여 혈역학 변경을 사용하고 최대 허용 오차 시간을 결정했습니다. 가장 심한 장기 손상까지 의 시간은 다른 장기에 대 한 변화. 이 방법은 쉽게 복제 될 수 있으며 간 이식 후 외간 장기의 IRI를 연구하는 데 사용할 수도 있습니다.
Introduction
허혈 -재관류 부상 (IRI) 간 이식 후 일반적인 합병증이다. 간 IRI는 허혈 매개 세포 손상 및 간 재관전의 비정상적인 악화를 관련시키는 병리학적인 과정입니다. 간 IRI 및 국천성 면역 반응은 임상 환경 의 차이에 따라 뜨겁고 차가운 IRI로 나눌 수 있습니다1. 뜨거운 IRI는 줄기 세포 손상에 의해 유도되며, 일반적으로 간 이식, 충격 및 외상2의결과로. 감기 IRI는 내피 세포 및 말초 순환에 의한 간 이식의합병증이다 3. 임상 보고는 간 IRI가 초기 장기 실패의 10%와 연관되고 급성 및 만성거부4,5의부각을 증가시킬 수 있다는 것을 보여주었습니다. 또한, IRI간 은 또한 높은 사망률6을가진 다중 장기 기능 장애 증후군 또는 전신 염증 반응 증후군을 유도할 수 있다. 간 장기 에 관여하는 환자는 병원에서 더 오래 머물고, 더 많은 돈을 지출하고, 더 나쁜 예후7이있는경향이 있다. 합병증의 발달은 간 이식8의간 절단 단계의 길이와 밀접한 관련이 있다.
쥐에 있는 직교성 간 이식 (OLT) 1973년에 미국 교수 리에 의해 처음 보고되었습니다. 실험 적 수술은 봉합 방법을 사용하여 임상 간 이식 및 혈관및 일반적인 담관 (CBD)의 해부학단계를 시뮬레이션했습니다. 절차는 어렵고성공률 9의낮은 시간 소모. 1979년, 카마다 등은 26분10분이내에 항간위상을 조절하기 위해 포털 정맥의 아나스토모정신에 '2-커프 방법'을 창의적으로 사용하여 쥐의 OLT에 상당한 개선을 이루었다. 같은 해, 짐머만은 '단일 담즙 스텐트 방법'을 제안했다. 이이남의 작품을 바탕으로 짐머만은 폴리에틸렌 튜브를 사용하여 기증자와 수령인의 CBD를 직접 마취하고 CBD의 재건을 단순화하고 괄약근의 기능을 보존했으며,이 방법은 OLT 모델11의담즙 재건을위한 표준이되었습니다. 1980년, Miyata 등은 포탈 정맥(PV), 수프라간 정맥(SVC), 및 간내 정맥 카바(IVC)가 커프 방법에 의해 마취된 '3-커프 방법'을 제안했다. 그러나, 열등한 베나 카바역류(12)의방해로 이어질 수 있는 이 방법으로 캐뉼라의 왜곡의 위험이 있다. 1983년, '투커프 방식'은 PV 및 IVC의 해부학을 위한 커프 방법을 사용하여 제안되었지만,SVC(13)에대한 봉합방법을 채택하였다. 이 방법은 OLT 모델을 확립하기 위해 전 세계 학자들에 의해 채택되었습니다. 그 이후, 커프 아나스토모시스 단계는 간항상을 단축하고쥐(14)의생존율을 향상시키기 위해 개선되었다. 유사하게, 개선된 방법은15년형을 단축하기 위해 임상 실습에서 사용된다. 그러나, 간 이식 후 IRI에 대한 기본 연구는 생존율이 비반대로 외간 장기에 상해의 정도와 관련이 있음을 보여 주었다. 따라서 간 이식 후 IRI를 시뮬레이션하기 위해서는 추가 연구가 필요하며, 간 이식 후 IRI를 시뮬레이션하기 위해서는 간단하고 재현 가능한 동물 모델이 필요합니다.
ancc 단계의 정의에 근거하여, 우리는 쥐에 있는 외측 기관의 IRI결과로 간 이식에 있는 혈역학적인 변경을 시뮬레이션했습니다. 본명, 간 이식 후 IRI에 대한 기초 연구를 용이하게 하기 위해 쥐에서 간편상(간 허혈)의 동물 모델을 구축하는 방법에 대한 상세한 설명을 제공합니다.
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Protocol
동물윤리위원회는 광시의과대학(No20190920)의 실험을 승인했다. 모든 동물은 광시 의과 대학의 동물 실험 센터에 의해 공급되었다. 우리는 SPF 남성 스프라그 Dawley 쥐 (200-250 g, 10-12 주)를 사용했으며, 25 ± 2 ° C의 실온 과 습도 50 ± 10 %를 사용했습니다. 수유는 작동 24시간 전에 중단되었습니다. 그러나 물이 제공되었습니다.
참고: 한 운전자는 미세 수술 기초 또는 수술 현미경 없이 모든 수술을 수행할 수 있습니다.
1. 작동
- 계량 후, 이소플루란으로 쥐를 마취 (5%) 동물 마취 기계를 사용 하 여.
- 1-2분 후, 쥐의 발가락을 핀셋으로 부드럽게 고정합니다. 쥐가 꼬집은 후에 반응하지 않으면 마취 상태에 들어갔습니다. 눈에 수의사 연고를 사용하여 건조함을 방지하십시오. 동물 가열 램프를 사용하여 쥐의 체온을 37-38 °C에서 유지하십시오.
- 복부 소독 (povidone 요오드 용액)에 따라 동물 해부 테이블에 쥐를 고정하십시오. 집게와 가위를 사용하여 xiphoid 프로세스 보다 3cm 의 중앙분리를 합니다.
- 복강을 열고, 리트랙터를 사용하여 간을 노출하고, 간위 인대를 동원합니다. 면봉을 사용하여 간 의 중간 엽을 부드럽게 뒤집고 위로 돌려 포타 간염을 노출시십시오. CBD, PV 및 HA를 식별합니다.
- 작은 내장을 면 봉면을 사용하여 왼쪽 하복위를 향해 밀어 젖은 거즈로 덮고 자궁 내 정맥을 오른쪽 신장 정맥으로 옮춥니다.
- 포털 정맥, 간 동맥 및 오른쪽 신장 정맥 위에 열등한 정맥을 3-0 실크 실로 표시된 집게로 분리합니다.
- 왼쪽과 오른쪽 하부 사지 피부를 잘라 안과 포셉을 사용하여 대퇴 정맥을 노출합니다. 대퇴 정맥을 통해 저분자 헤파린 625 IU/kg을 천천히 주입하여 전신을 헤패린시합니다.
- 포털 정맥, 간 동맥 및 열등한 정맥 위에 3-0 봉합사로 오른쪽 신장 정맥 위에 45 분 동안 지속됩니다(그림 1). 복강내의 소장을 교체하고 거즈로 덮습니다. 이 기간 동안 흡입 마취를 감소시십시오.
- 45분 후, 오른쪽 신장 정맥 위에 포문 정맥, 간 동맥 및 열등한 정맥을 방출한다.
- 근육과 피부를 봉합하고, 층별로 겹쳐서, 흡입 마취를 종료한다. 4시간마다 5 mg/kg의 피하 모르핀을 사용하여 수술 후 항간증을 제공합니다.
- 2 ±5 °C의 온도에서 깨어 있고 50 ± 10 %의 습도에서 먹이를 줄 때까지 쥐를 관찰하십시오. 동물 난방 램프가 필요합니다.
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Representative Results
간 허혈에 쥐의 내성
이 동물 모델에서는 수술 중에 혈관이 결찰된 부위가 도 1에도시되어 있다. 쥐는 무작위로 15 분 동안 허혈을 위한 5 개의 그룹으로 분할되었다 (I15 그룹), 30 분 (I30 그룹), 45 분 (I45 그룹), 60 분 (I60), 그리고 샴 그룹, 각 그룹에 10 쥐와. 각 군의 생존율은 수술 후 14일 후에 관찰되었다. 모든 쥐는 I15 그룹, I30 그룹, 그리고 가짜 그룹에서 살아남았다. I45 그룹에서 14일 동안 8명이 살아남았고, I60 그룹에서는 단 2명만이 살아남았습니다. 이러한 결과는 쥐가 최대 45분 동안 간항제 상을 견딜 수 있음을시사한다(표 1).
쥐의 순환에 혈관 결찰의 효과
실험 도중, Biosystems는 심박수 및 혈압 (오른쪽 내부 경동맥 삽관)을 간 단계 전후에 기록했습니다. 우리는 쥐의 심박수 및 평균 동맥 압력 (MAP)이 혈관 결찰 후 극적으로 변경된 것을 발견했습니다(그림 2).
외형 기관에 미치는 영향
간 허혈 혼잡및 부종은 내장, 위 변이, 및 결찰 후 비장에서 발견되었다. 80마리의 쥐는 45분(T0), 6시간(T6), 12시간(T12), 24시간(T24), 48시간(T48), 72시간(T72), 7일(D7), 14일(D14)에 대해 8군으로 무작위로 나뉜다. 쥐를 희생 한 후, 신장에서 조직, 췌장, 소장, 심장, 폐는 헤마톡시린 -eosin로 촬영하고 염색했다 (HE). 전체 염색 과정은 탈밀, 염색, 탈수, 투명성 및 밀봉의 다섯 단계로 구성됩니다. 심장을 제외하고, 병리학 점수는 이전에 설명된 바와 같이 할당되었다16,17,18,19.
엑스트라 간 장기에 최대 부상까지 시간이 다양; 췌장에 대한 수술 후 6-24 시간 및 폐에 대한 24-48 시간이었다. 장과 신장은 허혈의 45 분 후에 가장 심각하게 부상했습니다. 수술 후 24시간 동안 장 점막의 명백한 이상이 없었고, 신장은 48시간 후에 회복되었습니다. 재관류 후, 국소 심근 세포 괴사, 세포 단편화 및 용해, 염증세포 침화 및 국소 혈관 확장 및 혼잡이 수술 후 24-48시간 동안 심장에서발견되었다(도 3).
폐
호중구 침투는 허혈 후 폐 조직에서 발견되었다. 재관류 시간 (T0,T6)의 증가와 함께, 기관지 루멘의 점액은 폐 조직에서도 볼 수 있었다. 염증성 세포 침투는 폐포 벽에서 발생, 이는 심각하게 두꺼워졌다. 폐포가 붕괴되고 폐포 구멍의 실종은 또한 몇몇 조직에서 찾아볼 수 있었습니다. 폐포 벽에는 상당한 폐포 부종이나 모세관 혼잡이 없었습니다. 그(것)들은 수술 후에 24-48 시간, 몇몇 쥐가 호흡 곤란 및 그밖 표시를 보여주는 와 함께 7 일 수술 후에 가장 심각하게 부상했습니다. HE 염색 결과는 기도에서 림프절염, 폐포 벽에서 온화한 염증성 세포 침투 및 국소출혈(도 3A,도 4)을건의하였다.
신장
소량의 호산성 물질이 T0 단계에서 허혈 후 신장 튜블러에서 발견되었지만 염증성 세포 침투 및 기타 이상이 보이지 않았습니다. 그러나, 부은 신장 관 상피 세포, 다공성 또는 진공 세포, 몇 루멘, karyopyknosis, 단편화, 브러시 테두리 손실 및 많은 루멘에서 튜브 모양산성 군에서 괴사 세포는 작동 후 6-48 시간을 보였다. 또한, 소량의 신장 관 상피 세포는 과립 변성으로 보였으며, 다공성 및 가볍게 염색된 세포질은 수술 후 48시간 후에 보였다. 유의한 간질 적 텔란지Ctasia, 아직 심각한 염증 세포 침투가 발견되지 않았다(도 3B, 도 5).
소장
소장은 허혈 (T0)후 가장 심각하게 부상했다. 심한 염증 성 세포 침투, 점막 상피 흘리기, 및 텔란지크시아가 있었습니다. 레퍼퓨전 시간이 증가함에 따라 부상은 빠르게 치유되었습니다. 점막 상피는 수술 후 24시간 완전히 복원되었고, 온화한 염증세포 침광만보였다(도 3C, 도 6).
췌 장
심각한 염증 세포는 단계 T0에서 췌장 조직 주위에 침투. 그러나 췌장 병변은 균일하지 않았습니다. 10명 중 6명은 수술 후 24시간 동안 췌장 괴사와 염증성 침투를 했고, 나머지 4명은 명백한 이상이 없었습니다. 수술 후 24시간 동안 염증 세포의 침투 외에도 부종, 확장 공간, 출혈, 소수의 아시나르 세포의 괴사, 세포의 불분명한 경계, 핵 분열 및 용해 및 시야내의 가벼운 염증 세포 침투가 있었다. 그런 다음 염증이 천천히 사라졌습니다(그림 3D, 그림 7).
심장
단계 T0에 의해, 심장 심근세포는 명확한 경계, 일반적인 세포 형태, 현지 간질 혼잡 및 온화한 갈색-황색 안료 증착으로 정기적으로 배열되었습니다. 더욱이, 염증성 세포 침윤은 심근 간질 및 지각 부위에서 관찰되었다. 재관류 시간이 증가함에 따라 국소 심근 세포 괴사, 세포 단편화 및 용해, 염증세포 침투, 국소 혈관 확장 및 혼잡이 수술 후 24-48시간 동안 조직에서 발견되었습니다. 심실 팽창, 다공성 구조, 심근 간질 증가, 온화한 염증세포 침투 등이 일부 표본에서 보였다. 48 시간 후에, 국소 심근세포는 사라지고 온화한 선동적인 세포 침투를 가진 섬유성 결합 조직의 소량으로 대체되었습니다. 그때까지, 다른 명백한 이상이 보이지 않았다(그림 8).
간, 신장, 췌장 및 심장 혈청 색인에 대한 혈역학적 변화의 영향
세럼을 수집하였고, 알라닌 아미노트랜스퍼라제(ALT),아스파르타테 아미노트랜스퍼라제(AST), 크레아티닌 및 아밀라제의 수치가 자동 생화학 분석기에서 검출되었다. 모든 지표는 병리학적 변화와 달리 24-48시간으로 정점을 찍었습니다. 이러한 수준은 수술 후 48시간 동안 정상이었지만 병리학적 손상이 계속되었습니다(그림9).
그림 1: 합자 위치 : PV, HA, 오른쪽 신장 정맥의 IVC 상단.
| 그룹 | N | 생존에서 24 h, n (%) | 7d, n (%) 생존 | 생존 시 14 d, n (%) |
| 가짜 | 10 | 10 | — | — |
| 15분 | 10 | 10/10 | 10 (100) | 10 (100) |
| 나는 30 분 | 10 | 10/10 | 10 (100) | 10 (100) |
| 나는 45 분 | 10 | 8/10 | 8/10 (80) | 8/10 (80) |
| 나는 60 분 | 10 | 2/10 | 2/10 (20) | 2/10 (20) |
표 1: 간 허혈에 대한 쥐의 내성
그림 3: 기관 조직학의 점수. (A)폐; (B)신장; (C)장; (D)췌장; *수치그룹(P&05)에 비해 통계적으로 유의합니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 4: 수술 후 폐의 병리학적 변화. (A)샴 그룹; (B)허혈군(T0그룹); (C)재관류 6시간(T6) 군; (D)재관류 12시간(T12) 군; (E)재관류 12시간(T12) 군; (F)재관류 24시간(T24) 군; (G)재관류 48시간(T48) 군; (H)재관류 7일(D7) 군; (I)재관류 14일(D14) 군(스케일 50 μm). 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 5: 수술 후 신장의 병리학적 변화. (A)샴 그룹; (B)허혈군(T0그룹); (C)재관류 6시간(T6) 군; (D)재관류 12시간(T12) 군; (E)재관류 12시간(T12) 군; (F)재관류 24시간(T24) 군; (G)재관류 48시간(T48) 군; (H)재관류 7일(D7) 군; (I)재관류 14일(D14) 군(스케일 50 μm). 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
도 6: 수술 후 소장의 병리학적 변화. (A)샴 그룹; (B)허혈군(T0그룹); (C)재관류 6시간(T6) 군; (D)재관류 12시간(T12) 군; (E)재관류 12시간(T12) 군; (F)재관류 24시간(T24) 군; (G)재관류 48시간(T48) 군; (H)재관류 7일(D7) 군; (I)재관류 14일(D14) 군(스케일 50 μm). 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 7: 수술 후 췌장의 병리학적 변화. (A)샴 그룹; (B)허혈군(T0그룹); (C)재관류 6시간(T6) 군; (D)재관류 12시간(T12) 군; (E)재관류 12시간(T12) 군; (F)재관류 24시간(T24) 군; (G)재관류 48시간(T48) 군; (H)재관류 7일(D7) 군; (I)재관류 14일(D14)군(A 및 D 스케일 50 μm; BCEFGHI 스케일 50 μm). 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 8: 수술 후 심장의 병리학적 변화. (A)샴 그룹; (B)허혈군(T0그룹); (C)재관류 6시간(T6) 군; (D)재관류 12시간(T12) 군; (E)재관류 12시간(T12) 군; (F)재관류 24시간(T24) 군; (G)재관류 48시간(T48) 군; (H)재관류 7일(D7) 군; (I)재관류 14일(D14)군(A 스케일 50 μm; BCDEFGHI 스케일 100 μm). 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 9: 각 그룹의 ALT, AST, 크레아티닌 (Cr) 및 아밀라제의 변화; *수치그룹(P&05)에비해 통계적으로 유의합니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
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Discussion
쥐의 OLT는 간 이식, IRI, 이식 거부, 면역 내성, 이식 병리학 및 약리학, 균동 이식 및 외국인 이식에서 장기 보존을 연구하기위한 이상적인 모델입니다. 현재, 그것은 널리 간 이식의 실험 연구에 사용.
파일럿 연구 도중 우리는 먼저 pentobarbital 나트륨 내 성소 마취를 관리하고 이것이 높은 수술 후 사망률 및 혈역학 변화에 짧은 내성으로 이끌어 낸다는 것을 것을을 발견했습니다. 따라서, 우리는 행동의 급속한 개시 및 체외 특성의 급속한 배제를 위한 후속 예심에서 흡입 마취를 이용했습니다. 흡입 마취로의 전환은 쥐의 허용 오차 시간과 수술 후 생존을 크게 향상시게 했습니다. 수사관은 마취제를 과다 하는 것을 방지하기 위하여 쥐의 호흡 그리고 심박수에 주의를 기울여야 합니다. 생체 시스템은 심박수와 혈압을 모니터링하는 데 사용할 수 있습니다. 우리는 또한 혈관의 결찰에 외과 봉합사 두께의 충격을 관찰했습니다. 3-0보다 작은 선이 혈관을 완벽하게 이끌어 낼 수 있었지만 느슨해지는 것이 어려웠고 혈관파열로 이어질 수 있습니다. 반대로 3-0보다 큰 선은 불완전한 혈관 폐색을 초래할 수 있어 혈역학적 변화를 방지할 수 있습니다. 이러한 물질적 문제는 향후 실험에서 개선될 것입니다. 프로토콜에는 몇 가지 제한 사항이 있습니다. 열 램프는 과열의 가능성으로 인해 온도 유지 보수에 권장되지 않습니다. 물 담요를 재순환하는 것과 같은 대체 난방 제안은 동물의 이익을 위해 권장됩니다.
OLT 후에 말단 기관 상해를 위한 많은 이유가 있습니다. 첫째, 상해는 시험관 내의 기증자 간냉보에 기인할 수 있다20. 둘째, IRI는 오랜 기간동안 허혈 후 혈액 공급이 조직(reperfusion)으로 돌아올 때 조직 손상을 일으킬 수 있습니다. 허혈은 부상의 주요 원인이며, 재관류는 부상이 발생하는 과정입니다. 동시에 간 부 단계 동안 IVC 및 PV를 차단 한 후, 혈액 정지의 다량은 낮은 사지와 내부 장기에서 발생. 유효 순환 량(ECV)은 급격히 감소하고 MAP은 감소했습니다. 그러나, 미주 신경 자극으로 인해, 쥐에 있는 심박수에 있는 보상 증가가 없었습니다. 이 실험에서, 우리는 쥐가 허혈 재관류 증후군의 정의를 충족 결찰 및 혈관 방출의 5 분 안에 중요한 혈역학 변경을 겪었다는 것을 것을을 발견했습니다.
허혈은 간 외부의 일부 조직에서 발생했습니다. 간 단계 후, ECV는 증가했다. MAP은 IVC와 PV가 차단되지 않은 후 정상으로 돌아왔으며, 레퍼퓨전 후 간 외부에서 부상이 발생했습니다. 더욱이, 기증자의 간중의 IRI는 말단기관(21)을공격한 염증성 중재자(TNF-α, 인터류빈-1, 인터류신-6, 인터류신-8)를 생산하였다. 본 실험에서, 간원상 중 혈역학은 IVC와 신장의 수동적인 혼잡, 위장 장벽 손상, 세균전, SVC가 위치한 장기(예를 들어, 폐, 심장, 췌장, 신장 등)의 허혈을 유발하고, IRI를 심폐형 장기에 시뮬레이션하였다.
병리학적인 사실 인정은 허혈성 상해의 피크 및 복구 시간이 각 기관에서 다르다는 것을 보여주었습니다. 면역 요인에 의한 감기 저장 및 손상은 이 연구 결과에서 시뮬레이션될 수 없었더라도, acc IRI는 그밖 동물 모형과 비교되고 외형 기관 상해를 연구하기 위하여 복제될 수 있습니다. 우리의 모델과 OLT 모델은 비교하고 외간 장기 부상에 대한 연구를위한 기초를 제공하기 위해 관찰 될 수있다. 게다가, 우리의 모형은 Hilar cholangiocarcinoma를 위한 것과 같은 몇몇 임상 간 수술과 유사합니다. Hilar cholangiocarcinoma는 자주 PV 또는 IVC를 침략하고 수시로 수술 도중 PV 클램핑을 요구하는 악성종양입니다 (22). 간 포털 재구성이 수행되었다; 종양이 IVC를 침범할 때, IVC의 수술 내 클램핑도 필요하며, 그로 인한 혈역학적 변화는 우리의 모델과 일치합니다.
요약하자면, 쥐에 있는 우리의 모형은 micro surgery 없이 사용하기 쉽고 간단하고, 간 허혈 후에 외형 기관의 IRI에 근본적인 연구를 위한 기초를 제공합니다.
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Disclosures
이 원고의 저자는 공개 할 이해상충이 없습니다.
Acknowledgments
우리는 광시의과 대학의 제 2 부속 병원의 원타오 리 박사와 Ji-hua 우 박사가 준 유용한 제안을 인정하고 싶습니다. 저자는 유용한 의견과 토론에 대한 우리의 팀 동료에게 감사드립니다. 저자는 또한 그들의 의견에 대한 익명의 검토자와 편집자에게 감사드립니다. 특별한 감사는 그들의 지속적인 지원과 격려에 대한 박사 위안의 부모에게 가야한다. 이 작품은 닝보 자연과학 재단(2014A610248)의 지원을 받았습니다.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 4% paraformaldehyde solution | Shanghai Macklin Biochemical Co.,Ltd | P804536 | |
| air drying oven | Shanghai Binglin Electronic Technology Co., Ltd. | BPG | |
| Alanine aminotransferase (ALT)Kit | Elabscience Biotechnology Co.,Ltd | E-BC-K235-S | |
| ammonia | Sinopharm Chemical Reagents Co. Ltd | 10002118 | |
| amylase Kit | Elabscience Biotechnology Co.,Ltd | E-BC-K005-M | |
| anhydrous ethanol | Sinopharm Chemical Reagents Co. Ltd | 100092183 | |
| Animal anesthesia machine | Shenzhen Ruiwode Life Technology Co. Ltd | R640 | |
| aspartate aminotransferase (AST)kit | Rayto Life and Analytical Sciences Co., Ltd. | S03040 | |
| automatic biochemical analyzer. | SIEMENS AG FWB:SIE, NYSE:SI Co., Ltd. | 2400 | |
| Biosystems (when nessary) | Chengdu Taimeng Electronics Co., Ltd. | BL-420F | |
| Centrifuge | Baiyang Medical Instrument Co., Ltd. | BY-600A | |
| cover glass | Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co. Ltd | 10212432C | |
| creatinine Kit | Rayto Life and Analytical Sciences Co., Ltd. | S03076 | |
| dewatering machine | Hungary 3DHISTECH Co.,Ltd | Donatello Series 2 | |
| embedding machine | Hubei Xiaogan Kuohai Medical Technology Co., Ltd. | KH-BL1 | |
| frozen machine | Wuhan Junjie Electronics Co., Ltd | JB-L5 | |
| hematoxylin-eosin dye solution | Wuhan Saiwell Biotechnology Co., Ltd | G1005 | |
| high-efficiency paraffin wax | Shanghai huayong paraffin wax co., Ltd | Q/YSQN40-91 | |
| hydrochloric acid | Sinopharm Chemical Reagents Co. Ltd | 10011018 | |
| intraocular lens (IOL)forceps | Guangzhou Guangmei Medical Equipment Co., Ltd. | JTZRN | |
| Isoflurane | Shenzhen Ruiwode Life Technology Co. Ltd | — | |
| micro Scissors(when nessary) | Shanghai Surgical Instrument Factory | WA1010 | |
| needle holders | Shanghai Surgical Instrument Factory | J32010 | |
| neutral gum | Shanghai Huashen Healing Equipment Co.,Ltd. | — | |
| normal optical microscope | Nikon Instrument Shanghai Co., Ltd | Nikon Eclipse CI | |
| ophthalmic forceps | Shanghai Surgical Instrument Factory | J3CO30 | straight |
| ophthalmic forceps | Shanghai Surgical Instrument Factory | JD1060 | bending |
| ophthalmic Scissors | Shanghai Surgical Instrument Factory | J1E0 | |
| pathological slicer | Shanghai Leica Instrument Co., Ltd | RM2016 | |
| pipettes | Dragon Laboratory Instruments Co., Ltd. | 7010101008 | |
| retractors | Beijing Jinuotai Technology Development Co.,Ltd. | JNT-KXQ | |
| scanner | Hungary 3DHISTECH Co.,Ltd | Pannoramic 250 | |
| slide | Wuhan Saiwell Biotechnology Co., Ltd | G6004 | |
| xylene | Sinopharm Chemical Reagents Co. Ltd | 1330-20-7 |
References
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- Qiao, P. F., Yao, L., Zhang, X. C., Li, G. D., Wu, D. Q. Heat shock pretreatment improves stem cell repair following ischemia-reperfusion injury via autophagy. World Journal of Gastroenterology. 21 (45), 12822-12834 (2015).
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