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DOI: 10.3791/52700-v
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Cette vidéo présente les procédures de préparation, d’enregistrement et d’analyse de source d’EEG à haute résolution sur des rats sous sédation avec un modèle préclinique particulier d’épilepsie focale dans des conditions non invasives.
L’objectif global de cette procédure est d’effectuer une analyse de sources cérébrales à l’aide d’enregistrements EEG à haute résolution obtenus de rats atteints d’épilepsie focale. Pour ce faire, il suffit de placer d’abord un mini-capuchon EEG dans de l’eau distillée avec 0,2 % de chlorure pendant la nuit et de remplir chaque électrode le lendemain avec une pâte conductrice mixte pour améliorer l’impédance de l’électrode. La deuxième étape consiste à régler le mini-casque EEG sur un rat sous sédatif et à enregistrer des données EEG à haute résolution.
Ensuite, les signaux EEG enregistrés sont prétraités pour obtenir des signaux moyens pour différents types d’épileptiforme interictal à l’aide de la méthode basée sur le seuil et de la méthode de décomposition en ondelettes. La dernière étape consiste à générer le modèle de conducteur de volume de la tête de rat avec les positions des électrodes sur la base d’une IRM individuelle ou probabiliste. En fin de compte, la solution inverse d’ES Loretta est calculée pour montrer les sources cérébrales estimées qui devraient être liées aux régions cérébrales épileptogènes.
Les modèles précliniques de RAM sont très utiles pour étudier l’épigenèse au moyen de techniques électrophysiologiques. Bien que l’enregistrement électrophysiologique invasif ait été utilisé dans le passé pour étudier le rat épileptique, il n’existe aucune technique disponible pour effectuer une imagerie de source cérébrale entière chez ce rat sans anesthésie à l’aiguille. Dans cette étude, nous proposons toute une méthodologie pour y parvenir.
Dans cette vidéo, je vais vous montrer comment préparer et configurer l’EEG mini. Je serai en charge de toutes les procédures prêtes à la préparation de l’enregistrement. Lors d’un enregistrement G, j’utiliserai un équipement et un logiciel d’enregistrement G.
De plus, je montrerai comment effectuer une analyse de source cérébrale à partir des données enregistrées. Pour commencer cette procédure, mélangez la pâte d’électrode EEG avec une solution de NACL à 0,9 %. Ajoutez une goutte de bleu de méthylène pour aider à visualiser la pâte d’électrodes à l’intérieur des électrodes et sur la peau.
Ensuite, placez la pâte mélangée dans une seringue et assurez-vous qu’il n’y a pas de bulles d’air à l’intérieur. Ensuite, remplissez les 32 électrodes avec la pâte par le bas sans introduire de bulles d’air dans le cadre de la procédure de préparation pour le rat, coupez ensuite la tête du rat, réduisez l’isofluor à 2 %Ensuite, placez le rat sur le coussin chauffant dans l’appareil stéréotaxique. Fixez les conduits auditifs avec les barres d’oreille et fixez le cône nasal pour l’alimentation en anesthésique.
Ensuite, appliquez une pommade ophtalmique sur les yeux de l’animal. Ensuite, rasez-lui la tête et frottez la peau avec de l’alcool isopropylique à 90 % pour stimuler les vaisseaux sanguins et éliminer la graisse. Placez ensuite un tampon salin sur le cuir chevelu et couvrez-le complètement pour garder une bonne conductance cutanée jusqu’à ce que la mini-casquette EEG soit prête à être placée.
Connectez la température respiratoire et trois sondes d’électrocardiogramme à la sonde du rat au corps du rat pour surveiller en permanence sa physiologie pendant la procédure d’enregistrement. Dans cette procédure, retirez l’écouvillon salin sur le cuir chevelu du rat et placez le mini capuchon EEG préparé sur sa peau. Fixez le mini capuchon avec des élastiques.
Appliquez une couche de pâte d’électrode à haute conductance sur les électrodes de terre et de référence. Par la suite, placez-les sur les oreilles respectives. Connectez ensuite le mini capuchon EEG à l’amplificateur.
Regardez un aperçu des traces EEG et vérifiez les performances de toutes les électrodes. Administrez ensuite Dexter à raison de 0,25 milligramme par kilogramme au rat intrapéritonéal et réduisez immédiatement le taux de fluor à 0 %Si le taux de respiration n’est pas compris dans la plage de 30 à 60 BPM, augmentez doucement le taux de fluor au maximum de 1 %. Après l’enregistrement, marquez les positions des trois cercles saillants de la mini-casquette EEG sur le dessus de la peau en insérant un stylo de couleur à l’intérieur de ceux-ci.
Avant de retirer la mini-casquette EEG, prenez une photo de la tête de rat avec les points de repère. La détection et la classification des IED sont effectuées à l’aide des codes développés en interne dans matlab, les signaux EEG moyens pour chaque sous-type d’IED sont utilisés pour l’analyse des sources cérébrales. Dans la procédure suivante, le brainstorming logiciel open source sera utilisé avec l’atlas IRM pour les rats Worcester, entrez l’IRM et la surface du cerveau dans le logiciel, générez la surface de la tête avec le réglage par défaut.
Générez ensuite les surfaces du cuir chevelu et de l’intérieur du crâne externe sur la base de l’IRM. Pour le calcul du champ de plomb, vérifiez l’orientation et l’emplacement de chaque surface par rapport à l’IRM, à l’aide de l’option de visualisation, en utilisant l’image de la tête de rat acquise pour co-enregistrer les positions des trois points de repère dans l’IRM et les points de grille des points de repère. À titre de références, générez les positions des électrodes au fur et à mesure que les électrodes sont fixées sur l’échafaudage. Entrez ensuite le fichier de canal généré pour réfléchir à l’affichage du logiciel et confirmez l’emplacement de toutes les électrodes pour calculer la matrice de champ de plomb.
Entrez les valeurs de conductivité, qui satisfont le rapport entre la peau, le crâne et le cerveau. Obtenez la matrice de champ de plomb basée sur le modèle de conducteur de volume et les positions d’électrode créées. Après cela, entrez les signaux EEG moyens pour un sous-type d’IED en sélectionnant l’option de méthode d’estimation de la source telle que S Loretta.
La solution inverse sera obtenue sur la base de la matrice de champ de plomb calculée et des signaux EEG d’entrée sur le graphique final. Les sources estimées présentées ici sont les séries chronologiques de l’emplacement des sources cérébrales des EEI par rapport à différents groupes de pointes et d’ondes aiguës. L’évaluation a été effectuée à un moment précis marqué d’une ligne verticale rouge.
Voici les topographies EEG, et voici les sources de courant cortical. Cette figure montre les sources cérébrales estimées pendant la crise, l’instance de temps est marquée par des lignes verticales rouges. Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon de préparer le mini-capuchon facile pour enregistrer l’EEG à révolution élevée et pour effectuer une analyse de la source cérébrale sur le rat.
La méthodologie que nous avons présentée ici a été appliquée à un modèle clinique pour comprendre les mécanismes de l’épigenèse sous-jacente.
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