Name: Quantifier les changements aigus dans l’activité nerveuse sympathique rénale en réponse à des Manipulations du système nerveux Central chez le rat anesthésié (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-09-11T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 30 s
Description: Découvrez comment mesurer l'activité nerveuse sympathique rénale et la pression artérielle moyenne chez le rat anesthésié. Cette méthode permet d'étudier les mécanismes du système nerveux central régulant le flux sympathique rénal.

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Cette étude a été financée par le National Institute for Nursing Research (K99/R00NR014369).

<ol><li>Mancia, G., Grassi, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+autonomic+nervous+system+and+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">The autonomic nervous system and hypertension.</a> Circulation Research. 114 (11), 1804-1814 (2014).</li>
<li>Kannan, A., Medina, R. I., Nagajothi, N., Balamuthusamy, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Renal+sympathetic+nervous+system+and+the+effects+of+denervation+on+renal+arteries%5BTitle%5D)+AND+%22World+Journal+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Renal sympathetic nervous system and the effects of denervation on renal arteries.</a> World Journal of Cardiology. 6 (8), 814-823 (2014).</li>
<li>Johns, E. J., Kopp, U. C., DiBona, G. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neural+control+of+renal+function%5BTitle%5D)+AND+%22Comprehensive+Physiology%22%5BJournal%5D)">Neural control of renal function.</a> Comprehensive Physiology. 1 (2), 767(2011).</li>
<li>Fink, A. M., Dean, C., Piano, M. R., Carley, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pedunculopontine+tegmentum+controls+renal+sympathetic+nerve+activity+and+cardiorespiratory+activities+in+Nembutal-anesthetized+rats%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">The pedunculopontine tegmentum controls renal sympathetic nerve activity and cardiorespiratory activities in Nembutal-anesthetized rats.</a> PLoS One. 12 (11), e0187956(2017).</li>
<li>Dean, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endocannabinoid+modulation+of+sympathetic+and+cardiovascular+responses+to+acute+stress+in+the+periaqueductal+gray+of+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology%2C+Regulatory%2C+Integrative+and+Comparative+Physiology%22%5BJournal%5D)">Endocannabinoid modulation of sympathetic and cardiovascular responses to acute stress in the periaqueductal gray of the rat.</a> American Journal of Physiology, Regulatory, Integrative and Comparative Physiology. 300 (3), R771-R779 (2011).</li>
<li>Seagard, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anandamide+content+and+interaction+of+endocannabinoid%2FGABA+modulatory+effects+in+the+NTS+on+baroreflex-evoked+sympathoinhibition%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">Anandamide content and interaction of endocannabinoid/GABA modulatory effects in the NTS on baroreflex-evoked sympathoinhibition.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 286 (3), H992-H1000 (2004).</li>
<li>Ferreira, C. B., Cravo, S. L., Stocker, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Airway+obstruction+produces+widespread+sympathoexcitation%3A+Role+of+hypoxia%2C+carotid+chemoreceptors%2C+and+NTS+neurotransmission%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+Reports%22%5BJournal%5D)">Airway obstruction produces widespread sympathoexcitation: Role of hypoxia, carotid chemoreceptors, and NTS neurotransmission.</a> Physiological Reports. 6 (3), (2018).</li>
<li>Stocker, S. D., Muntzel, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recording+sympathetic+nerve+activity+chronically+in+rats%3A+Surgery+techniques%2C+assessment+of+nerve+activity%2C+and+quantification%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">Recording sympathetic nerve activity chronically in rats: Surgery techniques, assessment of nerve activity, and quantification.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 305 (10), H1407-H1416 (2013).</li>
<li>Miki, K., Kosho, A., Hayashida, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Method+for+continuous+measurements+of+renal+sympathetic+nerve+activity+and+cardiovascular+function+during+exercise+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Physiology%22%5BJournal%5D)">Method for continuous measurements of renal sympathetic nerve activity and cardiovascular function during exercise in rats.</a> Experimental Physiology. 87 (1), 33-39 (2002).</li>
<li>Huetteman, D. A., Bogie, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+blood+pressure+monitoring+in+laboratory+rodents+via+implantable+radio+telemetry%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Direct blood pressure monitoring in laboratory rodents via implantable radio telemetry.</a> Methods in Molecular Biology. 573, 57-73 (2009).</li>
<li>Jespersen, B., Knupp, L., Northcott, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Femoral+arterial+and+venous+catheterization+for+blood+sampling%2C+drug+administration+and+conscious+blood+pressure+and+heart+rate+measurements%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Femoral arterial and venous catheterization for blood sampling, drug administration and conscious blood pressure and heart rate measurements.</a> Journal of Visualized Experiments. (59), 3496(2012).</li>
<li>Paxinos, G., Watson, C. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPaxinos%2C+G+%22The+rat+brain+in+stereotaxic+coordinates%22">The rat brain in stereotaxic coordinates</a>. , Academic Press. Sydney/New York. (2014).</li>
<li>Scislo, T. J., Augustyniak, R. A., O'Leary, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+arterial+baroreflex+regulation+of+renal%2C+lumbar%2C+and+adrenal+sympathetic+nerve+activity+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Differential arterial baroreflex regulation of renal, lumbar, and adrenal sympathetic nerve activity in the rat.</a> American Journal of Physiology. 275, R995-R1002 (1998).</li>
<li>Kopp, U. C., Jones, S. Y., DiBona, G. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Afferent+renal+denervation+impairs+baroreflex+control+of+efferent+renal+sympathetic+nerve+activity%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology%2C+Regulatory%2C+Integrative+and+Comparative+Physiology%22%5BJournal%5D)">Afferent renal denervation impairs baroreflex control of efferent renal sympathetic nerve activity.</a> American Journal of Physiology, Regulatory, Integrative and Comparative Physiology. 295 (6), R1882-R1890 (2008).</li>
<li>Guild, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantifying+sympathetic+nerve+activity%3A+problems%2C+pitfalls+and+the+need+for+standardization%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Physiology%22%5BJournal%5D)">Quantifying sympathetic nerve activity: problems, pitfalls and the need for standardization.</a> Experimental Physiology. 95 (1), 41-50 (2010).</li>
<li>Stocker, S. D., Hunwick, K. J., Toney, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypothalamic+paraventricular+nucleus+differentially+supports+lumbar+and+renal+sympathetic+outflow+in+water-deprived+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Hypothalamic paraventricular nucleus differentially supports lumbar and renal sympathetic outflow in water-deprived rats.</a> Journal of Physiology. 15 (563 Pt 1), 249-263 (2005).</li>
<li>Stocker, S. D., Gordon, K. W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glutamate+receptors+in+the+hypothalamic+paraventricular+nucleus+contribute+to+insulin-induced+sympathoexcitation%5BTitle%5D)+AND+%22Neurophysiology%22%5BJournal%5D)">Glutamate receptors in the hypothalamic paraventricular nucleus contribute to insulin-induced sympathoexcitation.</a> Neurophysiology. 113 (5), 1302-1309 (2015).</li>
<li>Saponjic, J., Radulovacki, M., Carley, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Injection+of+glutamate+into+the+pedunculopontine+tegmental+nuclei+of+anesthetized+rat+causes+respiratory+dysrhythmia+and+alters+EEG+and+EMG+power%5BTitle%5D)+AND+%22Sleep+and+Breathing%22%5BJournal%5D)">Injection of glutamate into the pedunculopontine tegmental nuclei of anesthetized rat causes respiratory dysrhythmia and alters EEG and EMG power.</a> Sleep and Breathing. 9 (2), 82-91 (2005).</li>
<li>DiBona, G. F., Jones, S. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+analysis+of+renal+nerve+activity+responses+to+baroreceptor+denervation+in+hypertensive+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Dynamic analysis of renal nerve activity responses to baroreceptor denervation in hypertensive rats.</a> Hypertension. 37 (4), 1153-1163 (2001).</li>
<li>Kunitake, T., Kannan, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Discharge+pattern+of+renal+sympathetic+nerve+activity+in+the+conscious+rat%3A+spectral+analysis+of+integrated+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurophysiology%22%5BJournal%5D)">Discharge pattern of renal sympathetic nerve activity in the conscious rat: spectral analysis of integrated activity.</a> Journal of Neurophysiology. 84 (6), 2859-2867 (2000).</li>
<li>Machado, B. H., Bonagamba, L. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microinjection+of+L-glutamate+into+the+nucleus+tractus+solitarii+increases+arterial+pressure+in+conscious+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Microinjection of L-glutamate into the nucleus tractus solitarii increases arterial pressure in conscious rats.</a> Brain Research. 576 (1), 131-138 (1992).</li>
<li>Murakami, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhalation+anesthesia+is+preferable+for+recording+rat+cardiac+function+using+an+electrocardiogram%5BTitle%5D)+AND+%22Biological+and+Pharmaceutical+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Inhalation anesthesia is preferable for recording rat cardiac function using an electrocardiogram.</a> Biological and Pharmaceutical Bulletin. 37 (5), 834-839 (2014).</li>
<li>Nakamura, T., Tanida, M., Niijima, A., Hibino, H., Shen, J., Nagai, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auditory+stimulation+affects+renal+sympathetic+nerve+activity+and+blood+pressure+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+Letters%22%5BJournal%5D)">Auditory stimulation affects renal sympathetic nerve activity and blood pressure in rats.</a> Neuroscience Letters. 416 (2), 107-112 (2007).</li>
<li>Bardgett, M. E., McCarthy, J. J., Stocker, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glutamatergic+receptor+activation+in+the+rostral+ventrolateral+medulla+mediates+the+sympathoexcitatory+response+to+hyperinsulinemia%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Glutamatergic receptor activation in the rostral ventrolateral medulla mediates the sympathoexcitatory response to hyperinsulinemia.</a> Hypertension. 55 (2), 284-290 (2010).</li>
<li>Brozoski, D. T., Dean, C., Hopp, F. A., Seagard, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Uptake+blockade+of+endocannabinoids+in+the+NTS+modulates+baroreflex-evoked+sympathoinhibition%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Uptake blockade of endocannabinoids in the NTS modulates baroreflex-evoked sympathoinhibition.</a> Brain Research. 1059 (2), 197-202 (2005).</li>
<li>Barman, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((What+can+we+learn+about+neural+control+of+the+cardiovascular+system+by+studying+rhythms+in+sympathetic+nerve+activity%3F%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Psychophysiology%22%5BJournal%5D)">What can we learn about neural control of the cardiovascular system by studying rhythms in sympathetic nerve activity?</a> International Journal of Psychophysiology. 103, 69-78 (2016).</li>
<li>Charkoudian, N., Wallin, B. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sympathetic+neural+activity+to+the+cardiovascular+system%3A+integrator+of+systemic+physiology+and+interindividual+characteristics%5BTitle%5D)+AND+%22Comprehensive+Physiology%22%5BJournal%5D)">Sympathetic neural activity to the cardiovascular system: integrator of systemic physiology and interindividual characteristics.</a> Comprehensive Physiology. 4 (2), 825-850 (2014).</li>
<li>Malpas, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sympathetic+nervous+system+overactivity+and+its+role+in+the+development+of+cardiovascular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+Reviews%22%5BJournal%5D)">Sympathetic nervous system overactivity and its role in the development of cardiovascular disease.</a> Physiological Reviews. 90 (2), 513-557 (2010).</li>
<li>Chen, W. W., Xiong, X. Q., Chen, Q., Li, Y. H., Kang, Y. M., Zhu, G. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+sympathetic+afferent+reflex+and+its+implications+for+sympathetic+activation+in+chronic+heart+failure+and+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Physiologica%22%5BJournal%5D)">Cardiac sympathetic afferent reflex and its implications for sympathetic activation in chronic heart failure and hypertension.</a> Acta Physiologica. 213 (4), 778-794 (2015).</li>
<li>Linz, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modulation+of+renal+sympathetic+innervation%3A+Recent+insights+beyond+blood+pressure+control%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Autonomic+Research%22%5BJournal%5D)">Modulation of renal sympathetic innervation: Recent insights beyond blood pressure control.</a> Clinical Autonomic Research. , Epub ahead of print (2018).</li>
</ol>

Anne M. Fink est membre du Conseil consultatif client pour Data Sciences International.

Les étapes essentielles pour mesurer la RSNA comprennent : (1) en évitant de s’étendant de l’artère rénale et des nerfs en séparant les reins des muscles paravertébraux et lorsque vous placez le segment de nerf sur les électrodes d’enregistrement, (2) soigneusement disséqué les fibres nerveuses rénales du tissu environnant/navire, (3) s’assurer que les fils de l’électrode sont libres de tissus, le sang, ou liquide lymphatique et (4) empêchant le nerf ne se dessèchent pas en appliquant l’huile minérale à la nerveuse rénal...

Des découvertes précliniques sur contrôle autonome du système cardio-vasculaire informent des stratégies de gestion des troubles tels que l’hypertension artérielle, insuffisance cardiaque et l’insuffisance rénale chronique. Une activité excessive du système nerveux sympathique et tonus cardiaque vagal réduit contribuent à la tension artérielle élevée (BP)1. Chroniquement élevé débit sympathique rénale augmente la sécrétion de catécholamines et diminue le débit sanguin rénal, avec des conséquences délétères pour les systèmes cardiovasculaires/rénale2,3. Pour définir les voies neurobiologiques conduisant à un dysfonctionnement autonomique, les études chez les rongeurs sont importants pour déterminer comment les neurones du système nerveux central (SNC) régulent paramètres sympathiques. Le but du présent protocole est de fournir des informations techniques sur la mesure de l’activité nerveuse sympathique rénale (RSNA) et BP et de décrire les techniques utilisées pour quantifier les changements aigus de sympathiques en réponse à des manipulations de CNS chez des rats anesthésiés.
Mesures de RSNA aiguës (sans survie) (durée min à h) sont utiles lorsque les scientifiques sondera la CNS sur le plan pharmacologique, électriquement, ou optogenetically en anesthésiés rats pour déterminer les fonctions des noyaux spécifiques. À l’aide de ces méthodes, ouvrages d’art tels que le noyau solitaire, grise périaqueducale, tegmentum pedunculopontine et la moelle ventro rostral ont été étudiées pour définir les voies neurobiologiques réglementant les paramètres sympathique4, 5,6,7. Cette démarche est importante pour l’identification des cibles de la CNS à étudier plus en détail dans les modèles chroniques du dysfonctionnement autonomique8,9. Pour compléter ces expériences, le laboratoire nécessite un fer à souder, microscope chirurgical, cadre stéréotaxique, amplificateur de microélectrodes et moniteur audio. Selon les facteurs présents dans le laboratoire qui contribuent au bruit électrique, la zone chirurgicale/enregistrement peut exiger un Faraday cage/mise à la terre, sangle réduire le bruit électrique dans l’inscription de RSNA. Si les analyses de cerveau nécessite la fixation tissulaire, un capot de pompe et de fumées de perfusion sont nécessaires. Données peuvent être numérisées et enregistrement à l’aide de plusieurs logiciels/données physiologiques acquisition (convertisseur analogique / numérique) unités4,5, avec analyse différentes options et compatibilités pour incorporer des signaux télémétriques .

<table><tbody><tr><td>Fil d’acier inoxydable</td><td>A-M Systems ; Sequim, WA</td><td>791000</td><td>RSNA électrode</td></tr><tr><td>Tube en polyéthylène (PE-50)</td><td>VWR ; Radnor, PA</td><td>63019-048</td><td>Électrode RSNA ; canulation de récipient</td></tr><tr><td>Connecteur à broche miniature</td><td>A-M Systems ; Sequim, WA</td><td>520200</td> Outil de sertissage <td>d’électrode RSNA</td></tr><tr><td></td><td>Daniels Manufacturing Corp. ; Orlando, FL</td><td>M22520</td><td>Électrode RSNA</td></tr><tr><td>Bande de connecteur</td><td>Amphenol ; Clinton Township, MI</td><td>221-2653</td><td>Électrode RSNA</td></tr><tr><td>J-B Kwik Epoxy</td><td>J-B Weld, Sulphur Springs, TX</td><td>8270</td><td>Électrode RSNA</td></tr><tr><td>Silicone</td><td>Permatex ; Hartford, CT</td><td>2222</td><td>Électrode RSNA</td></tr><tr><td>Héparine sodique ; Injectable (flacon de 10 ml, 1000 U/mL)</td> <td>Approvisionnement vétérinaire KV ; David City, NE</td><td>P03466</td><td>Perméabilité des lignes veineuses</td></tr><tr><td>Phényléphrine HCl ; Injectable (fiole de 1 mL ; 10 mg/mL)</td> <td>Approvisionnement chirurgical ACE ; Brockton, MA</td><td>950-6312</td><td>Test de la sympathoinhibition rénale</td></tr><tr><td>Supports chirurgicaux élastiques à crochet unique</td><td>Appareil de Harvard ; Holliston, MA</td><td>72-2595</td><td>Incision</td></tr><tr><td>Ruban chirurgical en soie</td><td>3M, Minneapolis, MN</td><td>1538-0</td><td>Supports chirurgicaux sécurisés</td></tr><tr><td>Aiguilles, 20 G</td><td>Sigma-Aldrich ; St. Louis, MO</td><td>Z192554-100EA</td><td>Canulation vasculaire</td></tr><tr><td>Dumont #7 pince incurvée</td><td>Outils de science fine ; Foster City, CA</td><td>11274-20</td><td>Cornure vasculaire</td></tr><tr><td>5-0 attaches de suture en soie</td><td>Braintree Scientific ; Braintree, MA</td><td>SUT-S 106</td><td>Canulation</td></tr> vasculaire <tr><td>Pince hémostatique délicate</td><td>Roboz Surgical Instrument Co. ; Gaithersburg, MD</td><td>RS-7117</td><td>Canulation vasculaire et chirurgie RSNA</td></tr><tr><td>Crile Pince hémostatique</td><td>Outils de science fine ; Foster City, CA</td><td>13004-14</td><td>Flexion d’aiguille</td></tr><tr><td>Émetteur de télémétrie</td><td>Data Sciences International ; Minneapolis, MN</td><td>PA-10</td><td>Surveillance de la pression artérielle moyenne (télémétrie)</td></tr><tr><td>Seringue de re-gel</td><td>Data Sciences International ; Minneapolis, MN</td><td>276-0038-001</td><td>Réutilisation de l’émetteur (télémétrie)</td></tr><tr><td>Transducteur de pression jetable</td><td>Transpac ; San Clemente, CA</td><td>MI-1224</td><td>Surveillance de la pression artérielle moyenne</td></tr><tr><td>Infuseur de pression Clear-Cuff</td><td>MILA International Inc. ; Florence, KY</td><td>2281339</td><td>Surveillance de la pression artérielle moyenne</td></tr><tr><td>Pince de canulation des vaisseaux</td><td>Outils de science fine ; Foster City, CA</td><td>00574-11 Insertion du</td><td>cathéter</td></tr><tr><td>Suture en nylon monofilament noir 4-0 sur aiguille de coupe inversée</td><td>McKesson Médico-Chirurgical ; San Francisco, CA</td><td>S661GX Émetteur</td><td>de télémétrie sécurisé</td></tr><tr><td>Récepteur de télémétrie</td><td>Data Sciences International ; Minneapolis, MN</td><td>RPC-1</td><td>Surveillance de la pression artérielle moyenne (télémétrie)</td></tr><tr><td>LabChart Pro (logiciel), PowerLab (matériel d’acquisition)</td><td>AD Instruments ; Colorado Springs, CO</td><td>ML846, MX2 matrix 2.0 (compatible avec la télémétrie Data Science International)</td><td>3 options pour logiciel/matériel d’acquisition</td></tr><tr><td>SciWorks (logiciel), DataWave (matériel d’acquisition)</td><td>DataWave Technologies, Loveland, CO</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Spike 2 (logiciel), Micro1401-3</td><td>Cambridge Electronic Design Ltd., Londres UK</td><td>1401-3</td><td></td></tr><tr><td>Micro-drill</td><td>Roboz Surgical Instrument Co. ; Gaithersburg, MD</td><td>RS-6300 Chirurgie</td><td>du SNC</td></tr><tr><td>Cadre de chirurgie stéréotaxique</td><td>Stoelting ; Wood Dale, IL</td><td>51600</td><td>Chirurgie du SNC</td></tr><tr><td>Amplificateur à microélectrodes avec préamplificateur 10X</td><td>A-M Systems ; Sequim, WA</td><td>1800-2</td><td>RSNA enregistrement</td></tr><tr><td>Écarteurs</td><td>Fine Science Tools ; Foster City, CA</td><td>17009-07</td><td>Chirurgie RSNA</td></tr><tr><td>Pince à épiler Micro-dissection</td><td>Outils de science fine ; Foster City, CA</td><td>11251-10</td><td>RSNA chirurgie</td></tr><tr><td>Micro-crochet</td><td>Outils de science fine ; Foster City, CA</td><td>10064-14</td><td>Chirurgie RSNA</td></tr><tr><td>Huile minérale</td><td>Fisher Scientific ; Waltham, MA</td><td>8042-47-5</td><td>Chirurgie RSNA</td></tr><tr><td>Moniteur audio</td><td>A-M Systems ; Sequim, WA</td><td>3300</td><td>RSNA</td></tr><tr><td>chirurgie Gel de silice</td><td>Wacker, München ; Allemagne</td><td>RT601A-B</td><td>Chirurgie RSNA</td></tr><tr><td>Pinces électriques</td><td>Tyco Electronics ; Schaffhouse, Suisse</td><td>EB0283-000</td><td>Aiguille de mise à la terre ou de sécurisation</td></tr><tr><td>ciseaux de Bonn, pointes droites/pointues</td><td>Roboz Surgical Instrument Co ; Gaithersburg, MD</td><td>RS-5840</td><td>Aiguille de gavage de perfusion</td></tr><tr><td></td><td>Appareil de Harvard ; Holliston, MA</td><td>75-0286</td><td>Pompe</td></tr> de <tr><td>perfusion Masterflex</td><td>Cole-Parmer ; Vernon Hills, IL</td><td>7524-10</td><td>Tube en</td></tr><tr><td>silicone durci au platine</td> Perfusion <td>Masterflex Cole-Parmer ; Vernon Hills, IL</td><td>96410-15</td><td>Perfusion</td></tr><tr><td>de formol (solution tamponnée à 10 % ; 4 L)</td> <td>Sigma-Aldrich ; St. Louis, MO</td><td>HT501128</td><td>Perfusion</td></tr><tr><td>Saccharose</td><td>Sigma-Aldrich ; St. Louis, MO</td><td>S0389</td><td>Cryoprotection</td></tr></tbody></table>

quantifier les changements aigus dans l’activité nerveuse sympathique rénale en réponse à des manipulations du système nerveux central chez le rat anesthésié

Quantifying Acute Changes in Renal Sympathetic Nerve Activity in Response to Central Nervous System Manipulations in Anesthetized Rats

L’activité nerveuse sympathique rénale (RSNA) et la pression artérielle moyenne sont des paramètres importants dans la recherche cardiovasculaire et le système nerveux autonome ; Cependant, il sont a des ressources limitées, diriger des scientifiques dans les techniques de mesure et d’analyse de ces variables. Ce protocole décrit les méthodes pour mesurer la RSNA et la pression artérielle moyenne chez le rat anesthésié. Le protocole inclut également les approches permettant d’accéder à du cerveau pendant les enregistrements de la RSNA pour des manipulations du système nerveux central (SNC). La technique d’enregistrement de la RSNA est compatible avec pharmacologique, optogenetic, ou la stimulation électrique du SNC. L’approche est utile lorsque l’enquêteur mesurera à court terme (min h) réponses autonomes dans les expériences sans survie en corrélation anatomique avec des noyaux de CNS. L’approche n’est pas prévue pour être utilisé pour obtenir des enregistrements de chronique (survie) de RSNA chez les rats. Rejets au RSNA, en moyenne corrigée RSNA, et la pression artérielle moyenne peut être quantifié et analysés en utilisant des tests statistiques paramétriques. Méthodes pour obtenir des accès veineux, l’enregistrement de la pression artérielle moyenne telemetrically et fixation du cerveau pour des analyses histologiques sont également décrits dans l’article.

La figure 1 illustre un enregistrement de RSNA et BP d’échantillon d’un rat anesthésié Nembutal. Une injection intraveineuse de phényléphrine a été utilisée pour induire une augmentation de la pression artérielle moyenne et pour évoquer le baroréflexe et transitoires sympathoinhibition4,6. Afin de quantifier la RSNA, la RSNA raw a été redressée et inscrivit en 10 segments s sans chevauchement ; l’esti...

Méthodes pour mesurer les réponses sympathiques et cardiovasculaires aux manipulations du système nerveux central (SNC) sont importants pour faire progresser la neuroscience. Ce protocole a été développé pour aider les scientifiques à mesurer et quantifier les changements aigus dans l’activité nerveuse sympathique rénale (RSNA) chez des rats anesthésiés (sans survie).

Quantifier les changements aigus dans l’activité nerveuse sympathique rénale en réponse à des Manipulations du système nerveux Central chez le rat anesthésié

Renal sympathetic nerve activity (RSNA) and mean arterial pressure are important parameters in cardiovascular and autonomic research; however, there are ...

Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés sur le système nerveux autonome, en particulier sur les mécanismes du système nerveux central qui régulent l’écoulement sympathique vers le rein. Le principal avantage de cette technique est qu’elle permet de mesurer l’impact des manipulations du système nerveux central sur l’écoulement sympathique rénal vers le rein. Avant la canulation artérielle, inspectez le cathéter de détection de pression sous un fort grossissement pour confirmer que le cathéter est exempt de bulles et de débris et qu’il a un ménisque intact entre les composants remplis de liquide et de gel.Avant chaque implantation, remplissez le gel à l’extrémité distale du cathéter et utilisez un aimant pour allumer l’émetteur. Placez un demi-nœud lâche dans la suture proximale pour occlure brièvement l’artère fémorale. Et en tenant l’introducteur de cathéter dans la main non dominante, utilisez une pince de canulation vasculaire pour saisir l’extrémité de la canule de l’unité de télémétrie afin d’éviter de déplacer le gel de la pointe.Utilisez une pointe d’aiguille pliée de calibre 22 pour percer un trou dans l’artère et insérez la canule dans l’artère aussi loin que possible. Fixez ensuite le cathéter de pression avec les attaches de suture proximales et distales. Et rentrez le corps de l’implant de télémétrie à l’intérieur du flanc adjacent à l’incision.Pour accéder au cerveau, déplacez doucement le rat en position couchée dans un cadre de chirurgie stéréotaxique avec la tête entre les barres d’oreille et ajustez la barre d’incisive pour égaliser la hauteur de lambda et de bregma. Ensuite, faites une incision caudale rostrale de deux centimètres à travers la ligne médiane du cuir chevelu et utilisez des applicateurs à bout de coton pour retirer fermement tout tissu conjonctif de la surface du crâne. Appliquez du peroxyde d’hydrogène sur le crâne exposé pour aider à visualiser les sutures bregma, lambda et médiane.À l’aide d’un atlas du cerveau du rat pour guider le ciblage, percez une ostéotomie à trou de bavure dimensionnée pour l’accès aux électrodes à travers le crâne. Pour isoler les nerfs sympathiques rénaux, connectez un fil d’activité nerveuse sympathique rénale ou une électrode RSNA à un préamplificateur 10X et à un amplificateur de microélectrode et faites une incision au scalpel s’étendant de quatre à cinq centimètres sous les côtes dans la direction caudale légèrement latérale à la colonne vertébrale. Disséquez pour visualiser les muscles paraspinaux et faites une incision caudale rostrale très superficielle d’un à deux centimètres où la graisse rencontre le muscle.À l’aide d’applicateurs à embout de coton, étalez la graisse loin du muscle pour visualiser le rein sans entrer dans l’espace péritonéal. Et utilisez des écarteurs pour séparer doucement le rein des muscles paraspinaux afin de visualiser l’artère rénale et l’aorte abdominale. Et utilisez un grossissement élevé pour identifier les nerfs rénaux dans la poche d’incision.Les faisceaux nerveux sont plus facilement visibles dans l’angle droit formé par l’aorte et l’artère rénale, suivant de près l’artère rénale de l’aorte aux reins. Ensuite, utilisez une pince à épiler de microdissection pour disséquer doucement un segment du faisceau nerveux à placer sur l’électrode d’enregistrement à partir du tissu environnant. Fixez l’électrode RSNA dans un support et abaissez l’électrode au niveau du segment nerveux.À l’aide d’un crochet nerveux, soulevez doucement un segment du nerf rénal sur l’électrode sans étirer le nerf. Et remplissez l’incision avec de l’huile minérale pour garder le nerf sympathique rénal exposé hydraté. Fixez une pince de mise à la terre à l’animal et l’autre extrémité à la cage de Faraday et utilisez un filtrage passe-haut et passe-bas pour diriger le signal vers les amplificateurs.Ajustez ensuite le gain jusqu’à 10 kilohertz, y compris un moniteur audio, pour évaluer le modèle de rafale du RSNA. Pour évaluer la qualité de l’enregistrement RSNA, évoquez le baroréflexe avec une injection intraveineuse en bolus de 100 microlitres de phényléphrine en bolus de 10 microgrammes par millilitre pour augmenter la pression artérielle et inhiber l’activité du nerf sympathique rénal en ajustant la position des électrodes pour améliorer le signal si nécessaire. Une fois qu’un signal clair a été obtenu, aspirez l’huile minérale et fixez l’électrode en place avec du gel de silice.Dans cette expérience représentative, l’injection intraveineuse de phényléphrine a été utilisée pour induire une augmentation de la pression artérielle moyenne et pour provoquer le baroréflexe et la sympathoinhibition transitoire. Pour quantifier le RSNA, le RSNA brut a été rectifié et moyenné pour les segments de 10 secondes qui ne se chevauchaient pas, et l’estimation du bruit a été soustraite de chaque segment. Lors de l’exécution de cette procédure, il est important de se rappeler de s’assurer que le rat est correctement anesthésié, qu’il est correctement positionné dans le cadre stéréotaxique et que le système est correctement mis à la terre pour réduire le bruit électrique.À la suite de cette procédure et de la collecte de tissu cérébral, des méthodes histologiques peuvent être appliquées pour caractériser les types de noyaux du système central qui contrôlent une réponse sympathoexcitatrice. Cette technique permet aux neuroscientifiques d’explorer les mécanismes de régulation autonome chez les rats anesthésiés, ce qui éclaire les études futures chez les animaux pour comprendre le contrôle de la pression artérielle et de la fonction rénale. N’oubliez pas qu’il est essentiel d’évaluer le plan de l’anesthésie au moins toutes les 15 minutes.Et pour fournir une anesthésie supplémentaire au besoin.

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Grâce à la simplicité de la chirurgie et le résultat robuste du comportement, de constriction chronique du nerf sciatique est l'un des modèles animaux pré-éminents de la douleur neuropathique. Dans les 24 heures suivant la chirurgie, hypersensibilité à la douleur est établi et peut être mesurée quantitativement l'aide d'un von Frey esthésiomètre (essais mécaniques) et le compteur analgésie plantaire (essai thermique).

Constriction chronique du nerf sciatique et les essais hypersensibilité à la douleur chez le rat

Cette vidéo présente une technique d’étude de l’activité des nerfs sympathiques rénaux (RSN) en réponse aux changements de pression artérielle chez le rat. Lors de la fixation d’un cathéter sensible à la pression à l’artère fémorale, les nerfs sympathiques rénaux sont exposés. Les nerfs sont ensuite soulevés sur une électrode d’enregistrement, et leur activité électrique est enregistrée. Ensuite, un médicament vasoconstricteur est injecté pour élever la pression artérielle, et les changements...

Enregistrement des changements dans l’activité du nerf sympathique rénal en réponse à la pression artérielle chez le rat

Cette vidéo montre une procédure de dénervation sympathique de l’artère rénale dans un modèle de souris hypertensive induite par l’angiotensine II, utilisant du phénol pour perturber la fonction nerveuse sympathique et réduire la pression artérielle.

Dénervation sympathique des artères rénales dans un modèle murin d’hypertension induite par l’angiotensine II

Anesthésiés souris présentent artérielle systémique non physiologiques, qui s’oppose à une évaluation pertinente de tonus autonome étant donné la relation intime entre la pression artérielle et le système nerveux autonome. Ainsi, une nouvelle méthode pour l’activité nerveuse sympathique rénale en même temps record et la pression artérielle avec une perfusion intraveineuse chez des souris conscientes est exposée.

Nouvelle approche pour l’enregistrement simultané de l’activité nerveuse sympathique rénale et de la pression artérielle avec une perfusion intraveineuse, conscients, souris sans retenue.

Cette étude décrit une procédure chirurgicale simplifiée et la technique permettant d’effectuer la stimulation du nerf caverneux avec l’isolement de l’électrode nerveuses complexes à l’aide de colle silicone et mesure de la pression intracaverneuse.

Stimulation du nerf caverneux et enregistrement de la pression intracaverneuse chez un Rat

Nous présentons ici un protocole de dénervation sympathique rénale (RDN) chez les souris souffrant d’hypertension induite par la perfusion d’angiotensine II. La procédure est reproductible, pratique et permet d’étudier les mécanismes de régulation des RDN sur l’hypertension et l’hypertrophie cardiaque.

L’amélioration de la dénervation rénale a atténué l’hypertension induite par la perfusion d’angiotensine II

Nous présentons un protocole d’utilisation de l’aiguilletage sous-cutané de Fu dans un modèle de lésion de constriction chronique pour induire une douleur du nerf sciatique chez le rat.

Efficacité de l’aiguilletage sous-cutané de Fu sur la douleur du nerf sciatique : changements comportementaux et électrophysiologiques dans un modèle de rat de constriction chronique

Nous décrivons un protocole d’enregistrement extracellulaire multicanal de la colonne vertébrale parallèlement à l’enregistrement de la fonction cardiaque et à l’analyse des neurones de la corne dorsale de la colonne vertébrale verrouillés cardiaquement. Cette méthode offre un cadre temporel synchronisé pour l’étude des mécanismes spinaux sous-jacents aux changements fonctionnels viscéraux thoraciques induits par l’acupuncture.

Étude des profils codants de la stimulation somatique sur les réponses neuronales à verrouillage cardiaque dans la corne dorsale spinale du rat

Ici, nous présentons une méthode pour évaluer l’activation et le blocage des axones sensoriels dans les nerfs périphériques lors d’expériences aiguës, anesthésiées et in vivo sur des rats, en utilisant deux types de mesures électrophysiologiques spinales capables de discriminer l’activité des sous-types de fibres nerveuses : les potentiels de champ local et les enregistrements mononeuronaux à large plage dynamique.

Méthodes électrophysiologiques pour évaluer le blocage de la douleur périphérique chez un rat anesthésié

Section du nerf optique est un modèle largement utilisé de lésion du SNC adulte. Quatre-vingt dix pour cent des cellules ganglionnaires de la rétine (CGR) dont les axones sont complètement sectionné (axotomie) meurent dans les 14 jours après axotomie. Ce modèle est facilement prêter à des manipulations expérimentales et hautement reproductibles.

Section du nerf optique: un modèle de l&#39;apoptose neuronale des adultes dans le système nerveux central

Découvrez comment mesurer l'activité nerveuse sympathique rénale et la pression artérielle moyenne chez le rat anesthésié. Cette méthode permet d'étudier les mécanismes du système nerveux central régulant le flux sympathique rénal.

Quantifier les changements aigus dans l’activité nerveuse sympathique rénale en réponse à des Manipulations du système nerveux Central chez le rat anesthésié (Vidéo) | JoVE Journal

Quantifier les changements aigus dans l’activité nerveuse sympathique rénale en réponse à des Manipulations du système nerveux Central chez le rat anesthésié

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