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DOI: 10.3791/58396-v
Csilla Ari1, Dominic P. D’Agostino2,3, David M. Diamond1,2, Mark Kindy4,5,6, Collin Park1, Zsolt Kovács7
1Department of Psychology, Hyperbaric Neuroscience Research Laboratory,University of South Florida, 2Department of Molecular Pharmacology and Physiology, Metabolic Medicine Research Laboratory, Morsani College of Medicine,University of South Florida, 3Institute for Human and Machine Cognition, 4Department of Pharmaceutical Sciences, College of Pharmacy,University of South Florida, 5James A. Haley VA Medical Center, 6Shriners Hospital for Children, 7Savaria Department of Biology,ELTE Eötvös Loránd University
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Nous présentons ici un protocole afin d’étudier les variations du niveau d’anxiété des modèles animaux rongeurs. L’élevées plus labyrinthe test (EPM), utilisé en association avec une vidéo dépistant le logiciel, fournit une méthode fiable afin de documenter les effets de divers traitements anxiolytiques potentiels dans les scénarios de laboratoire préclinique.
Le labyrinthe plus élevé est une méthode pour documenter l’effet de divers traitements potentiellement anxiolytiques sur les modèles de rongeurs de laboratoire d’une manière plus humaine par rapport à d’autres méthodes. Le principal avantage de cette méthode est que s’appuie sur la propension instinctive du rongeur à la fois les espaces sombres et fermés, en plus de la peur inconditionnée des hauteurs et l’évitement des espaces ouverts. Collin Park, un collaborateur de mon laboratoire, aidera à démontrer la procédure.
Plusieurs jours avant l’essai, manipulez les animaux en les cueillant par leur torse et en les tenant pendant une minute pour les acclimater à l’expérimentateur. Ensuite, mesurez le poids corporel des animaux avant de commencer tous les traitements pour déterminer le calcul de dosage pour le traitement. Ensuite, familiarisez les animaux à la méthode de gavage intragastrique en utilisant l’eau par gavage pendant cinq jours avant la supplémentation en cétone.
Pour l’analyse d’anxiété, utilisez le labyrinthe surélevé plus ou appareil EPM, un appareil en forme de plus avec quatre bras avec deux ouverts et deux fermés. Allumez l’appareil EPM en utilisant l’éclairage indirect du plafond au lieu de l’éclairer directement. Assurez-vous que les quatre bras sont éclairés de la même façon.
Branchez la clé d’installation du logiciel de suivi des mouvements dans un port USB 2.0 et installez le logiciel. Ensuite, fixez la caméra au-dessus de la zone expérimentale, et assurez-vous qu’elle restera immobile pendant toute la durée de l’expérience. Enfin, mettre en place une nouvelle expérience dans le système logiciel de suivi des mouvements en utilisant le manuel d’instructions.
Placez l’animal dans la zone expérimentale. Ensuite, démarrez le processus d’acquisition de données en appuyant sur le bouton de démarrage sur le panneau de contrôle du temps. Dans la salle de test recueillir les données EPM de deux façons, manuellement et en utilisant le logiciel.
Les observateurs aveuglés sont séparés par un rideau. Attendez que l’ene de l’enregistrement du processus de suivi ou appuyez sur le bouton d’arrêt sur le panneau de contrôle du temps. Ensuite, retirez l’animal de la zone expérimentale.
Enfin, pour accéder à l’outil d’analyse appuyez sur le bouton d’analyse dans la barre assistant d’expérimentation. Sélectionnez les essais et les intervalles de temps pour analyser et générer un rapport. Commencez par transférer les rats dans leur cage d’origine à la salle expérimentale 30 minutes avant de commencer l’expérience.
Placez un rat à l’intersection des quatre bras de l’EPM face au bras ouvert opposé à l’expérimentateur. Exécutez le logiciel de suivi vidéo ainsi que d’enregistrer manuellement le comportement de l’animal pendant cinq minutes. Ensuite, si l’animal tombe de l’EPM, le ramasser et le remettre sur le même point de l’EPM où il est tombé.
Exclure les données comportementales de cet animal de l’analyse. À la fin du test de cinq minutes, arrêtez le logiciel de suivi vidéo. Retirez l’animal de l’EPM et placez-le de nouveau sur sa cage d’origine.
Enfin, nettoyez l’EPM avec un détergent désinfectant suivi de l’eau du robinet. Sécher l’appareil avec du papier absorbant. Après l’alimentation chronique, les rats du groupe KSMCT ont passé beaucoup plus de temps à bras ouverts que le groupe témoin.
Le groupe KS a passé beaucoup plus de temps dans le centre par rapport au groupe témoin. Et moins de temps est passé dans les bras fermés dans les groupes LKE, KS, KSMCT par rapport au contrôle. Les rats des groupes KS et KSMCT ont parcouru des distances beaucoup plus longues à bras ouverts.
Tandis que les rats dans les groupes de LKE, KS, et de KSMCT ont montré sensiblement moins de distance parcourue dans les bras fermés comparés au groupe témoin. En outre, après sept jours de gavage oral, le temps passé à bras ouverts était plus important dans le groupe KE, mais a diminué dans le centre pour les groupes KE, KS et KSMCT. Le nombre d’entrées dans les bras fermés a également été sensiblement inférieur après sept jours d’administration dans les groupes KE et KS.
Il est très important de placer tous les rats sur l’équipement dans un manoir cohérent à l’intersection face à l’expérimentateur. L’essai d’EPM sur des rongeurs est une méthode appropriée et sensible pour étudier l’effet de différents traitements qui influencent des secteurs de cerveau impliqués dans l’effet anxiolytique et les mécanismes d’action.
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