Quantifier Décrémente cognitifs causés par la radiothérapie crânienne

Les troubles cognitifs résultant de la gestion radiothérapeutiques de tumeurs du cerveau représente une condition cliniquement insolubles que les impacts négativement la qualité de vie. La capacité à évaluer de manière critique les interventions peut contribuer à minimiser radio-induites décrémente cognitives dépend finalement de la capacité d'entreprendre des évaluations quantitatives de la cognition.

L’objectif global de cette procédure est de quantifier les changements comportementaux et cognitifs induits par l’irradiation crânienne. La première étape consiste à tester la mémoire de reconnaissance spatiale basée sur l’hippocampe à l’aide de la nouvelle tâche de reconnaissance de lieu. Ensuite, les niveaux d’anxiété sont évalués à l’aide de la tâche de labyrinthe plus élevé, la formation de la mémoire basée sur la peur, à l’aide de la tâche de conditionnement juste contextuel dépendant de l’hippocampe et de l’amygdale, et la tâche de conditionnement de la peur en file d’attente dépendante de l’amygdale est ensuite mesurée.

La dernière étape consiste à administrer la tâche Maurice Water Maze afin d’évaluer l’apprentissage spatial, la mémoire spatiale et la capacité d’apprentissage inversé. En fin de compte, ce protocole détecte les changements d’humeur, d’apprentissage spatial et non spatial et de mémoire, ainsi que toute perturbation sensorimotrice induite par l’irradiation crânienne. Bien que cette méthode puisse donner un aperçu des effets de l’irradiation crânienne sur le comportement et la cognition.

Il peut également être utilisé dans d’autres situations dans lesquelles la cognition est altérée en tant qu’effet secondaire indésirable d’une autre thérapie, comme dans le cas d’une chimiothérapie, d’un cerveau ou de troubles de l’apprentissage et de la mémoire induits par la chimiothérapie. Les personnes novices dans cette méthode auront du mal à cause de la nature chronophage de la configuration et de l’optimisation de l’équipement. L’interprétation des résultats peut être difficile si les procédures expérimentales ne sont pas étroitement contrôlées, et la variation des données rend difficile la détection des différences entre les groupes témoins et expérimentaux.

La démonstration visuelle de ces méthodologies est essentielle, afin que le lecteur puisse apprécier les subtilités de l’organisation ou des salles d’expérimentation dans lesquelles les tests cognitifs sont effectués, ainsi que les procédures spécifiques employées. Afin d’assurer une manipulation cohérente des animaux, commencez la phase de familiarisation en préparant l’environnement d’essai, nettoyez soigneusement deux blocs de plastique identiques avec de l’éthanol à 70 % et placez-les dans des positions spécifiques dans l’arène. Placez l’animal au centre de l’arène et laissez-le explorer librement.

Pendant cinq minutes, les comportements exploratoires sont notés. À l’aide d’un système de suivi automatisé, l’exploration est définie comme le fait que le nez d’un animal se trouve dans un rayon de quatre centimètres des blocs et est dirigé vers eux. Une fois le temps écoulé, retirez l’animal dans une cage de maintien pendant cinq minutes supplémentaires.

Pendant ce temps, nettoyez l’arène de test avec de l’éthanol à 70 %. Ajoutez une copie identique des blocs à la même position spatiale que lors de la phase de familiarisation et une copie à une nouvelle position spatiale. Après l’intervalle de cinq minutes, réintroduisez l’animal dans les arènes d’essai pour une phase de test de cinq minutes et laissez-le explorer librement pendant trois minutes.

Si l’on se souvient de la disposition spatiale des blocs de la phase de familiarisation, le rat passera plus de temps à explorer le bloc dans le nouvel emplacement spatial. Le lendemain, les animaux sont ramenés une fois de plus dans l’arène. Pour une phase de test de 24 heures, encore une fois, un bloc reste dans une position familière tandis qu’un autre est dans un roman.

Premièrement, placez l’animal au centre de l’arène et enregistrez l’exploration pendant trois minutes. Le labyrinthe plus surélevé mesure les niveaux d’anxiété chez les rongeurs. Avant de tester, assurez-vous que le labyrinthe est bien nettoyé.

Pour commencer, placez l’animal dans la partie centrale du labyrinthe face au bras ouvert loin de l’expérimentateur, laissez l’animal explorer pendant cinq minutes. Le nombre d’entrées et le temps passé dans les bras ouverts et fermés sont suivis à l’aide d’un logiciel de suivi automatisé. Si un rat tombe du labyrinthe, remettez-le rapidement sur un bras ouvert et enregistrez l’événement.

Notez également tout comportement de blocage ainsi que toutes les causes possibles. Le conditionnement de la peur est un paradigme comportemental dans lequel les animaux apprennent à craindre un stimulus auparavant neutre. En l’associant à un stimulus nocif le premier jour, placez l’animal dans une chambre soigneusement nettoyée.

Commencer l’essai de formation, qui se compose de trois phases. La première est une phase de base de cinq minutes où aucun choc ou tonalité n’est administré pendant la phase d’entraînement, plusieurs paires de chocs de tonalité sont présentées sur une période de cinq minutes. Enfin, pendant la phase de post-entraînement, l’animal dispose de cinq minutes supplémentaires.

En l’absence de choc ou de tonalité, le pourcentage de temps que chaque animal passe à geler est mesuré à partir des 60 dernières secondes de la phase de référence et des 60 dernières secondes de la phase post-formation. 24 heures plus tard, retournez l’animal dans la chambre pour un test contextuel de cinq minutes et notez le pourcentage de temps passé à geler une heure après le test. Dans le contexte familier, retirez le sol en grille, ajoutez des panneaux à l’extérieur de la chambre et nettoyez avec un nettoyant ménager parfumé.

Pour tester le conditionnement de la peur, placez l’animal dans le nouveau contexte et enregistrez le comportement de congélation en présence et en l’absence du ton qui a été précédemment associé au stimulus nocif. Le labyrinthe d’eau Morris est un test d’apprentissage spatial qui nécessite l’utilisation de repères distaux pour localiser une plate-forme d’évacuation submergée dans une grande flaque d’eau opaque, la tâche est administrée sur huit jours et se compose de quatre phases, test de file d’attente et acquisition. Phase : un test de sonde de 24 heures et un test d’apprentissage inversé.

Pour commencer le test en file d’attente, placez un drapeau noir et blanc distinct au milieu de la plate-forme afin que l’endroit de l’évasion soit évident pour l’animal. Pour chaque essai CUD, placez l’animal à un endroit de départ prédéterminé différent sur le périmètre de la piscine, déplacez la plate-forme dans un quadrant différent. Pour chacune des quatre épreuves, laissez à l’animal 30 secondes pour trouver la plate-forme d’évacuation.

Si le temps maximum est atteint, guidez les animaux à la main. Laissez l’animal rester sur la plate-forme pendant 20 secondes avant de le placer dans une cage chauffée. Le lendemain, commencez la phase d’acquisition composée de quatre essais par jour pendant cinq jours consécutifs.

Pendant cette phase, la plate-forme cachée reste au même endroit et les animaux apprennent à s’y rendre. À l’aide d’indices distaux de l’espace, placez l’animal dans la piscine à un point de départ prédéterminé différent. Pour chaque essai, enregistrez la latence moyenne pour trouver la plate-forme et la longueur du chemin comme mesures de l’apprentissage spatial.

Si l’animal ne s’est pas échappé dans le délai maximal de nage de 60 secondes, guidez-le manuellement vers la plate-forme et laissez-le y rester pendant 20 secondes. 24 heures après l’essai d’entraînement final, effectuer un 62e essai de sonde au cours duquel la plate-forme est retirée afin de déterminer la préférence de l’animal pour le quadrant qui contenait la plate-forme. À la suite de cet essai de sonde, ramenez la plate-forme dans le même quadrant et administrez trois essais d’acquisition supplémentaires pour le test d’apprentissage inversé.

Le huitième jour, déplacez la plate-forme vers un nouvel emplacement. Présentez l’animal dans la piscine et mesurez le temps passé à chercher la plate-forme à son emplacement précédent par rapport à son nouvel emplacement ici. Les résultats de l’étude Animaux témoins et irradiés dans la nouvelle tâche de reconnaissance de lieu ont montré que les deux positions ont été explorées de manière égale pendant la phase de familiarisation.

Cependant, les animaux témoins ont montré une nette préférence pour la nouvelle position spatiale après les intervalles de retard de cinq minutes et de 24 heures, contrairement aux animaux irradiés. Dans le labyrinthe surélevé, les animaux contrôlés et irradiés ont passé moins de temps à explorer les bras ouverts que ce à quoi on pourrait s’attendre par hasard. Le pourcentage de congélation lors de l’exposition initiale à la chambre était très faible par rapport à la période post-formation du lendemain.

Le comportement de congélation était toujours accru dans le contexte familier, bien que beaucoup moins chez les animaux irradiés lorsqu’ils étaient placés dans un nouveau contexte, le comportement de congélation est revenu aux niveaux de base, mais a été à nouveau augmenté par la présentation du ton dans le labyrinthe d’eau Morris. Les animaux témoins ont localisé la plate-forme Escape plus rapidement au cours des essais successifs par rapport aux animaux irradiés. Les animaux irradiés ont également pris plus de temps et un chemin plus long vers la plate-forme lors d’un essai de sonde, 24 heures plus tard lors du test d’apprentissage inversé, lorsque l’emplacement de la plate-forme est changé, les animaux normaux cessent progressivement de chercher l’ancien quadrant et apprennent le nouvel emplacement de la plate-forme, alors que les animaux irradiés ne le font pas.

Lors de l’exécution de ces tâches, il est important de prendre des notes détaillées concernant tout événement ou comportement anormal, ainsi que tout problème de suivi qui doit être résolu avant que les données ne soient analysées. N’oubliez pas que travailler avec des animaux de laboratoire peut être dangereux et que des précautions telles que l’utilisation d’un équipement de protection individuelle doivent toujours être prises lors de la mise en œuvre de ces procédures. Il est également essentiel d’obtenir l’approbation de l’établissement et de suivre les directives institutionnelles et fédérales pour l’utilisation sûre et éthique des animaux.