השרוול הצרת המוצגים במאמר זה נועד לגרום לטרשת עורקים בעורק התרדמה Murine משותף. בשל בצורת חרוט של לומן הפנימי שלה את האזיק מושתל יוצרת אזורים מוגדרים היטב של מתח נמוך, גזירה גבוהה oscillatory מפעילה את התפתחות טרשת עורקים של פנוטיפים דלקתיות שונות.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
השרשה של קאף הראש מפעילה שאר מתח טרשת עורקים המושרה עכברים
במאמר זה
סיכום
תקציר
מקובל כי שינויים גזירה הלחץ בכלי הדם לעורר את הביטוי של גנים דלקתיים בתאי האנדותל ובכך לגרום לטרשת עורקים (הנסקרת ב 1 ו -2). תפקידה של מתח גזירה נחקרה בהרחבה במבחנה חוקרת את ההשפעה של זרימה על הדינמיקה לתאי אנדותל בתרבית 1,3,4 ו - in vivo בבעלי חיים גדולים ובני אדם 1,5,6,7,8. עם זאת, לשעתקו מאוד במודלים של בעלי חיים קטנים המאפשר חקירה שיטתית של השפעת הלחץ גזירה על התפתחות פלאק הם נדירים. לאחרונה, הציג נאם et al. 9 במודל עכבר שבה קשירת הענפים של עורק הצוואר יוצר אזור של זרם נמוך oscillatory. אף על פי מודל זה גורם תפקוד האנדותל היווצרות מהירה של טרשת עורקים בעכברים hyperlipidemic, לא ניתן לשלול כי התגובה הדלקתית הוא ציין, לפחות בחלקה, תוצאה of אנדותל ו / או נזק לכלי בשל קשירת.
כדי למנוע מגבלות כאלה, חפתים מתח גזירה שינוי פותחה על סמך דינמיקה של נוזלים מחושב, אשר חרוט לומן הפנימי בצורת נבחרה כדי ליצור אזורים מוגדרים של מתח נמוך, גזירה גבוהה oscillatory בתוך עורק התרדמה המשותף 10. על ידי יישום מודל זה אפוליפופרוטאין E (ApoE) נוקאאוט בעכברים שקיבלו כולסטרול גבוה המערבי דיאטה סוג, לפתח נגעים של כלי הדם במורד הזרם מן השרוול. הפנוטיפ שלהם היא בקורלציה עם הדינמיקה האזורית תזרים 11 כפי שאושרו על ידי הדמיה vivo תהודה מגנטית (MRI) 12: הלחץ גזירה נמוכה למינרית במעלה הזרם של השרוול גורם להיווצרות פלאק נרחב של פנוטיפ פגיע יותר, ואילו oscillatory מתח הזרם גזירה של השרוול גורם טרשת עורקים יציבה 11. באותם אזורים של מתח גזירה גבוהה וזרימה למינרית גבוה בתוך השרוול,בדרך כלל אין פלאק טרשת עורקים הם נצפו.
לסיכום, נוהל גזירה מתח שינוי השרוול היא גישה כירורגית אמין לייצר טרשת עורקים שונים phenotypically ב-ApoE לקוי בעכברים.
פרוטוקול
1. הכנת מתקן מתח גזירה (השרוול)
- מתקן מתח גזירה מורכב משני חצאים האורך של גליל עם לומן בצורת חרוט. פגזים המחצית עשויים polyetherketone תרמופלסטיים המיוצרים על ידי הליך הליהוק פלסטיק. גורמים משתתפים נשלחות בזמן עדיין מחובר הרץ. לפיכך, חצאים צריך להיות מנותקים לפני השימוש. הטיל מכיל קליפות חצי בגדלים שונים הנעים בין 150 מיקרומטר - 300 מיקרומטר (קוטר פנימי הנמוך ביותר בסוף במורד הזרם).
- הכנה השרוול צריכה להתבצע תחת מיקרוסקופ כירורגי.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
כדי למזער וריאציה ניסיוני מומלץ לעבוד עם בעלי חיים גיל כמעט זהה עם ההיסטוריה תזונה זהה. תחקיר שפורסם לאחרונה מוכיח כי מתקן מתח להחיל גזירה בעכברים wildtype יכול להיות מודל טוב חקירת תפקוד האנדותל תגובות דלקתיות מוקדם המושרה על ידי זרם שונה דינמיקת 13. עם זאת, חקירה של התפתחות טרשת עורקים פלאק hyperlipidemic מודלים עכבר מהונדס (למשל העכבר בנוקאאוט ApoE) נדרשים. התקדמות וההיקף של בתצהיר פלאק כל דגם העכבר תלויים בסוג של דיאטה בשימוש. באופן כללי, תוכן כולסטרול גבוה / שומן ש.......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
המחברים אין לחשוף.
תודות
מחקר זה נתמך בחלקו על ידי דויטשה Forschungsgemeinschaft (DFG), GZ פרויקט PI 771/1-1; SFB 656 "מולקולרית והדמיה לב וכלי דם", מינסטר, גרמניה (פרויקטים C6, Z2, B3, ו PM3); האיחוד האירופי נואי "אבחון הדמיה מולקולרית, דימי "(WP 11.1 ו -11.2). המחקר מומן גם על ידי קרן הלב הבריטית, בריטניה בחלקו.
....הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| שם | חברה | תגובות | |
| הלחץ משנה גזירה (polyetherketone) | Promolding BV http://promolding.nl | מטיל נשלחות בזמן עדיין מחובר הרץ. לפיכך, אחד האלמנטים חייבים להיות מנותקים לפני השימוש. |
מקורות
- Chiu, J. J., Chien, S. Effects of disturbed flow on vascular endothelium: pathophysiological basis and clinical perspectives. Physiol. Rev. 91, 327-387 (2011).
- Cunningham, K. S., Gotlieb, A. I. The role of shear stress in the pathogenesis of atheroscle....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
