פרוטוקול זה מתאר שתי מניפולציות סביבתיות שונות ופרוטוקול עירוי מוחי במקביל לחקר שינויים מוחיים המושרים על ידי הסביבה העומדים בבסיס התנהגות הסתגלות ותיקון מוח בעכברים בוגרים.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
אפנון סביבתי של מספר המוח התיכון דופמין נוירונים בעכברים בוגרים
במאמר זה
סיכום
תקציר
שינויים ארוכי טווח במוח או 'הגמישות מוחית' עומדים בבסיס התנהגות מסתגלת ותיקון המוח הבא מחלה או פציעה. יתר על כן, יחסי גומלין עם הסביבה שלנו יכולים לגרום לגמישות מוחית. יותר ויותר, מחקר מנסה לזהות אילו סביבות לעורר גמישות מוחית מועילה לטיפול במוח והפרעות התנהגות. שתי מניפולציות סביבתיות מתוארות בי להגדיל או להקטין את מספר immunopositive hydroxylase טירוזין (TH +, אנזים שער הגבלה בדופמין סינתזה (DA)) תאי עצב במוח התיכון העכבר הבוגר. הראשון כולל גברים זיווג ונקבות עכברים יחד ברציפות במשך השבוע 1, אשר מגדיל TH + נוירונים המוח התיכון בכ -12% בגברים, אך יורד TH + נוירונים המוח התיכון בכ -12% בנשים. השנייה כוללת עכברי דיור ברציפות במשך 2 שבועות ב'סביבות מועשרים "(EE) המכילות גלגלי ריצה, צעצועים, חבלים, חומר קינון, וכו ', שבו אניncreases TH + נוירונים המוח התיכון בכ -14% בגברים. בנוסף, פרוטוקול מתואר במקביל יציקת תרופות ישירות לתוך המוח התיכון במניפולציות הסביבתיות אלה כדי לסייע בזיהוי מנגנוני פלסטיות מוח לסביבה מושרה. לדוגמא, EE-גיוס של יותר TH + נוירונים המוח התיכון הוא בוטל על ידי מצור מקביל של קלט סינפטי על נוירונים המוח התיכון. יחד, נתונים אלה מצביעים על כך שמידע על הסביבה מועבר באמצעות קלט סינפטי לנוירונים המוח התיכון כדי לעבור או לבטל ביטוי של גני 'DA'. כך, גירוי סביבתי מתאים, או תרופת מיקוד של המנגנונים העומדים בבסיס, עשויה להיות מועילה לטיפול בהפרעות במוח והתנהגות הקשורים לחוסר איזון בDA המוח התיכון (למשל מחלת פרקינסון, קשב וריכוז והפרעת היפראקטיביות, סכיזופרניה, והתמכרות לסמים).
מבוא
הוא חשב DArgic איתות על ידי תאי עצב באזור הגחון tegmental (VTA) וcompacta סעיפי nigra substantia (SNC) של המוח התיכון להיות חשוב להתנהגויות קוגניטיביות, רגשיות ומוטורי מוטיבציה גמול. עם זאת, איתות DA המוח התיכון יותר מדי או מעט מדי גורמת לתסמינים רבים השבתה במגוון רחב של הפרעות נוירולוגיות (למשל מחלת פרקינסון, קשב וריכוז והפרעת היפראקטיביות, סכיזופרניה, והתמכרות לסמים). תרופות שתגדלנה או יקטינו DA האיתות להקל על תסמינים אלה, אולם הם גם מייצרים תופעות לוואי מיוחסות לאיתות dysregulated והשפעות חוץ-היעד. יעילות תרופה גם יורדת לאורך זמן בשל תגובות מפצות של המוח. האתגר לכן הוא להחזיר איתות DA המוח התיכון נורמלית באופן יותר ....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול
הערה: כל הליכי הניסוי על בעלי חיים אושרו על ידי מכון Florey של ועדת בריאות בעלי החיים Neuroscience ונפש אתיקה ולהתאים לבריאות הלאומית של אוסטרליה ומועצה למחקר רפואי שפורסמה קוד של תרגול לטיפול ולשימוש בבעלי חיים למטרות מדעיות (7 מהדורה ה, 2004).
1. מניפולציות סביבתיות
- שיוך מגדרי
- השתמש ב(> 8 שבוע ישן), גבר באותו גיל בגרות מיני ונקבות עכברים.
הערה: אנו משתמשים בדרך כל....
- השתמש ב(> 8 שבוע ישן), גבר באותו גיל בגרות מיני ונקבות עכברים.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תוצאות
עכברים בוגרים נתון למניפולציות הסביבתיות אלה שינו מספרים של המוח התיכון (SNC וVTA), אבל לא LC, TH + נוירונים, וEE בתוספת עירוי המוח התיכון במקביל של שני picrotoxin או bicuculline (GABA יריבים הקולטן) מבטל EE-גיוס של יותר SNC TH + נוירונים. נתונים אלו פורסמו בעבר ב- 6. הנתונים הנוכחיים לוקטו בניסויים לשכפל בוצעו כחלק ממחקר שהקודם, אך עדיין לא פורסמו במקום אחר.
באופן ספציפי, יש לי עכברי זכרים בוגרים שהות.......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
מניפולציות סביבתיות
המוטיבציה מאחורי העיצוב של מניפולציות אלה סביבתיים (זיווג בין המינים והעשרה סביבתית) הייתה לקבוע האם הסביבה, ו / או התנהגות תתבקש על ידי הסביבה, קשורה לשינויים במספר תאי עצב DA המוח התיכון. הדגש היה אפוא במתן סביבות ומגרים התנהגויות שעשויות לעסוק איתות DA המוח התיכון. זיווג אלה כללו עם המין השני, והעשרה סביבתית הכוללת גישה ולקן פועל גלגלים, חבלים, סולמות, מנהרות, ואובייקטים לחקור, לשח.......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
למחברים אין מה לחשוף.
תודות
מחקר זה נתמך על ידי מענק פרויקט המועצה הלאומית לבריאות ומחקר רפואי של אוסטרליה (NHMRC) 1022839. AJH הוא עמית עתיד של מועצת המחקר האוסטרלית (ARC) FT3 (FT100100835). מכון פלורי למדעי המוח ובריאות הנפש מכיר בתמיכה ממענק התמיכה בתשתיות תפעוליות של ממשלת ויקטוריה.
....הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| Isofluorane | Baxter Healthcare Pty Ltd, בקסטר דרייב, NSW 2146, אוסטרליה | AHN3640 | |
| ALZET משאבה אוסמוטית 1002 | DURECT Corporation, PO Box 530 קופרטינו, CA 95015-0530 | 0004317 | |
| ערכת עירוי מוח ALZET 1 | DURECT Corporation, PO Box 530 קופרטינו, CA 95015-0530 | 0004760 | |
| מחזיק צינורית ALZET 1 | DURECT Corporation, PO Box 530 קופרטינו, קליפורניה 95015-0530 | 0008860 | |
| Vertex Monomer ריפוי עצמי (ממס אקרילי דנטל) | Vertex Dental, Postbus 10, 3700 AA ZEIST, הולנד | n/a | |
| Vertex Self Curing (אבקת אקריליק דנטלית) | Vertex Dental, Postbus 10, 3700 AA ZEIST, הולנד | n/a | |
| METACAM (Meloxicam) | Troy Laboratories, 98 long Street, smithfield NSW 2164 אוסטרליה | L10100 | |
| נתרן פנטוברביטון | Lethabarb, Virbac, Milperra, NSW, אוסטרליה | 571177 | |
| סרום עיזים רגיל | chemicon-temecula, CA | S26-Litre | |
| Triton X-100 | Merck Millipore Headquarters , 290 Concord road, Billerica, MA 01821 | 1.08603.1000 | |
| ארנב פוליקלונלי אנטי-טירוזין הידרוקסילאז | Merck Millipore Headquarters , 290 Concord road, Billerica, MA 01821 | AB152 | |
| Polyclonal biotinylated עז אנטי-ארנב | Dako Australia Pty. Ltd., Suite 4, Level 4, 56 Berry street, North Sydney, NSW, Australia 2060 | EO432 | |
| Avidin peroxidase | Sigma-aldrich, Castle Hill, NSW 1765 AU | A3151-1mg | |
| Diamino-benzidine | Sigma-aldrich, קאסל היל, NSW 1765 AU | D-5637 | |
| חוקר סטריאו | MicroBrightField Bioscience, 185 Allen Brook Lane, Suite 101, Williston, VT 05495 | n/a |
מקורות
- Aumann, T., Horne, M. Activity-dependent regulation of the dopamine phenotype in substantia nigra neurons. Journal of neurochemistry. 121, 497-515 (2012).
- Sauer, H., Oertel, W. H.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
