"פוליקולטורה שיטת Rotifer" השלמה ומעודכנת לדג הזברה האכלת לתי-פוסקת הראשונה

סיכום

דגי זברה מותאמים להאכיל זואופלנקטון. אפשר לנצל את התכונה הטבעית הזו במעבדה על ידי גידול דגים האכלה ראשונה יחד באותה מערכת עם רוטיפרים חיים של מים מלוחים. אסטרטגיית "רב-תרבות" זו מקדמת צמיחה והישרדות גבוהות עם מינימום עבודה והפרעה לזחלים.

תקציר

דג הזברה (Danio rerio) הוא אורגניזם מודל בעל חשיבות הולכת וגוברת בתחומי מדע רבים. אחד ההיבטים הטכניים התובעניים ביותר של גידול מין זה במעבדה הוא גידול זחלים הניזונים ראשונים לשלב הצעיר עם שיעורי גדילה והישרדות גבוהים. האתגר הניהולי המרכזי של תקופת התפתחות זו סובב סביב אספקת פריטי מזון מזינים ביותר לדגים על בסיס כמעט רציף מבלי לפגוע באיכות המים. מכיוון שדגי זברה זחלים מותאמים היטב להאכיל זואופלנקטון קטנים בעמוד המים, פריטי טרף חיים כגון רוטיפרים ברכיונידים, ארטמיה ופרמציום מוכרים באופן נרחב כמזון המועדף, לפחות עד שהדגים מגיעים לשלב הצעיר ומסוגלים להאכיל ביעילות מתזונה מעובדת. פרוטוקול זה מתאר שיטה שבה זחלי דג זברה שזה עתה בקעו מגודלים יחד עם רוטיפרים חיים של מים מלוחים (Brachionus plicatilis) באותה מערכת. גישה רב-חקלאית זו מספקת לדגים מקור מזון חי "לפי דרישה" ועשיר בחומרים מזינים מבלי לייצר פסולת כימית ברמות שאחרת היו מגבילות את הביצועים. חשוב לציין, מכיוון שהמערכת רותמת הן את הפרודוקטיביות הגבוהה הטבעית של הרוטיפרים והן את ההעדפות ההתנהגותיות של הדגים, העבודה הכרוכה בתחזוקה נמוכה. הפרוטוקול הבא מפרט נוהל מעודכן, שלב אחר שלב, המשלב ייצור רוטיפרים (ניתן להרחבה לכל רמה רצויה) לשימוש בריבוי תרבות של זחלי דג זברה ורוטיפרים המקדם ביצועים מקסימליים במהלך 5 הימים הראשונים של האכלה אקסוגנית.

מבוא

דג הזברה (Danio rerio) היא בחיות מעבדה מראש יחסני מנוצלות במספר הולך וגדל של דיסציפלינות מדעיות, כולל אך לא מוגבל לגנטיקה התפתחותית, טוקסיקולוגיה, התנהגות, חקלאות ימית, ביולוגיה משובי, והמודלים של הפרעות אנושיות רבות ^{1 - 5.} למרות שהמין הוא קל יחסית כדי לשמור על במעבדה, יש מספר אתגרי ניהול המזוהים עם תרבותם ^6. הבולט ביותר הוא גידול זחל, במיוחד כאשר הדגים יתחילו ראשון להאכיל לאחר האינפלציה שלפוחית ​​גז ^7. בתנאים רגילים, בשליטה, אירוע התפתחותי זה מתרחש ב ~ 5 ימים לאחר הפריה (DPF), עם 3 הבאים - 5 הימים של צמיחה להיות ⁷ קריטיים במיוחד. הקושי הטכני המרכזי בשלב זה הוא לענות כראוי את הדרישות התזונתיות של זחלי ההאכלה הראשונים - פריטי מזון חייבים להיות בגודל מתאים, digestible, אטרקטיבי, וזמין על בסיס כמעט רציף, ללא יצירת פסולת מוגזמת בטנקי culturing. מבחינה הסטורית זו הושגה בדרך כלל על ידי מתן כמויות קטנות של מזון רבות לדגים בטנקים, יחד עם ^8,9 תחלופת מים שיגרתי. בעוד שיטות אלה הן במידה מסוימת מוצלחות, הם לא יעילים, דורשים תשומות עבודה גבוהות, ולחזור רק משתנה ושיעורים מוגבלים של צמיחה והישרדות ^10.

בטבע, זחלי דג הזברה ככל הנראה להאכיל בהווה זואופלנקטון קטן בשפע בעמודת המים ^11. מסיבה זו, פרוטוקולי larviculture שלשלב הזנות חיות כגון הסנדלית, rotifers, והארטמיה הם בדרך כלל יעילים ביותר ^7. בשנת 2010, בסט והמחברים הוכיחו שזה אפשרי לגדל דג הזברה זחל במי סטטי, מליחים יחד עם rotifers המים המלוחים במשך 5 הימים הראשונים של האכלת אקסוגני ^12. גישה זו, הרותמת אתes הפרודוקטיביות הגבוהה הטבעית של תרבויות rotifer לספק טרף בשפע, ערך תזונתי גבוהה מבלי לזהם את המים, תשואות שיעורים גבוהים מאוד של צמיחת זחל והישרדות עם תשומת עבודה נמוכה ^12,13. בשנים האחרונות, מספר גדל והולך של מעבדות ברחבי העולם אימץ וריאציות של פרוטוקול זה, ורבים מהם עכשיו culturing rotifers באופן רציף לתמיכה במערכות משתלת ^14.

בשנים האחרונות, שיטות לשני rotifer / פוליקולטורה דג הזברה וייצור rotifer כבר מעודנת והשתפרו להיות יותר סטנדרטי וניתן להרחבה בקלות. מאמר זה מספק הוראות צעד-אחר-צעד ל1) ייצור rotifer רציף וחזק ו 2) הקמת rotifer / מערכת פוליקולטורה דג הזברה משמשת לתמיכה בצמיחה חזקה של דגים במשך 5 הימים הראשונים של האכלת אקסוגני.

פרוטוקול

1. Rotifer תרבות

1. רכיבים בסיסיים של מערכת תרבות באמצעות כלי 100 L תרבות
   1. אסוף את כל הרכיבים להתקנת תרבות rotifer. התקנת תרבות rotifer מורכבת מכלי תרבות (CV) לגדול rotifers; כלי דומה כדי לשמור על rotifers feedout (כלי תרבות feedout, FCV); צנצנת בקיעה עגולה תחתית (Feed מאגר, FR) לאחסון של התערובת להאכיל אצות (AFM); אספקת אוויר (AS) ללאוורר את קורות החיים, וFCV FR; משאבת peristaltic עם טיימר מדידה (PMT) לשלוט משלוח של מזון אצות לקורות החיים וFCV; ומסנן חלקיקי חוט (FPF) שיושב בתוך קורות החיים.
      הערה: רשימה של ציוד ורכיבים מלא מסופקת ברשימת חומרים.
2. תְצוּרָה
   1. להעלות את קורות החיים וFCV על דוכן או שולחן, כך שהתרבויות יכולות להיות שנקטפו בקלות באמצעות ניקוז ההולם להמשך אוסףainer (איור 1). השתמש בצינורות אספקת האוויר גמישים להתחבר AS לאורכו של צינור קשיח בכל כלי תרבות. ודא שהצינור הוא מספיק זמן כדי לספק אוויר לתחתית קורות החיים או FCV.
   2. השתמש בקו אוויר קטן-יכולת להתחבר AS לאורכו של צינור קשיח המשתרע עד לתחתית של FR המכיל את AFM. התקן שסתום לכל שורת אוויר להסדיר את זרימת אוויר. חבר את FR לPMT עם צינורות אספקת מזון, ומפעיל את הצינור מPMT לתוך חור שנקדח בצד של קורות החיים / FCV, בחלקו העליון. איור 1.
3. לִקְפּוֹץ
   1. מלא את כלי התרבות עד 90% מההיקף הזמינים במי אוסמוזה ההפוך (RO). אם RO אינו זמין, להשתמש במים נקיים, dechlorinated עירוניים; עם זאת, הערכת סיכוני ביטחון ביולוגי צריכה להתבצע כדי לוודא ששום אורגניזמים שעלולים להיות פתוגניים נמצאים במי המקור. הערה: ניתוח כזה יכול להתבצעבכל מעבדת בדיקה מוסמכת מים.
   2. מינון המים כלי התרבות במלח אקווריום להגיע מליחות של 15 גר '/ ל'. הגדר את זרימת האוויר לתוך הכלי, כך שהוא שומר על "רתיחה מתגלגלת", ולאחר מכן להוסיף לאט כמות המדודה של מלח לכלי התרבות עד שהוא נמס לגמרי על ידי האוורור. המשך aerating מים ל> 1 שעה כדי לוודא שהוא הוא מחומצן באופן מלא.
   3. הפוך את התערובת להאכיל אצות. עד 3 ליטר נקי, dechlorinated מים מתוקים (0 ppm) להוסיף של NaHCO ₃ 100 גרם ושל מנטרל אמוניה (hydroxymethylsulfonate נתרן) 100 גרם. מגיב אחרון זה מספק את היתרון נוסף של נטרול כל כלור שיורי משאריות מים ברז או אקונומיקה מהחיטוי של ציוד התרבות. זה קריטי כדי להבטיח כי תרכובות אלה להמסה מלאה. ואז להוסיף 1 ליטר של תרכיז אצות (משקל יבש ביומסה ~ 15%). מוסיף את תערובת המזון לFR ולאחסן ב 4 מעלות צלזיוס.
   4. הוסף תרבות המתנע של 5-10,000,000 rotifers plicatilis Brachionus לקורות החיים המכילים מים מליחות סודה 15 גר' / ל '. אם rotifers כבר מקורר במהלך משלוח או אחסון, הם צריכים להיות בהדרגה (במהלך 30 דקות או יותר) התאקלמו לטמפרטורה של המים בכלי התרבות (25 - C ° 27).
   5. הפעל PMT ולהתחיל שאיבה להאכיל אצות לתוך כלי תרבות rotifer. באמצעות תכונת טיימר של PMT, להגדיר את קצב האספקה ​​של תערובת מזון לאצות כדי ש~ 1.6 מיליליטר של תערובת להאכיל אצות מועבר למיליון rotifers בתרבות, בכל יום. להפיץ את ההאכלות במנות קטנות במרווחי זמן קבועים במהלך תקופה של 24 שעות; תכוף יותר ההאכלות, טוב יותר.
   6. כייל את שיעור המסירה של המשאבה ידנית על ידי סיבוב על PMT לתקופה קצובה (למשל, 1 דקות) ולאסוף את האצות שמשאבות בפרק זמן זה לגליל או כוס סיים. לדוגמא, אם במינוני PMT 5 מיליליטר של אצות בדקות 1, ולאחר מכן את שיעור המינון יהיה5 מיליליטר אצות / דקה.
   7. לחשב את שיעור ההאכלה היומי הנדרש על ידי הכפלת מספר rotifers הנוכחי, במיליון, ב- 1.6 מיליליטר. לדוגמא, תרבות rotifer עם גודל אוכלוסייה של 100 מיליון rotifers תדרוש ~ 160 מיליליטר של מזון ליום (100 x 1.6 מיליליטר).
   8. הגדר את PMT למינון דרישת עדכונים היומי הכוללת במרווחים קבועים לאורך תקופה של 24 שעות. לדוגמא, אספקה ​​של כמות מזון יומית כוללת של 160 מיליליטר יכולה להיות מועברת במנות פעם אחת כל 3 שעות במשך 24 שעות באמצעות סט PMT עם שיעור משאבת מינון של 5 מיליליטר / דקה במשך 4 דקות, 8 פעמים ביום (5 מיליליטר / דקה x 4 דקות = 20 מיליליטר x 8 האכלות = 160 מיליליטר).
   9. לאפשר לתרבות לגדול עד שהוא מייצר אוכלוסייה הנדרשת, בדרך כלל עבור 48-72 שעות, לפני הקציר. ב 24 שעות שלאחר להתחיל, להוסיף מסנני חלקיקי חוט לכלי התרבות ולהתחיל תחזוקה רגילה.
4. תַחזוּקָה
   הערה: התרבות פועלת באופן רציף ודורשת routinתחזוקת דואר שבאופן אידיאלי צריכה להתבצע באותו הזמן בכל יום, ברצף הבא.
   1. מלא את FCV 90% מנפח זמין עם נקי, dechlorinated מים מתוקים, במינון עם מלחי אקווריום L / 10 גרם. ודא שהמים הוא גם מעורבים, וכי כל מלח מתמוסס באופן מלא. הגדר את זרימת האוויר לתוך הכלי, כך שהוא שומר על "רתיחה מתגלגלת". מדוד את המליחות עם refractometer ולהבטיח שהמליחות היא 10 גר '/ L. זה קריטי כדי לעמוד ביעד זה ושלא יעלה על זה.
   2. לדוגמא rotifers בקורות החיים: ודא שהתרבות היא מעורבת היטב, לאחר מכן לאסוף 3 דגימות של 2 - 3 מיליליטר כל אחד באמצעות פיפטה העברה או autopipettor, מחלקים שונים של התרבות. לשלב דגימות אלה בצינור או בקבוקון של גודל נוח (למשל, 10 מיליליטר).
   3. העברת 1 - 2 מיליליטר של המדגם המשולב על צלחת פטרי, כדי שניתן דמיינה אותו תחת מיקרוסקופ לנתח. בדוק את האיכות של התרבות (שחייה התנהגות שלrotifers, נוכחות של ביצים מנותקות, פרוטוזואה זיהום).
   4. לשתק את rotifers במדגם בשילוב שנותר על ידי הוספה של 50% תמיסת יוד Lugols 100 μl למדגם. בתוך שניות לאחר תוספת של Lugols, להתבונן rotifers להפסיק חייה. עכשיו, בקלות לספור את rotifers.
      הערה: אתנול, אקונומיקה מדוללת, או חומץ יכולה לשמש במקום של Lugols. חומץ (2 טיפות / 10 מיליליטר) יש את היתרונות של להיות לא מסוכן, לא לאבד את הכוח באחסון כפתרונות אקונומיקה ויוד יכול, ולא מה שהופך את חוזה rotifers, כך העטרה של cilia ו" הרגל "יישארו מורחבת ו בעלי חיים נראים טבעיים יותר.
   5. ודא שהמדגם הוא גם מעורב (rotifers המשותק יישב במהירות), ואז לקחת במהירות subsample מיליליטר ~ 2 בpipet פלסטיק ולוותר 1 מיליליטר לשקופית לספור Sedgewick-Rafter (20 x 50 ריבועים 1 מ"מ) (איור 2 ). באמצעות מיקרוסקופ לנתח או תרכובת, לספור את rotifers שלם ולאמספר otal של ביצים המצורפות לrotifers אלה (איור 2). ספירה כמה שיותר משטח השקופית כצורך לספור ~ 100 rotifers. לחשב את מספר rotifers לכל מיליליטר, ולהקליט את זה בגיליון אלקטרוני או יומן.
   6. קציר ~ 30% מהיקף rotifers בקורות החיים: הסירו את אספקת האוויר ומסנן חוט, לפתוח לאט את השסתום בחלק התחתון של קורות החיים ולאפשר למים לזרום לאספן פלנקטון עם מסך רשת 53 מיקרומטר. לאסוף את המים זורמים החוצה של החלק התחתון של האספן לאחר הסינון לדלי או ניקוז. השתמש בעדין לזרימה מתונה כדי למנוע נזק לrotifers. אל תאפשר rotifers לייבוש על המסך.
   7. מסיבות עקביות, רצוי להקים FCV עם מספר סטנדרטי של rotifers בכל יום. לכן, בהתבסס על הצפיפות הידועה rotifer קורות חיים וקציר הנפח, להתאים כולל FCV הנפח להשיג צפיפות סופית עולה בקנה אחד (למשל., 1500 rotifers מיליליטר /). הוסף את רוטי נקטףfers לFCV: בעדינות להעביר את rotifers מהמסך הגבייה באמצעות בקבוק לשטוף מלאים במים נקיים מלח (10 - L / 15 גר '). הפוך את המסך מעל FCV ולשטוף את rotifers לFCV עם זרם עדין של מים מלוחים. התחל PMT כדי לספק מזון (~ 1.57 מיליליטר למיליון rotifers ליום) לFCV.
   8. לשפשף את כל החלק הפנימי של קורות החיים עם, מברשת נקייה רכה ניילון או כרית קרצוף.
   9. הפוך תערובת חדשה של מים / L 15 גרם על ידי הוספת הכמות המתאימה של מלח לכמות מדודה של מי RO נקיים בדלי 5 ליטר להחליף את נפח מים איבד למסוק. מוסיף את המלח למים בדלי ומערבבים נמרצות עד שהוא נמס לגמרי, ולאחר מכן להוסיף לקורות החיים.
   10. שימוש בתרסיס בלחץ גבוה בכיור, לשטוף את מסנן החוט עד שהוא נקי מפסולת, ולאחר מכן להחזיר אותו לקורות החיים.
   11. התאם שיעורי הזנה של אצות נמסרו לקורות החיים על ידי שינוי משך הזמן של כל אירוע מינון, על פי הספירה היומית של rotifers מיליליטר /.השתמש בחישובים הניתנים בשלב 1.3.8, לעיל כדי לקבוע את הכמות המתאימה של מזון כדי להיות מועברת.
   12. כ 24 שעות מאוחר יותר, לחזור על התהליך. התחל על ידי קצירת rotifers שנותר בFCV (שלא היה זקוק ליום הקודם) באותו אופן כפי שתוארו לעיל (שלבים 1.4.2 - 1.4.10). לרכז אותם ב 2 ליטר של מים טריים, נקיים dechlorinated (מלח L / 5 ז). אלה יכולים להיות מאוחסן על 4 מעלות צלזיוס כפי שאספקת גיבוי, או נהגו להאכיל שלבים מאוחר יותר של דגים, מעבר למה שמתואר בפרוטוקול זה.
       הערה: פרוטוקול זה מאפשר עד 2 - 3 ימים של תחזוקה מופחתת תרבות (עם הזנה אוטומטית רגילה), כי rotifers בקורות החיים יכול לסבול מחדל של יבולים ללא השלכות חמורות.

2. פוליקולטורה

1. להכין
   1. לאסוף עוברי דג הזברה מאירוע השרצה על ידי שפיכת עוברים הולידו דרך תה מסננת ולאחר מכן בעדינות שטיפה עם FIS סטריליהמים h (או כל מקור אחר שאינם מזוהם של פתרון מותנה כראוי; למשל, בינוני עובר, E3, וכו ') מבקבוק לשטוף לתוך צלחות פטרי.
   2. דגירה עובר ב25 - 28 מעלות צלזיוס בצלחות פטרי בצפיפות של 40 - 50 עובר לכל צלחת במשך 5 ימים.
   3. תתחיל את שלב פוליקולטורה ביום 5 לאחר הפריה, או כאשר יותר מ -90% מהזחלים שבקעו באופן פעיל בחייה בעמודת המים.
2. הַרכָּבָה
   1. הוסף 500 מיליליטר של תרבות rotifer ישירות מFCV לטנק משתלת 3.5 L; הכללה של מים תרבות rotifer מספקת הזנה של אצות ששומרת על הערך התזונתי של rotifers במהלך פוליקולטורה.
   2. בעדינות לשפוך את הזחלים מצלחת פטרי אחת לתוך טנק חדר הילדים. ודא שאין זחלים יישארו בצלחת.
   3. הוסף 500 מיליליטר של מים נקיים, ממוזגים דגים ממערכת הסירקולציה המחודשת או מקור מים ייעודי לטנק להגיע נפח סופי של 1 ליטר ושל אחרוןalinity של 5 גר '/ ל'.
      הערה: מליחות זה קריטי כי הישרדות זחלי דג הזברה תושפע לרעה אם המליחות היא> 7 גרם / L והישרדות rotifer יושפע לרעה אם מליחות <2 g / L.
3. שלב פוליקולטורה
   הערה: שלב פוליקולטורה צריך להימשך עד 4 ימים לאחר חיסון (כולל של 5 ימים, מתאים לימים 5-9 לאחר הפריה).
   1. שים לב למכל פוליקולטורה לפחות פעם ביום בתקופה זו על מנת להבטיח שrotifers ודגים נמצאים וגדל. ודא שrotifers גלוי לאורך כל עמודת המים. ודא שfishs הם גם נראים בתוך עמודת המים, שחיה בין rotifers.
   2. התחל זרימת מים רגילה באמצעות הטנק. הנח מסך או לבלבל מעל נמל הניקוז כדי להבטיח זחלים שאינם סמוקים מהטנק.
      הערה: בסופו של שלב זה, הדגים יהיו גדולים מספיק כדי לצרוך פריטי טרף גדולים יותר כגון הארטמיהפריטי מזון Nauplii או מעובד בטווח הגודל של 75-125 מיקרומטר.
      הערה: דינמיקת אוכלוסיית rotifer בתוך טנק פוליקולטורה נציג נמדדה על ידי דגימה / ספירת rotifers מהמכל באותו אופן כפי שתואר בצעדים 1.4.2 - 1.4.5. זה נעשה פעם אחת בכל יום מההתחלה של שלב פוליקולטורה עד שהושלם.

תוצאות

מערכת תרבות rotifer רציפה המתוארת כאן היא דינמית, וזה נורמלי למספרי rotifer להשתנות במידה מועטת לאורך זמן אם יש וריאציות בשיעורי האכלה וקציר יומיים. האוכלוסייה של rotifers באחת התרבויות הפעילה במתקני החקלאות הימית בבית החולים לילדים בבוסטון, נשמר באופן מתואר לעיל, היה במעקב במשך 30 ימים (איור 3). הצפיפות הממוצעת התרבות בתקופה זו הייתה 932 rotifers / מ"ל, עם מקסימום של 1,330 מיליליטר / rotifers ומינימום של 510 מיליליטר / rotifers. ז...

דיון

יישום מוצלח של שיטת פוליקולטורה rotifer האכלה דג הזברה זחל מוקדם דורש פרוטוקולים יעילים לשתי משימות: ההקמה ותחזוקה של מערכת תרבות rotifer רציפה כדי להאכיל את הדגים, וculturing הראשון-האכלת זחלי דג הזברה יחד עם rotifers באותו הטנק.

ההתקנה למערכת ייצור rotifer המים המלוחים רציפה למעבדות דג הזברה תוארו לראשונה על ידי לורנס ומחברים ¹⁴ שונתה ומשופר במספר הדרכים לעשות את זה יותר חזק ואוניברסלי הן ביישום. הפר...

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם	חברה	מספר קטלוג	הערות
Rotifer Culture Infrastructure
100 L Culture-Vessel	Aquaneering	פוליקרבונט מותאם אישית	, תחתית חרוטית, עם שסתום ניקוז
5 ליטר ערכת דלי תרבות	Reed Mariculture	CCS Starter Kit	תרבית בנפח קטן למתקנים קטנים
צינורות שקופים קשיחים 1/2 אינץ' OD, 36 אינץ'	Pentair Aquatic Ecosystems	16025	צינורות שקופים קשיחים לאספקת אוויר
צינור רשת	Pentair Aquatic Ecosystems	RT444X	תמיכת צינור רשת למסנן חוט
דנטלי חוט דנטלי	חוט דנטלי חקלאות ימית	חוט דנטלי 12 אינץ' x 42 אינץ'	מלכודת פסולת חלקיקים
משאבת טיימר מדידה פריסטלטית, 5 GPD	Grainger	38M003	משאבת מדידה עם טיימר למינון הזנה לרוטיפרים
משאבת טיימר מדידה פריסטלטית, 1-100 מ"ל לשעה (לתרבית בקנה מידה קטן יותר)	Coral Vue	מק"ט: IC-LQD-DSR	משאבת מדידה עם טיימר למינון הזנה לרוטיפרים
צינורות סיליקון	צינורות Cole Parmer		לאספקת אצות לכלי הרוטיפר
צינורות שקופים קשיחים "OD, 36"	Pentair Aquatic Ecosystems	16025	צינורות שקופים קשיחים לאספקת אוויר למשחת אצות
צינורות שקופים קשיחים OD, 36 אינץ'	Pentair Aquatic Ecosystems	16025	צינורות שקופים קשיחים לאספקת אצות
Rotifers
Live Rotifers Brachionus plicatilis Type L	Reed Mariculture	Type L 5 מיליון	תרבית מלאי רוטיפר להפעלה של המערכת
Rotifer Feed
נתרן הידרוקסימתיל-סולפונאט	חקלאות ימית בקנים	ClorAm-X® < / sup> 1lb אמבטיה	מפחית אמוניה לתערובת הזנת אצות
נתרן ביקרבונט	פישר S25533B מדעי		pH מאגר לתערובת הזנת אצות
תרכיז מיקרו אצות	Reed Mariculture	Rotigrow Plus® שקית 1 ליטר	הזנת רוטיפר אופטימלית מבחינה תזונתית
RG Complete	Reed Mariculture	RG בקבוק שלם של 6 אונקיות	הכל בהזנה אחת מבוססת מיקרו-אצות לתרביות בקנה מידה קטן
הכנת מים
גבישי שונית מלח שונית	שדגים מניחים	198210	מלח להכנת מי תרבות (הערה: פריט זה הוא דוגמה בלבד; ניתן להשתמש בכל פורמולציות מלח ללא מזהמים).
רפרקטומטר	Pentair Aquatic Ecosystems	SR6	מדידת מליחות
ציוד לתרבית רוטיפר
אספני פלנקטון 12 אינץ' קוטר, 53 מיקרון	Pentair Aquatic Ecosystems	BBPC20	מסך רשת לאיסוף רוטיפרים
רפידות קרצוף	Pentair Aquatic Ecosystems	SCR-58	כרית קרצוף לניקוי פנים של כלי גידול
מברשת
דלי	Grainger Supply	43Y530	דלי מדורג לערבוב תרבית מים
צנצנת בקיעה	Pentair מערכות אקולוגיות מימיות	J30	אחסון תערובת הזנת אצות
Lugol' s פתרון, דילול	פישר מדעי	S99481	סוכן המשמש לשיתוק רוטיפרים חיים לספירת
שקופית ספירת פלנקטון Sedgewick-Rafter עם רשת	Pentair Aquatic Eco-Systems	M415	ספירת רוטיפרים
שונות
מסננת תה	Kitchenworks	971972	משמש לאיסוף עוברי דג הזברה לאחר ההטלה