מאמר שיטה

מיפוי אופטי של חריגות אלקטרופיזיולוגיות וטיפול בסידן בפרוזדורים במודל עכברוש של פריקרדיטיס סטרילית

244 צפיות

⸱

DOI:

10.3791/69767

⸱

27 בינואר 2026

 ,  ,  , 
1Department of Cardiology, Union Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, 2Research Center of Ion Channelopathy, Union Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, 3Institute of Cardiology, Union Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, 4Key Lab for Biological Targeted Therapy of Education Ministry, 5Hubei Provincial Engineering Research Center of Immunological Diagnosis and Therapy for Cardiovascular Diseases, Union Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, 6Department of Cardiology, Xuzhou Central Hospital, 7Institute of Cardiovascular Diseases & Department of Cardiology, Sichuan Provincial People's Hospital, School of Medicine, University of Electronic Science and Technology of China

* These authors contributed equally

במאמר זה

סיכום

פרוטוקול זה מתאר מיפוי אופטי כפול של חולצות מתח וסידן בלב פריקרדיטיס סטרילי של חולדות, כדי להעריך את עיצוב הפרוזדורים הנגרם מדלקת הבסיס לפרפור פרוזדורים לאחר הניתוח.

תקציר

פרפור פרוזדורים לאחר ניתוח (POAF) מתרחש לעיתים קרובות לאחר ניתוח לב וקשור לדלקת ולשיפוץ פרוזדורים. מודל הפריקרדיטיס הסטרילי (SP) משחזר מצב זה בעכברים, ומספק פלטפורמה חשובה לחקר אלקטרופיזיולוגיה פרוזדורית הנגרמת מדלקת. פרוטוקול זה מתאר את הכנת לבבות חולדות עם פיוז לנגנדורף לאחר השראה ב-SP ושימוש במיפוי אופטי כפול סימולטני לרישום מתח טרנסממברנלי וחולפים של סידן. הלבבות מוצבעים בצבע הרגיש למתח RH237 ובמדד הסידן Rhod-2 AM, בעוד שהכיווצות מדוכאת באמצעות בלביסטטין כדי למזער ארטיפקטים בתנועה. הדמיה במהירות גבוהה מאפשרת מיפוי מרחבי-זמני של פוטנציאלי פעולה של פרוזדורים ודינמיקת סידן במהלך פרוטוקולי קצב מבוקר. פרמטרים כמותיים כוללים משך פוטנציאל פעולה, מהירות הולכה, משך סידן חולף, זמן לשיא וגודל אלטרננים. השיטה מאפשרת הערכה מדויקת של הטרוגניות בהולכה עליזתית, קישור אלקטרו-סידן ופגיעות להפרעות קצב תחת לחץ דלקתי. גישה ויזואלית זו מספקת פלטפורמה שחוזרת ורב-שימושית לחקר מנגנוני POAF ולבדיקת התערבויות פרמקולוגיות או גנטיות המתמקדות בשיקום פרוזדורים.

מבוא

פרפור פרוזדורים לאחר ניתוח (POAF) הוא סיבוך נפוץ לאחר ניתוח לב-חזה, המאופיין בפרקים חולפים של פרפור פרוזדורים (AF) שמגיעים לשיא בדרך כלל בתוך 2-4 ימים לאחר הניתוח. בעוד ש-POAF לעיתים מוגבל בעצמו, הוא קשור לסיכון מוגבר לשבץ, אשפוזים ארוכים יותר ועלויות בריאות מוגברות1. לחץ דלקתי בשריר הלב העלייה נחשב לגורם מרכזי לפתוגנזהשלו 2.

מודל הפריקרדיטיס הסטרילי (SP) הוא מודל מבוסס היטב לבעלי חיים קטנים לחקר POAF 3,4. במודל זה, יישום הטלק האפיקרדיאלי גורם לדלקת פריקרדיאלית מקומית המדמה שינויים לאחר הניתוח. מחקרים קודמים שהשתמשו במודל זה הראו שיפוץ מבני, שינוי בביטוי מחלקים בפערים, וחריגות בטיפול בסידן שמובילות להפרעת קצב 5,6,7. עם זאת, טכניקות אלקטרופיזיולוגיות קונבנציונליות מספקות מידע מרחבי-זמני מוגבל, מה שמקשה על לכידת הטרוגניות של הולכה ודינמיקת קישור אלקטרו-סידן על פני השטח הפרוזדורי השלם.

מיפוי אופטי מאפשר הדמיה ברזולוציה גבוהה בו-זמנית של מתח טרנסממברנלי וחולפי סידן (CaT) על פני העלייה העליותית, ומאפשר הדמיה מדויקת של הולכת עליזות, קיטוב מחדש ואיתות סידן8. בפרוטוקול זה, אנו מתארים מיפוי אופטי כפול בלבבות חולדות SP עם לנגנדורף. גישה זו מאפשרת כימות של מהירות ההולכה, משך פוטנציאל הפעולה (APD), תכונות CaT ואלטרננים תחת פרוטוקולי קצב מבוקרים. על ידי שילוב הערכה חשמלית וטיפול בסידן בהכנה דלקתית לאלפורים, השיטה מספקת כלי עוצמתי לחקר הבסיס המכניסטי של POAF ולבדיקת התערבויות טיפוליות ממוקדות.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

כל ההליכים לבעלי חיים אושרו על ידי ועדת הטיפול והשימוש בבעלי חיים המוסדית (IACUC) תחת מזהה אישור [2024] מספר IACUC 4241 ובוצעו בהתאם להנחיות מוסדיות וארציות. במהלך המחקר, נשמרה הקפדה קפדנית על הנחיות רווחת בעלי חיים, עם נקודות סיום הומניות מוגדרות בבירור: חולדות שהפגינו עייפות מתמשכת, ירידה פתאומית במשקל מעל 20%, מצוקה נשימתית, חוסר יכולת לאכול או לשתות כרגיל, או סיבוכים חמורים לאחר הניתוח, הושמתו מיד באמצעות מנת יתר של איזופלוראן (5% עם זרימת חמצן של 1 ליטר לדקה) כדי לצמצם סבל.

1. הכנת תמיסות ומגבים

  1. הכינו את תמיסת טירוד המותאמת (במילימטר): 128.2 NaCl, 4.7 KCl, 1.3 CaCl2, 1.05 MgCl2, 1.19 NaH2PO4, 20 NaHCO3, 11.1 גלוקוז. בועה עם 95% O2/5%CO2, כוון את ה-pH ל-7.38-7.42, וחם ל-37 ± 1 מעלות צלזיוס.
  2. בלביסטטין: מתמוסס ב-DMSO (5 מ"ג/מ"ל), מאחסן ב-20°C- ומוגן מאור. שימוש בריכוז סופי של 10 מיקרומטר.
  3. RH237 (צבע רגיש למתח): מתמוסס ב-DMSO (2 מ"ג/מ"ל), מאוחסן בטמפרטורה של −20°C, מוגן מאור. שימוש בריכוז סופי של 2 מיקרומטר.
  4. רוד-2 בבוקר (מדד סידן): התמוסס ב-DMSO (1 מ"ג/מ"ל); אחסון בטמפרטורה של −20°C, מוגן מאור. שימוש בריכוז סופי של 0.89 מיקרומטר.
  5. פלורוני F-127 (סרפקקטנט): 20% תמיסה ב-DMSO (מגיבים זמינים מסחרית).
  6. נתרן פנטוברביטל (1%): המיס 0.1 גרם ב-10 מ"ל של תמיסת מלח להרדמה (40 מ"ג/ק"ג, i.p.).
    הערה: לטפל בצבעים ובמלאי DMSO עם ציוד מגן אישי מתאים; מגן על בלביסטטין וצבעים מאור. פעלו לפי כללי בטיחות ביולוגית ובטיחות כימית.

2. ציוד

  1. מערכת לנגנדורף עם בקרת טמפרטורה (37 ± 1 מעלות צלזיוס), מאגר, עמוד בועות ומשאבה פריסטלטית (זרימה 10-12 מ"ל לדקה).
  2. הדמיה: מצלמת CMOS מהירה (≥ קצב פריימים 1 קילוהרץ; ≥ שדה ראייה של 80 × 80 פיקסלים לאטריום), מקור עירור LED (530 ± 25 ננומטר), מפצל קרן דיכרואי (~630 ננומטר), מסנני פליטה (Rhod-2 ~590 ננומטר; RH237 >700 ננומטר), עדשה עם צמצם מתכוונן, שולחן אופטי עם בידוד רטט. מקור אור עירוי: לייזר LED עם זרם מרבי של 5 אמפר, אור ירוק עם הספק מקסימלי של 2.2 וואט.
  3. גירוי: מגרה במתח קבוע, אלקטרודות קצב דו-קוטביות.
  4. פיזיולוגיה: אלקטרודות אקג תת-ימיות; גלאי תרמיסטר; מצע רקע שחור (גומי) להפחתת זיהום אור חדרים; כלים כירורגיים איכותיים; מכונת הנשמה לעכברים. מלאי מפורט זמין בטבלת החומרים.

3. השראה של פריקרדיטיס סטרילית (SP) בעכברים

  1. הרדמו זכרים של חולדות ספרג-דולי (200-220 גרם) עם 1% נתרן פנטוברביטל (40 מ"ג/ק"ג, i.p.). לאשר עומק הרדמה (אובדן רפלקס הדוושה).
  2. יש אינטובציה לעכברוש באמצעות פוליאתילן או קנולה מתכתית תחת ויזואליזציה ישירה. קדם את הצינור בזהירות אל קנה הנשימה, ממוקם ממש מעל הקרינה, וקבע אותו כדי למנוע הזזה. חבר למכונת הנשמה בנפח גאות של 2 מ"ל/100 גרם, 55 נשימות לדקה, I:E = 1:1. אשר אוורור יעיל על ידי התבוננות בהרחבת חזה סימטרית ונשימה יציבה.
    הערה: הימנעו מהנחה עמוקה או רדודה כדי למנוע אינטובציה ברונכיאלית או הוצאה מקרית.
  3. הכינו את שדה הניתוחים. בצע תורקוטומיה פראסטרנלית קטנה (המרחב הבין-צלעי השני ליד עצם החזה). חשוף בעדינות את הלב.
  4. הרימו את התימוס כדי לדמיין את שני האגוזים. פתח בזהירות את הפריקרדיום מעל פני העלייה עם מלקחיים דקים.
  5. מרחו טאלק סטרילי באופן שווה על פני העלייה השמאלית והימנית באמצעות מרית דקה (מינון אבקת טלק: 50 מ"ג/100 גרם משקל גוף של חולדה). הימנעו משפיכה על כלי דם/חדרי דם גדולים. החליפו את התימוס מעל העלייה כדי להגביל את נדידת הטלק.
  6. הזיזו את שרירי החזה כך שיכסו את החתך הבין-צלעי הכירורגי. לאחר חיטוי ב-0.5% פובידון-יוד, תפרו את השרירים והעור לסגירת חלל החזה, ונתנו פניצילין (160,000 U/100 g, i.p.) לאחר הניתוח.
  7. שאם: תורקוטומיה ללא פריקרדיוטומיה או טלק.
    הערה: מרחו שכבת טלק דקה ואחידה רק על אפיקרדיום פרוזדורים; זיהום מופרז של טלק או חדר מעלה את שיעור התמותה ועלול לבלבל את הקריאות הספציפיות לפרוזדורים. מחקרים קודמים אישרו כי ניתוח פריקרדיטיס אספטי בעכברים גורם לדלקת שריר לב עלייתית חמורה עם פיברוזיס בולט וגורמי דלקת מוגברים, כולל IL-6, IL-1β ו-TGF-β1 3,9.

4. בידוד לב ופרפוזיה לנגנדורף

  1. ביום השלישי לאחר הניתוח, יש להרדים את העכברים עם איזופלורן (2-3%) באמצעות קונוס אף ולהזריק הפארין מערכתית (250 U/kg, i.p.) כדי למנוע היווצרות קריש תוך-כלי שעלול לחסום את זרימת הדם הכלילית ולפגוע בזרימת לנגנדורף. נקודת זמן זו נבחרה בהתבסס על ממצאים קודמים שלנו ב-in vivo , שלפיהם שיא השראת AF מגיעה לשיאה 3-4 ימים לאחר SP3, מה שמאפשר ללכוד את השלב החריף והמונע מדלקת, תוך הימנעות מהיצבויות מאוחרות יותר שמפריעות לטעינת צבע והקלטות אופטיות.
    הערה: לפני שתתחילו, תכינו טרי; איזון גז וטמפרטורה. יישר את האופטיקה ואשר פילטרים/דיכרואיק. הגדר תוכנת רכישה (1-2 קילוהרץ, חשיפה של 1 מילישניות), וביצוע כיול עם כרטיס פלואורסצנטי.
  2. בצע ניתוח תורקוטומיה מהירה מדיאן כדי לחשוף את חלל החזה. חתוך את הלב עם חלק מקשת האאורטה, וטבול אותו מיד בתמיסת טירוד הקרירה והמחומצנת כדי לעצור את חילוף החומרים ולשמור על חיוניות הרקמות. נתח בזהירות את רקמת החיבור הסובבת תוך שמירה על אורך אאורטה של 0.5 מ"מ לצורך הקנולציה. אבטח את האאורטה לקנולה של לנגנדורף באמצעות תפרי משי 4-0, כדי להבטיח אטימה אטומה ושהקצה התחתון של הקטטר יישר עם הגבול העליון של האטריום. התחל פרפוזיה רטרוגרדית עם טירוד מחומצן בקצב זרימה קבוע של 10-12 מ"ל לדקה, תוך שמירה על טמפרטורת הפרפוזאט של 37 ± 1 מעלות צלזיוס. לצורך שחזוריות, מפרט קנולה האאורטה של העכברוש הוא כדלקמן: קוטר חיצוני: 1.4 מ"מ; קוטר פנימי: 1.0 מ"מ; אורך כולל: 3-4 ס"מ; עומק החדרה: כ-0.5-1.0 ס"מ לתוך שורש האאורטה; צורת הקצה: מעט מחודדת; חומר: פלדת אל-חלד או צינורות מתכת קהה. הקנולה חייבת להיות קשיחה מספיק כדי לעמוד בלחצים של פרפוזיה (בדרך כלל 60-80 מ"מ כספית) ללא כיפוף, והקצה צריך להימנע מחסימת האוסטיה הכלילית.
  3. צפו בלב לתוצאות החזרת דם מיידיות. פרפוזיה מוצלחת מתבטאת בשטיפה מהירה ומהירה של שאריות דם מכלי הדם הכליליים, שיקום צבע שריר הלב הורוד האחיד, וחידוש התכווצויות קצביות ספונטניות. נדרשים בצקת שריר הלב מינימלית וקצב לב יציב (בדרך כלל 300-400 פעימות לדקה) לפני ניסוי נוסף. במקביל להקליט את האלקטרוקרדיוגרם של הלב. אפשר ללב להתאזן לפחות 20 דקות תחת פרפוזיה קבועה לפני שמתחילים פרוטוקולי מיפוי אופטי.

5. דיכוי תנועה ואוורור

  1. הוסף בלביסטטין לפרפוסט (10 מיקרומום אחרונים). פרפיוז ~10 דקות עד שההתכווצויות יפסיקו.
  2. הכנס קטטר היפוטנסיבי לחדר השמאלי דרך הווריד הריאתי דרך המסתם המיטרלי כדי לשחרר את הלחץ הפנימי, ובכך להפחית את הלחץ התוך-חללי תוך שמירה על מורפולוגיית העלייה ושלמות האות. לצורך שחזוריות, מפרטי הקטטר הם: קוטר חיצוני: 1.4 מ"מ; קוטר פנימי: 1.0 מ"מ; אורך כולל: 1.5 ס"מ; עומק החדרה ללב: 1.0 ס"מ. אין לפתוח את העלילים כדי לשמור על גאומטריה ואותות עלייתיים.

6. טעינת צבע

  1. הזרמת דם: לאחר דום לב, יש להזרים את הלב בטמפרטורת החדר בקצב זרימה קבוע של 10-12 מ"ל לדקה.
  2. צביעת סידן: הוסף Rhod-2 AM (ריכוז סופי 0.89 מיקרומון) ו-20 מיקרוליטר של 20% פלורוני F-127 ל-100 מ"ל תמיסת פרפוזיה. יש להפר את הלב בתמיסה זו למשך כ-30 דקות, עד שהעלייה והחדרים מציגים פלואורסצנציה אדומה אחידה.
  3. צביעת צבע רגיש למתח: מוסיפים RH237 (ריכוז סופי 2 מיקרומון) ל-100 מ"ל תמיסת פרפוזיה. תפרף את הלב ~5 דקות עד שהעליתות והחדרים נראים ורודים.
  4. חימום מחדש ושטיפה: העבר את הלב חזרה למערכת הפרפוזיה המקורית. חמם מחדש לטמפרטורה פיזיולוגית ופרפיוז במשך 5-10 דקות כדי לשטוף צבע שלא נספג.
    הערה: אותות CaT חלשים לעיתים משקפים עומס Rhod-2 לא מספק; האריך את הטעינה ב-10-15 דקות וודא שפלורוניק טרייה. אם התנועה נמשכת, בדוק את עוצמת הבלביסטטין ואת ההגנה מפני אור.

7. גאומטריית הדמיה ובידוד אותות

  1. הניחו את הלב באמבט הדמיה בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס. כוון את האטריום השמאלי (LA) לכיוון המצלמה. יישר את מקורות האור הראשיים והמשניים לכיוון LA.
  2. לתמוך בלב כדי למנוע סחף; פשטו בעדינות את העלייה ואבטחו אותה עם מחטי דיקור לצורך הדמיה מיטבית. כסו את החדרים ביריעות גומי שחורות כדי למזער זיהום אור בחדרים.
  3. מקם את אלקטרודות הקצב הדו-קוטביות על האטריום הימני (RA). הנח את אלקטרודות ה-ECG ליד העלייה ללכידת גל P גדול.

8. פרוטוקולי רכישה וקצב

  1. הפעל את תוכנת המיפוי (תוכנת OMapRecord4.0). הגדר קצב פריימים ל-1-2 קילוהרץ; כוונן את עומס ה-LED ל-3-4 אמפר; שדה ראייה שיכלול את כל לוס אנג'לס. כוון את הרווח/חשיפה כדי למנוע רוויה בכל אחד מהערוצים. אופטימיזציה של רווח המצלמה והחשיפה כדי להימנע מרוויה תוך מקסום יחס האות לרעש. פרמטרי הדמיה: חשיפה 1 מילישניות; תדר מצלמה מקסימלי 30 קילוהרץ; קצב דגימה 12.5 קילוהרץ; רזולוציה 2048 × 2048 פיקסלים; קצב פריימים על תשואה עד 3.5 קילוהרץ; רזולוציה מרחבית 70 מיקרון. הגדרות אלו מבטיחות הקלטות AP ו-CaT באיכות גבוהה.
  2. קצב S1S1 (קו בסיס): קצב RA ב-7 הרץ (רוחב פולס 2-4 מילישניות; סף דיאסטולי כפול). רכוש ≥ סרטי 5 שניות למשך APD/CaT (CaD), זמן לשיא ומהירות הולכה.
  3. פרוטוקול S1S2 (רפרקטוריות/AF): לספק 30 פעימות S1 ב-7 הרץ, ואז S2 יחיד; הפחתת מרווח S1-S2 מ-140 מילישניות בשלבים (10/5/1 מילישניות) לרפרקטוריות. רישום התאוששות של CaT (A2/A1), תקופת עמידה אפקטיבית (ERP), השראה/משך AF.
  4. קצב הדרגתי (אלטרננים): הגבר את קצב RA מ-8 ל-18 הרץ בשלבים של 1-2 הרץ. לרשום ≥ 5 שניות בכל קצב כדי לכמת Ca-ALT, APD-ALT ו-DIS-ALT. שמור סרטים דו-ערוציים סימולטניים ומעקבי ECG/גירוי מסונכרנים לניתוח.
    הערה: שמרו על טמפרטורה ופרפוזיה קבועים לאורך כל הקצב; היפותרמיה מפחיתה את ההולכה ומגזים בפריטי האלטרננס.

9. עיבוד וכימות נתונים

  1. ניתוח אותות אופטיים באמצעות תוכנת OMapScope 4.0. הוחל מסנן מרחבי גאוסי 3×3 כדי להפחית רעש תוך שמירה על מורפולוגיית האות על ידי ממוצע כל פיקסל עם שכניו. זמני ההפעלה מוגדרים כנקודת ה-dF/dt המקסימלית במהלך המכה העלייה, שממנה מחושבת מהירות ההולכה על ידי חלוקת המרחק הליניארי בין אתרי ההפעלה המוקדמים והאחרונים בהפרש זמן ההפעלה המתאים. APD70/90 הוגדר כזמן מה-dF/dT המקסימלי של פוטנציאל הפעולה לקיטוב של 70% או 90% של משרעת AP. CaD70/90 הוגדר כזמן מהשיא של הסידן החולף (Ca²⁺) ועד ל-70% או 90% דעיכה. האלטרננים נמדדו כך: Ca-ALT חושב כ-1 פחות יחס בין אמפליטודת CaT ממוצעת קטנה לגדולה, APD-ALT כהפרש בין ערכי APD80 הארוכים והקצרים, ו-DIS-ALT כאלטרננים מחוץ לפאזה מרחבית המופרדים על ידי קווי צמתים. יחס ההתאוששות של RyR חושב כיחס של שני שיאי CaT רצופים (קטנים/גדולים יותר).

10. פרמטרים קריטיים וקריטריוני קבלה

  1. פרפוזיה: 10-12 מ"ל לדקה, 37 ± 1 מעלות צלזיוס; סינוס יציב או קצב קצב; לוס אנג'לס מלאה באוויר.
  2. SNR: Upstroke dF/F ≥ 3 לשני הערוצים; הלבנת פוטובלינקה מינימלית מעל חלון הרכישה.
  3. תנועה: תנועה שאריתית זניחה לאחר בלביסטטין; רישום תמונה יציב בין פריימים שונים.
  4. טמפרטורה: ניטור רציף; החריג מערכי נתונים עם < אמבטיה ב-36 מעלות צלזיוס או > 38 מעלות צלזיוס במהלך הרכישה.

11. ניתוחים סטטיסטיים

  1. כל הניתוחים הסטטיסטיים בוצעו באמצעות GraphPad Prism 9. הנתונים מוצגים כממוצע ± SEM. נורמליות התפלגות הנתונים הוערכה באמצעות מבחן שפירו-וילק. עבור נתונים עם התפלגות נורמלית, נותחו ההבדלים בין שתי הקבוצות באמצעות מבחן Student's t דו-זנבי לא מזווג; עבור נתונים שאינם מבוזרים נורמלית, הוחל מבחן Mann-Whitney U. משתנים קטגוריים נותחו באמצעות מבחן χ2 . P < 0.05 נחשב מובהק סטטיסטית.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

אינדוקביליות AF
פעילות חוץ-רחמית וכניסה מחדש הם מנגנונים חיוניים התורמים להתחלה ולהמשך POAF2. אורך הגל של הכניסה מחדש (λ) נקבע על ידי מכפלת ERP ומהירות ההולכה (CV), כלומר λ = ERP × CV. בלבבות שניתחו במצב מזויף, קצב S1S2 עורר תגובות יציבות בעלויות ללא הפרעות קצב (איור 2A). לעומת זאת, לבבות שטופלו ב-SP הראו לעיתים קרובות תגובות חריגות, כולל אקטופיה עלייתית (איור 2B) וכניסה מחדש שהתדרדרה ל-AF (איור 2C...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

פרוטוקול זה מתאר מיפוי אופטי כפול של APs ו-CaTs בלבבות חולדות מבודדים בעקבות SP, מודל מונע דלקת של POAF. הקלטה סימולטנית ברזולוציה גבוהה של אותות Vm ו-Ca+ על פני השטח העליזתיים השלם תחת קצב מתוכנת מאפשרת הערכת APD, זמן לשיא, מהירות הולכה, הטרוגניות מרחבית של ריפולריזציה, משרעת CaD, משרעת CaT, זמן לשיא CaT, ושונות אזורית בטיפול בקלטימיניום. הוא גם מאפשר זיהוי וכימות של אלטרננים תלויי תדר, כולל APD-ALT, Ca-ALT ו-DIS-ALT, וכן ניתוח של התאוששות ועמידות RyR. יתרה מזאת, גישה זו מזהה...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

למחברים אין ניגודי עניינים לחשוף.

תודות

עבודה זו נתמכה על ידי הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (מס' 82470328, 82170326to Y.D.; מס' 82300350 ל-J.L.). ברצוננו להביע את תודתנו לד"ר גווליאנג האו וד"ר גונגשין וואנג (מכון האלקטרופיזיולוגיה, האקדמיה למדעי הרפואה של חנאן, ג'נגג'ואו, סין) על עזרתם המצוינת במיפוי אופטי.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
בלביסטטיןאבקאםab120425
CaCl2סיגמא-אלדריץ'10043-52-4
מצלמת CMOSMappingLabOMS-PCIE-2002
מערכת ECGצ'נגדו טקמןBL-420F
מדד FE32מטלר טולדו30254108
פילטרים/מראות דיכרואיותMappingLabRH237 >700 מייל ימי;
CaT 590 ננומטר
גלוקוזסיגמא-אלדריץ'921-60-8
אמבט אימגאהMappingLabלא זמין
KClסיגמא-אלדריץ'7447-40-7
מערכת פרפוזיה לנגנדורףRadnoti / Customלא זמין
מקור LED (530 ומעלה; 25 ננומטר)MappingLabלא זמין
MgCl2סיגמא-אלדריץ'7786-30-3
NaClסיגמא-אלדריץ'7647-14-5
NaH2PO4סיגמא-אלדריץ'10049-21-5
NaHCO3סיגמא-אלדריץ'144-55-8
תוכנת OMapRecord4.0MappingLabלא זמין
תוכנת OMapScope4.0MappingLabלא זמין
משאבה פריסטלטיתקול-פרמרMasterflex® L/S®
פלורוניק F-127InvitrogenP3000MP
RH237 (צבע מתח)Thermo Fisher / InvitrogenS1109
Rhod-2 AM (אינדיקטור Ca)Thermo Fisher / InvitrogenR1245MP
מכשירי הנשמה לבעלי חיים קטניםיויאנביוV-100
נתרן פנטוברביטלסיגמא-אלדריץ'P3761
עכברי ספרג-דולי (200&00; 220 גרם, זכר)ספק מוסמך מקומילא זמין
אבקת טלק סטריליתסיגמא-אלדריץ'T1586
ממריץMappingLabLEDC-2002
אמבט מים (מבוקרת טמפרטורה)נינגבו שינז'יSC-15

מקורות

  1. Gaudino, M., et al. Postoperative atrial fibrillation: From mechanisms to treatment. Eur Heart J. 44 (12), 1020-1039 (2023).
  2. Dobrev, D., Aguilar, M., Heijman, J., Guichard, J. B., Nattel, S. Postoperative atrial fibrillation: Mechanisms, manifestations and management. Nat Rev Cardiol. 16 (7), 417-436 (2019).
  3. Fu, X. X., et al. Interleukin-17A contributes to the development of postoperative atrial fibrillation by regulating inflammation and fibrosis in rats with sterile pericarditis. Int J Mol Med. 36 (1), 83-92 (2015).
  4. Liao, J., et al. TRPV4 blockade suppresses atrial fibrillation in sterile pericarditis rats. JCI Insight. 5 (23), e137528(2020).
  5. Huang, Z., et al. Signal transducer and activator of transcription 3/microRNA-21 feedback loop contributes to atrial fibrillation by promoting atrial fibrosis in a rat sterile pericarditis model. Circ Arrhythm Electrophysiol. 9 (7), e003396(2016).
  6. Liao, J., et al. Oral administration of TRPV4 inhibitor improves atrial calcium handling abnormalities in sterile pericarditis rats. Sheng Li Xue Bao. 74 (2), 188-200 (2022).
  7. Rossman, E. I., et al. The gap junction modifier GAP-134 improves conduction and reduces atrial fibrillation/flutter in the canine sterile pericarditis model. J Pharmacol Exp Ther. 329 (3), 1127-1133 (2009).
  8. Baines, O., et al. Optical mapping and optogenetics in cardiac electrophysiology research and therapy: A state-of-the-art review. Europace. 26 (2), euae017(2024).
  9. Wu, Q., et al. Colchicine prevents atrial fibrillation promotion by inhibiting IL1βinduced IL6 release and atrial fibrosis in the rat sterile pericarditis model. Biomed Pharmacother. 129, 110384(2020).
  10. Qu, Z., Weiss, J. N. Cardiac alternans: From bedside to bench and back. Circ Res. 132 (1), 127-149 (2023).
  11. Wang, L., et al. Optical mapping of sarcoplasmic reticulum Ca2+ in the intact heart: Ryanodine receptor refractoriness during alternans and fibrillation. Circ Res. 114 (9), 1410-1421 (2014).
  12. Liu, T., et al. Altered calcium handling produces reentrypromoting action potential alternans in atrial fibrillationremodeled hearts. JCI Insight. 5 (8), e133754(2020).
  13. Liao, J., et al. Interleukin6mediated Ca2+ handling abnormalities contribute to atrial fibrillation in sterile pericarditis rats. Front Immunol. 12, 758157(2021).
  14. Baines, O., et al. Optical mapping and optogenetics in cardiac electrophysiology research and therapy: A stateoftheart review. Europace. 26 (2), euae017(2024).
  15. Kanaporis, G., Blatter, L. A. Alternans in atria: Mechanisms and clinical relevance. Medicina (Kaunas). 53 (3), 139-149 (2017).
  16. Boukens, B. J., Efimov, I. R. A century of optocardiography. IEEE Rev Biomed Eng. 7, 115-125 (2014).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

Langendorff
הסרטון יגיע בקרוב

מאמרים קשורים