אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
אימונולוגיה
0 צפיות • 5:47 דק׳ • July 8th, 2025
לימפוציטים תוך-אפיתליים של גמא דלתא, γδ IELs, הם תאי T נודדים מיוחדים המבטאים קולטני תאי T גמא דלתא. תאים אלה נמצאים בעיקר בתוך אפיתל המעי ומפטרלים באפיתל כדי להגביל את העברת הפתוגן על פני המעי.
כדי לדמיין γδ IELs בתוך אורגניזם חי, התחל עם עכבר טרנסגני מורדם עם מעי דק חשוף חלקית. העכבר הטרנסגני עובר שינוי גנטי כדי לבטא חלבונים מדווחים - חלבונים פלואורסצנטיים ירוקים משופרים - אך ורק ב-γδ IELs, מה שמאפשר מעקב אחריהם.
בעזרת צריבה חשמלית, צור קו ניקוב מעל המעי הדק החשוף לאורך פני השטח הזמניים, ומונע דימום מוגזם.
בצע חתך אורכי מעל קו הניקוב כדי לחשוף את רירית המעי, ומראה בליטות מרובות דמויות אצבע - villi. כל וילוס מכיל תאי אפיתל עם γδ IELs שוכנים הבולטים לתוך לומן המעי.
מקם את העכבר עם משטח הרירית החשוף במגע ישיר עם הצבע הפלואורסצנטי, והעניק פלואורסצנטיות אדומה ללומן.
דמיין את העכבר תחת מיקרוסקופ קונפוקלי. אתר וילוס ותמונה במישורי מוקד שונים לאורך ציר ה-z, החל מאפיתל קצה הווילוס. שלב את המקטעים האופטיים הללו כדי להפיק תמונה תלת-ממדית.
הדמיה תוך-חיונית מראה את התנועה הדינמית של IELs פלואורסצנטיים ירוקים γδ לאורך קרום הבסיס של תא האפיתל ליד הלומן האדום.
הנח שני זוגות מלקחיים משני צידי המזנטריה הבסיסית בין כלי הדם, שפשף בעדינות את קצות המלקחיים יחד כדי ליצור חור בקרום. בעזרת מלקחיים זוויתי
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים