דור מצע לEndonucleases של מערכות CRISPR / קאש

28.7K צפיות

צוטט 4 פעמים

11:53 דק׳

8 בספטמבר 2012

8 בספטמבר 2012

28.7K צפיות

Judith Zoephel¹ , Srivatsa Dwarakanath¹ , Hagen Richter¹ , André Plagens¹ , Lennart Randau¹

¹Prokaryotic Small RNA Biology, Max-Planck-Institute for Terrestrial Microbiology

חסינות CRISPR / קאש מערכות לתווך אדפטיבית בחיידקי חיידקים קדומים. חלבוני CAS רבים הציעו לפעול כendoribonucleases פועל על מבשרי crRNA של משתנה אורך. כאן אנו מדגימים שלוש גישות שונות כדי להפיק את המצעים מראש crRNA לניתוח פעילות ביוכימית endonuclease קאש.

גלה סרטונים נוספים

בדיקות אנדונוקלאז

תמלול במבחנה (In Vitro Transcription)

יצירת סובסטרט RNA

אנדונוקלאז Cas6

T7 RNA פולימראז

אלקטרופורזה של ג'ל

אוטורדיוגרפיה

טיהור פלסמיד

התמזגות נוקלאוטידים

Chapters in this video

0:05

כותרת

1:37

סקירה כללית של מערכת CRISPR/Cas

2:29

הפקת מצעי pre-crRNA ארוכים באמצעות PCR

4:14

הפקת מצעי pre-crRNA בינוניים באמצעות הידבקות (Annealing) של אוליגו-נוקלאוטידי DNA

6:10

הפקת מצעי Cas RNA קצרים באמצעות סינתזה מותאמת אישית של אוליגו-נוקלאוטידי RNA

6:41

טרנסקריפציה של T7 RNA Polymerase *In vitro*

8:04

בדיקת פעילות אנדונוקלאז של Cas6

9:08

תוצאות: בדיקת פעילות אנדונוקלאז מייצגת של Cas6

11:10

סיכום

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.