Name: שיטה המבוססות על מיקרו-CT אפיון נגעים ואיתור אלקטרודות במוח בעלי חיים קטנים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-11-08T14:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 12 s
Description: למד שיטת הכנה של מוחות בעלי חיים קטנים לדימות micro-CT ללא צורך בחיתוך. השיטה מאפשרת אפיון מדויק של נגעים ואיתור אלקטרודות תוך שמירה על שלמות הרקמה.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

המחברים תודה גרג לין, ארתור מק'קללנד על המומחיות שלהם עם מכונת מיקרו-CT, דיויד ריצ'מונד, צייד אליוט על התמונה ו- Core ניתוח נתונים (IDAC) בבית הספר לרפואה בהרווארד לעיבוד עצה תמונה שלהם, ויליאם ליברטי בבוסטון אוניברסיטת למתן באדיבות מוח זברה פינק. העבודה בוצעה באופן חלקי במרכז עבור ננו מערכות (CNS), חבר של נבחרת ננוטכנולוגיה מתואמת תשתית רשת (NNCI), אשר נתמך על ידי הקרן הלאומית למדע תחת ה-NSF פרס 1541959 מס. מערכת העצבים המרכזית היא חלק של אוניברסיטת הרווארד. עבודה זו נתמכה על ידי ריצ'ארד, קרן משפחת סמית סוזן IARPA (חוזה #D16PC00002). S.B.E.W. נתמך על ידי מלגות מתוך התוכנית המדע הגבול האנושי (HFSP; LT000514/2014), בארגון האירופי לביולוגיה מולקולרית (EMBO; ALTF1561-2013). מטרות נעלות נתמכה על ידי קרן המדע הלאומית (NSF) לתואר שני מחקר מלגת התוכנית (GRFP).

כל מניפולציה ניסויית של בעלי חיים והטיפול היו נבדקו ואושר על ידי טיפול בעלי חיים מוסדיים הרווארד ועל שימוש הוועדה. זלוף המתוארים כאן הוא ספציפי חולדות, אבל ההליך הוא החלים על בעלי חיים עם מוח קטן או בגודל דומה.
1. זלוף
<ol><li>להכין 1 x באגירה פוספט תמיסת מלח (PBS). עבור מלשן (גיל: 0.5-1.5 בת, משקל: 250-600 גרם), 800-1000 מ ל אמור להספיק. השתמש 400 מ ל כדי perfuse בעלי חיים לבין אוטם 400 נוספים כדי לדלל את מקבע.</li>
	<li>הכינו את מקבע בהיקף של 2% (w/v) paraformaldehyde (PFA) ו- 2.5% (w/v) גלוטראלדהיד (ג'י אי) ב 1 x PBS. עבור מלשן, מספיקה 400 מ. לחסוך 50 מ ל 50 מ ל צינור חרוטי עבור קיבוע שאחרי של המוח לאחר זלוף.</li>
	<li>עזים ומתנגד העכברוש עם גז איזופלוריין 4 – 5% (ב 0.8 L/דקה O2 בר 1.0 ב 21 מעלות צלזיוס) למשך 15 דקות.</li>
	<li>תזריק מנה קטלנית של פנטל intraperitoneally (180 מ"ג/ק"ג).</li>
	<li>מבחן עבור אובדן רפלקס לחיה על ידי ביצוע בדיקת רפלקס הבוהן-קורט. לחכות כדי להתחיל את זלוף עד החיה איבדה את תגובתה רפלקס.</li>
	<li>בצע את intracardial שתואר לעיל זלוף והמוח החילוץ פרוטוקול14 עם הפתרונות הבאים: perfuse החיה עם 400 מ של PBS 1 x 125 מ"מ כספית כדי להסיר את הדם. לאחר כל הדם הוסר והוחלף 1 x PBS, להתחיל מה קורה עם 400 מ של פתרון של 2%, כדורגלן ו- 2.5% GA מומס 1 x PBS 125 מ"מ כספית. הערה: אם ההליך זה מתבצע בחיה זה לא עכברוש, הרכיבים החשוב היחיד של ההליך זלוף הם השימוש 1-PBS ו- 2% מחברים, 2.5% GA ב- 1 x PBS. פתרון אחסון ואת הלחץ זלוף עשוי להיות מותאם על פי המין.</li>
</ol>2. קיבוע שאחרי
<ol><li>למקם את המוח שחולצו 2% מחברים, GA 2.5% 1 x PBS פתרון (באותו פתרון נהגה perfuse החיה בעבר). ודא כי אמצעי האחסון פתרון לפחות 10 x הנפח של המוח. על חולדות, מקום במוח צינור חרוטי 50 מ עם 50 מ של פתרון. לאחסן את הדגימה קיבוע שאחרי 2-3 ימים, רועדת קלות ב 4 º C. הערה: אם המדגם הוא צינור חרוטי 50 מ ל, הנחתה אופקית על תפקודי לב / נשימה יבטיח את התוצאות הטובות ביותר.</li>
	<li>לאחר המדגם שלאחר תוקנה זמן רב מספיק, לשטוף את דגימת מים מזוקק פעמיים (ddH2O), מים מיוננים (לשכפל2O) או מים הנדסה גנטית (ראה טבלה של חומרים) ארבע פעמים עבור משכי הזמן הבאים: 1, 1, 1 ו- 15 דקות. הערה: עבור פרוטוקול זה, ddH2O, לשכפל2O או הנדסה גנטית המים צריך להיות להחלפה. פשטות, ddH2O ישמש כדי להפנות מים מורתחים מעתה ואילך.</li>
</ol>3. צביעת
התראה: בשלב זה, התנהגות כל ההכנות פתרון ברדס תוך שימוש בכפפות.
<ol><li>להכין לפחות 10 x נפח המוח של צביעת פתרון. עבור המוח עכברוש, להכין 50 מ של 2% (w/v) אוסמיום ארבע-חמצני (OsO4) ב- ddH2O על ידי שילוב של 25 mL בפתרון4 OsO 4% מניות ו- 25 מ של ddH2O. התראה: אוסמיום ארבע-חמצני הוא הפכפך, עלולה לגרום עיוורון זמני ובעיות בדרכי הנשימה אם לא מטופל כראוי. למחוק את כל החומרים לפנות אוסמיום ארבע-חמצני במיכל סיכון כימי המתאים בתוך גורם מכיל משנית.</li>
	<li>למקם את המוח צינור חרוטי 50 מ"ל ולהוסיף את הפתרון4 OsO. המוח יתחיל להיות חומים כמו OsO4 מגיב עם שומנים ברקמות.</li>
	<li>לסגור את הצינור, לאטום אותו ביסודיות עם פרפין סרט (ראה טבלה של חומרים) כדי להבטיח כי שהיא אינה דולפת במהלך הדגירה. הערה: אוסמיום הוא תנודתי, יגיב במתינות עם הפלסטיק של הרכבת התחתית, אז איטום הצינור כראוי חשוב מאוד. הצינור עשוי להיות עטוף ברדיד אלומיניום, כדי לספק הגנה נוספת.</li>
	<li>אחסן את הצינור אטום ב 4 ° C, רועדת קלות על תפקודי לב / נשימה ב-50 סל ד 2 שבועות. הצב צינור אופקי כדי להבטיח ערבוב הטוב ביותר. ודא כי המדגם באופן מלא שקוע בפתרון תוך טלטול. הערה: אם אוסמיום אסורה לזרום ללא הרף, היא אולי לא באופן מלא לחדור המדגם, אז מיקום אופקי על ניעור הוא חשוב מאוד.</li>
</ol>4. הטמעת
<ol><li>לאחר המדגם מודגרות OsO4 2 שבועות, לשטוף אותו עם ddH2O 5 פעמים בטמפרטורת החדר (RT) עבור משכי הזמן הבאים: 1, 1, 1, 15, ו- 60 דקות כדי להסיר את כל ה לא מאוגד OsO4 במדגם. הערה: החילופים מרובות, כולל החלפת 60 דקות האחרונות, נחוצים לאפשר את כל אוסמיום במערכת הדם לנטרל את החוצה.</li>
	<li>לשטוף את הדגימה עם ddH2O למשך 30 דקות ב 4 º C. הערה: אוסמיום עלולה להמשיך לפזר מתוך המדגם, אך הכמות שלו צריך להיות מופחת באופן משמעותי מהשלב הקודם.</li>
	<li>מייבשים את הדגימה עם אתנול לחדור אותה בסופו של דבר עם שרף. מייבשים, להחליף את ddH2O 10 – 20 מ של אתנול מדילולים (למשך 30 דקות כל ב 4 ° C): 20% (v/v) אתנול ו- 80% (v/v) ddH2O; אתנול 50% (v/v) ו- 50% (v/v) ddH2O; אתנול 70% (v/v) ו- 30% (v/v) ddH2O; אתנול 90% (v/v) ו- 10% (v/v) ddH2O; 100% אתנול.</li>
	<li>הכינו את דילולים אצטון/שרף כדלקמן.<ol>
<li>היכונו 100 מ של השרף הטבעה (ראה טבלה של חומרים) לפי הוראות היצרן.</li>
		<li>כדי להפוך 33% (v/v) שרף - 67% פתרון אצטון, שופכים 15 מ"ל של שרף לתוך צינור חרוטי 50 מ"ל ולהוסיף 30 מ של 100% מזוקק זכוכית אצטון.</li>
		<li>כדי להפוך אצטון שרף - 50% 50% (v/v), שופכים 22.5 מ של שרף לתוך צינור חרוטי 50 מ"ל ולהוסיף 22.5 מ ל 100% מזוקק זכוכית אצטון.</li>
		<li>כדי להפוך 67 (v/v) שרף - 33% פתרון אצטון, למזוג 30 מ של שרף לתוך צינור חרוטי 50 מ"ל ולהוסיף 15 מ"ל של 100% מזוקק זכוכית אצטון.</li>
		<li>השתמש mL 32.5 הנותרים של שרף כפתרון הראשון של 100% שרף להלן.</li>
	</ol>
</li>
	<li>להתחיל את תהליך הסתננות שרף על-ידי הזזת את הדגימה דרך 10-20 מ של אצטון, אצטון/שרף מדילולים: אצטון 100% למשך 30 דקות ב 4 ° C; אצטון 100% למשך 30 דקות ב 4 ° C; אצטון 100% למשך 30 דקות בטמפרטורת החדר (RT). הערה: שאר תהליך הסתננות יתקיים ב- RT.</li>
	<li>לטבול את הדגימה ב 33% (v/v) שרף 67% אצטון עבור 3 h ב- RT, אז אצטון שרף - 50% 50% (v/v) עבור 3 h ב- RT, 67% (v/v) שרף אצטון 33% עבור 3 h ב- RT, ושרף 100% עבור 12 h RT.</li>
	<li>הפוך אצווה מ"ל של שרף ועקוב אחר ההוראות על הבקבוק. להעביר את הדגימה אל המיכל שבו ניתן לרפא (למשל., תבניות חד פעמיות המתוארות בטבלה של חומרים). להשרות את הדגימה עם שרף 100% טרי למשך 4 שעות ב- RT. הערה: אם לא משמש טרי שרף, השרף את היום הקודם יתחיל להקשיח בטרם עת ולאחר המדגם יהיה קשה לתמרן.</li>
	<li>דגה המדגם בתנור ואקום למשך 15 דקות ב 45 º C. הערה: שלב זה יעזור להסיר את כל הבועות אוויר לכוד בתוך המדגם, אבל זה הטפל לא ישפיעו על איכות הנתונים.</li>
	<li>לבסוף, לרפא את הדגימה בתנור במשך 48 שעות ב 60 מעלות צלזיוס.</li>
</ol>5. מיקרו-CT
<ol><li>פעם אחת כבר נרפא את הדגימה, לקלף את התבנית חד פעמיות ולסרוק אותו עם המכונה מיקרו-CT. הערה: בהתאם המכונה בשימוש בהגדרות יהיה שונה. עבור הסורק בשימוש על ידי המחברים המופיעים בטבלה של חומרים, ההגדרות המומלצות הן 130 kV, 135 µA עם מסנן 0.1 מ מ נחושת, מוליבדן מקור, חשיפה שניה אחת של ממוצע של 4 מסגרות הקרנה. עם זאת, ניסויים צריך לכייל את הסורק בנפרד, כמו גורמים רבים ישפיעו על ההגדרות האופטימליות במהלך הפעלה מסוימת.</li>
	<li>עם סיום הסריקה, לשחזר את הדגימה עם הפרמטרים מומלצים לשילוב של הנסיין סורק/תוכנה במחשב עם שתוכנת הסורק.</li>
	<li>לבסוף, להמחיש ולנתח האחסון הדיגיטלי המשוחזרת באמצעות התוכנה של הנסיין של בחירה (ראו טבלה של חומרים דוגמאות).</li>
</ol>

<ol><li>Scoville, W., Milner, B. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/10678523">Loss of recent memory after bilateral hippocampal lesions.</a> Journal of Neuropsychiatry and Clinical Neuroscience. 12, 103-113 (2000).</li>
<li>Damasio, H., Grabowski, T., Frank, R., Galaburda, A. M., Damasio, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+return+of+Phineas+Gage%3A+clues+about+the+brain+from+the+skull+of+a+famous+patient%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">The return of Phineas Gage: clues about the brain from the skull of a famous patient.</a> Science. 264 (5162), 1102-1105 (1994).</li>
<li>Kawai, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motor+cortex+is+required+for+learning+but+not+for+executing+a+motor+skill%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Motor cortex is required for learning but not for executing a motor skill.</a> Neuron. 86, 800-812 (2015).</li>
<li>Otchy, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+off-target+effects+of+neural+circuit+manipulations%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Acute off-target effects of neural circuit manipulations.</a> Nature. 528, 358-363 (2015).</li>
<li>Wright, N., Vann, S., Aggleton, J., Nelson, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+critical+role+for+the+anterior+thalamus+in+directing+attention+to+task-relevant+stimuli%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">A critical role for the anterior thalamus in directing attention to task-relevant stimuli.</a> Journal of Neuroscience. 35, 5480-5488 (2015).</li>
<li>Kapgal, V., Prem, N., Hegde, P., Laxmi, T., Kutty, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long+term+exposure+to+combination+paradigm+of+environmental+enrichment%2C+physical+exercise+and+diet+reverses+the+spatial+memory+deficits+and+restores+hippocampal+neurogenesis+in+ventral+subicular+lesioned+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiology+of+Learning+and+Memory%22%5BJournal%5D)">Long term exposure to combination paradigm of environmental enrichment, physical exercise and diet reverses the spatial memory deficits and restores hippocampal neurogenesis in ventral subicular lesioned rats.</a> Neurobiology of Learning and Memory. 130, 61-70 (2016).</li>
<li>Hosseini, N., Alaei, H., Reisi, P., Radahmadi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+NBM-+lesion+on+synaptic+plasticity+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">The effects of NBM- lesion on synaptic plasticity in rats.</a> Brain Research. 1655, 122-127 (2017).</li>
<li>Palagina, G., Meyer, J., Smirnakis, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Complex+visual+motion+representation+in+mouse+area+V1%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Complex visual motion representation in mouse area V1.</a> Journal of Neuroscience. 37, 164-183 (2017).</li>
<li>Ranjbar, H., Radahmadi, M., Reisi, P., Alaei, H. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/28063155">Effects of electrical lesion of basolateral amygdala nucleus on rat anxiety-like behavior under acute, sub-chronic, and chronic stresses.</a> Clinical and Experimental Pharmacology and Physiology. , (2017).</li>
<li>Wood, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+honeycomb+maze+provides+a+novel+test+to+study+hippocampal-dependent+spatial+navigation%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">The honeycomb maze provides a novel test to study hippocampal-dependent spatial navigation.</a> Nature. , (2018).</li>
<li>Vermaercke, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+specialization+in+rat+occipital+and+temporal+visual+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurophysiology%22%5BJournal%5D)">Functional specialization in rat occipital and temporal visual cortex.</a> Journal of Neurophysiology. 112, 1963-1983 (2014).</li>
<li>Jun, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fully+integrated+silicon+probes+for+high-density+recording+of+neural+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Fully integrated silicon probes for high-density recording of neural activity.</a> Nature. 551, 232-236 (2017).</li>
<li>Masís, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((micro-CT-based+method+for+quantitative+brain+lesion+characterization+and+electrode+localization%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">micro-CT-based method for quantitative brain lesion characterization and electrode localization.</a> Scientific Reports. 8, 5184(2018).</li>
<li>Gage, G., Kipke, D. R., Shain, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Whole+Animal+Perfusion+Fixation+for+Rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Whole Animal Perfusion Fixation for Rodents.</a> Journal of Visualized Experiments. 65, 3564(2012).</li>
<li>Helander, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kinetic+studies+of+formaldehyde+binding+in+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnic+%26+Histochemistry%22%5BJournal%5D)">Kinetic studies of formaldehyde binding in tissue.</a> Biotechnic & Histochemistry. , (1994).</li>
<li>Paljärvi, L., Garcia, J., Kalimo, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+efficiency+of+aldehyde+fixation+for+electron+microscopy%3A+stabilization+of+rat+brain+tissue+to+withstand+osmotic+stress%5BTitle%5D)+AND+%22Histochemical+Journal%22%5BJournal%5D)">The efficiency of aldehyde fixation for electron microscopy: stabilization of rat brain tissue to withstand osmotic stress.</a> Histochemical Journal. , (1979).</li>
<li>Okuda, K., Urabe, I., Yamada, Y., Okada, H. <a target="_blank" href="https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/0922338X91902315">Reaction of glutaraldehyde with amino and thiol compounds.</a> Journal of Fermentation and Bioengineering. 71, (1991).</li>
<li>Bahr, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Osmium+tetroxide+and+ruthenium+tetroxide+and+their+reactions+with+biologically+important+substances%3A+electron+stains+III%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Cell+Research%22%5BJournal%5D)">Osmium tetroxide and ruthenium tetroxide and their reactions with biologically important substances: electron stains III.</a> Experimental Cell Research. , (1954).</li>
<li>Khan, A. A., Riemersma, J. C., Booij, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+reactions+of+osmium+tetroxide+with+lipids+and+other+compounds%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Histochemistry+%26+Cytochemistry%22%5BJournal%5D)">The reactions of osmium tetroxide with lipids and other compounds.</a> Journal of Histochemistry & Cytochemistry. 9, 560-563 (1961).</li>
<li>Riemersma, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Osmium+tetroxide+fixation+of+lipids+for+electron+microscopy+a+possible+reaction+mechanism%5BTitle%5D)+AND+%22Biochimica+et+Biophysica+Acta%22%5BJournal%5D)">Osmium tetroxide fixation of lipids for electron microscopy a possible reaction mechanism.</a> Biochimica et Biophysica Acta. 152, (1968).</li>
<li>Mikula, S., Binding, J., Denk, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Staining+and+embedding+the+whole+mouse+brain+for+electron+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">Staining and embedding the whole mouse brain for electron microscopy.</a> Nature Methods. 9, 1198-1201 (2012).</li>
<li>Mikula, S., Denk, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-resolution+whole-brain+staining+for+electron+microscopic+circuit+reconstruction%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">High-resolution whole-brain staining for electron microscopic circuit reconstruction.</a> Nature Methods. 12, 541-546 (2015).</li>
<li>Crespigny, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((3D+micro-CT+imaging+of+the+postmortem+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">3D micro-CT imaging of the postmortem brain.</a> Journal of Neuroscience Methods. 171, 207-213 (2008).</li>
<li>Anderson, R., Maga, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+procedure+for+rapid+imaging+of+adult+mouse+brains+with+MicroCT+using+Iodine-Based+contrast%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">A novel procedure for rapid imaging of adult mouse brains with MicroCT using Iodine-Based contrast.</a> PLoS One. 10, 0142974(2015).</li>
<li>Zhou, Z., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/27027284">Cerebral cavernous malformations arise from endothelial gain of MEKK3-KLF2/4 signalling.</a> Nature. 532, 122-126 (2016).</li>
<li>Choi, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Micro-CT+imaging+reveals+mekk3+heterozygosity+prevents+cerebral+cavernous+malformations+in+Ccm2-Deficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">Micro-CT imaging reveals mekk3 heterozygosity prevents cerebral cavernous malformations in Ccm2-Deficient mice.</a> PloS One. 11, 0160833(2016).</li>
<li>Choi, J., Yang, X., Foley, M., Wang, X., Zheng, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+and+Micro-CT+imaging+of+cerebral+cavernous+malformations+in+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Induction and Micro-CT imaging of cerebral cavernous malformations in mouse model.</a> Journal of Visualized Experiments. , (2017).</li>
<li>Benveniste, H., Kim, K., Zhang, L., Johnson, G. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/10860789">Magnetic resonance microscopy of the C57BL mouse brain.</a> Neuroimage. 11, 601-611 (2000).</li>
<li>Weninger, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-resolution+episcopic+microscopy%3A+a+rapid+technique+for+high+detailed+3D+analysis+of+gene+activity+in+the+context+of+tissue+architecture+and+morphology%5BTitle%5D)+AND+%22Anat+Embryol%22%5BJournal%5D)">High-resolution episcopic microscopy: a rapid technique for high detailed 3D analysis of gene activity in the context of tissue architecture and morphology.</a> Anat Embryol. 211, 213-221 (2006).</li>
<li>Schneider, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((high-throughput+magnetic+paragraph+sign+resonance+imaging+of+mouse+embryonic+paragraph+sign+anatomy+using+a+fast+gradient-echo+sequence%5BTitle%5D)+AND+%22MAGMA%22%5BJournal%5D)">high-throughput magnetic paragraph sign resonance imaging of mouse embryonic paragraph sign anatomy using a fast gradient-echo sequence.</a> MAGMA. 16, 43-51 (2003).</li>
<li>Sharpe, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optical+projection+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Biomedical+Engineering%22%5BJournal%5D)">Optical projection tomography.</a> Annual Review of Biomedical Engineering. 6, 209-228 (2004).</li>
<li>Cox, D. D., Papanastassiou, A., Oreper, D., Andken, B., James, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-Resolution+Three-Dimensional+microelectrode+brain+mapping+using+stereo+microfocal+x-ray+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurophysiology%22%5BJournal%5D)">High-Resolution Three-Dimensional microelectrode brain mapping using stereo microfocal x-ray imaging.</a> Journal of Neurophysiology. 100, 2966-2976 (2008).</li>
<li>Borg, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Localization+of+metal+electrodes+in+the+intact+rat+brain+using+registration+of+3D+microcomputed+tomography+images+to+a+magnetic+resonance+histology+atlas%5BTitle%5D)+AND+%22eNeuro%22%5BJournal%5D)">Localization of metal electrodes in the intact rat brain using registration of 3D microcomputed tomography images to a magnetic resonance histology atlas.</a> eNeuro. 2, (2015).</li>
<li>Fu, T. -M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stable+long-term+chronic+brain+mapping+at+the+single-neuron+level%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">Stable long-term chronic brain mapping at the single-neuron level.</a> Nature Methods. 13, 875-882 (2016).</li>
</ol>

המחברים אין לחשוף.

להלן השלבים הקריטיים לפרוטוקול: ראשית, השימוש בשילוב של כדורגלן GA perfuse החיה, לאחר מכן שלאחר ולתקן את המוח היה בעל חשיבות עליונה כדי להשיג חדירה עקבית אוסמיום מלא של הרקמה. למרות שאנחנו? לא לבדוק את זה במפורש, הסבר מתקבל על הדעת הוא כדורגלן קיבעון הוא הפיך15, ואילו קיבוע GA אינו הפיך16,17. כי דגירה שבועיים באוסמיום ארבע-חמצני נדרשת עבור חדירה מלאה של הרקמה, זה אפשרי כי מחברים הפנים של המוח מפזרת את ופוגם הרקמה במהלך צביעה. אוסמיום ולכן ...

מדעני מוח צריכים לסמוך על נגעים במשך זמן רב כדי להבין את הקשר בין פונקציית המיקום במוח. לדוגמה, ההבנה שלנו של ההיפוקמפוס כמו להיות הכרחית למידה וזיכרון ואת קליפת המוח הקדם חזיתית בתור מפתח עבור שליטה בדחפים היו שני המוצרים של נגעים החרס בני אדם1,2. השימוש במודלים, עם זאת, אפשרה מדעני מוח כדי לרתום את העוצמה של נגעים על ידי מעבר סרנדיפיות, הפונקציה של אזורים במוח אינספור יש כבר הובהר באמצעות מחקרים שיטתיים של מבנה פונקציה קשרים באמצעות נגעים3,4.
להקצאת כראוי של הפונקציה למבנה, אולם, הנגע מחקרים דורשות כימות מדויק נהלים, אשר הוא אזור יש שהיה חסר. תקן הזהב הנוכחי עבור לכימות נגעים היא סעיף, הר, והמוח תמונה עם מיקרוסקופ אור. הפרוסות שבעורך ואז מתאימים לסעיפים הקרוב ב אטלס, נקודות הציון המשוער של נגעים על פני נושאים באופן עקיף מדווחים, לעיתים קרובות באמצעות מצלמה lucida תמונות או דוגמה היסטולוגית פרוסות3,4 ,5,6,7,8,9,10.
מעבר העוסקת מההליכים כימות הנגע הנוכחי, טכניקות אלה הן זמן רב מועדת לכישלון. שינויים קטנים בתוך המוח נוקשות, חדות הלהב וטמפרטורה יכול להוביל מקטעים הכושלת, מעוותת או קרועה. מקטעים באפשרותך גם כתם לצר, לדימות כראוי בגלל בועות המדיום הרכבה. חשוב, על חלוקתה, ההקשר תלת מימדי של המיקום של הנגע במוח הוא הפסיד, ביצוע שחזור תלת-ממד מדויקות של הנגע מאתגרת המוח.
יישום נפוץ אחר לחבלות היה לקבוע את המיקום של יחיד, הקלטות מרובות אלקטרודה במוח. בסוף להקלטות הסופי, חוקרים זירוז נגעים electrolytic קטן בקצה האלקטרודה ולעבד המוח בהיסטולוגיה כפי שנעשה ניסוי11של הנגע קונבנציונלי. טכניקה זו סובל החסרונות באותו שתוארה לעיל, עם בעיות נוספות בכך נגעים electrolytic בדרך כלל גדולים יותר האלקטרודות נהגה להכין אותם. אבל הם בדרך כלל קטנים מספיק כי הם הם מאתגרים למצוא בהיסטולוגיה. כאשר מספר אלקטרודות מוכנסים, כמו במקרה של מערך tetrode, אימות דרך נגעים electrolytic הוא יותר מאתגר. אלטרנטיבה נגעים electrolytic הוא השימוש של צבע על האלקטרודה כדי מאוחר יותר לאמת בהיסטולוגיה12, אך טכניקה זו סובלת החסרונות אותו עם היסטולוגיה קונבנציונלי.
כאן, אנו מתארים מעמיק שיטת תיאר לאחרונה13 בהתבסס על צביעת טכניקות מיקרוסקופ אלקטרונים (EM) ו רנטגן טומוגרפיה ממוחשבת (מיקרו-CT) מכמתת נגעים, מאתרת אלקטרודות במוח בעל חיים קטן יותר הנוכחי שיטות. מיקרו-CT היא טכניקת הדמיה שבו צילומי רנטגן הם ירו מדגם מסובבת 360° בזמן scintillator אוספת את צילומי הרנטגן לא מוסח על ידי המדגם. התוצאה היא שחזור תלת-ממד דיגיטלית ברזולוציה גבוהה של המדגם שניתן דמיינו בכיוון כלשהו או לכמת במדויק. מוסדות אקדמיים רבים יש מיקרו-CT סורקים, אשר הינם גם זמינים מסחרית.

<table><tbody><tr><td>Paraformaldehyde (PFA)</td><td>מדעי מיקרוסקופיה אלקטרונית (EMS)</td><td>15710</td><td>2% (w/v/) ב-1X PBS</td></tr><tr><td>Glutaraldehyde (GA)</td><td>EMS</td><td>16220</td><td>2.5% (w/v) GA ב-1x PBS</td></tr><tr><td>OsO4</td><td>EMS</td><td>19190</td><td>עבודה במכסה אדים</td></tr><tr><td>אתנול</td><td>Decon Labs</td><td>Koptec</td><td>140, 190, 200 הוכחה</td></tr><tr><td>אצטון</td><td>EMS</td><td>10015</td><td></td></tr><tr><td>שרף Durcupan ACM</td> מזוקק זכוכית <td>Sigma-Aldrich</td><td>44610</td><td>רכיבי A, B, C ו-D, שרף להטמעה</td></tr><tr><td>תבניות חד פעמיות</td><td>Ted Pella</td><td>27114</td><td>מים מיליQ מומלצים</td></tr><tr><td>(מים טהורים במיוחד)</td> <td>Millipore Sigma</td><td>QGARD00R1 (או מטהר קשור)</td><td></td></tr><tr><td>פרפילם מוצע (סרט פרפין)</td><td>Millipore Sigma</td><td>P7793</td><td>סרט פרפין מוצע</td></tr><tr><td>סורק מיקרו-CT</td><td>ניקון מטרולוגיה בע"מ, טרינג, בריטניה</td><td>X-Tek HMS ST 225</td><td>בשימוש על ידי מחברים</td></tr><tr><td><חזק>תוכנה להדמיה וניתוח סריקות מיקרו-CT: גרפיקה </חזקה></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td>נפח</td><td>VG Studio Max</td><td>בשימוש על ידי מחברים</td></tr><tr><td></td><td>FEI / Thermo Scientific</td><td>Avizo</td><td>בשימוש על ידי מחברים</td></tr><tr><td></td><td>FEI / Thermo Scientific</td><td>אמירה</td><td>דומה לאביזו</td></tr><tr><td></td><td>מארק סאטון & ראסל גרווד</td><td>ספירס</td><td>חינם, http://spiers-software.org/</td></tr> <tr><td></td><td>Pixmeo Sarl</td><td>Osirix Lite</td><td>Free, https://www.osirix-viewer.com/</td></tr> <tr><td></td><td>קוד פתוח</td><td>FIJI</td><td>Free, https://fiji.sc/</td></tr> <tr><td></td><td>Adobe</td><td>Photoshop</td><td>טוב לניתוח פרוסה אחת בכל פעם</td></tr></tbody></table>

שיטה המבוססות על מיקרו-ct אפיון נגעים ואיתור אלקטרודות במוח בעלי חיים קטנים

A Micro-CT-based Method for Characterizing Lesions and Locating Electrodes in Small Animal Brains

אימות מיקום הנגע, אלקטרודה נעשים באופן מסורתי באמצעות היסטולוגית בחינת פרוסות המוח מוכתם, הליך גוזלת זמן זה דורש הערכה ידנית. כאן, אנו מתארים שיטה פשוט, פשוט לכימות נגעים ואיתור אלקטרודות במוח פחות מייגעת, מניבה תוצאות מפורטות יותר. כל המוח הן מוכתמות אוסמיום ארבע-חמצני, המוטבעות שרף, עם תמונה עם סורק מיקרו-CT. הסריקות לגרום בכמויות דיגיטלית תלת-ממד של המוח עם רזולוציות, סעיף וירטואלי עוביים תלויים גודל המדגם (מיקרומטר 12-15 ו- 5 – 6 לכל voxel עכברוש, זברה פינק המוח, בהתאמה). נגעים משטח עמוק ניתן לאפיין, יחיד tetrodes, tetrode מערכים, נגעים electrolytic ואני גם יכול להיות מקומי סיליקון הגששים. תוכנה חופשית, הקניינית מאפשרת ניסויים לבחון האחסון מדגם של כל מטוס, קטע עוצמת הקול באופן ידני או אוטומטי. כי שיטה זו יוצרת נפח כל המוח, נגעים ואלקטרודות ניתן לכמת את רמה גבוהה יותר מאשר בשיטות הנוכחי, אשר יסייע לתקנן השוואות בתוך ועל -פני לימודי.

באופן מסורתי, המוח למחלקה, צבעונית על מנת לכמת נגעים ולאתר אלקטרודות, אך שיטה זו מועדת לשגיאות שדורשת, בדרך כלל דורש הערכה של התוצאות. על-ידי הכנת כל המוח עבור מיקרו-CT הדמיה, הקטינה באופן משמעותי ההסתברות של פגיעה הדגימות, תכונות של הריבית עשויה להיות מנותח בהקשר של המוח כולו, השיטה משאיל את עצמו כדי עיבוד מקבילי של דגימות רבות, במידה ניכרת זירוז הכנת הדוגמא.
השיטה כוללת ארבעה שלבים עיקריים: (1) צביעת מוח perfused עם אוסמיום אר...

מאמר זה מתאר שיטה פשוטה כדי להתכונן מוח בעל חיים קטן מיקרו-CT הדמיה, פצעים אשר ניתן לכמת, אלקטרודות הממוקם עם דיוק גבוהה בהקשר של המוח כולו.

שיטה המבוססות על מיקרו-CT אפיון נגעים ואיתור אלקטרודות במוח בעלי חיים קטנים

Lesion and electrode location verification are traditionally done via histological examination of stained brain slices, a time-consuming procedure that ...

שיטה זו יכולה לסייע לענות על שאלות מפתח בתחום מדעי המוח על ידי מתן שיטה פשוטה יותר, פחות נוטה לשגיאות, ושיטה כמותית יותר לאימות נגעים ואיתור מיקומי אלקטרודה. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שהיא מאפשרת אימות של נגעים ואתרי אלקטרודה במוח כולו ללא צורך בניתוח. המוצר הסופי הוא נפח תלת-מימדי דיגיטלי של המוח ומוחות מרובים יכולים להיות מעובדים במקביל.למרות שיטה זו יוכח בחולדה, זה יכול להיות מיושם גם על אורגניזמים אחרים, כגון עכברים פרושים זברה. בדרך כלל, אנשים חדשים בשיטה זו יתקשו כי כמה צעדים דורשים טיפול מסוים כדי להבטיח את התוצאות הטובות ביותר. כדי להתחיל, למקם מוח שחולץ בתת פתרון שפע בצינור חרוט 50 מיליליטר.אחסן את הדגימה במשך יומיים עד שלושה עם רעידות עדינות בארבע מעלות צלזיוס. ודא כי אוסמיניום מדולל במים ולא חיץ. הסיבה לכך היא כי המים יפעלו כמו דטרגנט מתון, המאפשר אוסמיניום לחדור עמוק לתוך הרקמה.הכינו 50 מיליליטר של 2% אוסיום טטרוקסיד במים מזוקקים כפולים. ואז למקם את המוח בצינור חרוט חדש 50 מיליליטר ולהוסיף את פתרון אוסיום tetroxide. סגור את הצינור ואתום אותו עם סרט פרפין כדי למנוע דליפות.אחסן את הצינור האטום בארבע מעלות צלזיוס עם רעידות עדינות במשך שבועיים. ודא כי הצינור ממוקם אופקית. המוח עבה מאוד ודרכים ארוכות לנסוע על ידי דיפוזיה.הצבת הצינור אופקית תאפשר לאוסמיניום לנוע עמוק יותר לתוך הרקמה. לאחר הדגירה מדגם במשך שבועיים, לשטוף אותו עם מים מזוקקים פעמיים חמש פעמים כדי להסיר את כל osmium tetroxide מאוגד מהדגימה. לאחר מכן, לשטוף את המדגם עם מים מזוקקים כפול במשך 30 דקות בארבע מעלות צלזיוס.החלף את המים מזוקקים כפול עם ארבעה דילול של אתנול כדי לייבש את המדגם. כדי להתחיל את תהליך חדירת שף, להעביר את המדגם דרך שלושה אצטון ושלושה דילולים אצטון שף, ולאחר מכן לטבול את המדגם ב 100% שף בטמפרטורת החדר כדי להמשיך את תהליך החדירה. לאחר מכן, להעביר את הדגימה לתבנית חד פעמית.להחדיר את המדגם עם טרי 100% שדון במשך ארבע שעות בטמפרטורת החדר. דגה את הדגימה בתנור ואקום במשך 15 דקות ב 45 מעלות צלזיוס. ואז לרפא את הדגימה בתנור במשך 48 שעות ב 60 מעלות צלזיוס.לבסוף, כאשר המדגם סיים לרפא, לקלף את התבנית החד פעמית ולסרוק אותו עם מכונת מיקרו CT. בניתוח מסורתי, יש לציין מראש את כיוון המוח. באמצעות שיטת מיקרו-CT זו, ניתן לתפעל את הנפח הדיגיטלי של המוח המדגם בשלושה ממדים ולמעשה לחתוך אותו לכל כיוון.סריקת מיקרוסקופ אלקטרונים של מוח החולדה המוכן מאשרת כי הרקמה לא נפגעה באופן משמעותי לצורך הדמיית מיקרו-CT. מוח פרוש זברה היה גם מוכן נסרק על פי פרוטוקול זה כדי לבדוק את התועלת של שיטה זו על מוחות בעלי חיים קטנים אחרים. טכניקה זו יכולה לשמש כדי למצוא נגעים פני השטח במוח, כמו גם נגעים עמוק בתוך המוח.טכניקה זו יכולה להיות מיושמת גם על המיקום של טטרודים בודדים במקום, נגעים אלקטרוליטיים, מסלולי אלקטרודה, מערכי טטרודה במקום, ובדיקות סיליקון במקום. בעת ניסיון הליך זה, חשוב לזכור לאפשר למוח דגירה מספיק זמן עם מספיק תסיסה. בעקבות הליך זה, ניתן לבצע שיטות אחרות כמו אופטוגנטיקה והדמיה של שני פוטון על מנת לענות על שאלות נוספות על התפקיד של אזורי מוח שונים בהתנהגויות שונות.טכניקה זו יכולה לאפשר לחוקרים בתחום מדעי המוח לחקור טוב יותר את יחסי המבנה-תפקוד בין המוח להתנהגות בחולדות, עכברים, ציפורי שיר ובעלי חיים קטנים אחרים. אל תשכח כי עבודה עם אוסמיניום יכול להיות מסוכן מאוד אמצעי זהירות, כגון ללבוש כפפות ולעבוד במכסה המנוע ואקום תמיד צריך לקחת בעת ביצוע הליך זה.

a-micro-ct-based-method-for-characterizing-lesions-locating

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

הסרטון מדגים הליך להשתלת יחידת אלקטרודה רב-ערוצית דו-ערוצית אלחוטית במוח חולדה כדי להקליט ולעורר רשתות עצביות רב-ערוציות.

השתלת מערכת מיקרואלקטרודות דו-כיוונית אלחוטית במוח של חולדה

מקור: Choi, J. P.  ואחרים. אינדוקציה והדמיית מיקרו-CT של מומים במערות המוח במודל עכבר. J. Vis. exp. ( 2017)} סרטון זה מדגים את השימוש בהדמיית מיקרו-CT כדי להמחיש נגעים של מום מערות מוחי (CCM) במוח של עכבר. הוא מפרט את השלבים להכנת דגימה, הדמיה ושחזור תמונה תלת מימדית כדי להעריך את הצפיפות והמיקום של נגעי CCM ברקמת המוח.

הדמיית מיקרו-CT משופרת ניגודיות של נגעי מום במערות המוח במוח עכבר

כאן אנו מציגים שיטה היסטולוגית ללכיד, סימון, ניקוי אופטי, והדמית ממשק רקמת המוח השלם סביב microdevices המושתל כרוני ברקמת מוח מכרסם. תוצאות מהטכניקות הכוללות בשיטה זו הן שימושיות להבנת ההשפעה של-שתלים במוח חודרניים שונים ברקמות המקיפות אותם.

אפיון היסטולוגית שלם של Microdevices מוח מושתלים-ורקמה סובבת

פרוטוקול זה מדגים את תנאי הגיוס של מחלה מוחית מום חלול במודל של עכברים, שימושים חדות משופרת מיקרו טומוגרפיה כדי למדוד את הנגע הנטל. שיטה זו מגבירה את הערך של העכבר ויצר מודלים ללמוד את הבסיס המולקולרי של טיפולים פוטנציאליים חלול מום מוחי ומחלות אחרות כשאבדן.

אינדוקציה והדמיה מיקרו-CT של המוח מומים חלול במודל עכבר

בעוד שדימות מולטיפוטונים יעיל רק בעומקים מוגבלים מפני השטח של הרקמה, ניתן להשיג הדמיה ברזולוציה של 3 מיקרומטר בכל עומק באמצעות pCLE. כאן, אנו מציגים פרוטוקול לביצוע הדמיית pCLE למדידת דינמיקה מיקרו-וסקולרית בהיפוקמפוס של עכברי איקטל ועכברי בר.

In Vivo Fiber-Coupled Pre-Clinical Confocal Laser-Scanning Endomicroscopy (pCLE) של נימי היפוקמפוס בעכברים ערים

כאן נתאר תהליך ניקוי רקמות, תיוג פלורסנט של הדמיה בקנה מידה גדול של רקמת מוח העכבר המאפשרת, ובכך, ויזואליזציה של הארגון תלת מימדי של סוגי תאים בתוך קליפת.

הדמיה תלת מימדי בקנה מידה גדול של ארגון הסלולר קליפת העכבר

כאן, אנו מציגים שיטה להערכת ביצועים ובטיחות ארוכת טווח של מערכי אלקטרודות תת-דוראליות רכות במודל מיני-חזיר, המתארת שיטות וכלי ניתוח, דימות תהודה מגנטית לאחר הניתוח, אלקטרופיזיולוגיה של קליפת המוח השמיעתית, תכונות אלקטרוכימיות של השתל ואימונוכימיה לאחר המוות.

השתלת מערך אלקטרוקורטיקוגרפיה רכה תת-דוראלית (ECoG) ורישום קליפת המוח לטווח ארוך במיני-חזירים

מחקר זה מתאר את השלבים להשגת תמונות ברזולוציה גבוהה של מוחות עכבר בילודים על ידי שילוב טומוגרפיה מיקרו-ממוחשבת (micro-CT) וסוכן ניגוד בדגימות ex vivo . אנו מתארים ניתוחים מורפומטריים בסיסיים כדי לכמת את גודל המוח וצורתו בתמונות אלה.

הדמיית מיקרו-CT וניתוח מורפומטרי של מוחות יילודים בעכברים

אנו מתארים פרוטוקול להערכת עקומות מנה-תגובה לגירוי חוץ-גולגולתי במונחים של מדידות שדה חשמלי במוח וזרימת דם רלוונטית של סמן ביולוגי-מוחי. מכיוון שפרוטוקול זה כולל החדרת אלקטרודות פולשניות למוח, יש צורך בהרדמה כללית, כאשר נשימה ספונטנית עדיפה על פני נשימה מבוקרת.

מיקום אלקטרודות מעוררות חוץ-גולגולתיות ומדידת זרימת דם מוחית ושדות חשמליים תוך גולגולתיים בעכברים מורדמים

מערכת הקלטה אלקטרואנצפלוגרפית בעלות נמוכה בשילוב עם סליל בגודל מילימטר מוצעת להניע גירוי מגנטי טרנס-גולגולתי של מוח העכבר in vivo. באמצעות אלקטרודות בורג קונבנציונליות עם מצע מערך מותאם אישית, גמיש ורב-אלקטרודות, ניתן לבצע הקלטה מרובת אתרים ממוח העכבר בתגובה לגירוי מגנטי טרנס-גולגולתי.

מערכת הקלטה אלקטרואנצפלוגרפית בעלות נמוכה בשילוב עם סליל בגודל מילימטר כדי לגרות באופן טרנס-גולגולתי את מוח העכבר in vivo

כאן, אנו מציגים שני פרוטוקולים לרישום מיקרו-אלקטרוקורטיקוגרפיה בצפיפות גבוהה (μEcoG) בחולדות ועכברים, כולל שיטות כירורגיות, השתלה והקלטה. הקלטות μECoG מבוצעות בשילוב עם הקלטת פוליטרודה למינרית בקליפת המוח השמיעתית של החולדה או עם מניפולציה אופטוגנטית של פעילות עצבית בקליפת המוח הסומטוסנסורית של העכבר.

חקירות רב-ממדיות של עיבוד קליפת המוח על ידי שילוב פוליטרודים למינאריים ואופטוגנטיקה עם מיקרו אלקטרוקורטיקוגרפיה במכרסמים

למד שיטת הכנה של מוחות בעלי חיים קטנים לדימות micro-CT ללא צורך בחיתוך. השיטה מאפשרת אפיון מדויק של נגעים ואיתור אלקטרודות תוך שמירה על שלמות הרקמה.

שיטה המבוססות על מיקרו-CT אפיון נגעים ואיתור אלקטרודות במוח בעלי חיים קטנים

גלה סרטונים נוספים