13 ביוני 2025
הפרוטוקול מתאר כיצד למדוד היפרלגזיה בברך בעכברים. אנו מראים דוגמאות במודלים של עכברים לכאבי ברכיים חריפים כמו גם במודלים של דלקת מפרקים ניוונית (OA).
פיתחנו בדיקות כאב רלוונטיות לתרגום בעכברים עם אוסטיאוארתריטיס ברך ניסיוני מתקדם כדי לשפר את ההבנה של המנגנונים שמאחורי כאבי מפרקים. לאנשים עם אוסטיאוארתריטיס יש גם סף לחץ כאב נמוך יותר. השיטה עמידה וניתנת לשחזור ומציעה גישה בינונית-תפוקה לבדיקת ההשפעות האנלוגיות האפשריות של תרכובות חדשות המנוהלות מערכתית או תוך-מפרקית.
אני מעוניין לחקור חרדה הקשורה ל-OA ניסיוני פרוגרסיבי. אנו מפתחים בדיקות לחקור את הקשר בין חרדה לכאב OA ולאפשר חקירת מנגנונים בסיסיים. כדי להתחיל, חבר כבל ממכשיר ה-PAM למחשב. חבר את הכבל השני מהמכשיר למתמר הכוח.
עכשיו, תדליק את המחשב ותפעיל את תוכנת ה-PAM. הגדר את ערך הלחץ המרבי בתוכנה ל-450 גרם. לאחר מכן, השאירו את העכברים בחדר הבדיקה ל-15 עד 30 דקות עד שיתרגלו ויתייצבו.
תוודא שהעכבר רגוע ורגוע כשהוא קשור. אם לא, תחזיר אותו לכלוב ותדחה את הבדיקה בכמה ימים. להחזיק את העכבר ביד שמאל, להגב ולהחזיק את הזנב בחוזקה עם האצבעות הרביעית והחמישית.
מעבירים את אצבע המורה של היד הימנית דרך קשירות הטרנסדוסר ומכניסים את האצבע עם המתמר לשקית פלסטיק שקופה. עכשיו, עם האגודל והאצבע האמצעית הימנית, תחזיק את הרגל הימנית. הצמיד בעדינות את כף הרגל לתוך התנר של יד שמאל בעזרת האצבע האמצעית.
ודאו שהברך ממוקמת בכיפוף של כ-90 מעלות בתחילת הבדיקה. לאחר מכן, נגעו בצד הצידי של הברך עם האגודל הימני ובצד המדיאלי של הטרנסדוסר עם האצבע המורה. הפעילו לחץ על הברך באיטיות, ואז הפעילו כוח מוגבר בקצב של 30 גרם לשנייה.
המשיכו להעלות את הלחץ באופן רציף עד שמגיעים ל-450 גרם לשנייה או עד שהעכבר מראה התנהגויות הקשורות לכאב, כמו קולות, עוויתות שרירים, זזיות גוף או תנועות שפם. כאשר הגעה לסף, משך את האצבע עם הטרנסדוסר. הקלט את הלחץ המוצג על המסך.
הזרקה תוך-מפרקית של Pam3CSK4 בעכברים גרמה להיפראלגזיה בברך באופן תלוי במינון, שהגיעה לשיא ארבע שעות לאחר ההזרקה וחזרה למצב הבסיסי ב-24 שעות. הזרקה תוך-מפרקית של לידוקאין בשיא של ארבע שעות הפכה את ההיפראלגזיה בברך שנגרמה על ידי Pam3CSK4 בתוך 30 דקות. ניתוח DMM גרם להיפראלגזיה בולטת בברך שבועיים לאחר הניתוח, והחלמה לאט לאט לאורך שבוע 16.
עכברים שניתחו בשמה פיתחו גם הם היפראלגזיה ברך בולטת לאחר הניתוח, אך היפראלגזיה של הברך החלימה מהר יותר. הזרקה תוך-מפרקית של לידוקאין ארבעה שבועות לאחר ניתוח DMM גרמה להיפוך מיידי של היפראלגזיה בברך בתוך 30 דקות, כאשר ההשפעה פחתה בארבע שעות.
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים
מחקר זה מציג פרוטוקול למדידת היפרלגזיה בברכיים במודלי עכבר, תוך התמקדות ספציפית בכאבי ברך חריפים ודלקת מפרקים ניוונית (OA). השיטות שפותחו מספקות תובנות לגבי המנגנונים העומדים בבסיס כאבי מפרקים ומאפשרות בדיקה של תרכובות חדשות.
Quantitative assessment of knee hyperalgesia in mice using pressure application measurement (PAM) enables robust evaluation of peripheral sensitization and pain-related behaviors in preclinical arthritis models. This standardized assay supports predictive confidence in pain mechanism studies and pharmacological intervention testing, directly informing early-stage analgesic discovery and target validation. Its reproducibility and sensitivity to drug effects position it as a critical tool for portfolio triage and translational alignment in pain and osteoarthritis research.
The PAM-based knee hyperalgesia assay integrates into the discovery-to-preclinical continuum, supporting both early mechanistic studies and downstream compound evaluation.