Summary
الجزئي تشريح الدماغ الفئران في مناطق مختلفة من المهم للغاية لدراسة الأمراض العصبية المختلفة. هذا الفيديو يوضح الدقيقة تشريح الدماغ أربع مناطق رئيسية تشمل البصلة الشمية ، اللحاء الجبهي ، والمخطط الحصين في الفئران الطازجة أنسجة المخ. يتم إعطاء النصائح المفيدة لإزالة سريعة للمناطق المعنية لتفادي تدهور RNA والبروتين من الأنسجة.
Abstract
الجزئي تشريح الدماغ الفئران في مناطق مختلفة من المهم للغاية لدراسة الأمراض العصبية المختلفة. هذا الفيديو يوضح الدقيقة تشريح الدماغ أربع مناطق رئيسية تشمل البصلة الشمية ، اللحاء الجبهي ، والمخطط الحصين في الفئران الطازجة أنسجة المخ. يتم إعطاء النصائح المفيدة لإزالة سريعة للمناطق المعنية لتفادي تدهور RNA والبروتين من الأنسجة.
Protocol
الخطوة 1
التضحية الفئران وفقا للبروتوكولات المعمول بها. إزالة المخ من الجمجمة وشطفه في الجليد الباردة تعامل DEPC ملي س بالماء لإزالة أي دم السطح.
الخطوة 2
مكان على صفيحة معدنية باردة. قطع نصف الدماغ ثنائية في نصف الكرة اليمين واليسار.
الشكل 1. مواقف قطاعات من الرأي الإنسي لنصف الكرة الفئران
الخطوة 3
جمع البصلة الشمية مباشرة بعد أول خطوة من نوعها. فلاش تجميد العينة في النيتروجين السائل وتخزينه في -80 درجة مئوية.
الشكل 2. تشريح البصلة الشمية
الخطوة 4
جمع الحق القشرة الأمامية بعد خفض الثانية ، باستخدام شفرة وملقط دومون رقم 5. فلاش تجميد العينة في النيتروجين السائل وتخزينه في -80 درجة مئوية.
الشكل 3. القشرة الأمامية التشريح
الخطوة 5
جمع المخطط (نواة المذنب) اليمين بعد قطع الثالث مع بمساعدة اثنين من ملقط No.5 دومون. فلاش تجميد العينة في النيتروجين السائل وتخزينه في -80 درجة مئوية.
الشكل 4. المخطط (نواة المذنب) تشريح
الخطوة 6
لجمع الحصين ، وطرح الجانب البطنية من الدماغ وحتى ذلك الحين إزالة المخ الأوسط لكشف الحصين. تشريح الحصين من القشرة باستخدام اثنين دومون ملقط No.5. فلاش تجميد العينة في النيتروجين السائل وتخزينه في -80 درجة مئوية.
الشكل 5. تشريح الحصين
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
مناطق الدماغ المختلفة اقترانه الأمراض العصبية المختلفة. على سبيل المثال ، القشرة الأمامية والمخطط تتصل مع مرض باركنسون ق الحصين حين يتعلق بمرض الزهايمر. دقة متناهية الصغر تشريح الدماغ يتيح لنا الكشف عن التغيرات مرنا والبروتين في المنطقة المريضة بشكل أكثر دقة.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
وقد تم التعامل مع هذه الحيوانات وفقا لبروتوكول لاستخدام الحيوانات في البحوث التي وافقت عليها اللجنة بشأن استخدام حيوانات حية في التدريس والبحث (CULATR) في جامعة هونج كونج وفقا للمعاهد الوطنية للصحة المبادئ التوجيهية للاستخدام الحيواني.
Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Microscope | Olympus Corporation | ||
Dissection tools | Metal plate, forceps, blade, etc. Individually wrapped with aluminum foil and heated at 180oC for eight hours to eliminate RNase. Made ice cold before use. |
References
- Palkovits, M. Maps and guide to micro-dissection of the rat brain. , Elsevier. New York. (c.1988).
- Swanson, L. W. Brain maps: structure of the rat brain. 3rd revised edition. , Elsevier Academic Press. (2004).