Articolo metodologico

Settembre 2013 - Questo mese in JoVE

2.2K visualizzazioni

⸱

3 settembre 2013

 , 

In questo articolo

Abstract

Ecco uno sguardo a ciò che sta arrivando nel numero di September 2013 di JoVE: The Journal of Visualized Experiments.

La palatogenesi (formazione del palato) coinvolge complessi processi di sviluppo che sono altamente regolati e conservati tra i vertebrati. Pertanto, gli scienziati utilizzano modelli di laboratorio come il pesce zebra per studiare la palatoschisi e le relative malformazioni dello sviluppo. Gfrerer et al. Esamina gli embrioni di zebrafish utilizzando la microscopia confocale time-lapse, che consente loro di osservare la migrazione delle cellule della cresta neurale cranica (CNCC) dal tubo neurale dorsale per formare strutture craniofacciali. Questo metodo consente anche l'imaging dal vivo dello sviluppo craniofacciale anomalo nel pesce zebra, che viene utilizzato per modellare condizioni come la palatoschisi nell'uomo.

In laboratorio, batteri, lieviti e molti altri tipi di cellule vengono comunemente coltivati in fiasche a scuotimento. Tuttavia, questa tecnica classica presenta molti inconvenienti che possono impedire una crescita ottimale, come le fluttuazioni del pH, della concentrazione di ossigeno, dei nutrienti e della temperatura. Nel JoVE Bioengineering, Obom et al. dimostrano un bioreattore da banco completo di una sonda di pH, una sonda di ossigeno, una bottiglia di alimentazione del reagente per reintegrare i terreni, controlli precisi della temperatura, un infusore di gas e una girante che agita la coltura. Questo sistema consente condizioni di coltura ottimali per la crescita su larga scala di sistemi di espressione ricombinanti.

Anche in JoVE Bioengineering, abbiamo un metodo per l'imaging di cellule vive in un saggio di adesione cellulare basato sul flusso. Ma a differenza dei protocolli standard che utilizzano sistemi a telecamera singola, il nostro metodo presentato è un sistema di suddivisione dell'emissione a doppia telecamera che cattura immagini in tempo reale in due canali di fluorescenza contemporaneamente. Carlson et al. Utilizzare un saggio di adesione della camera di flusso a piastre parallele per dimostrare questo sistema a doppia telecamera, che vengono utilizzati per studiare l'adesione, il rotolamento e altri comportamenti cellulari.

JoVE Chemistry presenta un modello animale non così comune: il pipistrello rosso orientale, che è diffuso negli Stati Uniti; tuttavia, negli ultimi anni, una malattia fungina chiamata sindrome del naso bianco (WNS) ha ucciso milioni di questi pipistrelli. La WNS è una grave minaccia per l'industria agricola, che si affida ai pipistrelli come forma di controllo naturale dei parassiti. Come altri mammiferi, i pipistrelli hanno ghiandole sebacee nella pelle che secernono sebo, un materiale oleoso che aiuta a proteggere dalle infezioni. Pannkuk et al. dimostrare un metodo per isolare il sebo dai capelli e dalla pelle del pipistrello, quindi analizzare la composizione lipidica del sebo utilizzando la cromatografia su strato sottile (TLC) combinata con la spettrometria di massa a tempo di volo di desorbimento/ionizzazione laser assistita da matrice (MALTI-TOF). Il profilo lipidico del sebo può influenzare i processi immunitari e può anche fungere da marcatori di malattia; pertanto, questo metodo fornirà informazioni vitali per il trattamento e la prevenzione delle malattie nel pipistrello rosso orientale e in altri mammiferi.

Hai appena dato un'occhiata ad alcuni punti salienti del numero September 2013 di JoVE. Visita il sito web per vedere gli articoli completi, oltre a molti altri, in JoVE: The Journal of Visualized Experiments.

Ristampe e permessi

Esplora altri articoli

Palate FormationPalatogenesisZebrafishCleft PalateCranial Neural Crest CellsTime-lapse Confocal MicroscopyBioreactorRecombinant Expression SystemsLive Cell ImagingCell Adhesion AssayDual Camera SystemEastern Red BatWhite Nose SyndromeNatural Pest ControlSebaceous GlandsSebum IsolationLipid Composition Analysis