Summary
रॉक्स-एन-वाई गैस्ट्रिक बाईपास (RYGB) मोटापे और मधुमेह के इलाज के लिए किया जाता है। हालांकि, RYGB की प्रभावकारिता अंतर्निहित तंत्र पूरी तरह से समझ में नहीं आ रहे हैं, और अध्ययन तकनीकी कठिनाई से सीमित हैं जिससे पशु मॉडलों में उच्च मृत्यु दर हो जाती है। यह लेख उच्च सफलता दरों के साथ चूहों में RYGB प्रदर्शन करने के तरीके पर निर्देश प्रदान करता है।
Abstract
रॉक्स-एन-वाई गैस्ट्रिक बाईपास (RYGB) आमतौर पर गंभीर मोटापे और टाइप 2 मधुमेह के इलाज के लिए किया जाता है। हालांकि, वजन घटाने और मेटाबॉलिक बदलावों का तंत्र अच्छी तरह समझ में नहीं आता है। कई कारकों को कम गरमी का सेवन, पोषक तत्वों के अवशोषण में कमी, तृप्ति में वृद्धि, तृप्ति को बढ़ावा देने वाले हार्मोन की रिहाई, पित्त एसिड चयापचय में बदलाव, और आंत माइक्रोबायोटा में परिवर्तन सहित एक भूमिका निभाने के लिए सोचा जाता है ।
चूहा RYGB मॉडल इन तंत्रों का अध्ययन करने के लिए एक आदर्श ढांचा प्रस्तुत करता है। माउस मॉडल पर पूर्व काम उच्च मृत्यु दर पड़ा है, 17 से ५२% से लेकर, उनके गोद लेने को सीमित । चूहा मॉडल सर्जिकल उत्तेजना के लिए अधिक शारीरिक रिजर्व का प्रदर्शन करता है और तकनीकी रूप से अपनाना आसान होता है क्योंकि वे सर्जिकल स्टेपलर के उपयोग के लिए अनुमति देते हैं। सर्जिकल स्टेपलर के साथ एक चुनौती यह है कि वे अक्सर एक बड़ी गैस्ट्रिक थैली छोड़ देते हैं जो मनुष्यों में RYGB का प्रतिनिधि नहीं है।
इस प्रोटोकॉल में, हम चूहों में एक RYGB प्रोटोकॉल पेश करते हैं जिसके परिणामस्वरूप सर्जिकल स्टेपलर का उपयोग करके एक छोटा गैस्ट्रिक पाउच होता है। दो स्टेपलर आग का उपयोग करना जो चूहे के वनोमाच को हटा देते हैं, हम एक विशिष्ट मानव RYGB के बाद एक छोटे गैस्ट्रिक पाउच प्राप्त करते हैं। सर्जिकल स्टेपलिंग भी तेज विभाजन की तुलना में बेहतर hemostasis में परिणाम है । इसके अतिरिक्त, चूहे के वनोमाच में कोई ग्रंथियां नहीं होती हैं और इसके हटाने से RYGB के शरीर विज्ञान में परिवर्तन नहीं होना चाहिए।
RYGB पलटन में वजन घटाने और मेटाबॉलिक परिवर्तन नकली पलटन की तुलना में महत्वपूर्ण थे, 14 सप्ताह में काफी कम ग्लूकोज सहिष्णुता के साथ । इसके अलावा, इस प्रोटोकॉल में RYGB के बाद 88.9% का उत्कृष्ट अस्तित्व है। इस प्रोटोकॉल में वर्णित कौशल पिछले माइक्रोसर्जिकल अनुभव के बिना प्राप्त किया जा सकता है। एक बार महारत हासिल होने के बाद, यह प्रक्रिया RYGB के तंत्र और प्रभावों का अध्ययन करने के लिए एक प्रजनन योग्य उपकरण प्रदान करेगी।
Introduction
मोटापा और टाइप 2 मधुमेह दुनिया भर में महामारी बन गए हैं1. हालांकि चिकित्सा वजन घटाने के रोगियों में मधुमेह में सुधार कर सकते हैं, गंभीर मधुमेह के साथ उन बैरिएट्रिक सर्जरी से सबसे अधिक लाभ । बैरिएट्रिक सर्जरी वजन घटाने और टाइप 2 मधुमेह 2,3 में सुधार या इलाज करने में सुरक्षित और प्रभावी साबित हुई है, यहां तक किलंबेसमय से चली आ रही बीमारी वाले लोगों में भी4। मेटाबोलिक बैरिएट्रिक प्रक्रियाएं, जैसे वर्तमान स्वर्ण-मानक रॉक्स-एन-वाई गैस्ट्रिक बाईपास (आरवाईजीबी) सर्जरी, ग्लूकोज होरोस्टेसिस में तेजी से और निरंतर सुधार को प्रेरित करती है, जबकि मधुमेह की दवाओं की आवश्यकता को भी कम करती है5,6,7।
RYGB के बाद, ग्लूकोज होरोस्टेसिस सुधार तेजी से होता है और वजन घटाने8से स्वतंत्र है। मेटाबोलिक सर्जरी के बाद होने वाले मधुमेह छूट से जुड़े मेटाबोलिक परिवर्तनों को समझाने के लिए दो प्रमुख सिद्धांतों का प्रस्ताव किया गया है । सबसे पहले, हिंदगुट परिकल्पना यह करती है कि, बाईपास के बाद, अपाच्य पोषक तत्वों की उच्च सांद्रता जीएलपी-1 जैसे हार्मोन की रिहाई को बढ़ाने वाली डिस्टल आंत तक पहुंचती है। दूसरी ओर, फोरगुट परिकल्पना से पता चलता है कि समीपस्थ आंत को दरकिनार करने से एंटी-इनक्रेटिन हार्मोन का स्राव कम हो जाता है। इन दोनों प्रभावों से ग्लूकोज चयापचय में शीघ्र सुधार हो सकता है9.
पशु मॉडल इन तंत्रों का अध्ययन करने के लिए एक शक्तिशाली उपकरण होने की क्षमता है। हालांकि, माउस या चूहा मॉडल का उपयोग करने में एक प्रमुख बाधा इन प्रक्रियाओं के प्रदर्शन में तकनीकी कठिनाई है। अधिकांश अध्ययनों में माउस या चूहे के मॉडल10 , 11,12पर भरोसा कियागयाहै । माउस मॉडल मुश्किल हो गया है क्योंकि माउस का पेट स्टेपलर उपकरणों का उपयोग करने के लिए बहुत छोटा है11,और मृत्यु दर अस्वीकार्य रूप से अधिक है, 17 से 52%13तक। चूहों में, पेट12,14को विभाजित करने से पहले गैस्ट्रिक जहाजों के जटिल बंधन के कारण कुछ प्रोटोकॉल तकनीकी रूप से कठिनरहतेहैं। अन्य मॉडल एक स्टेपलर का उपयोग करके पेट को विभाजित करते हैं लेकिन एक बड़ी थैली को पोस्ट RYGB मानव शरीर रचना विज्ञान11के अनुरूप नहीं छोड़ते हैं। इस मॉडल में, हम चूहे के मॉडल में रैखिक स्टेपलर का उपयोग करके RYGB का प्रदर्शन करने के बारे में विस्तृत निर्देश प्रदान करते हैं जिसके परिणामस्वरूप मानव शरीर रचना विज्ञान को ध्यान में रखते हुए गैस्ट्रिक पाउच अधिक होता है। कुल मिलाकर, यह प्रक्रिया उत्कृष्ट जीवित रहने की दरों और मेटाबोलिक परिणामों से जुड़ी थी।
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Protocol
पशु उपयोग प्रोटोकॉल अलबर्टा विश्वविद्यालय (AUP00003000) में स्वास्थ्य विज्ञान पशु देखभाल और उपयोग समिति द्वारा अनुमोदित किया गया । RYGB शरीर रचना विज्ञान का प्रदर्शन एक आरेख के लिए चित्रा 1 देखें ।
1. रॉक्स-एन-वाई गैस्ट्रिक बाईपास
- जानवरों और ऑपरेटिव सेटअप की तैयारी
- सर्जरी से एक सप्ताह पहले, चूहों को उनके ठोस आहार और पानी के अलावा मौखिक रिहाइड्रेशन थेरेपी और तरल आहार प्रदान करें ताकि उन्हें इस नए आहार में अनुकूलित किया जा सके।
- सर्जरी से पहले 12-18 घंटे के लिए पानी के लिए केवल उपयोग के साथ तेजी से चूहों ।
- सुनिश्चित करें कि चूहों को एक उठाए गए तार मंच पर उपवास किया जाता है ताकि वे बिस्तर सामग्री का उपभोग न कर सकें।
- सर्जरी से तुरंत पहले 1 मिलीग्राम/किलो की खुराक पर चमड़े के नीचे लंबे बुप्रेनोरफिन निरंतर रिलीज (एसआर) के साथ चूहों को इंजेक्ट करें।
- ऑटोक्लेव सभी सर्जिकल उपकरणों, तौलिए, और पर्दे।
- ऑपरेटिंग सतह, हीटिंग पैड, और संवेदनाहारी नाक शंकु 70% इथेनॉल के साथ साफ करें।
- ऑपरेटिंग सतह को ऑपरेटिंग माइक्रोस्कोप, एनेस्थेटिक मशीन के साथ सेट करें, और ऑपरेटिंग सर्जन के लिए एर्गोनोमिक तरीके से आपूर्ति करें।
- तापमान-विनियमित हीटिंग पैड का उपयोग करें और 37 डिग्री सेल्सियस तक सेट करें।
- हीटिंग पैड पर एक बाँझ कपड़ा या तौलिया रखें।
- 0.9% खारा के साथ एक 50 एमएल बाँझ शंकु ट्यूब भरें।
- एनेस्थेटिक इंडक्शन और तैयारी
- पहले से स्थापित प्रोटोकॉल15के अनुसार 4% आइसोफ्लुन का उपयोग करके संज्ञाहरण को प्रेरित करें ।
- यह सुनिश्चित करने के लिए सभी चार अंगों के हिंदफुट पर दबाव लागू करें कि कोई दर्द प्रतिक्रिया नहीं है।
- हर 5 मिनट के बाद पर्याप्त संज्ञाहरण और श्वसन दर की जांच करें।
- सूखने से रोकने के लिए दोनों आंखों पर स्नेहक लगाएं।
- पेट से बाल शेव करें।
- पेट को पोविडोन-आयोडीन के घोल से साफ करें। समाधान को सूखने दें, और बाँझ दस्ताने में बदलें।
- पेट को बेनकाब करने के लिए कपड़े में एक खोलने के साथ चूहे को कपड़ा।
- एक स्थान है कि प्रक्रिया के दौरान आसान पहुंच की अनुमति देता है में उपकरणों, टांके, कपास झाड़ू, और एक 10 मिलीएल सिरिंज रखें ।
- मीडियन लेप्रोटॉमी
- एक मील का पत्थर के रूप में जाइफोड प्रक्रिया के ठीक नीचे, स्केलपेल का उपयोग करके पेट के ऊपरी मिडलाइन में 3 सेमी चीरा लगाएं।
- कैंची का उपयोग करना, प्रावरणी और पेरिटोनम को विभाजित करें, रेकस एब्डोमिनस से रक्तस्राव को कम करने के लिए लाइना अल्बा पर मिडलाइन रहने की देखभाल के साथ। यदि रक्तस्राव हो रहा है, तो इसे थर्मल या इलेक्ट्रोक्यूटरी से नियंत्रित करें।
- पेट जुटाना
- दो गीले सूती झाड़ू का उपयोग करके, स्पष्ट रूप से गैस्ट्रिक अटैचमेंट को काटना।
- घने आसंजन का सामना करते समय, पेट को कोटिंग करने से बचने के लिए देखभाल के साथ गैस्ट्रिक अटैचमेंट को विभाजित करने के लिए थर्मल कॉटरी का उपयोग करें। पेट जुटाने के साथ जिगर के फाड़ के जोखिम को कम करने के लिए पेट और सहायक जिगर पालि के बीच स्नायु को तेजी से विभाजित करें।
- बड़ी रक्त वाहिकाओं के लिए, विशेष रूप से छोटी गैस्ट्रिक धमनियों में, 6-0 पॉलीप्रोपाइलीन सीवन का उपयोग करके लिगेट करें।
- घेघा के दाहिने डिस्टल साइड पर एक खिड़की बनाएं लेकिन बाएं गैस्ट्रिक धमनी के समीपस्थ। सुनिश्चित करें कि एक कपास झाड़ू पीछे से इस क्षेत्र में पहुंच सकता है। पेट पर्याप्त रूप से जुटाया जाता है जब इसे पेट के बाहर बाहरी किया जा सकता है।
- पहचानें और जेजुम विभाजित करें
- जेजुनम का पालन करके ट्रेइट्ज़ के स्नायु की पहचान करें जब तक कि यह ट्रांसवर्स मेसोकोलन से लगाव न हो जाए।
- 7 सेमी डिस्टली मापें, मेसेंटेरिक जहाजों के बीच एक स्थान की पहचान करें, और आंत्र को माइक्रो कैंची से विभाजित करें। आंत्र को विभाजित करते समय पीयर के पैच से बचें। केवल आंत्र को विभाजित करने का ध्यान रखें न कि मेसेंट्री को।
- संदूषण को कम करने के लिए आंत्र को विभाजित करने से पहले एक साफ, खारा लथपथ स्पंज रखें।
- छोटी आंत की सीमा पर मेसेन्ट्री में एक छोटे से क्रॉसिंग पोत की उपस्थिति की जांच करें और रक्तस्राव से बचने के लिए इसे कौटेरी के साथ विभाजित करें।
- मेसेंटेरी 1 सेमी को मेसेंटेरिक बेस की ओर विभाजित करना जारी रखें।
- समीपस्थ और डिस्टल जेजुम की पहचान करें। चूहे के दाईं ओर एक गीली धुंध के नीचे समीपस्थ जेजुनियम रखें और चूहे के बाईं ओर डिस्टल जेजुम रखें।
- पेट को स्टेपल करना
- एक छोटे पाउच बनाने के लिए वनोमाच की सफेद रेखा के पार 3.5 मिमी स्टेपल ऊंचाई के साथ 45 मिमी रैखिक काटने स्टेपलर डालें। स्टेपलर फायरिंग से पहले 10 एस का इंतजार करें।
- hemostasis सुनिश्चित करने के लिए 1 मिनट के लिए स्टेपल लाइनों पर धुंध का उपयोग कर दबाव रखें। यदि अकेले दबाव के साथ हेमोसेसिस प्राप्त नहीं किया जाता है, तो स्टेपल लाइन के साथ रक्तस्राव आठ टांके के 6-0 पॉलीप्रोपाइलीन फिगर का उपयोग करके अधिक होता है।
- पहले बनाई गई खिड़की में पेट भर में एक दूसरी स्टेपल आग प्रदर्शन करते हैं । स्टेपलर फायरिंग से पहले 10 एस का इंतजार करें। दबाव मुख्य रेखा के साथ आयोजित किया जाता है हेमेस्तासिस सुनिश्चित करने के लिए, और oversewing की जरूरत हो सकती है ।
- गैस्ट्रोजेजुनोस्टोमी
- पेट को स्टेपल करने के तुरंत बाद गैस्ट्रोटॉमी बनाएं। इस में देरी गैस्ट्रिक तनाव और आकांक्षा पैदा कर सकती है क्योंकि दूसरे गैस्ट्रिक स्टेपल के बाद पेट असतत है।
- 11-ब्लेड स्केलपेल का उपयोग करके, डिस्टल पाउच पर एक गैस्ट्रोटॉमी बनाएं। गैस्ट्रोटॉमी के माध्यम से गैस्ट्रिक सामग्री व्यक्त करें। यह गैस्ट्रिक डिस्टेंशन और आकांक्षा को रोकने के लिए महत्वपूर्ण है। लगभग 5 मिमी तक माइक्रो कैंची का उपयोग करके इस गैस्ट्रोटॉमी को लंबा करें। गैस्ट्रोटॉमी को कपास झाड़ू टिप के लिए पर्याप्त रूप से फिट करने के लिए बनाया जाता है।
- गैस्ट्रोटॉमी से सटे जेजुनम के डिस्टल एंड को लामबंद करें और ऐसी जगह दें कि मेसेंट्री मुड़ न जाए।
- एनास्टोमोसिस को टांका लगाते समय, यह सुनिश्चित करें कि आंत्र को नमकीन से लथपथ धुंध से ढककर नम रखा जाए और नियमित रूप से खारा फिर से लागू किया जाए।
- 6-0 पॉलीडिऑक्सायन या पॉलीप्रोपाइलीन सीवन का उपयोग करके, एनास्टोमोसिस के अवर मार्जिन पर रहने का सीवन रखें और एक तस्वीर का उपयोग करके धीरे-धीरे वापस लें। तीन समुद्री मील के साथ टाई।
- एनास्टोमोसिस के बेहतर मार्जिन पर रहने का सीवन रखें और धीरे-धीरे एक तस्वीर का उपयोग करके वापस लें। छह समुद्री मील के साथ टाई।
- एक निरंतर फैशन में एनास्टोमोसिस के पूर्वकाल पक्ष सीवन, काटने लेने के अलावा 1 मिमी चौड़ा और 1 मिमी देखभाल के साथ पीठ लेने से बचने के लिए ।
- एक बार सीवन अवर रहने सीवन तक पहुंच गया है, एक अतिरिक्त छह समुद्री मील के साथ इन एक साथ टाई ।
- एक बार पूर्वकाल पक्ष पूरा हो जाने के बाद, आंत्र और पेट को पलटें और मेसेंटेरिक दोष के माध्यम से अवर रहने वाले सीवन को पारित करें। तस्वीर को फिर से लागू करें और अवर रूप से वापस लें।
- एनास्टोमोसिस के पीछे की ओर के लिए, बैकसाइड लेने से बचने के लिए देखभाल के साथ, 6-0 टांके, 1 मिमी चौड़ा और दूरी 1 मिमी के अलावा पूरी मोटाई बाधित रखें। ये छह समुद्री मील के साथ बंधे हैं।
नोट: एनास्टोमोसिस के पूर्वकाल पक्ष को निरंतर फैशन में सुस्तित किया जाता है जबकि पीछे की ओर एक बाधित फैशन में किया जाता है। यह लगातार परिवर्ती बंद होने से जुड़े संभावित सख्ती या स्टेनोसिस को रोकता है। - एनास्टोमोसिस में चमकदार सामग्री को धीरे-धीरे धकेलकर रिसाव की जांच करें। यदि रिसाव वाले क्षेत्र हैं, तो उन्हें बाधित टांके के साथ सावधानीपूर्वक मजबूत करें। अतिरिक्त टांके के साथ मजबूत करते समय बैकवॉल लेने से बचने के लिए ध्यान रखें।
- जेजुनोजेजुतोटॉमी
- गैस्ट्रोजेजुनोस्टॉमी से, 20 सेमी डिस्टली को मापें।
- 11-ब्लेड स्केलपेल का उपयोग करके एंटाइमेंटेरिक साइड पर एक जेजूनोटॉमी बनाएं। पेयर के पैच पर जेजूनोटॉमी बनाने से बचें।
- माइक्रो कैंची का उपयोग करके इस जेजूटॉमी का विस्तार करें, जैसे कि यह बिलियोपैंक्रीटिक अंग के समान आकार का होता है। सुनिश्चित करें कि एक कपास झाड़ू बस के अंदर फिट बैठता है ।
- बिलियोपैंकीटिक अंग को इस तरह रखें कि मेसेंट्री की कोई घुमा-फिराकर न हो।
- बेहतर और अवर पक्षों पर 6-0 रहने टांके के साथ गैस्ट्रोजेजुनोस्टोमी के समान एनास्टोमोसिस का प्रदर्शन करें। पूर्वकाल की ओर निरंतर टांके के साथ किया जाता है जबकि पीछे की ओर बाधित टांके के साथ किया जाता है।
- सुनिश्चित करें कि इस एनास्टोमोसिस के दौरान खारा के साथ आंत्र नम रखा जाता है।
- एनास्टोमोसिस के माध्यम से चमकदार सामग्री को धीरे-धीरे धक्का देकर रिसाव की जांच करें। यदि रिसाव वाले क्षेत्र हैं, तो उन्हें बाधित टांके के साथ मजबूत करें।
- आंत्र और पेट को फिर से स्थापित करना
- सुनिश्चित करें कि थैली, अवशेष पेट, या जिगर की कोई घुमा नहीं है। सुनिश्चित करें कि जिगर की बाईं पालि पेट के पूर्वकाल है और थैली के पीछे फंस नहीं है क्योंकि यह संपीड़न जिगर इस्केमिया पैदा कर सकता है।
- पेट में आंत्र को अपनी प्राकृतिक स्थिति में रखें ताकि कोई घुमा न हो।
- पेट बंद
- फेसिया को लगातार फैशन में 3-0 पॉलीक्लैक्टिन के साथ बंद करें। 3-0 पॉलीडियोक्सनोन का भी इस्तेमाल किया जा सकता है।
- लगातार फैशन में 2-0 सिल्क के साथ स्किन को बंद कर दें।
- एनेस्थेटिक उद्भव
- शून्य करने के लिए आइसोफ्लुनाणे कमी लेकिन पूरक ऑक्सीजन जारी है।
- चीरा करने के लिए एक छप ब्लॉक के रूप में एक स्थानीय संवेदनाहारी प्रशासन।
- गर्दन के पीछे चमड़े के नीचे ऊतक में सामान्य नमकीन (D5NS) में चमड़े के नीचे 5% डेक्सट्रोस के 10 एमएल प्रशासन।
- चूहे के पूरी तरह से जागने से पहले एक एलिजाबेथ चूहा कॉलर रखें। इसे चुस्त रूप से फिट करने के लिए ध्यान रखें लेकिन असुविधा पैदा करने के लिए बहुत तंग न हों।
नोट: घाव की विहिसान को रोकने के लिए कॉलर को 5 दिन तक रखा जाता है।
2. शाम सर्जरी
नोट: शाम सर्जरी RYGB के समान किया जाता है, हालांकि, कोई एनास्टोमोस नहीं किया जाता है।
- एक गैस्ट्रोटॉमी बनाया जाता है और फिर 6-0 पॉलीडियोक्सानोन या पॉलीप्रोपाइलीन टांके के साथ बंद कर दिया जाता है।
- एक जेजूनोटॉमी को ट्रेइट्ज़ के स्नायु बंधन के लिए 7 सेमी डिस्टल बनाया जाता है और फिर 6-0 पॉलीडिआक्सानोन या पॉलीप्रोपाइलीन टांके के साथ बंद कर दिया जाता है।
3. पश्चात देखभाल
- पश्चात देखभाल
- घर चूहों व्यक्तिगत रूप से और उन्हें उठाया तार प्लेटफार्मों पर रखने के लिए जब तक ठोस भोजन बिस्तर और चमकदार बाधा की खपत को रोकने के लिए फिर से शुरू किया है ।
नोट: पश्चात आहार धीरे-धीरे फिर से शुरू होता है क्योंकि गैस्ट्रोजेजुनोस्टोमी में एडिमा ठोस आहार की जल्दी बहाली के साथ बाधा पैदा कर सकता है। - किसी भी त्वचा परिवर्तन के लिए चूहों उठाए गए तार प्लेटफार्मों पर हैं, जबकि दैनिक पैरों का निरीक्षण करें।
- चूहों को पहले 72 घंटे के लिए पानी और ओरल रिहाइड्रेशन थेरेपी डाइट पर रखें।
- पहले 72 घंटे के लिए हर 12 घंटे में D5NS की 10 एमएल प्रशासन।
- यदि चूहों को दर्द दिखाई देता है तो 0.01 मिलीग्राम/किलोग्राम पर चमड़े के नीचे कम अभिनय बुप्रेनोरफिन का प्रशासन करें। चूहा ग्रिमासे स्केल का उपयोग दर्द16के आकलन के लिए किया जाता है ।
- पश्चात दिन 3 पर, कृंतक तरल आहार जोड़ें। पानी और ओरल रिहाइड्रेशन थेरेपी प्रदान करते रहें।
- पोस्टऑपरेटिव दिन 5 पर, उच्च वसा वाले आहार को पुनः आरंभ करें। पानी और लिक्विड डाइट देना जारी रखें। एलिजाबेथ कॉलर हटा दें।
- पश्चात दिन 7 पर, तरल आहार बंद करें।
- पश्चात दिन 10-14 पर त्वचा टांके निकालें।
- घर चूहों व्यक्तिगत रूप से और उन्हें उठाया तार प्लेटफार्मों पर रखने के लिए जब तक ठोस भोजन बिस्तर और चमकदार बाधा की खपत को रोकने के लिए फिर से शुरू किया है ।
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Representative Results
पशु और आवास
३६ पुरुष Wistar चूहों जोड़े में रखे गए थे और ६०% बाँझ कृंतक उच्च वसा आहार छह सप्ताह की उंर(चित्रा 2)से शुरू खिलाया गया । 16 हफ्तों की उम्र में, उन्होंने RYGB या नकली सर्जरी की। पहले पोस्टऑपरेटिव वीक के बाद, चूहों को उच्च वसा वाले आहार पर फिर से शुरू किया गया था। चूहों के आधे 2 सप्ताह के बाद ऑपरेटिव पर इच्छामृत्यु थे और दूसरे आधे 14 सप्ताह के पश्चात में इच्छामृत्यु थे ।
मृत्यु दर
कुल मिलाकर, 33 (91.7%) चूहे नियोजित अध्ययन अंत बिंदु तक बच गए। जल्दी इच्छामृत्यु के दौर से गुजर सभी चूहों एक पशुचिकित्सा द्वारा necropsy से गुजरना पड़ा । 24 घंटे के भीतर दो चूहों को इच्छामृत्यु दी गई । एक RYGB आकांक्षा वायमोनाइटिस था और एक नकली चूहा unsalvageable आंत्र के साथ fascial dehiscence था । गैस्ट्रोजेजुनोस्टोमी से एनास्टोमोटिक रिसाव के कारण दो सप्ताह में एक और RYGB चूहा इच्छामृत्यु हो गया था। कुल मिलाकर, RYGB चूहों का 88.9% एंडपॉइंट का अध्ययन करने के लिए बच गया।
शरीर का वजन
RYGB के दौर से गुजर चूहों नकली चूहों की तुलना में एक कम पश्चात वजन था । चित्रा 3 चूहों के लिए पूर्ण वजन को पश्चात रूप से दर्शाता है जबकि चित्र 4 पश्चात प्रतिशत वजन परिवर्तन को दर्शाता है जो सभी टाइमपॉइंट पर सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण था। 14 हफ्तों में, चूहों जो RYGB था ६.४% का एक मतलब प्रतिशत वजन परिवर्तन किया था, जबकि नकली सर्जरी के साथ चूहों २३.७% (पी = ०.०००१) था ।
इंट्रापेरिटोनियल ग्लूकोज सहिष्णुता परीक्षण
उपवास रक्त ग्लूकोज किसी भी साथियों के बीच काफी अलग नहीं था। हालांकि, वक्र के तहत क्षेत्र 13 सप्ताह (18.1 बनाम 23.8 mmol-h/L, p=0.046, चित्रा 5)पर शाम के साथ तुलना में RYGB में काफी कम था, लेकिन 1 सप्ताह में RYGB बनाम शाम के लिए एक ही था (20.8 बनाम 23.3 mmol-h/L, p=0.68)।
चित्रा 1:रॉक्स-एन-वाई गैस्ट्रिक बाईपास शरीर रचना विज्ञान कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।
चित्रा 2:उच्च वसा आहार पर प्रीऑपरेटिव पूर्ण वजन; RYGB, रॉक्स-एन-वाई गैस्ट्रिक बाईपास कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।
चित्रा 3:उच्च वसा वाले आहार पर पश्चात पूर्ण वजन; RYGB, रॉक्स-एन-वाई गैस्ट्रिक बाईपास कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।
चित्रा 4:उच्च वसा वाले आहार पर पश्चात प्रतिशत वजन परिवर्तन; RYGB, रॉक्स-एन-वाई गैस्ट्रिक बाईपास कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।
चित्रा 5:13 सप्ताह में गैस्ट्रिक बाईपास बनाम नकली में इंट्रापेरिटोनियल ग्लूकोज सहिष्णुता परीक्षण। RYGB, रॉक्स-एन-वाई गैस्ट्रिक बाईपास कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।
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Discussion
RYGB में एक छोटे गैस्ट्रिक पाउच (30 एमएल से कम) का निर्माण और एक बिलियोपैंक्रिएटिक अंग और रॉक्स अंग(चित्र 1) कानिर्माण शामिल है। मनुष्यों में, बिलियोपैंक्रीटिक अंग आमतौर पर 30 से 50 सेमी होता है और गैस्ट्रिक अवशेष, यकृत और अग्न्याशय से स्राव का परिवहन करता है। रॉक्स अंग आमतौर पर लंबाई में 75 से 150 सेमी है और भोजन के लिए प्राथमिक चैनल है। आम चैनल शेष छोटे आंत्र डिस्टल है जहां दो अंग शामिल होते हैं और जहां पाचन और अवशोषण के बहुमत होते हैं, अग्नाशय एंजाइमों और पित्त के रूप में निगला भोजन17के साथ मिश्रण ।
RYGB में वजन घटाने का तंत्र मल्टीमॉडल है। छोटे गैस्ट्रिक पाउच यांत्रिक प्रतिबंध के माध्यम से भोजन का सेवन कम कर देता है। बाईपास के परिणामस्वरूप छोटी आंत का एक महत्वपूर्ण हिस्सा कैलोरी और पोषक तत्वों को अवशोषित नहीं कर रहा है। हाल ही में, अध्ययनों से पता चला है कि आंत हार्मोन RYGB के बाद वजन घटाने में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं। ये मुख्य रूप से ghrelin, पेप्टाइड-YY, कोलेसिस्टोकिनिन (सीसीएल) के माध्यम से कर रहे हैं, और जीएलपी-1 हार्मोन रास्ते18।
चूहा मॉडल RYGB के वजन और मेटाबोलिक प्रभावों दोनों के पीछे तंत्र का अध्ययन करने के लिए एक शक्तिशाली विधि प्रदान करते हैं। इस पेपर में, हम एक RYGB प्रोटोकॉल पेश करते हैं जिसमें महत्वपूर्ण वजन घटाने और मेटाबोलिक प्रभावों के साथ कम मृत्यु दर होती है। एक बार ऑपरेटर तकनीक से परिचित हो गया, प्रक्रिया प्रदर्शन करने के लिए लगभग ९० मिनट लग गए । प्रोटोकॉल को वजन घटाने और मेटाबोलिक प्रभाव को संभावित रूप से बढ़ाने के लिए लंबे समय तक बिलियोपैंक्रिएटिक और रॉक्स अंग लंबाई के साथ भी संशोधित किया जा सकता है। इसके अलावा, यह तकनीकी रूप से अन्य मॉडलों की तुलना में अधिक व्यवहार्य है क्योंकि यह सर्जिकल स्टेपलर्स के उपयोग को हेमेसिस को प्राप्त करने और ऑपरेटिव समय को कम करने की अनुमति देता है। मॉडल है कि स्टेपल के बिना पेट के तेज विभाजन पर भरोसा अक्सर महत्वपूर्ण रक्त हानि के कारण उच्च मृत्यु दर में परिणाम । प्रक्रिया करने के लिए आवश्यक तकनीकी कौशल प्राप्त करने के लिए अपेक्षाकृत आसान थे, और शिक्षार्थियों को आराम से लगभग पांच से दस गैर वसूली प्रक्रियाओं के बाद प्रक्रिया प्रदर्शन करने में सक्षम थे ।
इस प्रोटोकॉल के महत्वपूर्ण चरणों में से एक पेट के जुड़ाव के दौरान रक्त की कमी को सीमित करना है। जहाजों के सीवन लिगामेंट के साथ संयुक्त थर्मल कॉटरी का सावधानीपूर्वक उपयोग महत्वपूर्ण है। अनास्तोमोस की कम से कम आधी परिधि को बाधित तरीके से करना भी महत्वपूर्ण है। यह एनास्टोमोस पर अत्यधिक सख्ती को रोकता है। इसके अलावा, लीक के लिए जांच महत्वपूर्ण है के रूप में इन सेप्सिस और मौत के लिए नेतृत्व कर सकते हैं । पेट को बंद करने से पहले, यह आवश्यक है कि यकृत के बाएं पालि को इसकी प्राकृतिक, पूर्वकाल की स्थिति में रखा जाए और आंत्र या पेट में कोई रोटेशन न हो क्योंकि इससे आंत इस्केमिया हो सकता है।
पश्चात देखभाल इस प्रोटोकॉल के लिए महत्वपूर्ण है। उपवास और पश्चात दोनों अवधियों के दौरान उठाए गए तार प्लेटफार्मों की आवश्यकता होती है क्योंकि ठोस सामग्री की खपत से एनास्टोमिक बाधाएं होती हैं। चमड़े के नीचे तरल पदार्थ प्रदान करना महत्वपूर्ण है क्योंकि चूहे तत्काल पश्चात अवधि में मौखिक तरल पदार्थ बर्दाश्त नहीं कर सकते हैं। चूहों को मौखिक रिहाइड्रेशन थेरेपी और तरल आहार के लिए अनुकूलित किया जाना चाहिए क्योंकि चूहे पश्चात दर्द के साथ संघों के कारण नए आहार से बच सकते हैं। यह आहार प्रोटोकॉल दोनों RYGB और नकली साथियों में तत्काल पश्चात अवधि में महत्वपूर्ण वजन घटाने के लिए योगदान देता है, और नकली समूह में वजन वसूली के बारे में पांच सप्ताह लग गए । हालांकि, RYGB के बाद रुग्णता और मृत्यु दर को कम करने के लिए इस पश्चात प्रोटोकॉल का कड़ाई से पालन करना महत्वपूर्ण है। इसके अतिरिक्त, चूहा ग्रिमाइस स्केल का उपयोग करके चूहों की लगातार जांच रुग्णता के लिए पता लगाने के लिए महत्वपूर्ण है। हमारे अध्ययन में, एक चूहे ने देर से एनास्टोमोटिक रिसाव विकसित किया जिसे इस पैमाने का उपयोग करके तेजी से पता लगाया गया था और दुख को कम करने के लिए प्रारंभिक इच्छामृत्यु की अनुमति दी गई थी।
इस विधि के फायदों में से एक यह है कि यह गैस्ट्रिक रक्तस्राव को कम करने के लिए सर्जिकल स्टेपलर के उपयोग के माध्यम से एक छोटी थैली में परिणाम देता है। जब हमने बिना स्टेपलर के पेट को तेजी से विभाजित करने का प्रयास किया, तो इससे अत्यधिक रक्तस्राव होता है और मृत्यु दर बहुत अधिक होती है। हालांकि, इससे वनोमाच को भी हटाया जाता है, और इससे शारीरिक परिवर्तन हो सकते हैं जो मानव आरवाईजीबी से अलग हैं। हालांकि, वनोमाच कृंतक के लिए अद्वितीय है और इसमें कोई ग्रंथियां नहीं हैं, और आंत हार्मोन में कोई परिवर्तन नहीं होना चाहिए।
इस विधि की सबसे महत्वपूर्ण सीमा यह है कि इसके लिए प्रति चूहे दो सर्जिकल स्टेपलर रीलोड की आवश्यकता होती है, जो महंगा हो सकता है। हालांकि, उत्कृष्ट अस्तित्व के परिणाम संभावित रूप से एक अध्ययन के लिए कम चूहों की आवश्यकता के द्वारा लागत को कम करते हैं, जिसके परिणामस्वरूप पशुपालन सुविधाओं, शल्य चिकित्सा उपकरण और अनुसंधान कर्मियों का बेहतर उपयोग होता है।
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Disclosures
एथिकॉन ने दो 45 मिमी रैखिक काटने के स्टेपलर, कई 3.5 मिमी स्टेपलर रीलोड, और 6-0 पॉलीप्रोपाइलीन टांके की आपूर्ति की। लेखकों की घोषणा करने के लिए हितों के कोई अन्य संघर्ष नहीं है।
Acknowledgments
इस अध्ययन को अमेरिकन सोसायटी फॉर मेटाबोलिक एंड बैरिएट्रिक सर्जरी रिसर्च अवार्ड द्वारा वित्त पोषित किया गया था। एथिऑन ने शालीनता से टांके, स्टेपलर और क्लिप की आपूर्ति की। प्रमुख लेखक के डॉक्टरेट अनुसंधान में अलबर्टा चिकित्सक अन्वेषक कार्यक्रम और अलबर्टा नवाचार Clinician फैलोशिप के विश्वविद्यालय द्वारा वित्त पोषित किया गया था । हम भी RYGB शरीर रचना विज्ञान के अपने चिकित्सा चित्रण के लिए मिशेल ट्रान शुक्रिया अदा करना चाहते हैं ।
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 2-0 Silk Sutures | Ethicon | K533 | |
| 3-0 Vicryl Sutures | Ethicon | J219H | |
| 4% Isoflurane | N/A | N/A | |
| 5% Dextrose and 0.9% Sodium Chloride Solution - 1000 mL | Baxter | 2B1064 | |
| 50 mL Conical Centrifuge Tubes | Fisher Scientific | 14-432-22 | |
| 6-0 Prolene Sutures | Ethicon | 8805H | |
| Anesthetic Machine | N/A | N/A | |
| Animal Hair Shaver | N/A | N/A | |
| Betadine Solution | N/A | N/A | |
| Castrojievo Needle Holder with lock 14 cm (smooth curved) | World Precision Instruments | 503258 | |
| ECHELON FLEX Articulating Endoscopic Linear Cutter | Ethicon | EC45A | |
| Economy Tweezers #4 | World Precision Instruments | 501978 | |
| ENDOPATH ETS Articulating Linear Cutter 45mm Reloads | Ethicon | 6R45B | |
| Far Infrared Warming Pad Controller with warming pad (15.2 cm W x 20.3 cm L), pad temperature probe, and 10 disposable, non-sterile sleeve protectors | Kent Scientific | RT-0515 | |
| Large Rat Elizabethan Collar | Kent Scientific | EC404VL-10 | |
| Liquid Diet Feeding Tube (150 mL) | Bio-Serv | 9007 | |
| Liquid Diet Feeding Tube Holder (short adjustable) | Bio-Serv | 9015 | |
| Micro Mosquito Forceps | World Precision Instruments | 500452 | |
| Micro Scissors | World Precision Instruments | 503365 | |
| Mouse Diet, High Fat Fat Calories (60%), Soft Pellets | Bio-Serv | S3282 | |
| No. 11 Blade and Scalpel Handle | N/A | N/A | |
| OPMI Vario Surgical Microscope | ZEISS | S88 | |
| Raised Floor Grid | Tecniplast | GM500150 Raised Floor Grid | |
| Rodent Liquid Diet, Lieber-DeCarli '82, Control, 4 Liters/Bag | Bio-Serv | F1259 | |
| Sodium Chloride Irrigation 0.9% Solution - 500 mL | Baxter | JF7633 | |
| Sterile Cotton Swabs | N/A | N/A | |
| Sterile Drape | N/A | N/A | |
| Sterile Towel | N/A | N/A | |
| Thermal Cautery Unit | World Precision Instruments | 501293 |
References
- World Health Organization. Obesity and Overweight. , Available from: http://www.who.int/news-room/fact-sheets/detail/obesity-and-overweight (2018).
- Courcoulas, A. P., et al. Three-year outcomes of bariatric surgery vs lifestyle intervention for type 2 diabetes mellitus treatment. JAMA Surgery. 15213 (10), 1-9 (2015).
- Ardestani, A., Rhoads, D., Tavakkoli, A. Insulin cessation and diabetes remission after bariatric surgery in adults with insulin-treated type 2 diabetes. Diabetes Care. 38 (4), 659-664 (2015).
- Casella, G., et al. Ten-year duration of type 2 diabetes as prognostic factor for remission after sleeve gastrectomy. Surgery for Obesity and Related Diseases. 7 (6), 697-702 (2011).
- Panunzi, S., De Gaetano, A., Carnicelli, A., Mingrone, G. Predictors of remission of diabetes mellitus in severely obese individuals undergoing bariatric surgery. Annals of Surgery. 261 (3), 459-467 (2015).
- Edelman, S., et al. Control of type 2 diabetes after 1 year of laparoscopic adjustable gastric banding in the helping evaluate reduction in obesity (HERO) study. Diabetes, Obesity and Metabolism. 16 (10), 1009-1015 (2014).
- Mingrone, G., et al. Metabolic surgery versus conventional medical therapy in patients with type 2 diabetes: 10-year follow-up of an open-label, single-centre, randomised controlled trial. The Lancet. 397 (10271), 293-304 (2021).
- Thaler, J. P., Cummings, D. E. Minireview: Hormonal and metabolic mechanisms of diabetes remission after gastrointestinal surgery. Endocrinology. 150 (6), 2518-2525 (2009).
- Mingrone, G., Castagneto-Gissey, L. Mechanisms of early improvement / resolution of type 2 diabetes after bariatric surgery. Diabetes and Metabolism. 35 (6), 518-523 (2009).
- Arapis, K., et al. Remodeling of the residual gastric mucosa after Roux-en-Y gastric bypass or vertical sleeve gastrectomy in diet-induced obese rats. PloS One. 10 (3), 012414 (2015).
- Bruinsma, B. G., Uygun, K., Yarmush, M. L., Saeidi, N. Surgical models of Roux-en-Y gastric bypass surgery and sleeve gastrectomy in rats and mice. Nature Protocols. 10 (3), 495-507 (2015).
- Bueter, M., et al. Roux-en-Y gastric bypass operation in rats protocol. Journal of visualized experiments : JoVE. (64), (2012).
- Stevenson, M., Lee, J., Lau, R. G., Brathwaite, C. E. M., Ragolia, L. Surgical mouse models of vertical sleeve gastrectomy and Roux-en Y gastric bypass: a Review. Obesity Surgery. , (2019).
- Hao, Z., et al. Reprogramming of defended body weight after Roux-En-Y gastric bypass surgery in diet-induced obese mice. Obesity. 24 (3), 654-660 (2016).
- McErlane, S. Adult rodent anesthesia SOP. UBC Animal Care Guidelines. , Available from: https://animalcare.ubc.ca/sites/default/files/documents/ACC-01-2017_Anesthesia.pdf (2017).
- Sotocinal, S. G., et al. The Rat Grimace Scale: a partially automated method for quantifying pain in the laboratory rat via facial expressions. Molecular pain. , 1-10 (2011).
- Elder, K. A., Wolfe, B. M. Bariatric surgery: A review of procedures and outcomes. Gastroenterology. 132 (6), 2253-2271 (2007).
- Lim, R. B. Bariatric procedures for the management of severe obesity: Descriptions. UpToDate. , Available from: https://www.uptodate.com/ (2017).
