February 20th, 2011
مظاهرة للتصنيع واستخدام إلكترود شفط خارج الخلية المستخدمة لقياس التسجيلات الكهربية من الحبال القوارض الولدان الشوكي في المختبر
اسمي Hi.My ريش غاري دوري ، وأنا مساعد باحث في مختبر فاف التابع لمعهد سالك للدراسات البيولوجية. سأوضح لك اليوم كيفية تصنيع أقطاب شفط خارج الخلية باستخدام طريقتين. يمكن استخدام هذه الأقطاب الكهربائية لأخذ تسجيلات الفيزيولوجية الكهربية للحبل الشوكي في المختبر.
استخدم مصباح كحول كمصدر للحرارة لإذابة الأنابيب البلاستيكية PE 90 إلى العرض المطلوب. أمسك الأنبوب فوق اللهب المضاء وقم بإزالته عندما يبدأ في الذوبان ، وافصل الأطراف برفق عن بعضها البعض ، مع الحرص على عدم كسر المنتصف. يتم عرض هذه العملية مرة أخرى.
قم بإزالة الأنبوب لأنه يلين ويذوب ويفصل الأطراف برفق. قم بقص الأنبوب بشفرة حلاقة حادة عند نقطة تتوافق مع العرض التقريبي للعينة المراد قياسها في الطرف السميك للأنبوب. قم بعمل قطع بزاوية 45 درجة.
يجب الآن تثبيت حلقة وحشية على الطرف السميك. أدخل هذا الطرف من الأنبوب من خلال الفتحة السداسية للوحشي. ثم أدخل نهاية الأنبوب في الحلقة O المطاطية.
سيتم تثبيت هذا الإعداد في مقدمة القطب. قم بقص أنبوب صغير بطول سنتيمتر واحد من Zeus بشفرة حلاقة حادة وافحص الأطراف بحثا عن قطع نظيف وخنزير مفتوح قم بقص قطعة 10 سم من أنبوب PE 90 باستخدام شفرة حلاقة حادة. ضع قطرة من لحام JB على نقطة منتصف الأنبوب الصغير باستخدام شفط الفم.
ارسم الأنبوب الصغير واللحام في تجويف الأنبوب الكبير واترك هذا الإعداد يشفى بين عشية وضحاها. على الرغم من عدم عرضه ، يجب إجراء قطع بزاوية 45 درجة في الطرف السميك من هذا الأنبوب ، ويجب تثبيت حلقة وحشية على هذه النهاية. بنفس الطريقة الموضحة سابقا.
قمبفك قطب شفط قياسي قم بفك الوحشي من الواجهة الأمامية للقطب وموصل BNC من الخلف. يجب الآن عمل منفذ جانبي بزاوية منخفضة على جانب برميل القطب. قم بتسخين قطعة من المعدن باستخدام كعكة وموقد.
اضغط على المعدن الساخن في الفتحة الموجودة على جانب البرميل بزاوية منخفضة. قم بإزالة السلك الفضي من موصل BNC عن طريق سحب السلك حيث يلتقي بالموصل. انقع موصل BNC في الزيلين لمدة ساعة لإزالة الشمع.
بمجرد إزالة الشمع ، اشطف الموصل بالماء وجففه بالمناشف الورقية. قطع بطول 15 سم من الأسلاك الفضية. نقع السلك في المبيض لمدة 15 دقيقة.
ثم اشطفها وجففها بمنشفة ورقية. لحام السلك الفضي إلى موصل BNC. أدخل السلك الفضي في الطرف الخلفي لبرميل قطب الشفط ، واترك مساحة كافية لموصل BNC ليبقى على الجانب.
أدخل أنبوب الشفط في المنفذ الجانبي حوالي ثلاثة سنتيمترات. قم بحقن مادة مانعة للتسرب من السيليكون في الفتحة الخلفية لقطب الشفط مع منعه من الانسكاب من المنفذ الجانبي عن طريق تغطيته بإصبعك. قم بحقن مادة مانعة للتسرب من حوالي سنتيمترين إلى ثلاثة سنتيمترات في برميل القطب.
بمجرد الفشل ، قم بتثبيت موصل BNC بإحكام في مكانه ، مما سيدفع مانع التسرب إلى الأمام. دع المادة المانعة للتسرب تعالج بين عشية وضحاها. قم بربط الوحشية للأنبوب التي تم إنشاؤها إما بواسطة الطرف المسحوب أو طريقة طرف القطع في مقدمة استقامة القطب.
سيساعد الأنبوب في تخفيف السلك الفضي من خلال القطب الكهربائي المكتمل الآن. يتم وضع إعداد التسجيل داخل قفص فاراداي لتقليل التداخل الخارجي. تم وضع الإعداد الخاص بنا أيضا على طاولة هوائية للتخلص من التداخل الميكانيكي.
يتم تثبيت الأقطاب الكهربائية على معالجات دقيقة للحامل المغناطيسي وتوضع بالقرب من طبق التسجيل. يتم توصيل الكابلات المحورية BNC بمرحلة رأس متصلة بمكبر للصوت. يتم توصيل مكبر الصوت بمحول عرض بولي ، والذي يتم توصيله بالكمبيوتر.
يظهر هذا الإعداد عن قرب. يتم توصيل الكابلات المحورية BNC بمرحلة الرأس. مرحلة الرأس متصلة بمكبر الصوت.
يخرج خرج مكبر الصوت من قفص فاراداي ويتم توصيله بمحول عرض بولي. يتم توصيل محول العرض المتعدد بالكمبيوتر الذي تم تثبيت برنامج التسجيل المناسب عليه. يجب تأريض الإعداد بالكامل بشكل صحيح.
يتم إنشاء أرضية خارجية عن طريق توصيل قفص فاراداي وطاولة الهواء بالأرض. يتم إنشاء أرضية داخلية عن طريق توصيل طبق التشريح بمرحلة الرأس. من الضروري أيضا تأريض أبواب القفص إلى الجسم الرئيسي.
مع الإعداد المناسب يمكن الآن جمع البيانات. شكرا لك على مشاهدة هذا الفيديو ومساعدته في مساعدتك في تجاربك المستقبلية.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
توضح هذه المقالة تصنيع وتطبيق أقطاب الشفط خارج الخلية لقياس التسجيلات الكهربية الفسيولوجية من الحبل الشوكي للقوارض حديثي الولادة في المختبر. يتضمن العملية استخدام مصباح كحولي لإذابة أنابيب بلاستيكية في الشكل المطلوب.