Denne protokol beskriver en monolayer, serum-fri metode til effektivt at generere hepatocyte-lignende celler fra humane pluripotente stamceller (hPSCs) i 18 dage. Dette indebærer seks trin som hpscs sekventielt differentiere til mellemliggende celle-typer såsom primitive streak, definitive endoderm, posterior foregut og lever opløbet forfædre før dannelse hepatocyte-lignende celler.