February 23rd, 2024
Questo protocollo offre un quadro sistematico per la creazione di organoidi di carcinoma ovarico provenienti da diversi stadi di malattia e affronta le sfide della variabilità specifica del paziente per aumentare la resa e consentire una robusta espansione a lungo termine per le applicazioni successive. Include passaggi dettagliati per la lavorazione dei tessuti, la semina, la regolazione dei requisiti dei terreni e la colorazione in immunofluorescenza.
La migliore gestione clinica nella ricerca traslazionale all'avanguardia per le pazienti con carcinoma ovarico avanzato ha la massima priorità nel nostro istituto. Con la biobanca di organoidi derivati da pazienti, abbiamo compiuto importanti progressi verso una gestione personalizzata. Questo ci permette di valutare le caratteristiche specifiche del paziente e di identificare biomarcatori predittivi.
Negli ultimi anni abbiamo fatto progressi significativi nel migliorare la chirurgia multiviscerale radicale, la chemioterapia, la terapia anti-angiogenica e anche la terapia con inibitori di PARP in pazienti con carcinoma ovarico avanzato e abbiamo migliorato i tassi di sopravvivenza anche con questo. Ora, il prossimo grande passo sarebbe quello di prevedere meglio quale paziente trarrebbe beneficio da quale trattamento specifico. Attualmente, le decisioni terapeutiche cliniche si basano sulle caratteristiche istopatologiche generali e sulle informazioni sul deficit di raccomandazione omologa o testate in tessuto tumorale incluso in paraffina.
I modelli biologici che valutano le risposte specifiche alla chemioterapia e ai trattamenti mirati non sono ancora stati implementati nella routine clinica. Abbiamo identificato le caratteristiche chiave del tessuto del carcinoma ovarico, in particolare i requisiti di coltura necessari per sostenere il suo potenziale di rinnovamento in vitro, e utilizziamo queste conoscenze per ottenere una robusta crescita a lungo termine delle linee di organoidi e stabilire una biobanca da campioni in vari stadi della malattia. La nostra esperienza quotidiana nel biobanking degli organoidi del carcinoma ovarico mostra effettivamente una notevole eterogeneità nella biologia di questa neoplasia, che potrebbe aprire la strada a una nuova classificazione o fornire la base per nuove soluzioni terapeutiche mirate al potenziale di STEMI.
Questo protocollo fornisce un quadro sistematico per stabilire organoidi del cancro ovarico da varie fasi della malattia, affrontando la variabilità specifica del paziente per migliorare la resa e consentire un'espansione robusta a lungo termine. Include passaggi dettagliati per la lavorazione dei tessuti, l'innesto, gli aggiustamenti dei media e la colorazione immunofluorescente.