go to jove.com

HIGH SCHOOL

Biology

Science Experiments

Advanced Biology

This is a free preview. For full access

Immunology

Protein Pull-Down with Antibodies and Beads

Description

Immunoprecipitation uses antibodies and Protein A/G agarose beads to isolate a specific protein from a cell lysate. It is also called a pull-down assay. The term "immuno" refers to the antibody, and "precipitation" means pulling a substance out of solution.

The target protein ...

Transcript

免疫沈降(IP)は、タンパク質の特性評価やタンパク質間相互作用の研究のために、細胞や組織の溶解物、または体液から目的のタンパク質を単離するために広く使用されている手法です。

このプロセスは、標的タンパク質に対して高い親和性と特異性を持つ抗体から始まります。この抗体をサンプルと混合することで、抗体-標的複合体を形成できます。標的タンパク質に結合したタンパク質は、その過程で間接的に抗体に結合します。次に、溶液をアガロースビーズとインキュベートし、抗体の定常領域に対して強い親和性を持つ細菌タンパク質に結合させます。細菌タンパク質は抗体に結合し、抗体-標的複合体をビーズに結合します。次に、溶液を遠心分離してビーズを沈殿させ、それにより、結合抗体、標的タンパク質、および相互作用するタ...

Tags