ここでは、2013年9月号のJoVE: The Journal of Visualized Experiments』に掲載される内容をご紹介します。
口蓋形成(口蓋形成)には、脊椎動物間で高度に制御され保存されている複雑な発生過程が含まれます。したがって、科学者はゼブラフィッシュのような実験室モデルを使用して、口蓋裂と関連する発達奇形を研究しています。Gfrerer et al.タイムラプス共焦点顕微鏡を使用してゼブラフィッシュの胚を調べると、背側神経管から脳神経堤細胞(CNCC)が頭蓋顔面構造を形成するための移動を観察できます。この方法では、ゼブラフィッシュの異常な頭蓋顔面発達のライブイメージングも可能になり、ヒトの口蓋裂などの状態をモデル化するために使用されます。
実験室では、細菌、酵母、その他多くの細胞タイプが一般的にシェイクフラスコで増殖します。ただし、この古典的な手法には、pH、酸素濃度、栄養素、温度の変動など、最適な成長を妨げる可能性のある多くの欠点があります。JoVE Bioengineeringでは、Obomらが、pHプローブ、酸素プローブ、培地を補充するための試薬供給ボトル、精密な温度制御、ガス注入器、培養物を攪拌するインペラを備えたベンチトップバイオリアクターを実演しています。このシステムは、組換え発現システムの大規模な増殖に最適な培養条件を可能にします。
また、JoVE Bioengineeringでは、フローベースの細胞接着アッセイにおける生細胞イメージングの方法を提供しています。しかし、シングルカメラシステムを使用する標準的なプロトコルとは異なり、当社の注目の方法は、2つの蛍光チャネルで同時にリアルタイム画像をキャプチャするデュアルカメラ発光分割システムです。Carlson et al.パラレルプレートフローチャンバー接着アッセイを使用して、このデュアルカメラシステムを実証し、接着、ローリング、およびその他の細胞挙動の研究に使用しています。
JoVE Chemistryは、あまり一般的ではない動物モデル、つまり米国で広く分布しているオオコウモリを特徴としています。しかし、近年では、ホワイトノーズ症候群(WNS)と呼ばれる真菌性疾患により、これらのコウモリが何百万匹も死亡しています。WNSは、自然の害虫駆除の一形態としてコウモリに依存している農業業界にとって大きな脅威です。他の哺乳類と同様に、コウモリの皮膚には皮脂腺があり、感染から保護するのに役立つ油性物質である皮脂を分泌します。Pannkuk et al.コウモリの髪の毛や皮膚から皮脂を分離する方法を実証し、薄層クロマトグラフィー(TLC)とマトリックス支援レーザー脱離イオン化飛行時間型(MALTI-TOF)質量分析を組み合わせて皮脂の脂質組成を分析します。皮脂の脂質プロファイルは免疫プロセスに影響を与える可能性があり、病気のマーカーとしても機能します。したがって、この方法は、オオコウモリや他の哺乳類の病気の治療と予防に重要な情報をもたらします。
JoVE の 2013 年 9 月号のハイライトを少しだけご紹介しました。ウェブサイトにアクセスして、JoVE: The Journal of Visualized Experimentsの全文とその他多くの記事をご覧ください。