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p style='background-color:#ffffff;line-height:1.38;margin-bottom:0pt;margin-top:0pt;padding:0pt 0pt 12pt;' dir='ltr'>人間の目から始めます。シースを取り外して視神経を露出させます。
目を二等分し、後部から硝子体液を取り除きます。
外層である強膜を切り取り、メッシュ状の構造である篩状層を介して視神経に接続された網膜神経節細胞を含む網膜を広げます。
このセグメントを経層自律系の下部チャンバーのドームの上に置き、視神経を上に向けて密封します。
チューブを接続し、灌流媒体を流します。
液体の動きにより、眼圧に似たアイカップ内に圧力がかかります。
次に、視神経を覆う上部チャンバーを配置し、密閉します。
チューブを接続して、頭蓋内圧に似た神経の周りに培地を流します。
これらのチャンバー間の圧力差により、篩状層全体にわたる層状圧力が確立され、この圧力条件下での視神経への網膜神経節細胞信号伝達の研究が可能になります。
ヒトの全眼球サンプルを調製するには、視神経鞘を除去し、後部から硝子体液を除去します。IOPチャンバーの丸いドームにしっかりとフィットするように、必要に応じて後部から追加の強膜をトリミングし、鉗子を使用して網膜がセグメントの人間の後部に均等に広がるようにします。次に、視神経を上に向けて、円形ドームの上の TAS の IOP チャンバーにセグメントを置き、エポキシ樹脂の O リングと 4 本のネジを使用して後セグメントをシールします。
IOPチャンバーをセットアップするには、チューブをチャンバーのインポートとアウトポートに挿入し、IOP流入シリンジをインポートに挿入します。空の IOP 流出シリンジ セットアップをアウト ポートに挿入し、プッシュプル法を使用して灌流媒体を流入ポートにゆっくりと注入して後部アイ カップを満たすと同時に、流出シリンジから灌流培地をゆっくりと引き抜き、ラインから気泡を取り除きます。インチューブとアウトチューブの両方に気泡がなくなったら、注入を停止し、活栓をオフの位置にロックします。
IOPインポートフィルターアセンブリからシリンジを取り外し、シリンジに30ミリリットルの培地を追加で補充します。次に、シリンジのセットアップをフィルターアセンブリに再度挿入します。ICPチャンバーをセットアップするには、視神経が上部チャンバー内にあるように注意しながら、チャンバーを後部の後部の後ろに置き、上部チャンバーを4本のネジで密閉します。
次に、先ほど示したように、ICP入力シリンジをインポートに挿入し、空のICP流出シリンジをアウトポートに挿入して、システムを媒体で洗い流します。