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DOI: 10.3791/3785-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
ここでは、ラットやマウスはnocifensive動作を示している最低温度を決定するための迅速な信頼性と簡単な手順を説明し、
この手順の全体的な目標は、コントロールラットと糖尿病ラットの熱侵害受容閾値を決定することです。最初のステップは、インクリメンタルホットプレートと鎮痛計に動物を置くことです。次に、表面が加熱されている間にホットプレートの温度を徐々に上昇させます。
動物は不快な行動がないことが観察されています。この挙動が観察されると、加熱が停止し、その瞬間のプレートの温度が記録されます。最終的には、鎮痛薬で治療された動物や痛みを伴う糖尿病性ニューロパチーに苦しんでいる動物における熱侵害受容閾値の変化を示す結果を得ることができます。
この技術の主な利点は、通常は超閾値温度として設定されるホットプレートのような既存の方法よりも、当社の方法がプレートの温度を徐々に上昇させ、熱侵害受容閾値を正確に決定できるようにすることです。熱侵害受容閾値または TNT は、インクリメンタル ホット プレート鎮痛剤、メーター、または IH pam を使用して決定されます。このシステムのコンポーネントには、プレキシガラスの観察チャンバー、温度制御されたアルミニウムプレート、プログラミングに使用されるキーパッド、およびユニットのリモートコントロール用のフットスイッチが含まれます。
データは、近くのコンピューター上のカスタマイズされたソフトウェアを使用して収集されます。または、ユニットにあるシリアルポートを使用してハードコピーを印刷することもできます。プレキシガラスチャンバーの後ろに鏡を置いて、動物の行動の視認性を高めます。
次に、希望の昇温速度と、初期スタンバイ温度と最終カットオフ温度を設定します。フットスイッチを押して、システムを起動および停止します。初期スタンバイ温度と最終カットオフ温度が記録されていること、および最終温度に到達するまでの時間を確認します。
必要に応じて、実験者は自分自身でシステムをテストできます。痛みの瞬間に金属板から手を引っ込めます。知覚は皮膚に害を及ぼしたり、後で不快感を引き起こしたりしてはなりません。
テストが行われるベンチにケージを置くことにより、前日の夜に順応を開始します。テストの2時間前。IHパンの電源を入れて、ユニットのバックグラウンドノイズに動物を慣れさせます。
この時点で、前に見たようにシステムをセットアップしてテストできます。動物が環境に順応したら、暖かい表面の上にあるプレキシガラスチャンバーにネズミをそっと置きます。動物が数分間チャンバーを探索するのを待ちます。
テストを開始します。動物が試験を開始するのに快適であるように見えたら、フットスイッチを押してプレートの加熱を開始します。プレートが加熱されるときの動物の行動を観察します。
一般に、この方法に不慣れな個人は、大規模な攻撃行動の特定が必ずしも簡単ではなく、練習が必要なため、苦労します。どちらかの後毛穴を舐めたり、揺さぶったり、持ち上げたりするような不快な行動はありません。観察される最初の行動は、4つの毛穴を舐めることであり、その後に後肢の毛穴が反応する可能性があることに注意することは有用です。
最も不快な行動が観察された場合は、フットスイッチを押して試験を終了し、動物を自宅のケージに戻します。この行動を呼び起こす温度は、対照動物の熱侵害受容閾値またはTNTと見なされます。ユニットを洗浄し、次に見た動物に対してテストを繰り返します。
これは、正常な若年成人ラットとマウスの熱侵害受容閾値です。このデータは、ラットのTNTが4日間にわたってテストされた場合、変化しなかったことを示しています。同様に、マウスのTNTは異なる年齢間で一貫していました。
この例では、若年成人STZ糖尿病ラットのTN TSを繰り返し測定しました。熱侵害受容閾値の着実な減少は、糖尿病の誘発の2週間後から見られます。ここでは、IHパムを使用して、鎮痛剤の急性抗侵害受容特性をテストしました。
A、この化合物は、ビヒクルを投与された動物と比較して、対照動物において軽度の鎮痛効果をもたらしました。しかし、鎮痛は、ビヒクルコントロールと比較して、化合物を投与された糖尿病動物でより顕著でした。.この手順を試みる際には、動物の行動、特に動物のcept Tの近くで発生する行動を継続的に監視することを覚えておくことが非常に重要です。
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