Osteoclast Derivation from Mouse Bone Marrow

Ruth Tevlin; Adrian McArdle; Charles K.F. Chan; John Pluvinage; Graham G. Walmsley; Taylor Wearda; Owen Marecic; Michael S. Hu; Kevin J. Paik; Kshemendra Senarath-Yapa; David A. Atashroo; Elizabeth R. Zielins; Derrick C. Wan; Irving L. Weissman; Michael T. Longaker

doi:10.3791/52056

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Biology

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Osteoclast Derivation from Mouse Bone Marrow

マウス骨髄からの破骨細胞の導出

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06:17 min

November 6, 2014

DOI: 10.3791/52056-v

Ruth Tevlin*¹, Adrian McArdle*^1,2, Charles K.F. Chan², John Pluvinage², Graham G. Walmsley^1,2, Taylor Wearda^1,2, Owen Marecic^1,2, Michael S. Hu¹, Kevin J. Paik¹, Kshemendra Senarath-Yapa¹, David A. Atashroo¹, Elizabeth R. Zielins¹, Derrick C. Wan¹, Irving L. Weissman^1,2, Michael T. Longaker^1,2

¹Hagey Laboratory for Pediatric Regenerative Medicine, Division of Plastic and Reconstructive Surgery, Department of Surgery,Stanford University School of Medicine, ²Institute for Stem Cell Biology and Regenerative Medicine,Stanford University

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

破骨細胞は、体内の主要な骨吸収細胞である。大量に破骨細胞を単離する能力は、破骨細胞の生物学の理解における大きな進歩をもたらした。このプロトコルでは、培養し、インビトロで破骨細胞活性を定量化する、単離するための方法を記載する。

この手順の全体的な目標は、マウスの骨髄から破骨細胞を大量に分離することです。これは、最初に安楽死させたマウスから骨を採取することによって達成されます。次に、乳鉢と乳棒を使用して骨を粉砕することにより、細胞を骨髄から解放します。

次に、骨髄溶液を密度勾配細胞分離培地に重ね合わせ、密度勾配細胞分離を行います。最後に、目的の細胞を含む層を吸引し、細胞を骨髄マイクロファージ誘導培地に入れます。最終的に、トラップ染色は、多数の破骨細胞の存在を示すために使用されます。

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