Name: 微小電極は、長期的な脳深部刺激のためのラットの視床下核に電極の移植ガイド付き (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-10-02T15:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 52 s
Description: 学ぶラットの視床下核への微小電極移植法。マイクロレコーディングシステムを用いて正確な電極配置を行い、長期間の脳深部刺激を可能にする神経科学的手法です。

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私たちは、ワイヤーを準備してくださったワッベル氏と、私たちの計画に従ってプラグとケージを建設してくださったティーチ氏に感謝したいと思います。この研究は、Deutsche Forschungsgemeinschaft(Sonderforschungsbereich 688)の支援を受けました。フェリックス・フルリは、ドイツのヴュルツブルク大学クリニックにあるInterdisziplinäre Zentrum für Klinische Forschung(IZKF)のフェローシップを保持しています。

動物実験は、ヴュルツブルク大学と法的状態当局（ウンターフランケン、承認番号：54-2531.01-102 / 13）によって承認された、実験ストロークでの研究のための推奨に従って行っ17を研究し、現在の動物実験：の報告in vivo実験ガイドライン（http://www.nc3rs.org.uk/arrive-guidelines）。 1.麻酔<ol><li>手続きの期間中、供給ガス（酸素）およびイソフルランの適切な量を確保するための麻酔システムをチェックしてください。定位固定装置の切歯バーをノーズコーンを接続し、-3.3ミリメートルに切歯バーを置きます。 </li><li>供給ガス（2 L /分）をオンにします。ボックスにラットを置き、上部を密封します。 3.5％にイソフルラン気化器の電源をオンにします。 </li><li>ラットが横臥のとき麻酔ガスは、切歯バーに固定されたノーズコーンに流れるように、システムを切り替えます。 </li><li> RAを削除ボックス室からトンと耳と目の間の領域を剃ります。 Jodosept PVPを浸した綿棒を使用して、任意の緩い毛を取り除くために剃った領域を綿棒。 </li><li>ポジションノーズコーンにおけるラット（ 図1）とO 2（1リットル/分）でイソフルラン2.5％で麻酔を続けます。インターデジタルの領域をつまんで麻酔のレベルを確認してください。ラットを十分に麻酔されている場合は、守備の反射は（足のすなわち 、撤退を）廃止されています。 </li><li>手順の間刺激に呼吸し、応答を監視し、必要に応じて気化器を調整します。 </li><li>麻酔下ながら乾燥を防ぐために、目に獣医軟膏を適用します。監視およびフィードバック制御加熱方式により37±0.5℃の体温を維持します。 </li></ol> 2.手術<ol><li>全体の手術中に無菌手術野を保管してください。 surgeon&#39;s手は無菌であり、動作フィールドは、滅菌すると、のみcarefuを移動LLYと無菌状態を壊さないように覚えています。これも一つの楽器を下に設定することができるの無菌領域（ すなわち、滅菌防水ドレープ）を有する含まれています。 </li><li>剃っエリアの中心にメピバカイン皮下0.2ミリリットルを注入。メピバカインは、最大3時間の作用持続時間を有する局所麻酔薬です。さらに、手術領域を麻酔ます。 </li><li>メスを用いて、正中切開は耳の間に開始し、2センチメートルに向かって延在作ります。骨膜（皮膚の下に光沢のある膜）も切開されていることを確認します。 4クランプ（ 図2）で頭蓋骨を公開します。 </li><li>綿棒を使用して、冠状および矢状縫合が露出するまで静かに骨膜を取り除きます。その後、綿ウールで血を止めます。 </li><li>プローブホルダに固定された針を用いてブレグマの座標を決定し、黒のサインペンで針の先端をマーク。前方/後方（AP）を使用して、正中線/横（ML）と背腹（DV）の駆動ネジは、直接ブレグマの上に針の先端を置きます。 </li><li> APとMLバーニアスケールの測定値を取る：APの読みから3.6ミリメートルを引き、右STNに電極注入のための読書のMLから2.5ミリメートル、または左STNに電極注入の2.5ミリメートルを追加します。この位置は、頭蓋骨の表面に針の先端を下げた後、フェルトペンの色素によってマークされます。 </li><li>定位固定装置の大型プローブホルダーに歯科用ドリルを固定します。 すなわち、頭蓋骨上の印を付けた点-計算された領域に歯科用ドリルを移動します。硬膜が表示されるまで、顕微鏡で見ると、（頭蓋骨は約1mmの厚さである）頭蓋骨の貫通孔（直径約1mm）を開けます。マイクロ解剖鉗子または滅菌針を用いて硬膜を撤回。硬膜は、電極の先端を破壊するのに十分なタフです。 </li><li>各前頭鱗であり、int型に歯科用ドリルで穴を開け電極穴にerparietal鱗の反対。定位固定装置からのプローブホルダを外します。静脈血管が頭蓋骨の下に縫合糸をたどるよう頭蓋骨縫合糸をドリルしないでください。 </li><li> 5つの穴のそれぞれに骨ねじをねじ込みます。深すぎるでネジをねじ込むことは避けてください。ステンレス製ねじ（M1.6）は、ねじの2-3ターンは十分に脳に圧力をかけることなく、ねじを保持します。巻き数は、ねじのピッチに依存します。マイクロマニピュレーターで、電極（ 図3）とプローブホルダーを固定します。 </li><li>先端がほぼブレグマに触れられるまで、AP、MLとDVドライブネジを使用して、電極とプローブホルダを移動します。ブレグマでのAP、MLとDVバーニアスケールの測定値に注意してください。朗読が行われた場合には、移動中に頭蓋骨をこするから電極を防ぐために、電極を数ミリメートルを上げます。電極に挿入する必要がある位置の座標を決定するために穴にMLの読み取りには、APの読み取りに3.6ミリメートルを追加し、追加（または減算）2.5ミリメートル。 </li><li> APとMLドライブネジを使用して、計算された位置に電極を移動します。この時点で、電極先端が掘削電極穴の真上に位置する必要があります。その後、顕微鏡を通して見ることにより、硬膜（ 図4）のレベルに電極を下げます。このレベルは、DV方向のゼロレベルとして機能します。その後、静かに顕微鏡で見ることによって、脳への電極の先端を挿入します。 </li><li>記録システムのコネクタに電極ピンを接続します。定位固定装置（ 図5）で、ラットの上にファラデーケージを入れて（またはアルミホイルでそれを置き換えてください）。で働いていたされている部屋のカウンターポイズと定位固定装置を接地してください。 </li><li>記録システムを起動します。可能な場合、またadvancin時は、1単位の放電/軟膏の音響信号を得るためにスピーカーを使用G電極。 </li><li>ゆっくり電極を進める中の電気活動を記録することにより、脳内に電極を挿入します。硬膜から7.5の間と8.1ミリメートルの深さで、STNの特定の電気的活動は、（ 図6）は、通常、検出可能です。 18：STNのニューロンの典型的な活動が不規則な発火パターンと高発火率によって特徴付けられる（40.9±12.9 Hzの周波数を意味します）。 </li><li>録音中に、（0.8から1.0パーセントに、 例えば ）できるだけ多くの麻酔を減らします。低麻酔動物は明確に電気脳の活性を示します。 </li><li>電極を下げたときに、頭蓋骨の表面で移動された任意の血液や脳脊髄液を離れて綿棒。 </li><li>歯科用セメントの少量を混合し、電極の周りに、小さなへら（ 図7）を使用して、5本のネジの4の周りにそれを適用します。第五のネジは、プラグのアース線を固定するために使用されます。 </li><li>歯科用セメントが固定されたときに記録システムの電極ホルダーとコネクタから電極ピンを外します。 </li><li>歯科用セメントで固定されませんでしたネジを外します。電極ピンのプラグを入れてください。第五ネジ（ 図8）とプラグのアース線を固定してください。 </li><li>歯科用セメントを混合し、プラグの周りにそれを適用します。セメントが厚くなるように、キャップを形成するために、プラグの周りにそれを成形。動物に害を与えると（ 図9Aおよび B）硬化中にそれらを除去することができる歯科用セメントのシャープなエッジを避けてください。 </li><li>傷のエッジを創面切除し、前面にキャップの後ろに縫合糸でそれらを閉じます。傷のエッジを消毒します。 </li><li>スイベルに固定されたワイヤにヘッドプラグを接続します。定位固定装置からラットを削除します。 </li><li> 2〜3日間毎日一回、その後の介入の最後にトラマドール（12.5ミリグラム/キログラム、腹腔内）を適用し、。 THERMAと清潔なケージにラットを置き、リットルのサポートは、このケージ（ 図10）にスイベルを修正し、1時間慎重に検査します。 </li><li>それは胸骨横臥位を維持するのに十分な意識を取り戻したまで無人の動物を放置しないでください。完全に回復するまで、他の動物の会社に手術を受けた動物を返さないでください。 </li></ol> 3.刺激<ol><li>インピーダンスメータを用いて、刺激の前の動物の抵抗を決定します。 </li><li>ワイヤと電流出力を有するワイヤの他端のプラグと刺激装置のアース線用の出力とスイベルのプラグを接続します。刺激をプログラムするために、コンピュータと刺激を接続します。 </li><li>プログラム内の刺激のパラメータを選択してください。例えば、パーキンソン病に使用されるパラメータは、パルス長さ：60μ秒;周波数：130 Hzの。ジスキネジアが認識されるまで増加する電流振幅を有するラットを刺激します。目を削減ジスキネジアを誘発強度以下の10〜20％で、または神経学的徴候が消え、動物が快適になるまで電子電界強度。単相矩形パルスをこの研究で使用しました。 </li><li>実験を完了した後、イソフルランで動物を安楽死さ：5％以上にisofurane流量や濃度を調整します。停止を呼吸した後、1分までイソフルラン暴露を続けます。 </li></ol>

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</ol>

著者らは、競合する金銭的利益はないと宣言している。

<html>本研究では、ラットのSTNにモノポーラ慢性電極を移植するための命令のステップバイステップのセットを提供します。低インピーダンスのタングステン電極は、多くの場合、DBS 18,19のために使用されているが、白金/イリジウム白金（Pt / Ir）から製の単極電極は、約1MΩのインピーダンスを持っていたことを採用しました。 Pt / Irの電極はまた、それらの好ましい特性のパーキンソン病の患者に使用されている：彼らは、最小限の浸食20を示し、何の高電荷密度が使用されていない場合は、関連する組織損傷21を生成しません 。本研究の目的は、長期刺激のセットアップであり、翻訳のアプローチを実現するために、上記の仕様の電極を本実験に適用された。以来電極先端の局在を示した脳切片の組織学的検査では、この実験でのPt / Irの22の弱毒異物反応を裏付け。 ENT &quot;&gt;本研究では、1MΩのインピーダンスとのPt / Irは電極を使用した。低い、またはより高いインピーダンスを有する電極、記録脳活性のいずれかまたは脳の構造を刺激するためにの...

4または腹側中間視床5 -脳深部刺激（DBS）は、内部の淡蒼球1、視床下核（STN）2のような特定の脳構造に埋め込 ​​まれた電極を介した電気インパルスの配信に基づいて治療法です。過去20年間では、この治療は、パーキンソン病1のための強力な治療ツールとして確立されている- 4、ジストニア6と震え7、および慢性疼痛7を変調するためにも使用され、精神障害（ すなわち 、強迫性障害8、大うつ病9）または難治性てんかん10,11。また、DBSは、将来的には、耐火動脈高血圧12や起立性低血圧13のための治療選択肢になるかもしれません。 効果の基礎となる生理学的メカニズムDBSのよくわかっていないままです。麻酔をかけたげっ歯類での研究は、臨床的にDBS 14適用模倣高頻度刺激に神経応答への洞察を提供してきました。しかしながら、これらの研究は、DBS効果の行動の裏付けを欠くだけでなく、14を適用した刺激パラメータに応じてかなりのばらつきが生じます。 より簡潔に意識げっ歯類におけるDBSの行動への影響と根底にある機構を調べるために、刺激のセットアップには、特定の要件を満たすことが必要です。 DBSは、主に、長期療法として使用されている（例えば、パーキンソン病、慢性の痛み）。ユニットはプラグと同様に、外部刺激へのプラグからのワイヤと電極で構成されるようにこのように、げっ歯類における刺激セットアップを設計する必要があります。頭蓋骨に固定されたときや、本機は、軽量で割れないでなければなりません。また、移動の自由はstimula中のラットのために不可欠です長期にわたってる。 DBSの標的構造は小さいです。例えば、ラットにおけるSTNは1.2mmの長さおよび0.8 mmの3,15の体積を有します。したがって、電極は、核が挿入中に損傷しないように設計されており、正確にニーズを標的としなければなりません。げっ歯類で行わ最もDBS研究は、標的構 ​​造に対して電極のランドマークベースの定位挿入を使用しているように、エラーレートがPaxinosとWatsonの16に従って座標を用いた場合であっても、比較的高いとすることができます。これは、統計的に意味のある結果に到達するために必要な動物の多数を生じます。 本研究では、電極注入法は、電極を進めながらmicrorecording系を用いて高精度にSTNを標的とする、導入されます。また、刺激システムは、刺激された動物のための移動性の高度を可能にするだけでなく、連続stimulatiを保証しない提示されていますラットの頭の上に（ステンレス製スプリングで保護されている）刺激線の確実な固定を介した上で。

<table><tbody><tr><td>Pt/Ir電極</td><td>FHC株式会社</td><td>UE</td><td>カスタムメイド:仕様:UEPSEGSECN1M</td></tr><tr><td>プラグ</td><td>GT Labortechnik(アルンシュタイン/ドイツ)</td><td></td><td>カスタムメイドピン</td></tr><tr><td></td><td>ヘッダーDISTRELEC</td><td>143-95-324</td><td>単列、90°C、1x3データメイト、タイプM80-8420342</td></tr><tr><td>ソケット</td><td>DISTRELEC</td><td>143-95-621</td><td>単列、ストレート2mmポールNo.1 x 3データメイト、タイプM80-8400342</td></tr><tr><td>ステンレス鋼スプリング</td><td>プラスチックONE</td><td>SS0102</td><td>パート#:.120 X .156スプリングID(mm):3.0&nbsp;スプリング外径(mm):4.0</td></tr><tr><td>歯科用セメント/パラドゥール</td><td>ヘレウスクルツァー</td><td>64707938</td><td>液、500ml</td></tr><tr><td>歯科用セメント/パラドゥール</td><td>ヘレウスクルツァー</td><td>64707954</td><td>パウダー、ローズ、500g</td></tr><tr><td>ヘッドスクリュー</td><td>ハマー&Reiss</td><td>V2ADIN84 M1.6x3</td><td></td></tr><tr><td>Jodosept PVP</td><td>Vetoquinol 435678</td><td></td><td>/E04</td></tr><tr><td>Mepivacain 1%</td><td>アストラゼネカ</td><td></td><td>PZN03338515</td></tr><tr><td>エピネフリン</td><td>Sanofi-Aventis</td><td></td><td>PZN00176118</td></tr><tr><td>Tramadolhydrochloride</td><td>Rotexmedica</td><td></td><td>38449.00.00</td></tr></tbody></table>

微小電極は、長期的な脳深部刺激のためのラットの視床下核に電極の移植ガイド付き

Microelectrode Guided Implantation of Electrodes into the Subthalamic Nucleus of Rats for Long-term Deep Brain Stimulation

脳深部刺激（DBS）は、特発性パーキンソン病、ジストニアまたは振戦などのいくつかの神経障害のために広く使用され、効果的な治療です。 DBSは、中枢神経系の特定の深い解剖学的構造への電気刺激の配信に基づいています。しかし、DBSの効果のメカニズムは謎のままです。これは、特にラットに、動物モデルにおいてDBSの影響を調査の関心につながっています。 DBSは、長期的な治療であるため、研究はDBS後数週間を発生する神経回路の分子遺伝的変化に焦点を置くべきです。ラットは所定の位置に刺激に対する動物の頭からの導線を維持するのに問題が発生し、そのケージに動き回るため、ラットの長期DBSは困難です。また、ラットの脳内の刺激のための標的構造は、小型であり、したがって、電極は、容易に必要な位置に配置することができません。このように、長期的なstimulaためのセットアップ約1MΩのインピーダンスと白金/イリジウム電極を用いたラットの化は、この研究のために開発されました。これらの仕様と電極は、適切な刺激だけでなく、DBSのためのターゲット領域を識別するために、脳深部構造の記録だけでなくすることができます。我々のセットアップでは、ワイヤ用のプラグと電極を頭蓋骨に固定4本のネジで固定する歯科用セメントに埋め込まれました。刺激へのプラグからワイヤーをステンレス製のスプリングにより保護されていました。スイベルは、もつれたならワイヤを防止するために回路に接続しました。全体的に、この刺激のセットアップは、ラットのための自由移動性の高い学位を提供し、長期的な強度を保持するために、ヘッドプラグだけでなく、プラグと刺激間の配線の接続を可能にします。

記録システムを用いてラットのSTNに電極を移植する - ここに提示されるようなことは - 動物あたり約1時間かかりますDBSための効果的かつ正確な手順です。このモデルは、かなりマイナーな手順です：手術を施したラット10匹のうち、すべての介入を生き延びました。介入後の二十四時間は、各ラットの状態をモニターし、何の動物は、重大度コードに応じて1以上3点を達成していません。連続刺激（14日、24時間日）の期間中は、ワイヤが取り外されていない、または壊れを通して噛まれました。 10匹のラットのいずれも、歯科用セメントのキャップを失ったことも、彼らは刺激のフェーズの間に設備によって傷つくました。刺激前に、これらの10の動物で測定されたインピーダンスは353±101kΩのでした。ラットは、130ヘルツの周波数及び60マイクロ秒のパルス幅で刺激しました。平均刺激強度は、口腔顔面または続きの強度閾値を下回る20％に設定した60μAでしたralateral前足の運動障害は、それによって、刺激の期間中に給餌や移動の問題を防止することができます。 14日の介入と連続刺激の後、すべての10匹のラットを深...

ラットの視床下核(STN)に電極を埋め込む方法が説明されています。STNのより良い位置特定は、マイクロレコーディングシステムを使用することで達成されました。さらに、動物の頭部と刺激装置との間の長期的な接続を特徴とする刺激セットアップが提示されます。

Deep brain stimulation (DBS) is a widely used and effective therapy for several neurologic disorders, such as idiopathic Parkinson&#8217;s disease, ...

この手順の全体的な目的は、記録ガイド下でラットの視床下核にマイクロ電極を植え込み、その後、同核に対して長期的な刺激を行うことです。まず、露出させた頭蓋骨に電極用の穴を開けます。次に、電極をその穴から脳内へと進めながら、STN特有の活動が検出されるまで、脳の異なる領域の電気活動を同時に記録します。次に、電極シャンクの周囲に歯科用セメントを塗布して電極を固定し、電極ピンにヘッドプラグを取り付けます。最後のステップとして、プラグを歯科用セメントで固定し、刺激装置へつながるワイヤーに接続します。最終的に、採取した脳を8 µm厚の切片に分割し、ヘマトキシリン・エオジン染色を行い、電極の先端が視床下核に配置されていることを確認します。ブラインド電極植え込みなどの既存の手法に対する本手法の主な利点は、マイクロ電極の植え込みを記録しながら誘導することで、視床下核へのターゲティングの精度を高められることです。動物実験は、Burg大学および州法当局の承認を得て、実験的脳卒中研究における研究推奨事項および現在のin vivo実験における動物研究報告に従って実施されました。ガイドラインに基づき、まず誘導チャンバー内で、毎分2 Lの空気と3.5%のisof fluorineを用いてラットを麻酔します。ラットを誘導チャンバーから取り出し、耳と目の間の領域を剃毛します。消毒液に浸した綿棒を使用して、剃毛した領域を拭きます。緩い毛を取り除き、気流をノーズコーンに切り替えて、麻酔を2.5% Isof fluorine、流量1 liter per minuteに調整します。ラットをノーズコーンに配置し、ステレオタキシス装置に固定します。指間の皮膚をつまんで麻酔深度を確認してください。ラットが十分に麻酔されていれば、防御反射は消失します。麻酔中の乾燥を防ぐため、眼に動物用軟膏を塗布してください。ラットの体温を37 °Cに維持し、モニタリングしてください。手術部位を麻酔するため、除毛領域の中央にメピバカイン0.2 millilitersを皮下注射し、以降は無菌状態を維持してください。メスを用いて、両耳の間から前方へ約2 centimetersの正中切開を行います。骨膜も確実に切開し、その後、4つのクランプで頭蓋骨を露出させます。綿棒を使用して、冠状縫合と矢状縫合が露出するまで骨膜を慎重に除去します。出血がある場合は、脱脂綿で止血してください。プローブホルダーに針を固定し、針の先端に黒色のフェルトペンで印を付けます。前後正中線、左右、および背腹方向の駆動ネジを使用して、針先をbgmaの直上に配置します。APおよびMLのベニヤスケールの読み取り値を記録します。右側のSTNに電極を植え込むため、AP値から3.6 mmを、ML値から2.5 mmを差し引きます。針先を頭蓋骨の表面まで下げ、フェルトペンで注入部位に印を付け、歯科用ドリルのクランプをステレオタキシス装置の大型プローブホルダーに固定します。歯科用ドリルを頭蓋骨上の印を付けた点まで移動させ、顕微鏡で確認しながら、硬膜が見えるまで直径約1 mmの穴を頭蓋骨に開けます。これが電極用の孔です。硬膜は電極の先端を破損させるほど強靭であるため、マイクロディセクティング鉗子または滅菌針を用いて硬膜を牽引してください。歯科用ドリルを用いて、各前頭鱗および電極用孔の反対側の頂鱗に孔を開けます。その後、各頭頂鱗板に穴を開けます。5つの穴それぞれにボーンスクリューをねじ込みます。脳に圧力がかかるため、スクリューを深くねじ込みすぎないように注意してください。回転数はネジのピッチによって異なります。ここでは、各ネジを2〜3回転させます。プローブホルダーを脳定位固定装置から取り外し、電極を装着したプローブホルダーをマイクロマニピュレーターで固定します。AP、ML、およびDVの駆動ネジを使用して、電極を備えたプローブホルダーを移動させ、先端がBregmaにほぼ接するまで近づけます。BregmaにおけるAP、ML、DVのバーニア目盛りの数値を記録してください。その後、移動中に電極が頭蓋骨を擦るのを防ぐため、電極を数mm上げます。電極を孔に挿入すべき位置の座標を決定するには、AP値に3.6 millimetersを加え、ML値に2.5 millimetersを加えます。APおよびMLの駆動ネジを使用して、電極を計算した位置まで移動させます。この時点で、電極の先端が穿孔した電極孔の直上に位置しているはずです。次に、顕微鏡で確認しながら、電極を硬膜の高さまで下げます。ここをDV方向のゼロ点として記録してください。その後、電極の先端を脳内にゆっくりと刺入します。顕微鏡で観察しながら、電極ピンを記録システムのコネクタに接続します。脳定位固定装置を部屋のカウンターポイズで接地させます。その後、脳定位固定装置内のラットにファラデーケージを被せます。アルミニウム箔の効果はファラデーケージと同じであるため、ここで示すようにアルミニウム箔を使用することも可能です。利用可能な場合は、記録システムを開始してください。電極を進めながら、スピーカーを使用して単一ユニットの放電のアコースティック信号を取得します。電極を進める間の電気活動を記録しながら、電極を脳内へゆっくりと挿入します。記録中は、麻酔を可能な限り0.8から1%まで低減させてください。麻酔深度が浅い動物の方が、より鮮明な脳電気活動を示すためです。STNに特有の電気活動は、通常、硬膜から7.5から8.1 mmの深さで検出可能です。STNにおけるニューロンの典型的な活動は、不規則な発火パターンと高い発火率によって特徴付けられます。ここで、電極を挿入した際に頭蓋骨表面に付着した血液や脳脊髄液を綿棒で拭き取ります。次に、少量の歯科用セメントを混ぜ合わせ、小型のスパチュラを使用して電極の周囲および5本のネジのうち4本の周囲に塗布します。歯科用セメントが硬化した後、電極ピンを記録システムの電極ホルダーおよびコネクタから取り外します。次に、歯科用セメントで固定されていない5番目のネジを外します。電極ピンにプラグを装着し、プラグのアース線を4番目のネジで固定します。セメントが粘性を増してきたら、プラグの周囲に歯科用セメントを塗布します。プラグの周囲に成形してキャップを作ります。動物を傷つける可能性がある歯科用セメントの鋭いエッジを避け、硬化中にそれらを取り除きます。創縁をデブリードメントし、キャップの後方で縫合して閉鎖し、前方の創縁を消毒します。ヘッドプラグをスイベルに固定されたワイヤーに接続します。その後、ラットを脳定位固定装置から取り出し、適切な術後鎮痛剤（12.5 mg/kg）を投与します。ここではトラマドールを使用します。ラットを保温設備のある清潔なケージに入れ、このケージにスイベルを固定します。動物の回復状態を観察してください。この画像は、電極先端の配置箇所を可視化するため、植込みおよび連続刺激から14日後に犠牲にした動物から採取し、ヘマトキシリン・エオジン染色を施した厚さ8 µmの切片を示しています。実線で囲まれた部分がSTNです。14日間の刺激期間中に電極先端が位置していた箇所に、小さな病変が確認できます。電極の穿刺管が見えないことは注目に値し、これは電極が周囲の組織を破壊していないことを示しています。この画像は、同じ領域を高倍率で示したものです。電極先端に対する脳組織の反応により、病変周囲に少数の炎症細胞が検出されました。この手法を習得し、適切に実施すれば、1時間15分で完了させることができます。

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Research

JoVE Journal

Neuroscience

神経科学

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学ぶラットの視床下核への微小電極移植法。マイクロレコーディングシステムを用いて正確な電極配置を行い、長期間の脳深部刺激を可能にする神経科学的手法です。

微小電極は、長期的な脳深部刺激のためのラットの視床下核に電極の移植ガイド付き

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