Name: 焦点閉鎖系中枢神経系損傷のためのシステム (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-11-29T13:20:00.000+00:00
Duration: 4 min 2 s
Description: 学ぶ、マウスを用いた過圧空気システムによる中枢神経系損傷誘導法。軸索変性とミクログリア応答を評価し、二次変性のメカニズム解明と治療法開発に貢献する実験手法です。

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<meta charset="utf8"></head><body>マウスモデルにおける中枢神経系損傷を誘発するためのカスタム過圧空気システム

<ol><li>Schneiderman, A. I., Braver, E. R., Kang, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Understanding+sequelae+of+injury+mechanisms+and+mild+traumatic+brain+injury+incurred+during+the+conflicts+in+Iraq+and+Afghanistan%3A+Persistent+postconcussive+symptoms+and+posttraumatic+stress+disorder%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Epidemiol%22%5BJournal%5D)">Understanding sequelae of injury mechanisms and mild traumatic brain injury incurred during the conflicts in Iraq and Afghanistan: Persistent postconcussive symptoms and posttraumatic stress disorder.</a> Am J Epidemiol. 167 (12), 1446-1452 (2008).</li>
<li>Terrio, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Traumatic+brain+injury+screening%3A+Preliminary+findings+in+a+us+army+brigade+combat+team%5BTitle%5D)+AND+%22J+Head+Trauma+Rehabil%22%5BJournal%5D)">Traumatic brain injury screening: Preliminary findings in a us army brigade combat team.</a> J Head Trauma Rehabil. 24 (1), 14-23 (2009).</li>
<li>Morissette, S. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deployment-related+tbi%2C+persistent+postconcussive+symptoms%2C+ptsd%2C+and+depression+in+oef%2Foif+veterans%5BTitle%5D)+AND+%22Rehabil+Pyschol%22%5BJournal%5D)">Deployment-related tbi, persistent postconcussive symptoms, ptsd, and depression in oef/oif veterans.</a> Rehabil Pyschol. 56 (4), 340(2011).</li>
<li>Cooper, D. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treatment+of+persistent+post-concussive+symptoms+after+mild+traumatic+brain+injury%3A+A+systematic+review+of+cognitive+rehabilitation+and+behavioral+health+interventions+in+military+service+members+and+veterans%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Imaging+Behav%22%5BJournal%5D)">Treatment of persistent post-concussive symptoms after mild traumatic brain injury: A systematic review of cognitive rehabilitation and behavioral health interventions in military service members and veterans.</a> Brain Imaging Behav. 9, 403-420 (2015).</li>
<li>Elder, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Update+on+tbi+and+cognitive+impairment+in+military+veterans%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Neurol+Neurosci+Rep%22%5BJournal%5D)">Update on tbi and cognitive impairment in military veterans.</a> Curr Neurol Neurosci Rep. 15 (10), 68(2015).</li>
<li>Vincent, A. S., Roebuck-Spencer, T. M., Cernich, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cognitive+changes+and+dementia+risk+after+traumatic+brain+injury%3A+Implications+for+aging+military+personnel%5BTitle%5D)+AND+%22Alzheimers+Dement%22%5BJournal%5D)">Cognitive changes and dementia risk after traumatic brain injury: Implications for aging military personnel.</a> Alzheimers Dement. 10, S174-S187 (2014).</li>
<li>St Onge, P., Mcilwain, D. S., Hill, M. E., Walilko, T. J., Bardolf, L. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Marine+corps+breacher+training+study%3A+Auditory+and+vestibular+findings%5BTitle%5D)+AND+%22US+Army+Med+Dep+J%22%5BJournal%5D)">Marine corps breacher training study: Auditory and vestibular findings.</a> US Army Med Dep J. , 97-107 (2011).</li>
<li>Capó-Aponte, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+repetitive+low-level+blast+exposure+on+visual+system+and+ocular+structures%5BTitle%5D)+AND+%22J+Rehabil+Res+Dev%22%5BJournal%5D)">Effects of repetitive low-level blast exposure on visual system and ocular structures.</a> J Rehabil Res Dev. 52 (3), 273-290 (2015).</li>
<li>Tate, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serum+brain+biomarker+level%2C+neurocognitive+performance%2C+and+self-reported+symptom+changes+in+soldiers+repeatedly+exposed+to+low-level+blast%3A+A+breacher+pilot+study%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Serum brain biomarker level, neurocognitive performance, and self-reported symptom changes in soldiers repeatedly exposed to low-level blast: A breacher pilot study.</a> J Neurotrauma. 30 (19), 1620-1630 (2013).</li>
<li>Carr, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Repeated+low-level+blast+exposure%3A+A+descriptive+human+subjects+study%5BTitle%5D)+AND+%22Mil+Med%22%5BJournal%5D)">Repeated low-level blast exposure: A descriptive human subjects study.</a> Mil Med. 181 (suppl_5), 28-39 (2016).</li>
<li>Caplan, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relation+of+repeated+low-level+blast+exposure+with+symptomology+similar+to+concussion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Head+Trauma+Rehabil%22%5BJournal%5D)">Relation of repeated low-level blast exposure with symptomology similar to concussion.</a> J Head Trauma Rehabil. 30 (1), 47-55 (2015).</li>
<li>Woodall, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Repetitive+low-level+blast+exposure+and+neurocognitive+effects+in+army+ranger+mortarmen%5BTitle%5D)+AND+%22Mil+Med%22%5BJournal%5D)">Repetitive low-level blast exposure and neurocognitive effects in army ranger mortarmen.</a> Mil Med. 188 (3-4), e771-e779 (2023).</li>
<li>Stone, J. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+and+structural+neuroimaging+correlates+of+repetitive+low-level+blast+exposure+in+career+breachers%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Functional and structural neuroimaging correlates of repetitive low-level blast exposure in career breachers.</a> J Neurotrauma. 37 (23), 2468-2481 (2020).</li>
<li>Gavett, B. E., Stern, R. A., Cantu, R. C., Nowinski, C. J., Mckee, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mild+traumatic+brain+injury%3A+A+risk+factor+for+neurodegeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Alzheimers+Res+Ther%22%5BJournal%5D)">Mild traumatic brain injury: A risk factor for neurodegeneration.</a> Alzheimers Res Ther. 2, 1-3 (2010).</li>
<li>Smith, D. H., Johnson, V. E., Stewart, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+neuropathologies+of+single+and+repetitive+tbi%3A+Substrates+of+dementia%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Neurol%22%5BJournal%5D)">Chronic neuropathologies of single and repetitive tbi: Substrates of dementia.</a> Nat Rev Neurol. 9 (4), 211-221 (2013).</li>
<li>Juan, S. M., Daglas, M., Adlard, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tau+pathology%2C+metal+dyshomeostasis+and+repetitive+mild+traumatic+brain+injury%3A+An+unexplored+link+paving+the+way+for+neurodegeneration%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Tau pathology, metal dyshomeostasis and repetitive mild traumatic brain injury: An unexplored link paving the way for neurodegeneration.</a> J Neurotrauma. 39 (13-14), 902-922 (2022).</li>
<li>Kundi, S., Bicknell, R., Ahmed, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spinal+cord+injury%3A+Current+mammalian+models%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Spinal cord injury: Current mammalian models.</a> Am J Neurosci. 4 (1), 1-12 (2013).</li>
<li>Flierl, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+closed+head+injury+model+induced+by+a+weight-drop+device%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Mouse closed head injury model induced by a weight-drop device.</a> Nat Protoc. 4 (9), 1328-1337 (2009).</li>
<li>Khalin, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+mouse+model+of+weight-drop+closed+head+injury%3A+Emphasis+on+cognitive+and+neurological+deficiency%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Regen+Res%22%5BJournal%5D)">A mouse model of weight-drop closed head injury: Emphasis on cognitive and neurological deficiency.</a> Neural Regen Res. 11 (4), 630-635 (2016).</li>
<li>Jamnia, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+clinically+relevant+closed-head+model+of+single+and+repeat+concussive+injury+in+the+adult+rat+using+a+controlled+cortical+impact+device%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">A clinically relevant closed-head model of single and repeat concussive injury in the adult rat using a controlled cortical impact device.</a> J Neurotrauma. 34 (7), 1351-1363 (2017).</li>
<li>Mishra, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Primary+blast+causes+mild%2C+moderate%2C+severe+and+lethal+tbi+with+increasing+blast+overpressures%3A+Experimental+rat+injury+model%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Primary blast causes mild, moderate, severe and lethal tbi with increasing blast overpressures: Experimental rat injury model.</a> Sci Rep. 6 (1), 1-14 (2016).</li>
<li>Hu, C. -K., Chen, M. -H., Wang, Y. -H., Sun, J. -S., Wu, C. -Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integration+of+multiple+prognostic+predictors+in+a+porcine+spinal+cord+injury+model%3A+A+further+step+closer+to+reality%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neurol%22%5BJournal%5D)">Integration of multiple prognostic predictors in a porcine spinal cord injury model: A further step closer to reality.</a> Front Neurol. 14, 1136267(2023).</li>
<li>Lim, J. -H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+a+canine+spinal+cord+injury+model+induced+by+epidural+balloon+compression%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vet+Sci%22%5BJournal%5D)">Establishment of a canine spinal cord injury model induced by epidural balloon compression.</a> J Vet Sci. 8 (1), 89(2007).</li>
<li>Fukuda, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+canine+spinal+cord+injury+model+free+from+laminectomy%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res+Protoc%22%5BJournal%5D)">New canine spinal cord injury model free from laminectomy.</a> Brain Res Protoc. 14 (3), 171-180 (2005).</li>
<li>Norris, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+closed-body+preclinical+model+to+investigate+blast-induced+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Mol+Neurosci%22%5BJournal%5D)">A closed-body preclinical model to investigate blast-induced spinal cord injury.</a> Front Mol Neurosci. 16, 1199732(2023).</li>
<li>Zhao, Q., Zhang, J., Li, H., Li, H., Xie, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Models+of+traumatic+brain+injury-highlights+and+drawbacks%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neurol%22%5BJournal%5D)">Models of traumatic brain injury-highlights and drawbacks.</a> Front Neurol. 14, 1151660(2023).</li>
<li>Osier, N. D., Dixon, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+controlled+cortical+impact+model%3A+Applications%2C+considerations+for+researchers%2C+and+future+directions%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neurol%22%5BJournal%5D)">The controlled cortical impact model: Applications, considerations for researchers, and future directions.</a> Front Neurol. 7, 214364(2016).</li>
<li>Chen, Y., Constantini, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Caveats+for+using+shock+tube+in+blast-induced+traumatic+brain+injury+research%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neurol%22%5BJournal%5D)">Caveats for using shock tube in blast-induced traumatic brain injury research.</a> Front Neurol. 4, 117(2013).</li>
<li>Bernardo-Colón, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antioxidants+prevent+inflammation+and+preserve+the+optic+projection+and+visual+function+in+experimental+neurotrauma%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+Dis%22%5BJournal%5D)">Antioxidants prevent inflammation and preserve the optic projection and visual function in experimental neurotrauma.</a> Cell Death Dis. 9 (11), 1097(2018).</li>
<li>Bernardo-Colón, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progression+and+pathology+of+traumatic+optic+neuropathy+from+repeated+primary+blast+exposure%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Progression and pathology of traumatic optic neuropathy from repeated primary blast exposure.</a> Front Neurosci. 13, 719(2019).</li>
<li>Thomas, C. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+necroptosis+in+the+retina+in+a+repeated+primary+ocular+blast+injury+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Assessment of necroptosis in the retina in a repeated primary ocular blast injury mouse model.</a> Exp Eye Res. 197, 108102(2020).</li>
<li>Naguib, S., Bernardo-Colón, A., Rex, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intravitreal+injection+worsens+outcomes+in+a+mouse+model+of+indirect+traumatic+optic+neuropathy+from+closed+globe+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Intravitreal injection worsens outcomes in a mouse model of indirect traumatic optic neuropathy from closed globe injury.</a> Exp Eye Res. 202, 108369(2021).</li>
<li>Vest, V., Bernardo-Colón, A., Watkins, D., Kim, B., Rex, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+repeat+exposure+to+subthreshold+trauma+causes+synergistic+axonal+damage+and+functional+deficits+in+the+visual+pathway+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Rapid repeat exposure to subthreshold trauma causes synergistic axonal damage and functional deficits in the visual pathway in a mouse model.</a> J Neurotrauma. 36 (10), 1646-1654 (2019).</li>
<li>Hines-Beard, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+mouse+model+of+ocular+blast+injury+that+induces+closed+globe+anterior+and+posterior+pole+damage%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">A mouse model of ocular blast injury that induces closed globe anterior and posterior pole damage.</a> Exp Eye Res. 99, 63-70 (2012).</li>
<li>Naguib, S., Bernardo-Colon, A., Cencer, C., Rex, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Galantamine+confers+neuroprotection+in+a+model+of+indirect+traumatic+optic+neuropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Galantamine confers neuroprotection in a model of indirect traumatic optic neuropathy.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 60 (9), 4407-4407 (2019).</li>
<li>Bricker-Anthony, C., Hines-Beard, J., Rex, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+changes+and+vision+loss+in+a+mouse+model+of+closed-globe+blast+trauma%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Molecular changes and vision loss in a mouse model of closed-globe blast trauma.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 55 (8), 4853-4862 (2014).</li>
<li>Bricker-Anthony, C., Hines-Beard, J., D'surney, L., Rex, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exacerbation+of+blast-induced+ocular+trauma+by+an+immune+response%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neuroinflammation%22%5BJournal%5D)">Exacerbation of blast-induced ocular trauma by an immune response.</a> J Neuroinflammation. 11 (1), 1-15 (2014).</li>
<li>Bricker-Anthony, C., Hines-Beard, J., Rex, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Eye-directed+overpressure+airwave-induced+trauma+causes+lasting+damage+to+the+anterior+and+posterior+globe%3A+A+model+for+testing+cell-based+therapies%5BTitle%5D)+AND+%22J+Ocul+Pharmacol+Ther%22%5BJournal%5D)">Eye-directed overpressure airwave-induced trauma causes lasting damage to the anterior and posterior globe: A model for testing cell-based therapies.</a> J Ocul Pharmacol Ther. 32 (5), 286-295 (2016).</li>
<li>Bricker-Anthony, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Erythropoietin+either+prevents+or+exacerbates+retinal+damage+from+eye+trauma+depending+on+treatment+timing%5BTitle%5D)+AND+%22Optom+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Erythropoietin either prevents or exacerbates retinal damage from eye trauma depending on treatment timing.</a> Optom Vis Sci. 94 (1), 20-32 (2017).</li>
<li>Heldt, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+closed-head+model+of+mild+traumatic+brain+injury+caused+by+primary+overpressure+blast+to+the+cranium+produces+sustained+emotional+deficits+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neurol%22%5BJournal%5D)">A novel closed-head model of mild traumatic brain injury caused by primary overpressure blast to the cranium produces sustained emotional deficits in mice.</a> Front Neurol. 5, 2(2014).</li>
<li>Guley, N. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+closed-head+model+of+mild+traumatic+brain+injury+using+focal+primary+overpressure+blast+to+the+cranium+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">A novel closed-head model of mild traumatic brain injury using focal primary overpressure blast to the cranium in mice.</a> J Neurotrauma. 33 (4), 403-422 (2016).</li>
<li>Del Mar, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+closed-body+model+of+spinal+cord+injury+caused+by+high-pressure+air+blasts+produces+extensive+axonal+injury+and+motor+impairments%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">A novel closed-body model of spinal cord injury caused by high-pressure air blasts produces extensive axonal injury and motor impairments.</a> Exp Neurol. 271, 53-71 (2015).</li>
<li>Wolf, S. J., Bebarta, V. S., Bonnett, C. J., Pons, P. T., Cantrill, S. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blast+injuries%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Blast injuries.</a> Lancet. 374 (9687), 405-415 (2009).</li>
<li>Bricker-Anthony, C., Rex, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurodegeneration+and+vision+loss+after+mild+blunt+trauma+in+the+c57bl%2F6+and+dba%2F2j+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Neurodegeneration and vision loss after mild blunt trauma in the c57bl/6 and dba/2j mouse.</a> PLoS One. 10 (7), e0131921(2015).</li>
<li>Heldt, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+closed-head+model+of+mild+traumatic+brain+injury+caused+by+primary+overpressure+blast+to+the+cranium+produces+sustained+emotional+deficits+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neurol%22%5BJournal%5D)">A novel closed-head model of mild traumatic brain injury caused by primary overpressure blast to the cranium produces sustained emotional deficits in mice.</a> Front Neurol. 5, 2(2014).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1-ペンタノール</td><td>フィッシャーサイエンティフィック</td><td>AC160600250</td><td>アバーチン溶液の製造に使用されます&nbsp;</td></tr><tr><td>2,2,2-トリボモエタノール</td><td>シグマ・アルドリッチ</td><td>T48402</td><td>アバーチン溶液の製造に使用されます&nbsp;</td></tr><tr><td>蓋付き24ウェルプレート</td><td>VWRの</td><td>76520-634</td><td>24ウェルプレート</td></tr><tr><td>2-プロパノール&nbsp;</td><td>フィッシャーサイエンティフィック</td><td>A451-1&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>50 kS/s/チャンネルブリッジアナログ入力モジュール&nbsp;</td><td>ナショナルインスツル</td><td>NI-9237型</td><td>DAQモジュール</td></tr><tr><td>アルブミンウシ画分 V (BSA)&nbsp;</td><td>Research Products International&nbsp;</td><td>A30075</td><td>BSAの</td></tr><tr><td>抗Iba1一次抗体(ヤギポリクローナル)&nbsp;</td><td>アブカム&nbsp;</td><td>AB5076</td><td>ミクログリアのマーカー、1:500濃度で使用&nbsp;</td></tr><tr><td>抗シナプトフィシン一次抗体(マウスモノクローナル)&nbsp;</td><td>アブカム&nbsp;</td><td>AB8049</td><td>光受容体リボンシナプスのマーカー、1:20濃度で使用</td></tr><tr><td>アラルダイト GY 502&nbsp;</td><td>電子顕微鏡科学</td><td>10900</td><td></td></tr><tr><td>カコジレートバッファー</td><td>電子顕微鏡科学</td><td>11652</td><td></td></tr><tr><td>チャコールフィルターキャニスター</td><td>E-Zシステム</td><td>EZ-258</td><td>麻酔廃棄物の収集</td></tr><tr><td>クリア H20 ダイエットジェル 76A</td><td>クリア H2O&nbsp;</td><td>72-07-5022</td><td>爆発後に動物の回復を助けるために使用</td></tr><tr><td>CompactDAQシャーシ</td><td>ナショナルインスツル</td><td>USB-9162</td><td>DAQシャーシ</td></tr><tr><td>圧搾空気</td><td>A-Lガス</td><td>GSMCA300&nbsp;</td><td>加圧空気タンクの補充に使用</td></tr><tr><td>DAPIフルオロマウント-G&nbsp;</td><td>サザンバイオテック</td><td></td><td>DAPIを使用したメディアの取り付け</td></tr><tr><td>ダイヤモンドナイフ</td><td>マイクロスターテクノロジーズ、ブルカーナノ社のグループ&nbsp;</td><td></td><td>視神経切片用、3 mm/45度/スタイルH&nbsp;</td></tr><tr><td>ロバ抗ヤギ IgG (H+L) 高交差吸着二次抗体、Alex Fluor 594</td><td>Invitrogen(サプライヤー:Fisher Scientific)</td><td>A-11058</td><td>ミクログリアの二次抗体、1:200濃度で使用</td></tr><tr><td>ロバ抗マウス IgG (H+L) 高交差吸着二次抗体、Alex Fluor 594</td><td>Invitrogen(サプライヤー:Fisher Scientific)</td><td>A-21203</td><td>光受容体リボンシナプスの二次抗体、1:200濃度で使用</td></tr><tr><td>ロバ抗ウサギ IgG (H+L) 高交差吸着二次抗体、Alex Fluor 488</td><td>Invitrogen(サプライヤー:Fisher Scientific)</td><td>A-21206</td><td>桿体双極細胞の二次抗体、1:200濃度で使用&nbsp;</td></tr><tr><td>ロバ血清&nbsp;</td><td>シグマ・アルドリッチ&nbsp;</td><td>D9662</td><td>NDSの</td></tr><tr><td>デュモン #3 鉗子</td><td>ファインサイエンスツール</td><td>11231-30</td><td>全眼摘出用の細い鉗子&nbsp;</td></tr><tr><td>エタノール(200プルーフ)&nbsp;</td><td>KOPTEC(サプライヤー:VWR)&nbsp;</td><td>89125-188</td><td>エタノール&nbsp;</td></tr><tr><td>フルオロマウント-G&nbsp;</td><td>Invitrogen(サプライヤー:Fisher Scientific)</td><td>00-4958-02</td><td>取付媒体</td></tr><tr><td>Genteal Tears 点眼ジェル</td><td>コベトラス</td><td>72359</td><td>麻酔中/麻酔後に目の乾燥を防ぐための目の潤滑剤&nbsp;</td></tr><tr><td>グルタルアルデヒド</td><td>電子顕微鏡科学</td><td>16200</td><td></td></tr><tr><td>メスシリンダー 1000 mL</td><td>フィッシャーサイエンティフィック</td><td>08-572G</td><td></td></tr><tr><td>メスシリンダー 250 mL</td><td>フィッシャーサイエンティフィック</td><td>08-572円</td><td></td></tr><tr><td>メスシリンダー 500 mL</td><td>フィッシャーサイエンティフィック</td><td>08-572階</td><td></td></tr><tr><td>加熱パッド&nbsp;</td><td>ブレインツリーサイエンティフィック</td><td>AP-R 26E</td><td>制御された加熱サポート</td></tr><tr><td>高圧充填ステーション</td><td>忍者ペイントボール</td><td>HPFSV2</td><td>加圧空気タンクの補充に使用</td></tr><tr><td>イメージJ</td><td>国立衛生研究所&nbsp;</td><td></td><td>画像解析ソフトウェア</td></tr><tr><td>ミニを反転</td><td>エンパイアペイントボール</td><td></td><td>ペイントボールガン</td></tr><tr><td>イソフルラン</td><td>コベトラス</td><td>29405</td><td>吸入麻酔薬</td></tr><tr><td>イソフルラン気化器</td><td>獣医装備</td><td>901806</td><td>動物麻酔</td></tr><tr><td>マスターフレックスポンプ</td><td>コール・パーマー</td><td></td><td>動物灌流に使用</td></tr><tr><td>メタノール&nbsp;</td><td>シグマ・アルドリッチ</td><td>322415-2L&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>顕微鏡スライド</td><td>グローブサイエンティフィック</td><td>1358ワット</td><td>白色ガラス顕微鏡スライド</td></tr><tr><td>NI Measurement and Automation Explorer(NI MAX)&nbsp;</td><td>ナショナルインスツル</td><td></td><td>DAQシステム設定を行うソフトウェア</td></tr><tr><td>NI-DAQmxドライバ&nbsp;</td><td>ナショナルインスツル</td><td></td><td>DAQシステムと対話するためのドライバ&nbsp;</td></tr><tr><td>ニコンエクリプスNi-E顕微鏡</td><td>ニコンインスツルメンツ</td><td></td><td></td></tr><tr><td>四酸化オスミウム 2%</td><td>電子顕微鏡科学</td><td>19152</td><td></td></tr><tr><td>パラホルムアルデヒド 32%</td><td>電子顕微鏡科学</td><td>15714-S</td><td>PFAを4%に希釈</td></tr><tr><td>パラフェニレンジアミン&nbsp;</td><td>シグマ・アルドリッチ</td><td>P6001</td><td></td></tr><tr><td>PBS(10x)、pH 7.4</td><td>サーモフィッシャーサイエンティフィック</td><td>70011044</td><td>PBSを1倍に希釈</td></tr><tr><td>プロピレンオキシド&nbsp;</td><td>電子顕微鏡科学</td><td>20401</td><td></td></tr><tr><td>PROV3 48 L、48 in3 アルミニウム 3000 psi 定格タンク</td><td>忍者ペイントボール</td><td></td><td>加圧空気タンク</td></tr><tr><td>パイレックス 再利用可能なメディア保存ボトル 1000 mL</td><td>フィッシャーサイエンティフィック</td><td>06-414-1D</td><td></td></tr><tr><td>パイレックス再利用可能なメディア保存ボトル 500 mL</td><td>フィッシャーサイエンティフィック</td><td>06-414-1C</td><td></td></tr><tr><td>パイレックス再利用可能なメディア保存ボトル 250 mL</td><td>フィッシャーサイエンティフィック</td><td>06-414-1B</td><td></td></tr><tr><td>組換え抗PKC-a一次抗体(ウサギモノクローナル)&nbsp;</td><td>アブカム&nbsp;</td><td>AB32376</td><td>桿体双極細胞のマーカー、1:500濃度で使用&nbsp;</td></tr><tr><td>樹脂 812</td><td>電子顕微鏡科学</td><td>14900</td><td></td></tr><tr><td>シリーズTJE圧力トランスデューサ、100 psi&nbsp;</td><td>ハネウェル&nbsp;</td><td>060-0708-10TJG</td><td>圧力トランスデューサを選択するときは、測定の分解能を最適化するために範囲を考慮してください。</td></tr><tr><td>蔗糖</td><td>シグマ・アルドリッチ</td><td>S5016</td><td></td></tr><tr><td>スーパーTJE圧力トランスデューサ、7500 psi&nbsp;</td><td>ハネウェル&nbsp;</td><td></td><td>圧力トランスデューサを選択するときは、測定の分解能を最適化するために範囲を考慮してください。</td></tr><tr><td>シリンジ/ニードルコンボ</td><td>コベトルス&nbsp;</td><td>60728</td><td>IP注入を行うためのシリンジ/ニードル</td></tr><tr><td>ティッシュプラスOCTコンパウンド</td><td>フィッシャーサイエンティフィック</td><td>23-730-571&nbsp;</td><td>凍結培地&nbsp;</td></tr><tr><td>トルイジンブルー</td><td>フィッシャーサイエンティフィック</td><td>BP107-10</td><td></td></tr><tr><td>トリトンX-100</td><td>シグマ・アルドリッチ</td><td>T8787</td><td></td></tr><tr><td>UniSlide XYテーブル</td><td>ベルメックス&nbsp;</td><td>AXY40シリーズ</td><td>XYポジショニングテーブル&nbsp;</td></tr><tr><td>ユニバーシティブラシ - シリーズ233 - ラウンド、サイズ000</td><td>ウィンザーとニュートン&nbsp;</td><td></td><td>絵筆</td></tr><tr><td>Vannas スプリング ハサミ - 2.5mm 刃先</td><td>ファインサイエンスツール</td><td>15000-08</td><td>眼全体の摘出用ハサミ</td></tr><tr><td>バーチャルインストゥルメント</td><td>ナショナルインスツルメンツ&nbsp;</td><td></td><td>データ収集ソフトウェア用のデジタルツール&nbsp;</td></tr></tbody></table>

焦点閉鎖系中枢神経系損傷のためのシステム

System for Focal, Closed-System Central Nervous System Injury

ここで説明する過圧空気生成システムを使用して、成体(生後3か月)の雄C57Bl/6マウス(n = 4)の左眼を0.5秒間隔で15psiの過圧空気の6連続バーストにさらすことにより、間接外傷性視神経障害(ITON)を誘発しました。偽の動物(n = 8;Vest et al.33から採取したデータ)を麻酔し、動物ホルダーに入れ、音にはさらされましたが、過圧の空気にはさらされませんでした。
偽動物の近位視神経(図3A)は、正常な形態と分布を持つグリア細胞に囲まれた密集した均一なサイズの軸索で健康に見えました。これに対し、ITONにばく露されたマウスの近位視神経(すなわち、0.5秒間隔で隔てられた15psiの過圧空気の6回連続バースト)(図3B)は、残りの軸索間の間隔の増加、腫脹を含む軸索変性の兆候、軸索形状の不規則性、軸索のミエリン鞘の破壊などの軸索喪失の兆候を伴って変性しているように見えました。 グリア細胞の肥大および過形成を含む神経膠症の徴候。Mann-Whitney U 検定では、ITONマウスと偽マウスとの間に、全軸索(p = 0.0040)(図3C)と変性プロファイル(p = 0.0028)(図3D)に有意差があることが確認されました。これらの結果は、ITONが全軸索を有意に減少させ、変性プロファイルを有意に増加させることを示唆しています。Mann-Whitney U 検定は、ITONグループのデータに 独立サンプルt検定に十分なサンプルサイズがなかったために実施されました。
ミクログリア(中枢神経系の一次免疫細胞)のマーカーである抗Iba1( 材料表参照)による網膜断面の免疫組織化学的染色を、偽マウス(図4A)とITON(図4B)マウスの両方で行いました。染色により、ミクログリアはすべてのマウスで休眠状態にあり、長くて薄く、高度に分岐した突起を持つ小さな細胞体を特徴とすることが明らかになりました。特に、ITONマウスではミクログリアの数の増加が認められ(図4B)、損傷に応答したミクログリアの増殖が示唆されています。また、ITONマウスでは、ミクログリアが視細胞体が存在する外核層(ONL)に異常に広がっていることが観察されました(図4B)。これは、ミクログリアが神経節細胞層(GCL)、内側フジツボ層(IPL)、内核層(INL)、および外側フジツボ層(OPL)に局在していた偽動物(図4A)とは対照的です。これらの層は、通常、ミクログリアが健康で損傷のない網膜に存在する層です。
その後、桿体双極細胞のマーカーである抗PKC-α( 材料表参照)および抗シナプトフィジン( 材料表参照)および視細胞リボンシナプスによる免疫組織化学染色により、偽マウス(図5A)およびITONマウス(図5B)の両方で無傷のシナプス結合が明らかになりました。具体的には、桿体双極細胞の樹状突起が桿体視細胞のシナプス終末と延長し、重なり合っていることが観察されました。この発見は、ITONの4週間後に、1日1回1回(0.5秒間隔)の過圧空気の2回連続したバースト(0.5秒間隔)により、桿体双極細胞樹状突起が細胞体に向かって収縮することを示した初期の研究35とは対照的です。この不一致は、2つの研究間の組織採取時点が異なることに起因している可能性があります。現在のサンプルは、以前の研究ではITONの4週間後に収集されたのに対し、ITONの2週間後に収集されました。現在の解析ではシナプス障害は検出されませんでしたが、ミクログリアのプロセスが光受容体細胞体が位置するONL(図4B)に拡張されていることに注目しました。この観察結果は、双極細胞と視細胞との間のシナプス結合の破壊が損傷の二次的影響として現れる可能性があり、軸索の喪失、軸索変性、および神経膠症が損傷の一次的影響を構成することを示唆しています。
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66948/66948fig01.jpg"> 図1:限局性閉鎖系中枢神経系損傷のシステム。 上の画像の破線の四角形は拡大され、下の 2 つの画像では B、C、A として表示されています (白い矢印で示されています)。(A)ペイントボールガンの端にあるカスタム1.5インチ、非穴あきバレル(I)。(B)ガイドキャップを取り外して調整ネジ(II)を露出させた圧力調整器。(C)重力式フィードローダーを取り外し、フィードネックカバーを取り付けたフィードネック(III)。(D)1.5フィート×1.5フィートのファイバーボードを、より大きな2.5フィート×1.5フィートのファイバーボードの上に持ち上げたベースプラットフォーム。(E)圧縮空気タンクをペイントボールガンの圧力調整器に接続し、耐久性のあるストラップを使用してファイバーボードプラットフォームに固定します。(F)x-y動物位置決めテーブル。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66948/66948fig01large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66948/66948fig02.jpg"> 図2:過圧空気の焦点供給のためのカスタムアニマルホルダー。 (A)動物の頭部と後頭部の上部を露出させるための長方形の穴(3×5cm)を備えた細いPVCチューブからなるアニマルホルダーの内部。(B)動物ホルダーの外側は、幅の広いPVCチューブで構成され、幅の狭いPVCチューブがスライドして、露出開口部内の露出した組織から動物の体全体をシールドします。(C)対象のCNS損傷部位に過圧空気を焦点として送達するための露出開口部。(D)システムの出力圧力を校正するための圧力トランスデューサ。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66948/66948fig02large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66948/66948fig03.jpg"> 図3:過圧空気の焦点供給によるITON。 (A,B)(A)偽および(B)ITONからの近位視神経断面の代表的な明視野顕微鏡写真。(C)総軸索数の定量化。(D)変性軸索プロファイルの定量化。 ITON の場合は n = 4 です。 n = 9 は sham です。偽群の軸索数データは、Vest et al.33から取得しました。**p &lt; 0.005.エラーバーは標準偏差を表します。スケールバー = 20 μm。略称:ITON=間接外傷性視神経障害。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66948/66948fig03large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66948/66948fig04.jpg"> 図4:システム誘発性ITONによる異常なミクログリアの増殖とONLへの移動 (A,B)(A)偽動物および(B)ITON動物由来のミクログリア(赤)の抗Iba1標識を施した網膜断面の代表的な蛍光顕微鏡写真。スケールバー = 100 μm。略語:ITON =間接外傷性視神経障害;GCL =神経節細胞層、INL =内核層、ONL =外核層。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66948/66948fig04large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66948/66948fig05.jpg"> 図5:遅延性シナプス障害の可能性があるにもかかわらず、システム誘発性ITONによる桿体双極細胞と光受容体との間のシナプス結合の早期定着 (A,B) (A)偽および(B)からの光受容体リボンシナプスの抗シナプトフィジン標識(赤)および桿体双極細胞(緑)の抗PKC-α標識による網膜断面の代表的な蛍光顕微鏡写真)ITONの動物。スケールバー = 100 μm。略語:ITON =間接外傷性視神経障害;PKC = プロテインキナーゼC. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66948/66948fig05large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>

The prevalence of closed-system central nervous system (CNS) injuries underscores the need for an enhanced understanding of these traumas to improve ...

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Research

JoVE Journal

Neuroscience

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焦点閉鎖系中枢神経系損傷のためのシステム

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