이 비디오는 immunodeficient 쥐 모델에서 인간의 함대 (IMA)를 사용하여 스텐 트를 배포 후 내막 증식증의 발전을 연구하는 모델을 보여줍니다.
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방법 논문
인간 내유 동맥 (IMA) 이식과 Stenting : 인 Restenosis 스텐 트의 개발을 공부하는 인간 모델
이 논문에서
요약
초록
선박 stenting 후 내막 증식증의 개발에 pathobiological 및 pathophysiological 프로세스를 조사 생체내 연구 모델의 잠복기는 translational 방법 1,2를위한 열쇠입니다.
일반적으로 사용되는 동물 모델 마우스, 쥐, 토끼 및 돼지 3-5 포함되어 있습니다. 이러한 생물 학적 과정이 이미 동물의 혈관에서 공부하지만, 인간의 연구 모델 6,7 년 전에는 수행되지 않습니다 때문에 그러나, 임상 설정으로 이러한 모델의 번역이 어려운 남아 있습니다. 이 동영상에서 우리는이 translational 격차를 극복하는 새로운 인간화 모델을 보여줍니다. 표시된 절차, 재현할 쉬우며, 빠르게 수행할 수 있으며 내막 증식증과 다양한 stents의 적용의 개발을 공부하기 적합합니다.
이 비디오는 immunodeficient 쥐에 이식 다음에 인간의 혈관에 스텐 트 기술을 수행하는 방법을 보여줍니다, 그리고인간과 같은 proliferating 세포의 출처를 식별합니다.
프로토콜
1. 내유 동맥 (IMA) 준비
- 동맥 내피는 2 - 프랑스어 포가 티 동맥 embolectomy의 카테터 (박스터 헬스케어, 디어 필드, 일리노이, 미국)의 흐름에 의해 denuded됩니다. 카테터에 두번 내피 손상을 보장하기 위해 전체 선박의 길이 빠져있다.
- 8mm의 길이와 직경 2.5 mm-3mm (예 Translumina, 유콘 스텐 트)의 인간의 스텐 트를 사용합니다. 주의 : 스텐 트의 직경은 사전 및 사후 스텐 트 협착증을 피하기 위해 10 % 이상에 의해 혈관 직경을 초과해서는 안됩니다. 주의 : 같은 연구 내에 스텐 트의 길이를 전환하지 마십시오.
- 원하는 직경을 달성하기위한 적절한 풍선 압력 (어떤은 스텐 트 패키지에 언급되는)를 사용하여 스텐 트를 배포합니다.
- 쇼핑몰 ° C RPMI + 헤파린 (500 IE/10 ML) 얼음 이식까지 4 IMA를 stented.
2. 동물 준비
RNU 누드 (CRL : NIH-Foxn1rnu) 쥐 (3백~3백50g)는 는걸 있습니다scantainer에서 종래의 조건에서 SED는 캐비닛, 수사관 표준 쥐 차우와 autoclaved 물 광고....
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토론
생체내 연구 모델에서 서로 다른가 스텐 트 배치 후 내막 증식증의 발전을 조사하기 위해 존재하고 있지만, 이러한 모델은 여전히 극복하기 위해 translational 장애물에 직면. 또한, 대형 동물 모델은 고가의 주택 및 특수 조건뿐만 아니라 수술 장비 모든 실험실을 사용할 수 없습니다입니다.
인간의 내막 증식 및 인 - 스텐 트 restenosis의 개발을 연구하는 인간 IMA를 사용하면 장기의 문화 8,9의 전직 원위치 전에 공부했다. 새로운 인간화 IMA 모델은 immunodeficient 쥐의 복부 대동맥 위치로 인간 IMA을 이온 주입하여 생체내에 재 협착의 스텐 트의 문제를 해결하기위한 translational 접근 방식을 구성합니다. 인간 IMA가 쥐의 복부 대동맥의 크기에 완벽하게 일치합니다. 따라서 우리의 제시 모델, 재현성 쉽게 수행할 빠르고, 특수 외과 교육을 요구하고있다하지 않습니다저렴.......
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공개 사항
관심의 어떠한 충돌 선언 없습니다.
감사의 글
저자는 그녀의 공헌을 위해 크리스티안 Pahrmann 감사드립니다. 봉합 재료를 제공 Ethicon, Norderstedt, 함부르크 (독일)에 대한 특별 감사합니다.
기금
소냐 Schrepfer는 도이치 Forschungsgemeinschaft (DFG) (SCHR992 / 3 1 SCHR992/4-1)에서 연구 보조금을 받았습니다.] 작품 ISHLT Shumway 경력 개발 그랜트 2010 포크 연구 기금 (스탠포드 대학)에 의해 지원되었다.
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재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 시약의 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
| 2 프랑스어 포가 티의 카테터 | 박스터 헬스케어, 디어 필드, 일리노이, 미국 | 120602F | |
| 유콘 스텐 트 | Translumina 게엠베하, Hechingen, 독일 | 학업 프로토콜에 따라 원하는 스텐 트를 사용하여 | |
| RPMI 미디어 | Biochrom | Nr.F1275 | |
| 헤파린 | 벡스터 | 2B0953 | |
| isoflurane | 대수도 원장 | B506 | |
| 프로보 - 요오드 | Betadine Puredue 파마 | EAN : 5995327165830 | |
| 80% ethano리터 | Geyer | ETV 80 / 0500 | |
| 마이크로 클램프 | 하버드 장치 | PY2 - 61-0186 | |
| 봉합 8-0 | 존슨 앤 존슨, | 2808G | |
| 봉합 6-0 | 존슨 앤 존슨, | 1,698 H | |
| Carprofen | Feizer의 투어뇌려 | PZN : 0,110,208 | |
| Metamizol | Ratiopharm | ||
| 대상 검색 솔루션, pH9 | Dako | S2368 | |
| 이미지 IT FX 신호 확장기 | Invitrogen | I36933 | |
| 마우스 단클론 항 GFP 항체 | BD 생활 색상 | 632,381 | |
| 일차 항체 희석액 | Dako | S3022 | |
| 염소 - 안티 - 마우스 IgG, 알렉사 형석 488 | Invitrogen | A11017 | |
| 이차 항체 희석액 | Dako | S0809 | |
| 토끼 polycolonal 안티 평활근 α-actin | Abcam, | ab5694 | |
| 염소 - 안티 - 토끼 IgG, 알렉사 형석 555 | Invitrogen | A21430 | |
| 골드 antifade 시약을 연장 | Invitrogen | P36930 |
참고문헌
- Deuse, T., Ikeno, F., Robbins, R. C., Schrepfer, S. Imaging In-Stent Restenosis: An Inexpensive, Reliable, and Rapid Preclinical Model. J. Vis. Exp. (31), e1346(2009).
- Oyamada, S. Trans-iliac rat aorta stenting: a novel high throughput....
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