hippocampal 회로에 대한 기능 변경 사항을 조사에 대한 다원적 인 측면의 접근이 설명되어 있습니다. Electrophysiological 기술은 부상 프로토콜, 행동 테스트 및 지역 해부 방법과 함께 설명되어 있습니다. 이러한 기술의 결합은 다른 뇌 영역과 과학 질문에 대해서도 이와 유사한 방식으로 적용 할 수 있습니다.
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이 논문에서
요약
초록
외상성 뇌 손상은 (외상성 뇌 손상) 매년 미국에서 이상 1백70만명을 괴롭히는, 심지어 가벼운 외상성 뇌 손상은 영구적 신경 장애 1 될 수 있습니다. 외상성 뇌 손상 생존자, 메모리 결손 및 발작 임계 값의 감소에 의해 경험 두 보급 및 비활성화 증상은 외상성 뇌 손상 유발 hippocampal 장애 2,3에 의해 중재 할 생각입니다. hippocampal 회로 기능이 나쁜 쥐 외상성 뇌 손상 후 행동에 미치는 영향에 대해 변경된 보여하기 위해, 우리는 측면 유체 타악 상해, neuronal 세포 손실, gliosis, 그리고 이온 섭동 4를 포함한 인간의 외상성 뇌 손상의 여러 기능을 재현 외상성 뇌 손상의 일반적으로 사용되는 동물 모델을 채용 - 6.
여기 외상성 뇌 손상 유발 hippocampal 장애를 조사하는 조합 방법을 보여줍니다. 우리 접근 방식은 분석하기 위해 동물의 행동과 생화학 분석과 함께 여러 예를 생체 생리 기술을 통합해마의 포스트 외상성 뇌 손상 변경됩니다. 우리는 외상성 뇌 손상 후인지 장애를 평가하기 위해 행동 분석과 함께 실험 부상 패러다임으로 시작합니다. 전체 세포 패치 - 클램핑을 시각화 세포 분야 잠재력 녹음 및 전압에 민감한 염료 기록 : 다음, 우리는 세 가지 예를 생체 녹음 기술을 제공합니다. 마지막으로, 우리는 지역 neurochemical과 신진 대사 변경 후 외상성 뇌 손상에 대한 자세한 분석을 위해 유용 할 수 있습니다 해마의 하위 지역을 해부하는 방법을 보여줍니다.
이러한 방법은 외상성 뇌 손상 다음과 hippocampal 회로의 변경을 검토하고 이가있는 이랑과 해마의 CA1 하위 지역 (그림 1 참조)에서 발생하는 네트워크 회로 함수에서 반대 변경 사항을 조사하는 데 사용되었습니다. 각 하위 지역의 포스트 외상성 뇌 손상 변경 사항을 분석 할 수있는 능력은 외상성 뇌 손상 유발 행동 및인지 D에 참여하고있는 기본 메커니즘을 이해하는 데에 매우 중요합니다eficits.
여기에 설명 된 다원적 인 측면의 시스템은 조사가 질병 상태 (외상성 뇌 손상이 경우)에 의해 유도 현상론의 과거 특성을 밀어과 외상성 뇌 손상과 관련된 관찰 된 병리에 대한 책임 메커니즘을 확인할 수 있습니다.
프로토콜
1. 측면 유체 타악기 상해
- 케타민과 xylazine 주어진 intraperitoneally의 혼합물을 사용하여 마우스를 마취시키다. 그런 다음 요오드 스크럽을 사용하여 절개에 대한 마우스의 머리를 준비합니다.
- 3mm (직경 외) trephine을 사용하여 오른쪽 정수리 영역에 craniectomy을 수행합니다.
- cyanoarylate 및 치과 아크릴을 사용하여 craniectomy 통해 보안 Luer-LOC 바늘 허브 (직경 3mm 내부).
- 24 시간 후, 흡입을 통해 isoflurane을 사용하여 마우스를 마취시키다.
- 일단 정상적인 호흡 이력서,하지만 마우스가 자극에 민감되기 전에, 유체 타악 부상 장치를 통해 두개골에 염분의 20 밀리 초 펄스를 제공합니다.
- 즉시 부상 후 허브를 제거 isoflurane을 사용하여 마우스를 reanaesthetize하고, 두피가 폐쇄 봉합 해.
샴 운영하는 제어 단계 1.5 생략과 동일한 절차를 받게 될 것입니다.
2. 행동 분석 - 에어컨, 두려움 Response
- 에어컨, 공포 반응 (CFR) 교육하기 전에 연속 2 일에 쥐를 처리합니다. ....
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토론
위에서 설명한 각 기술은 관찰 된 행동 적자의 원인이 기본 메커니즘의 더 큰 이해에 기여하고있다. 각 방법에서 얻은 고유 한 정보를 결합하여 우리가 더 정밀도와 생물학적 메커니즘을 검토 할 수 있습니다.
측정 fEPSPs는 뉴런의 대형 spatially 정의 영역의 순 신경 효능을 정량화하는 데 유용합니다. 또한 시냅스 소성를 받아야하는 세포의 그룹의 가능성에 대한 정보를 제공 할 수 신경은 학습과 기억의 상관 관계. 이 기술적으로 간단하고 회로 기능의 폭 넓은 측정에 대한 정보를 제공하는이 electrophysiological 분석의 유용한 첫번째 지점입니다.
fEPSPs는 대조적으로, 전체 세포 패치 - 클램프 녹음은 단일 셀의 electrophysiological 매개 변수에 대한 자세한 정보를 제공합니다. 그것은 수많은 다른 매개 변수와 일반 등 매우 다양한 기술입니다시냅스 입력의 에스는 녹화 조건 (전압을 유지하는 .......
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공개 사항
관심 없음 충돌이 선언 없습니다.
감사의 글
저자는 자신의 기술 지원을 부르주아 더러 감사드립니다. 이 작품은 건강 보조금 R01HD059288과 R01NS069629 국립 연구소에 의해 자금을 지원했다.
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재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 장비의 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 코멘트 (선택 사항) |
| 200B 앰프를 Axopatch | 분자 장치 | AXOPATCH 200B | 패치 - 클램프 장비 |
| Digidata 1322A 디지타이저 | 분자 장치 | 패치 - 클램프 장비 | |
| MP-225 micromanipulator | 셔터 | MP-225 | 패치 - 클램프 장비 |
| DMLFSA 현미경 | Leica | 패치 - 클램프 장비 | |
| 700B 앰프를 Multiclamp | 분자 장치 | 700B를 MULTICLAMP | 다목적 (필드)도구 |
| Digidata 1440 디지타이저 | 분자 장치 | Multipurpos (필드) 장비 | |
| MPC-200 micromanipulator | 셔터 | MPC-200 | 다목적 (필드) 장비 |
| BX51WI 현미경 | 하늘 | BX51WI | 다목적 (필드) 장비 |
| 900A 앰프를 Axoclamp | 분자 장치 | 900A를 AXOCLAMP | VSD 장비 |
| Digidata 1322 디지타이저 | 분자 장치 | VSD 장비 | |
| Redshirt CCD-SMQ 카메라 | Redshirt | NCS01 | VSD 장비 |
| VT 1200 년대 Vibratome | Leica | 14048142066 | |
| P-30 전극 풀러 | 셔터 | P-30 / P | |
| 완료 프로테아제 억제제 | 로슈 | 11697498001 |
참고문헌
- Faul, M., Xu, L., Wald, M. M., Coronado, V. G. Traumatic Brain Injury in the United States: Emergency Department Visits Hospitalizations and Deaths 2002-2006. Centers for Disease Control and Prevention, National Center for Injury Prevention and Control. , (2010).
- McAllister, T. W.
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