방법 논문

2013년 9월 - 이달의 JoVE

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2013년 9월 3일

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이 논문에서

초록

다음은 2013년 9월호 JoVE: The Journal of Visualized Experiments에 게재될 내용입니다.

구개형성(palatogenesis, 구개 형성)은 척추동물에서 고도로 조절되고 보존되는 복잡한 발달 과정을 포함합니다. 따라서 과학자들은 제브라피시와 같은 실험실 모델을 사용하여 구개열 및 관련 발달 기형을 연구합니다. Gfrerer 외. 타임 랩스 컨포칼 현미경을 사용하여 제브라피시 배아를 검사하여 배아를 검사하면 배쪽 신경관에서 두개골 신경능선 세포(CNCC)가 두개안면 구조를 형성하기 위해 이동하는 것을 관찰할 수 있습니다. 이 방법은 또한 인간의 구개열과 같은 상태를 모델링하는 데 사용되는 제브라피시의 비정상적인 두개안면 발달에 대한 실시간 이미징을 가능하게 합니다.

실험실에서는 박테리아, 효모 및 기타 여러 세포 유형이 일반적으로 쉐이크 플라스크에서 자랍니다. 그러나 이 고전적인 기술에는 pH, 산소 농도, 영양소 및 온도의 변동과 같이 최적의 성장을 방해할 수 있는 많은 단점이 있습니다. JoVE Bioengineering에서 Obom 등은 pH 프로브, 산소 프로브, 배지 보충을 위한 시약 공급 병, 정밀한 온도 제어, 가스 주입기 및 배양을 교반하는 임펠러가 완비된 벤치탑 생물 반응기를 시연합니다. 이 시스템은 재조합 발현 시스템의 대규모 성장을 위한 최적의 배양 조건을 허용합니다.

또한 JoVE Bioengineering에는 유동 기반 세포 접착 분석에서 살아있는 세포를 이미징하는 방법이 있습니다. 그러나 단일 카메라 시스템을 사용하는 표준 프로토콜과 달리 당사의 주요 방법은 두 개의 형광 채널에서 동시에 실시간 이미지를 캡처하는 듀얼 카메라 방출 분할 시스템입니다. Carlson 외. Parallel Plate Flow Chamber Adhesion Assay를 사용하여 접착, 롤링 및 기타 세포 거동을 연구하는 데 사용하는 이 듀얼 카메라 시스템을 시연합니다.

JoVE Chemistry는 그리 흔하지 않은 동물 모델을 특징으로 한다: 미국에서 널리 퍼져 있는 동부 붉은박쥐; 그러나 최근 몇 년 동안, 흰코증후군(white nose syndrome, WNS)이라고 불리는 곰팡이 질병으로 인해 수백만 마리의 박쥐가 죽었다. WNS는 자연 해충 방제의 한 형태로 박쥐에 의존하는 농업 산업에 큰 위협이 됩니다. 다른 포유류와 마찬가지로 박쥐의 피부에는 피지선이 있어 감염으로부터 보호하는 데 도움이 되는 기름진 물질인 피지를 분비합니다. Pannkuk 외. 박쥐의 털과 피부에서 피지를 분리하는 방법을 시연한 다음 매트릭스 보조 레이저 탈착/이온화 비행 시간(MALTI-TOF) 질량 분석법과 결합된 박층 크로마토그래피(TLC)를 사용하여 피지의 지질 조성을 분석합니다. 피지의 지질 프로필은 면역 과정에 영향을 미칠 수 있으며 질병 마커 역할도 할 수 있습니다. 따라서 이 방법은 동부 붉은박쥐와 다른 포유류의 질병 치료 및 예방에 중요한 정보를 얻을 수 있습니다.

JoVE 2013년 9월호 에서 몇 가지 주요 내용을 살짝 엿볼 수 있었습니다. JoVE: The Journal of Visualized Experiments에서 전체 기사와 더 많은 기사를 보려면 웹 사이트를 방문하십시오.

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