Här presenterar vi ett protokoll för att etablera en replikerbar konduktiv hörselnedsättning induktion via kirurgiska tympanic membran punktering och verifiering av otoskop visualisering och beteendemässiga bedömning av klappa startle.
Konduktiv hörselnedsättning (CHL) är en utbredd hörselnedsättning hos människor. Målet med protokollet är att beskriva ett enkelt kirurgiskt ingrepp för att inducera CHL på gnagare. Protokollet visar CHL av tympanic membran punktering. Verifiering av CHL kirurgi var genom otoskop undersökning och beteendemässiga bedömning av klappa skrämma svar, både Replikerbar och pålitlig, och är enkla metoder för att demonstrera hörselnedsättning har inträffat. Den enkla CHL förfarande är fördelaktigt på grund av dess reproducerbarhet och flexibilitet till olika sysselsätt i hörselnedsättning forskning. Begränsningarna av inducerande CHL genom en kirurgisk metod är förknippade med inlärningskurvan att utföra kirurgiska ingrepp och förtroende för audiologiska undersökning. Inducera en hörselnedsättning av CHL tillåter en att lätt studera neurala manifestationer och beteendemässiga resultat av hörselnedsättning.
Förekomsten av hörselnedsättning hos barn och vuxna är cirka 19,5%1 respektive 15,2%2 . Emellertid, cirka 39,3% av alla nyfödda med en onormal hörsel screening får inte avhjälpande behandling som rapporterats av Centers for Disease Control3. Hörselnedsättning är ett allmänt studerat tillstånd, och gnagare är en robust modell för att studera normal hörsel och hörsel relaterade störningar4,5,6,7,8,9 ,10,11,12,13,14,15. Hörsel störningar såsom konduktiv hörselnedsättning (CHL) leder till en ökning av den kortsiktiga synaptiska depressionen i hörselbarken4, vilket resulterar i grundare psykometriska sluttningar i samband med frekvensmodulering detektions trösklar 5. konduktiv hörselnedsättning modeller av kirurgiskt avlägsnande/förskjutning av Malleus, tympanic membran (TM) punktering eller Öronpropp är lätt anställda och möjliggöra en snabb induktion av hörselnedsättning modell5,14 ,15,16,17,18. Målet med det nuvarande protokollet och metoden är att demonstrera en enkel och reproducerbar CHL-modell på gnagare.
Det nuvarande protokollet är billigt (≈ USD $300 med alla verktyg), och lätt kan ändras till olika forskningsaktiviteter. Råttan har haft detaljerade bedömningar av mellanörat anatomi19,20,21,22,23, kirurgiska metoder24, modeller i otitis media25, 26,27 och TM punkteringförnyelse 16,17,18,28,29,30, vilket gör det till en idealisk modell för att studera Hörselnedsättning. Här, en enkel CHL induktion förfarande beskrivs med verifiering av otoskop och beteendemässiga bedömning med klappa skrämsel respons i råtta, som sedan kan användas för att utforska ytterligare följdtillstånd av hörselnedsättning. CHL-proceduren induceras av kirurgisk punktering av TM. Verifiering av CHL förfarande utförs av otoskop visualisering för att avgöra frånvaro av TM. Beteendemässig bedömning utförs av en hög decibel (dB) Ljudtrycksnivå (SPL) hand-CLAP. Denna metod har tillämpats tidigare i en mängd gnagare. Det är lätt att replikera, producerar robusta psykometriska skillnader och förändringar i neurala fysiologiska svar4,5,16,17,18.
Vi beskriver en enkel kirurgisk induktion av CHL med verifiering med otoskop visualisering och beteendemässiga klappa skrämsel respons i råtta. Här visar vi metoden på råtta och tidigare denna metod har tillämpats på gerbiler och möss. Metoden kan lätt antas till andra gnagare. Induktion av CHL tillåter studiet av en subtil form av hörselnedsättning som manifesteras i auditiva kortikala förändringar och psykofysiska beteendemässiga fynd4,5,</…
The authors have nothing to disclose.
Detta arbete stöddes delvis av Hong Kongs forskningsanslag rådet, tidiga karriärprogram, projekt #21201217 till C. L., för projektet Brain Mapping guidad elektrofysiologi med tillämpningar i hörsel och bullerforskning. Vi tackar Posgrado en Ciencias Biomédicas, Instituto de Neurobiología vid Universidad Nacional Autónoma de México (UNAM), Consejo Nacional de Ciencia y Tecnología (CONACyT) México för Graduate Fellowship 578458 till FAM Manno.
Latex, polyvinyl or nitrile gloves | AMMEX | Use unpowdered gloves 8-mil | |
Micro spring scissors (see Fig. 1b) | RWD Life Science | S11035-08 | 8.0 cm total length, with 3.5mm cutting edge, or similar micro forceps. Standard tweezers with spring action will suffice |
Otoscope mini 3000 | HEINE | D-008.70.120M | Standard LED otoscope will suffice |
Rat or mouse | JAX labs | Any small rodent | |
Small rodent cage | Tecniplast | 1284L | Need two cages to separate CHL rodent from hearing rodent. If rodent are in direct contact with one-another, they will startle each other. Cage dimensions 365 x 207 x 140 mm, floor area: 530 cm2/82.15 in2 |