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공간 학습 및 반 즈 미로 계 집 아이-에서-조 난 패러다임을 사용 하 여 마우스 Prosocial 동작 분석

Published: November 17, 2018 doi: 10.3791/58008

Summary

이 프로토콜은 공간 학습 및 반 즈 미로 사용 하 여 메모리를 측정 합니다. 새로운 계 집 아이-에서-조 난 패러다임 쥐에서 prosocial 동작과 운동 활동을 평가 하는 데 사용 됩니다.

Abstract

반 즈 미로 공간 학습 및 음식 제한 또는 매우 스트레스 자극에 노출 하지 않아도 메모리의 신뢰할 수 있는 측정 이다. 반 즈 미로 또한 미로 플랫폼 및 탐험 행동에서 탈출을 일반 동기 같은 다른 마우스 동작을 평가할 수 있습니다. 반 즈 미로 유전자 변이 여부를 측정할 수 있다 또는 환경 변수 수집 및 공간 기억의 보존에 영향을 줄 뿐만 아니라 수 쥐 여 검색 전략에 대 한 정보를 제공. 여기 반 즈 미로 사용 하 여 성인 쥐 단일 발달 에탄올 노출 이벤트 다음에 메모리 적자를 검출 하기 위하여. 새로 설명된 조에 계 집 아이 패러다임 남성 마우스 경기장의 센터 필드에 챔버에 갇혀 여성 마우스를 제공 합니다. 그것은 사회적으로 갇힌 여성 응답 prosocial 동작을 마우스에 대 한 기회를 제공 합니다. 계 집 아이-에서-조 난 패러다임 또한 새로운 경기장 및 측정 운동 활동에서 마우스 동작을 검사 하 사용할 수 있습니다. 반 즈 미로 계 집 아이-에서-조 난 프로토콜 필요 최소한의 금융 투자와 일반적인 실험실에서 테스트의 대부분의 측면을 구성할 수 있습니다. 이러한 유연 하 고 액세스할 수 있는 도구를 개발의 과정을 통해 행동 변화를 감지 사용할 수 있습니다.

Introduction

이 프로토콜의 목적은 측정 공간 학습과 생쥐 반 즈 미로 뿐만 아니라 사회적인 응답성 및 운동 계 집 아이-에서-조 난 패러다임을 사용 하 여 사용 하 여 메모리 것입니다. 일반적으로 설치류 포함 멀티-spoked 기기에의 한 팔에 숨겨진된 음식을 찾을 수 있는 마우스의 기능을 측정, 광선 팔 미로 큰 욕조 또는 수영장 물에서 마우스를 두는 모리스 물 미로 공간 학습 및 메모리 테스트를 사용 하 고 숨겨진된 수 중 플랫폼을 찾는 데 걸리는 시간을 평가 합니다. 일반적으로, 이러한 패러다임에 대 한 여러 실험을 걸쳐 훈련과 수 둘 다의 측정 수집 속도 단기 및 장기 메모리 실험을 통해 보존을 학습.

광선 팔 미로 모리스 물 미로 설치류에서 메모리 테스트를 신뢰할 수 있는 방법입니다, 하지만 그들은 일부 연구에 대 한 합병증을 제시. 미로 두 보강1으로 박탈 또는 강한 혐오 자극을 사용합니다. 광선 팔 미로 설치류 제대로 음식 보상을 찾을 동기 되도록 음식 부족을 사용 합니다. 모리스 물 미로에서 강제 수영에 의해 유도 된 스트레스의 영향 쥐2에 결과 변경할 수 있습니다.

반 즈 미로 설치류, 오픈 미로 표면3탈출 구멍의 위치를 배울 수 필요로 하는 대안 공간 인식 작업입니다. 약한 혐오 자극 (빛 또는 소리) 플랫폼에서 마우스 탈출 가능성을 높이기 위해 적용 됩니다. 그래서 동물 준비 금액 미만 반 즈 미로 음식 부족, 필요 하지 않습니다 광선 팔 미로. 그것은 행동 또는 분자 먹고, 호르몬 조절, 또는 hypothalamic 경로와 관련 된 조사는 연구자에 의해 충돌 없이 사용할 수 있습니다.

반 즈 미로 모리스 물 미로에 장점이 있습니다. 그것은 쥐4corticosterone의 더 높은 레벨을 일으키는 모리스 물 미로 보다 덜 스트레스입니다. 또한, 그것 훨씬 간단 하 게 조립 하 고 테스트 절차 및 저장 하는 동안 덜 전용된 공간이 필요.

계 집 아이-에서-조 난 분석 결과 prosocial 행동 뒤 운동 활동을 평가할 수 있는 간단한 2 부분 실험 이다. 계 집 아이-에서-조 난 분석 결과 탐색적 행동과 봉된 여성 쥐에 대 한 응답에서 남성 설치류의 사회적 응답을 평가 하기 위해 설계 되었습니다. 사교 성 (뿐만 아니라 사회 참신에 대 한 기본 설정)을 평가 하기 위해 일반적으로 사용 되는 방법은 Crawley의 3-챔버 사교 성 테스트, 근처 또는 다른 쥐5에서 시간을 보내고는 마우스의 자유로운 선택 평가의 사용 이다.

크롤 리의 3-챔버 사교 성 테스트와 마찬가지로, 계 집 아이-에서-조 난 분석 결과 또한 측정 다른 마우스의 존재 시간을 보내고 하는 방법에 관한 자유로운 선택 하지만 그것 또한 제공 하는 사회 작용의 깊은 측면에 대 한 측정: 1)에 계 집 아이-에서-조 난 분석 결과, 갇힌된 여성 마우스는 오픈 필드의 중앙에 그래서 개최 오픈 필드에 남자의 잠재적인 혐오 사회적 탐구 조사 고민된 여성 conspecific에 그의 드라이브에 대 한 경쟁해 서. 2) 계 집 아이-에서-조 난 모델은 또한 쥐에 자주 탐험 되지 않은 갇힌된 마우스에 대 한 응답에서 prosocial 및 empathetic 행동을 평가 하는 방법은 제공 합니다.

동물 공감은 정확 하 게 관찰 하 고 측정, 많은 패러다임이이 목적을 위해 존재 하더라도. 예를 들어 쥐에 갇혀 케이지 친구 쥐 덫을 놓은 동물을 무료로 작동 합니다 prosocial 동기의 상태를 유도할 수 있다. 사실, 쥐 것도 초콜릿 간식를 포함 하는 유사한 컨테이너를 열기 전에 갇힌된 동물 수 있도록 다음 초콜릿 액세스 선택한6새로 해제 된 쥐 함께 그것을 공유.

일반적으로 고통;의 형벌을 포함 하는 쥐에 공감의 측정 실제로, 고통에 다른 마우스 볼 마우스7,8자신을 고통에 더 민감합니다. 구속 스트레스 설치류에 특징이 현상 이며 공감 쥐9,10에 한 측정으로 스트레스 응답을 검사 하는 충격으로 결합 되었습니다.

윤리적 고려 스트레스 유도 대안 필요 하다 그래서 유발된 통증이 나 충격과 관련 있다. 우리는 통증이 나 충격 요법의 부재에 empathetic 행동의 측정으로 계 집 아이-에서-조 난 패러다임을 개발. 그들은 작은 컨테이너 내에서 주변에 돌 수 없습니다 아직 그들은 무사 히 그들의 고통에 응답을 다른 쥐에 대 한 기회를 제공 하면서 우리의 계 집 아이-에서-조 난 프로토콜에 갇힌된 쥐만 잠시 후 고통의 명백한 흔적을 보여줍니다.

계 집 아이-에서-조 난 평가 하려면 남성 마우스는 작은 빈 중앙 실린더를 포함 하는 큰 새로운 경기장에 배치 됩니다. 예비 동작으로 경기장의 얼마나 많은 부분 교차 하 고 중앙 오픈 공간에 얼마나 많은 시간 소요를 포함 하 여 몇 분 동안 기록 됩니다. 이 메서드는 성공적인 완료에 대 한 조정된 움직임을 요구 하는 학습 상황에서 잠재적인 confounder로 운전 적자를 배제 하는 빠르고 쉬운 방법을 제공 합니다. 그것은 또한 오픈 센터 분야에 얼마나 많은 혐오는 존재의 기본적인 측정을 제공 합니다. 두 측정 반 즈 미로 성능에 영향을 미칠 수 있습니다.

초기 탐험 다음 남성은 경기장에서 제거 하 고 여성 마우스는 동봉, 작은 분명 중앙 실린더 (와 유사한 쥐에서 혈액을 수집 하는 데 사용)에 배치 됩니다. 그리고, 원래 남성 마우스 경기장, 재는 예비 동작 다시 득점. 마우스는 갇힌된 여성 있으면 (센터 광장에 파고 편수 소요 시간에 의해 득점), 그리고 행동 패턴 변화에 따라 사회적 상호 작용에 관심이 있는지 여부를 평가 하는 계 집 아이-에서-조 난 패러다임은 마우스 (실린더 조사 및 갇힌된 여성 연락처 이벤트의 양에 의해 득점) 갇힌된 여성을 향해 prosocial 행동을 전시 한다. 계 집 아이-에서-조 난 분석 결과 사회 참신 (크롤 리의 3-챔버 사교 성 테스트와 마찬가지로) 연구원은 익숙한 또는 소설 마우스를 트랩 하는 여부에 따라 성향 측정을 사용할 수 있습니다.

함께, 반 즈 미로 계 집 아이-에서-조 난 실험 허용 마우스의 정확한 평가 학습 능력과 사회 응답 매우 스트레스 자극의 부재에서. 모든 행동 분석, 것과 같이이 실험 동물에 의해 경험 하는 불편을 최소화 하는 동물 경험으로 좋은 감도로 수행 되어야 한다.

대부분 미로 처럼 차이 운동 활동에 영향을 미칠 수 반 즈 미로에서 성능을 반 즈 미로 사용 하 여 (와 같은 움직임을 손상 시킬 수 있는 돌연변이 생쥐에 학습 평가를 하는 경우에 특히 연구원은 또한 운동 활동, 평가 한다 그래서 그는 Huntington의 질병 마우스 모델에서 발견 하거나 그 과다를 유발 하거나 지체 운동, 에탄올 같은 독 소에 노출). 또한, 미로 챔버를 철저 하 게 청소 해야 하 고 냄새 큐를 피하기 위해 각 동물 사이 변경 침구 혼동 한다.

중요 한 것은, 최소한의 금융 투자 사이트에 모든 자료를 날조 될 수 있다 그리고 이러한 분석의 작은 물리적 공간 거의 모든 설정에서 뛰어난 유연성에 대 한 수 있도록 이러한 실험을 복제 될 수 있습니다 의미 합니다. 접근의이 유형에 좋은 과학을 또는 파일럿 데이터를 신속 하 게 실질적인 지원의 부재에서에서 수집 해야 하는 상황에서 한정 된 자원을 가진 작은 기관에서 수행할 수 있습니다.

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Protocol

여기에 설명 된 모든 메서드는 기관 동물 관리 및 사용 위원회 (IACUC)의 Hampden 시드니 대학 또는 랜 돌 프-마 콘 대학 (어디 몇 가지 작업 이전에 수행한)에 의해 승인 되었다.

1. 기본적인 주택 마우스의

  1. 단단한 바닥 및 측면, 그리고 부드러운 침구와 종이 파쇄 등의 재료를 중첩의 레이어 플라스틱 장에 쥐 집. 났습니다 옥수수 cobs 구성 된 침대 또는 나무 부스러기를 사용 하 고 침구 위생에 대 한 정기적으로 변경 됩니다.
  2. 음식에 대 한 액세스를 제공 하 고 광고 libitum물. 플라스틱 케이지 상단의 집 음식 호퍼. 음식 호퍼에서 제대로 공식화 마우스 음식 펠 릿을 분배 하 고 물 디스펜서를 제공 합니다. 케이지 상단 마우스 외부 오염 물질 로부터 보호 하기 위해 공기 필터를 갖추고 있는지 확인 합니다.
  3. 주택 시설에 12 시간 빛 어두운 주기에 따라 쥐의 자연적인 circadian 리듬을 유지 합니다. 행동 테스트 동물의 어두운 주기 동안 이상적으로 하루 중 같은 시간에 같은 저녁 시간 동안 실시 합니다.
    참고: 관리는 구별 주택에서 쥐를 취해야 한다. 구별 마우스에 대 한 다양 한 방법을 귀 펀치, 귀 태그, 꼬리 표시 등 사용할 수 있습니다.

2. 반 즈 미로 테스트: 건설

  1. 원형 나무 보드를 약 120 cm를 가져옵니다.
  2. 원의 둘레의 주위에 원형 구멍 (지름에서 4.5 c m) 20 컷. 미로 가장자리에서 2.5 cm 및 인접 구멍 떨어져 13 cm 각 구멍을 배치 합니다.
  3. 서피스를 부드럽게 하 고 그들에 페인트 광택 흰색 (밝은 색 권장).
  4. 작은 컵의 삽입을 위한 미로 보드의 지정 한쪽 20 구멍 및 장소 2 후크 각 구멍 (각 구멍의 양쪽에 하나)의 각각에서 대략 2-3 cm 후크.
  5. 얕은 블랙 (플라스틱) 디스크를 사용 하 여 후크 미로의 측면에 구멍을 커버에 대 한. 후크를 사용 하 여 미로의 하단에 디스크를 개최 하기 위해 두꺼운 고무 밴드를 확보.
  6. 안전 하 게 반 즈 미로 120cm 지상 및 테이블 또는 자 처럼 마찬가지로 키가 다른 개체에서 탑재 합니다. 상자 또는 자 미로의 중앙을 지 원하는 데 사용할 수 있습니다.
  7. 미로의 3 면에 추가-미로 큐로 한 모양으로 큰 흰색 포스터 (삼각형, 원 및 크로스) 각 벽에 장소. 각 시험에 대 한 미로 주위 벽에 포스터를 유지 합니다.
  8. 미로의 마지막 편이 생쥐는 미로에 게 표시 되 고 연구원은 없이 데이터를 정확 하 게 기록 될 수 있도록 관찰자를 숨기려고 단단한 검은 커튼을 설정 합니다.
  9. 전체 미로 표면의 조감도 함께 경기장에 비디오 카메라를 일시 중단 합니다.
  10. 청소 (블랙 디스크와 대상 상자 포함) 미로의 모든 표면을 물으로 다음 70% 에탄올 솔루션 각 마우스 시험 전후.
  11. 미로 (재판의 시작/완료에 온/오프 회전)의 센터를 통해 100 W 광원 25 cm를 놓고 디스크와 바닥을 직면 하는 후크 하십시오.
    참고: 방에 있는 다른 모든 오버 헤드 조명 해야 해제 테스트 하는 동안. 100 W 빛 옆 매달아 초음파 소음 공해의 추가 것이 좋습니다. 각 재판의 시작/완료에 온/오프 바꿀.

3. 반 즈 미로 테스트: 프로시저

참고: 모든 미로 구성 요소가 물과 70% 에탄올 용액으로 세척 이력서를 테스트 하기 전에 완전히 건조 시간에 대 한 수 있도록, 각 재판 전후 확인 합니다. 치료는 재판에 대 한 타이머로 서 공급 준비를 해야 합니다.

  1. 신뢰할 수 있는 식별 메서드를 사용 하 여 그룹의 모든 생쥐를 집. 그들은 적극적으로 미로에 실행 하지 않는 시험장 외부 마우스를 유지 합니다. 이것은 그들은 초음파 권총에 완전히 적용 되지 않습니다 확인 하입니다.
  2. 부드럽게 따기 하 고 한 손에 발, 꼬리의 기지에서 그들을 들고 하 여 쥐를 처리 합니다.
  3. 훈련, 미로에서 하루 학습/획득을 평가 하기 위해 연속에서 7 일 동안 매일 한 번 실행 하는 생쥐를 있다.
    참고: 단일 장기 재판 메모리/보존 평가를 나중에 할 수 있습니다. 현재 프로토콜 훈련 출생 후 하루 32에서 시작 하는 사춘기 쥐 그리고 장기 재판 4 개월의 나이에 성인에서 수행 되었다.
  4. 각 마우스 테스트 기간 동안 사용 하 여 대상 구멍 임의로 할당 합니다. 구멍 1-20 미로의 바닥에 또는 어디 그들은 미로에서 마우스에 표시 되지 않습니다 미로 둘레의 외부에 표시 수 있습니다.
  5. 작은 블랙 박스 (23 x 11 cm) 할당 된 구멍 디스크를 교체 합니다. 단단히 가까운 갈고리에 연결 된 고무 밴드를 사용 하 여 반 즈 미로를 연결 합니다.
    참고: 대상 상자는 얕은 충분히 마우스나 수 쉽게 스텝 다운으로 마우스 그것으로 아래로 이동 필요가 없습니다 수 있도록 단계를 포함.
  6. 테스트가 시작 될 때까지 30 초 동안 적응 하 컵 아래 미로의 센터에 마우스를 놓습니다. 비디오 녹화를 시작 합니다.
  7. 빛과 초음파 권총 켭니다. 동물의 초기 제목 바이어 싱을 방지 하려면 문자열 메커니즘을 통해 컵을 들어올립니다. 타이머를 시작 하 고 관찰 하는 커튼 뒤에 앉아.
  8. 마우스 입력 대상 구멍, 후 재판 또는 바인더의 시작에 사용 된 동일한 불투명 컵 구멍을 커버 하 고 초음파 권총 끄십시오. 마우스 5 분 경과 후 목표를 입력 하지 않은, 경우 대상 구멍에 마우스를 확보.
    1. 마우스 입력 구멍을 확인 합니다. 마우스 대상 상자 안에 있을 때 구멍을 커버 하 고는 권총 끄십시오. 마우스를 그대로 1 분간 대상 상자에 남아 있을 수 있습니다.
  9. 하지만 대상 구멍 훈련 기간 동안 각 마우스에 대 한 일정 하 게 유지 됩니다 실행 마우스 무작위 순서로 매일 이전 마우스에 의해 왼쪽으로 어떤 단서/냄새를 따르지는 되도록.

4. 반 즈 미로 테스트: 데이터 분석

  1. 반 즈 미로 실험 기록 다음과 같은 타임 데이터: 미로에 소요 시간 총 대상, 찾을 시간과 대상 입력 대상 구멍을 입력 하는 시간.
  2. 오류 (잘못 된 구멍 탐험의 수)의 수를 확인 하려면 마우스의 전반적인 움직임을 추적 대상 발견 전후. 또한 탐험 첫 번째 구멍을 대상 구멍에서 거리를 기록 (거리는 멀리 구멍의 수), 측정 함께 어떤 주목할 만한 행동을 손질.
  3. 각 재판 중 미로의 다이어그램으로 종이의 조각에 각 동물의 움직임을 추적 하 고 그것을 사용 하 여 검색 전략을 분석 하 고 대상 반대 사분면에서 탐구 했다 구멍 수를 결정. 비디오 분석을 사용 하 여 경로 확인 하십시오.

5. 계 집 아이-에서-조 난 테스트: 건설 자제 챔버

  1. 명확한 실린더와 같은 길이 ¾ 여성 마우스의 길이에 코의 끝에 꼬리의 기지에서 잘라. 실린더의 크기는 내부 배치 마우스 돌아서 수 없습니다 있는지 확인 하십시오.
    참고: 우리 만들기 4 개월 된 생쥐에 대 한 1 개월 마우스 4 cm 긴 튜브와 8 cm 긴 튜브 아래로 50 mL 원뿔 튜브의 원뿔 끝을 잘라.
  2. 모자 중 하나 제거 될 수 및 다시 연결 되도록 실린더의 양쪽 끝을 모자. 펀치 구멍 3-4, 약 0.5 c m 각, 각 cap에. 구멍 마우스와 호흡12사이 코 감동 수 있도록 충분히 큰 있는지 확인 하십시오.
    참고: 또는, 혈액 수집 하는 동안 마우스 구속 장치를 사용할 수 있습니다.

6. 계 집 아이-에서-조 난 테스트: 경기장 준비

  1. 경기장 19 cm 벽 38 x 38 cm의 한 불투명 한 토플 리스 플라스틱 사각형 상자 인지 확인 합니다. 약 2.5 c m의 높이에 옥수수 침구와 그것을 균일 하 게 채우십시오.
    참고: corncob 침구 쉽게 파고 이벤트 감지 합니다.
  2. 경기장의 전체 보기에 경기장에 비디오 카메라를 일시 중단 합니다.

7. 계 집 아이-에서-조 난 테스트: 탐구 행동 측정

  1. 장소는 경기장의 센터에 폐쇄 하 고 빈 스트레스 챔버.
  2. 정지 카메라로 녹화를 시작 합니다.
  3. 남자 마우스를 선택 합니다. 쥐 식별 표시를 하는 경우 note이 남자의이 정체성; 그렇지 않은 경우에이 마우스를 표시 하는 감 금 소에 돌려보내기 후에 구별 될 수 있다.
  4. 부드럽게 경기장에서 왼쪽된 아래 모서리에 컵 아래 남성 마우스를 놓습니다. 30 초 후, 문자열 메커니즘을 통해 컵을 제거 합니다.
  5. 마우스를 녹음 하는 동안 그것의 시야에 참견을 돌보는 10 분 탐구 수 있습니다. 10 분의 끝에, 경기장에서 마우스를 제거 하 고 5 분12에 대 한 지주 케이지를 반환 합니다.
  6. 녹음을 중지 하 고 적절 한 식별자를 가진 비디오 파일을 저장 합니다.

8. 계 집 아이-에서-조 난 테스트: 사회 응답 측정

  1. 예비 동작 측정에서 같은 무대와 녹음 설정 사용 하 여.
  2. 여성 마우스를 선택 합니다. 쥐 식별 표시를 하는 경우 note이 여자의이 정체성; 그렇지 않은 경우에이 마우스를 표시 하는 감 금 소에 반환 후에 구별 될 수 있다.
    참고: littermate, 케이지 친구, 또는 새로운 마우스를 사용할 수 있습니다, 연구 질문에 따라. 여러 실험을 수행 하는 경우 모든 재판에 걸쳐 관계를 유지 합니다.
  3. 여성 마우스 부드럽게 목 구속, 또는 꼬리의 기지에 의해 필요한 경우 누른 구속 챔버로 낮은. 그것은 뒤에 오픈 엔드 닫고 돌아서 수 있는지 확인 합니다.
    참고: 여성 마우스 구속 챔버를 입력 저항 것 입 저항 하는 장갑 착용 고려 하십시오.
  4. 정지 카메라로 녹화를 시작 합니다.
  5. 공감 경기장의 센터에서 구속 챔버 안에 갇힌 여성 마우스를 놓고 10 분 두었던 여성을 허용 합니다. 여자의 시야 밖으로 유지 하는 것을 주의.
  6. 여성 마우스는 5 분 동안 감 금 실에서 후 다시 무대로 공감 하기 전에 동일한 프로세스를 사용 하 여 표시 된 남성 마우스를 놓습니다. 수 컷 마우스 다시 쥐의 시야 밖으로 남아 돌보는 경기장을 탐구 하는 추가 5 분.
  7. 녹음을 중지 하 고 적절 한 식별자를 가진 비디오 파일을 저장 합니다.
  8. 5 분의 끝에, 경기장에서 모두 쥐를 제거 하 고 그들의 감 금 소도 그들을 배치. 옥수수 침구를 교체 하 고 경기장 및 70% 에탄올12스트레스 챔버를 청소.

9. 계 집 아이-에서-조 난 테스트: 데이터 분석

  1. 추적 소프트웨어를 사용할 수 있습니다, 하지만 비디오 수동으로 분석할 수도 있습니다. 비디오 파일을 컴퓨터에서 볼 수, 일단 화면 위에 투명 시트를 오버레이 및 개요는 마커를 사용 하 여 경기장의 광장. 경기장 광장을 9 동등 구획으로 나눕니다.
  2. 초기 탐험 측정의 첫 5 분에 대 한 비디오 데이터를 검토 합니다. 수 기록 구획을 넘어 (운동 활동/예비 동작), 경기장 (오픈 필드 혐오), 파고의 에피소드, 정리 번호 및 횟수는 마우스만 진 빈 센터 구속 광장 센터에서 보낸 시간 약 실입니다.
    참고: 남성의 10 분 초기 탐사의 두 번째 5 분 동안 하지 이루어집니다 득점도 10 분에 대 한 여성 남성의 부재에 중앙 챔버에 갇혀.
  3. 남성은 갇힌된 여자와 함께 경기장 재 직후 사회 응답 측정의 5 분에 대 한 비디오 데이터를 검토 합니다. 초기 탐험 측정에 관해서는 동일한 데이터를 기록 하지만 또한 남성 마우스 건드리지 갇혀 여성 마우스와 함께 코 번의 번호를 기록 합니다.

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Representative Results

반 즈 미로

반 즈 미로 사용 하는 방법을 설명 하기 위해 우리는 단일 초기 에탄올 노출 마우스 개발의 과정을 통해 학습에 차이 발생 여부 조사. C57Bl6/J 쥐도 2.5 g/kg의 에탄올 솔루션 주입 했다 (n = 8) 또는 식 염 수 (n = 6) 두 번, 두 시간 떨어져, 출생 후 주 6에서. 우리는 사춘기 (P30), 동안에 반 즈 미로 동물 훈련 후 성인 (4 개월)에 단일 장기 시험을 수행. 수집 된 데이터는 몇 가지 주요 범주로 나눌 수 있습니다: 1) 정확도 시간과 오류 비율, 2) 대상 항목, 및 3) 탐사 경로 매핑.

시간 및 오류 비율 정확도:

몇 가지 중요 한 측면을 포괄 하는 시간 측정: 마우스 탈출 구멍 (찾을 되어 학습 하는 경우 대기 시간 도달 하는 첫 번째 구멍 (마우스 재판 시작 후 첫 번째 구멍을 조사를 하는 데 걸리는 시간)을 보여주는 것입니다 그림 1A)입니다. (대상 구멍의 평면에 걸쳐 코는 초기 낮추는 득점) 대상 구멍을 찾을 수 대기 시간은 올바른 구멍 (그림 1B)를 찾을 수입니다. 각 세션 훈련 세션을 실행 하는 시간이 감소 한다, 나타내는 동물 미로 배우고 있다.

잘못 된 구멍 조사 (불리 오류) 마우스 올바른 구멍 (그림 1C)를 찾기 전에 수행 수 동물 상대적으로 대상 탈출 구멍에 (게) 똑바로 갈 수 인지 나타냅니다. 마우스는 재판의 과정을 통해 잘못 된 구멍을 탐구 총 횟수 운동 활동 및 탐험 행동의 기본적인 측정을 제공 합니다. (그림 1D)입니다. 모든 마우스 성공적으로 훈련 되었다 반 즈 미로에 에러율 감소 시간 표시 (출생 후 일 32-39에 매일 세션에 의해 여기에서 대표), 사춘기 동안 7 일간의 테스트 기간을 통해 대상 구멍을 찾을 수 있습니다. 학습 훈련 기간 동안 에탄올과 제어 동물 사이에서 통계적 인 차이가 없었다.

대상 항목 평가:

실제로 대상 구멍 입력 대기 시간 일반적으로 성공적인 미로 완성에 대 한 기준으로 사용 하지만 가능성이 테스트의 다른 측면으로 많은 정보를 제공 하지 않습니다. 대상에 0 또는 1로 또한 득점 수 있습니다. 마우스 입력 대상 5 분 경과 하기 전에, 테스트는 성공한 것으로 간주, 하지만 그래서 아래 챔버의 안전 경험 대상으로 동물을 확보 하는 바인더 또는 책을 사용 해야 합니다 마우스 팬 들은 대상의 정보를 입력 하지 않습니다. 첫 번째 훈련 일에 목표와 동물을 미로에 전체 5 분으로 항목의 낮은 속도 보고 예상 되어야 한다. 이후 일 테스트 시간이 덜 소요 됩니다.

찾는 대상 후 여러 오류를 만드는 낮은 동기 입력 대상 상자를 나타내고, 또한 비정상적인 편안 함을 마우스 (상승 된 플랫폼, 밝은 빛, 오픈 필드, 초음파 소음) 일반적으로 혐오 상황을 검색할 수 있습니다. 큰 차이 재판 중 대상과 구멍 탐험의 총 수를 찾기 전에 만든 오류 가난한 동기 입력 대상 탈출 챔버 (그림 2A)를 나타냅니다. 쥐 발견 후 대상 탈출 구멍을 입력 하지 하는 경우 밝은 빛 이나 소음 추가할 수 있습니다 테스트 상황에 약간 유해 자극으로.

우리의 실험에는 초음파 소음이 미터는 시험 당일 대상 입력을 여분 동기 부여를 소개 하는 5 미로 위에 추가 되었습니다. 초음파 소음을 도입 하기 전에 아무 염 치료 쥐도 하지만 입구는 잡음의 소개 후에 아군 대상을 입력 했다. 훨씬 더 많은 마우스 (식 염 수와 결합 하는 에탄올) 재판 6 재판 4에 비해 대상 입력 (t-테스트, p = 0.0014) (그림 2B).

경로 매핑:

마우스의 경로 매핑 정보 보존 및 학습 전략, 또한 평가 하는 것을 도울 수 있다. 첫 번째 탐험된 구멍 및 대상 구멍 사이의 거리가이 트랙 마우스에 먼저 하 고 어떻게 그들을 닫습니다 (그림 3A) 대상에는 대상 위치에 대 한 메모리의 좋은 지시자 이다. 훈련의 시작 부분에서 널리 다양 하 게이 법안을 기대 하지만 쥐 배울 대상 위치 방문 첫 번째 구멍 대상에 가까이 이동 해야 합니다.

때 이러한 마우스 성인 (4 개월)에서 단일 장기 평가판을 사용 하 여 다시 실행 했다, 훈련 기간 동안 에탄올과 제어 동물 사이 발견 학습에 통계적 차이가 에탄올 주입 동물 더 시간을 했다 대상 구멍은 위치 기억 (그림 3B)12. 메모리 보존에이 차이 교육, 학습/메모리에 미묘한 차이를 우리가 나중에 다시 미로 사용 하 여 초기 반 즈 미로에서 찾을 수 없습니다 단일 발달 에탄올 중독 이벤트와 발견 그 같은. 미로 표면 수 마우스 했다 경로 지도를 연구 하는 반스의 대표적인 다이어그램, 오류 수 및 첫 번째 구멍의 기록을 포함 하 여 (그림 3C)을 방문 했다.

반대 사분면에서 소요 시간 시간 마우스, 다른 미로의 한 부분을 탐구 대상의 구체적으로 한 반대에 해당 합니다. 마우스 미로 실행 하지만이 측정 나중에 분석을 필요로 다른 모든 측정을 계산 하는 연구원에 대 한 가능 하다. 배우는 누가 마우스 반대 사분면에 시간 탐험 구멍을 감소 한다. 재판 장기 성인 에탄올 처리 일반적인 공간 위치를 기억 하는 실패를 나타내는 대상에서 반대 사분면에 훨씬 더 많은 구멍을 탐험 하는 쥐 (p = 0.03) (그림 4A).

헤어이 매핑 측정 오류 전에 고 실제로 목표를 찾는 후에 중요 하다. 대상 찾기 전에 오류 수 학습 발생 하지만 그것은 또한 마우스의 검색 전략에 대 한 우리에 게 수 알아낼 수 있습니다. 구멍, 무작위로 방문 하는 대신 마우스는 신속 하 게 찾을 대상 전략을 채택할 수 있다. 장기 시험 기간 동안 에탄올 치료 동물의 모든 순차 구멍-구멍 검색 고리 모양의 패션 구멍 발견 될 때까지, 사용 마우스 고용이 기술을 훨씬 더 적은 염 분 처리 하는 반면 (p = 0.004) (그림 4B 4 D). 또는, 마우스 미로 (그림 4C),이 공간 학습 발생 동물 가능성이 대상 구멍의 주변 머리 외부 신호를 사용 하는의 일반적인 방향으로 대상 수 있습니다.

계 집 아이-에서-조 난

계 집 아이-에서-조 난 경기장 건설 되었고 두 1 M에서 C57Bl6/J 쥐의 탐구 하 고 사회 행동 테스트 하 사용 (n = 15) 및 4 M (n = 12) 나이의. 공감 무대 남성 마우스 (그림 5A) 코너에 배치 하는 위치 이용 되었다. 마우스 탐구 행동 소설 분야에서 5 분에서 교차 하는 사각형의 수로 정량입니다. 우리의 결과 이전 마우스 (4 달) 어린 쥐 (1 개월) (p < 0.0001) 보다 더 많은 사각 크로스 (그림 5B).

다음, 갇힌된 여성 아레나 (그림 5A) 중간 실린더에 배치 했다. 일단 여성 챔버에 갇혀, 탐험 행동 수 있습니다 다시 교차 하는 사각형의 수로 측정할 수 있습니다. 갇힌 여성의 존재 남성 탐구 행동에 미치는 영향. 나이에 남성 쥐 덜 갇힌된 여성 존재 탐구 한다. 청소년 남성 탐험 적은 경기장 (존재의 교차 하는 사각형의 수로 측정 된 때 혼자 갇힌된 여성 보다 마우스 (1 달에서: t-테스트, p = 0.001; 남성 혼자 46 ± 여성 26.13 ± 3.42 사각형 대 4.34 사각형을 의미). 이 차이 또한 성인에 명백한 (4 개월: t-테스트, p < 0.000001; 의미 남성 혼자 151.5 ± 5.31 사각형 대 여성 103.08 ± 0.3.59 사각형) (그림 5B).

마우스는 5 분 동안 중앙 광장에서 보낸 시간의 양을 평가 또한 한다. 센터 광장에서 소요 시간 존재 및 사회적 관심의 측정으로 여자의 부재에 비교 한다. 우리의 결과 남성 갇힌된 여성 존재 센터 광장에서 더 많은 시간을 보여 줍니다. 청소년 남성 갇힌된 여성 앞 무대의 중심을 탐험 더 많은 시간을 보낸 때 혼자 보다 마우스 (1 달에: p = 0.05, 남성 혼자 13.14 ± 2.79 s 대 여성 33.42 ± 9.32 s를 의미). 이 차이 또한 성인에 보였다 (4 개월: p = 0.001; 남성 혼자 14.80 ± 1.89 s 대 여성 52.87 ± 8.9 s와 함께 의미) (그림 5C).

또한, 연구자는 불안 또는 갇힌된 여성을 향해 prosocial 행동의 측정 될 수 있는 분야에서 파고 이벤트 수를 계량 또한 한다. 이 측정은 크게 1 개월 (1 M) 마우스 하지만 하지 4 달 (4m) 쥐에 대 한 여자의 존재. 청소년 남성 보냈다 갇힌된 여성 존재 경기장에 그들의 시간 동안 더 많은 시간 파고 때 혼자 보다 마우스 (1 달에: p = 0.027, 의미와 여성 3.2 ± 0.27 번 대 남성 혼자 0.4 ± 1.09 배). 이 차이 성인에서 볼 수 없는 (4 개월: p = 0.65; 의미 남성 혼자 1.33 ± 0.54 배 vs. 여성 1 ± 0.49 배) (그림 5D).

남성 접촉 자제 챔버 갇힌된 여성 동물 공기 구멍을 통해 코를만 진 한 횟수를 포함 하는 횟수는 prosocial 행동의 측정. 우리의 결과에서 남성 쥐 감동 포함 된 갇힌된 여성 크게 성인 (4 개월)으로 더 자주 보다 청소년 (1 개월)으로 튜브 (p = 0.00001; 의미 1 개월 4.73 ± 0.95 배 vs. 4 개월 15.92 ± 1.64 배) (그림 5E). 또한 더 시작 하는 성인 남성에 여성 연락처 이벤트 트래핑 합니다. 남성 쥐만 진 공기 구멍을 통해 갇혀 여 코 크게 성인 (4 개월)으로 더 자주 보다 청소년 (1 개월)으로 (p = 0.002, 의미 1 번 대 4 개월 8.67 ± 1 개월 3.93 ±.94 번). (그림 5 층)입니다.

초음파 녹음 장비 여성 쥐에 의해 20 kHz 이상의 초음파 vocalizations 수신 하는 데 사용 했다 그리고 그것은 또한 "학사-에서-조 난" 반전 패러다임에 갇혀 남성 쥐 초음파 발성 법에 대해 수신 대기를 사용 했다. 아니 vocalizations 어느 상황에서 이전 연구 혐오 자극 (예: 물리적 구속 또는 전기 충격) 노출11동안 아무 초음파 vocalizations 마우스를 찾을 수 있기 때문에, 예상 되는 감지 했다.

Figure 1
그림 1 : 반 즈 미로 정확도 대표 시간과 오류 비율 결과. 마우스 했다 하거나 주입 2.5 g/kg의 에탄올 솔루션 또는 염 분 두 번 2 시간 출생 후 주 6에서 떨어져. 우리는 일단 청소년 기, 중 7 일 동안 매일 동물 훈련 후 성인11단일 장기 시험을 수행. (A) 대기 시간 마우스 탈출 구멍을 찾아 학습 하는 경우 첫 번째 구멍 (마우스 재판 시작 후 첫 번째 구멍을 조사를 하는 데 걸리는 시간) 계시에 도달. (B) 대기 시간 (낮추어는 초기 코의 대상 구멍의 평면에 걸쳐 득점) 대상 구멍을 찾을 수는 정확한 구멍을 찾을 수 있다. (C) 잘못 된 구멍의 수 수사 (불리 오류) 마우스 게 동물 인지 상대적으로 대상 탈출 구멍에 (게) 똑바로 갈 수 나타냅니다 올바른 구멍을 찾기 전에. (D)는 총 횟수는 재판의 과정을 통해 잘못 된 구멍을 탐구 하는 마우스 운동 활동 및 탐험 행동의 기본적인 측정을 제공 합니다. 오차 막대는 sem의11를 나타냅니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

Figure 2
그림 2 : 성공적인 반 즈 미로 완료. 실제로 대상 구멍 입력 대기 시간 일반적으로 성공적인 미로 완성에 대 한 기준으로 사용 하지만 동물 발견 후 대상 구멍을 입력할 수 있습니다. (A) A 가난한 동기 입력 대상 탈출 챔버를 나타냅니다는 재판 중 대상과 구멍 탐험의 총 수를 찾기 전에 오류 사이의 큰 차이입니다. 우리의 실험에는 초음파 소음 쥐 대상 입력을 유도 하기 위해 재판 5에 추가 되었습니다. (B) 훨씬 더 많은 마우스 (식 염 수와 결합 하는 에탄올) 입력 대상 재판 4에 비해 재판 6에 (t-테스트, p = 0.0014). 제 7 일에 의해 목표를 찾는 후 탐험 계속 아니 에탄올 쥐. 오차 막대를 나타내는 SEM. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

Figure 3
그림 3 : 반 즈 미로 동기. 마우스 경로 매핑 동기 부여에 대 한 정보를 제공할 수 있습니다. (A) 첫 번째 탐험된 구멍 및 대상 구멍 사이의 거리는 마우스 먼저 갑니다이 측정 트랙으로 대상 위치에 대 한 메모리의 좋은 지표는 대상에서 들은 얼마나. (B) 때이 쥐 성인 (4 개월)에서 단일 장기 평가판을 사용 하 여 다시 실행 했다, 훈련 기간 동안 에탄올과 제어 동물 사이 발견 학습에 통계적 인 차이가 있지만 에탄올 주입 동물 대상 구멍은 있는 기억 힘든 시간을 했다. (C) A 미로 표면 수 마우스 했다 경로 지도를 연구 하는 반스의 대표적인 다이어그램, 오류 수 및 첫 번째 구멍의 기록을 포함 하 여 방문 했다. 이 마우스 16 초 이내 대상에 (게) 똑바로 갔다 하지만 결코 5 분 동안 그것을 입력 하 고 이후에 41 구멍을 탐험. 이 문제는 낮은 동기 부여 대상 입력을 나타냅니다. 오차 막대를 나타내는 SEM. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

Figure 4
그림 4 : 반 즈 미로 검색 전략. 마우스 경로 매핑 검색 전략을 폭로 하 고 전략을 학습 하는 것에 대 한 정보를 제공할 수 있습니다. (A) 시험 장기 성인 에탄올 처리 일반적인 공간 위치를 기억 하는 실패를 나타내는 대상에서 반대 사분면에 훨씬 더 많은 구멍을 탐험 하는 쥐 (* p = 0.03). (B) 장기 재판 중 에탄올 치료 동물의 모든 순차 구멍-구멍 검색 고리 모양의 패션 구멍 발견 될 때까지, 사용 마우스가이 기술은 고용 크게는 염 분의 더 적은 취급 하는 반면 (* * p = 0.004) (B D). 시험 일 6 결과 사진 (C) 염 분에 대 한 치료 마우스 및 (D) 에탄올 처리 마우스. 마우스 미로 (C),이 공간 학습 발생 동물 가능성이 대상 구멍의 주변 머리 외부 신호를 사용 하는의 일반적인 방향으로 대상 수 있습니다. 일반적으로, 쿼드런트 점수는이 전략을 사용 하 여 마우스에 대 한 훨씬 더. (D) 구멍을 순차적 구멍 검색 링 전략, 마우스는 미로의 가장자리에 넘어가고 찾을 대상 각 구멍에 이다. 쿼드런트 점수는 중대 한 변이와 불 쌍 한 마우스 링 전략을 사용 하는 경우. 오차 막대를 나타내는 SEM. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

Figure 5
그림 5: 계 집 아이-에서-조 난. (A) 계 집 아이-에서-조 난 아레나 9 사각형으로 나누어져 있습니다. 남자 마우스 코너에 배치 되 고 남성의 행동 관찰. 실린더 용기에 갇혀 여성 마우스 경기장의 중앙 광장에 배치 됩니다. 경기장 내에 (B) 예비 동작 사춘기 (1 달 = 1 M)와 성인 (4 개월 = 4 M) 사이 증가합니다. 전반적으로, 남성 쥐 갇힌된 여성 존재 덜 탐험. 에 추가, 탐구 하는 젊은 쥐 보다 성인 쥐 덫을 놓은 여자의 존재. (C) 사회 응답 시간 마우스 어디에 갇혀 마우스 개최 센터 광장에 의해 측정할 수 있습니다. 청소년 및 성인 남성 갇힌된 여성 존재 센터 광장에서 더 많은 시간을 보냈다. (D) 청소년 남성 보냈다 갇힌된 여성 존재 경기장에 그들의 시간 동안 더 많은 시간 파고 때 혼자 보다 마우스. (E) 남성 쥐 크게 청소년으로 성인 보다는 더 빈번 하 게 갇힌된 여성을 포함 하는 튜브를 건드리지. 또한 더 시작 하는 (F) 성인 남성 보다 청소년 여성 연락처 이벤트 트래핑 합니다. 오차 막대를 나타내는 SEM (* * * p < 0.0001, * * p 0.001, * p 0.05). 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

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Discussion

반 즈 미로 계 집 아이-에서-조 난 실험 공간 학습, 운동 활동, 및 쥐에서 prosocial 행동, 신속, 저렴 하 고 상대적으로 쉬운 방법이 있습니다. 명백한 스트레스, 통증, 또는 동물에 대 한 음식 제한의 부재는 다른 장점이 있습니다. 대부분 학습/메모리 패러다임 처럼 반 즈 미로의 단점은 실험 동물 대상 구멍은 학습과 입력에 필요한 수입니다.

데이터 수집:

마우스의 활동 두 패러다임에 행동을 관찰 하는 경우 데이터를 지속적으로 수집할 수 한다. 반 즈 미로 대 한 첫 번째 구멍에 도달 하면, 그것은 탐구를 대상 구멍에 도달 하는 시간 및 대상 구멍에 들어가는 시간 오류/잘못 된 구멍의 수 시간 포함 됩니다. 또한, 연구팀은 미로에 각 마우스의 경로 매핑해야 합니다. 마우스 미로 실행 하는 동시에 반 즈 미로의 종이 지도 사용 하 여 데이터를 추적할 수 하 고 비디오 푸티지를 사용 하 여 타이밍 및 구멍 숫자를 확인할 수 있습니다. 동물을 추적 하는 때 그것은 잠재적으로 겹치는 구멍 탐험을 한 번 매 분 펜 색을 변경 하려면 유용할 수 있습니다. 컴퓨터 기반 추적 시스템 정확성과 신뢰성, idTracker, Ctrax, tracktor, 등을 보장 하기 위해 사용할 수 있으며 몇 가지는 무료 또는 오픈 소스.

계 집 아이-에서-조 난 분석 결과 대 한 기록된 데이터 얼마나 많은 사각형 남성 입력, 남성 여성, 얼마나 많은 시간 남성 센터 광장에 갇힌된 여성 있으면 빈 실린더에 비해 도달 하는 데 걸리는 시간을 포함 해야 합니다. 거기에 얼마나 많은 연락처 이벤트는 실린더, 챔버, 그리고 몇 번 이나 파고 이벤트 통해 동물을만 진 코 전체 발생 한 중앙에서 수 광장.

행동 테스트에서 상수:

모든 행동 테스트와 마찬가지로 그것은 중요는 조건 사이 및 환경 변수는 연구의 결과 혼동 하지 않습니다 보장 하기 위해 동물 실험에서 일정 하 게 유지 됩니다. 실험 환경에서 시각, 청각, 또는 후 각 자극을 일으킬 수 있습니다 행동 변화 쥐, 의도 또는 안13. 이와 같이, 한다 주의 산만 한 외부 자극14에서 쥐를 보호 하. 모두 경기장 계 집 아이-에서-조 난 시나리오에 사용 하 고 각 물으로 시험 하 고 이전 마우스의 더 느린 지표 나중 재판 영향을 미칠 수 있도록 70% 에탄올과 소 각 후 반 즈 미로 청소 한다. 또한, 각 계 집 아이-에서-조 난 분석 결과 후 침구를 변경 해야. 데이터 컬렉션은 항상 데이터를 검토 하 여 정확한 분석을 위해 경험 수 있도록 비디오에 기록 되어야 합니다. 그것은 커튼 뒤에 숨겨진 남아 연구원에 대 한 도전이 될 수 있습니다 또는 그렇지 않으면 데이터를 하지만이 수집 하는 동안 보이지 쥐에 대 한 상수, 방해가 설정을 유지 하기 위해 중요 하다.

반 즈 미로 패러다임 설계 및 수정:

반 즈 미로 대 한 사용에서 여러 개의 게시 된 패러다임 있다. 반 즈 미로 훈련 프로토콜 일반적으로 7-15 일, 하지만 프로토콜 단축 될 수 있다. 때로는 어렵게 작업을 학습 할 수 있도록 교육 세션의 수를 자르는 차이 긴 프로토콜15놓치지 격리 수 있습니다. 그것은 오버 헤드 (원래 반 즈 연구)로 빛만 사용할 수 있습니다 또는 다른 요소 (예: 밝은 빛, 팬, 또는 소음) 쥐 탈출 챔버3,16을 입력 더 많은 동기 부여를 만들기 위하여 추가 될 수 있다. 파일럿 연구 중 대상 상자에 입력 하는 가난한 동기를 관찰 하는 경우 실제 훈련 기간 동안 이러한 요소의 추가 고려 한다.

올바른 대상 구멍에 이러한 요소 없이 덜 빠르게 발생 가능성이 것입니다만 연구팀은 이러한 추가 스트레스 유발 될 수 있습니다 알고 있어야 자극. 혐오 자극의 유무 평가 대상 구멍을 입력 하도록 동기 부여를 조작할 수 있습니다. 우리의 연구는 태아 에탄올 했다 마우스 때 밝은 빛만 사용 되었다, 그리고이 현상이 실제로 학습 대상 구멍은 위치에서 훈련 기간 동안 탈출 구멍을 입력 것 이라고 가능성에 영향을 보여주었다.

우리의 프로토콜의 일 1-4에서에서 볼 하지만 그들은 그것을 충분히 쉽게 찾을 듯 쥐 구멍, 입력 매우 동기 되지 않았습니다. 그러나, 초음파 소음 날 5 미로 위에 배치 했다, 쥐가 그것을 찾는 후 대상 챔버를 입력 것 가능성을 포함 하 여 대부분 반 즈 조치에 점수 향상. 소음을 극적으로 줄이기 위해 외부 구멍 조사 수 재판에 하루 6, 7, 등장 하 고 하루 7 아무 에탄올 마우스 대상 (그림 2A)를 찾은 후 탐험 유지. 이 미로 학습의 자연 스러운 결과 이다 가능 하다, 비록 동물 초음파 잡음의 소개 후에 더 흥분 하 고 미로 탐험 하 듯 않았다. 챔버는 쥐에 대 한 보람 있는 상황 유지를 위해서, 연구원은 또한 조심 해야 혐오 자극을 해제 하려면 (구멍을 커버 하 고 소음을 끄십시오) 동물의 할당된 금액에 대 한 챔버에 그대로 남아 있도록 동물을 제거 하기 전에 복구 시간입니다.

반 즈 미로의 디자인 학습 및 메모리 평가에 영향을 미칠 수 있습니다. 현재 프로토콜 추가 미로 신호를 사용합니다. 시험장의 비대칭, 이외에 4 개의 간단한 블랙에 흰색 배경 도형 (사각형, 삼각형, 원형, 크로스)의 포스터도 보여주도록 방의 벽에 장착 했다. 반 즈 미로 또는 테스트 룸의 벽에 원심 단서 없이 해결 될 수 있다 또는 직렬 검색 전략을 사용 하 여 해결할 수 있습니다. 이 때문에, "먼저 구멍 대상에서 거리" 측정만을 사용 하 여 마우스 미로 해결 하 고 비 공간 능력17에서 공간 구분 하지 않을 수 있습니다 방법에 관련 된 차이 놓칠 수 있습니다. 여러 분석 대책 또한 반대 광장 또는 대상 전에 오류 수에서 구멍의 수를 검토 하는 등, 사용 되어야 한다. 검색 전략의 패턴 또한 분석할 수 있습니다.

쥐의 타고 난된 긴장을 다른 반 즈 미로 가능성 때문에 시력에 가변 성능을 가질 수 있습니다. 가난한 시력과 마우스의 변형 반 즈 미로에 사용 하기 위해 선택 하면 미로의 가장자리 주위에 작은 벽의 추가 thigmotaxis (벽 포옹 동작)를 증가 하 고 비-비주얼 검색 전략의 사용을 증가 수 있습니다. 남성 DBA/2J와 C3H/HeJ 긴장에 여성 보다 더 나은 성능을 학습 했 고 남성만 현재 프로토콜에서 사용 되었다, 비록 C57/Bl6 마우스 하지 발견 되었습니다 반 즈 미로18에 메모리에서 성별 차이 표시.

계 집 아이-에서-조 난 패러다임 설계 및 수정:

계 집 아이-에서-조 난 실험에 대 한 주요 한계가입니다 거기 방법이 없습니다 여성 마우스, 또는 "계 집 아이,"를 탐구 마우스에 대 한 경기장의 센터에 있는 관에서. 릴리스 메커니즘을 포함 하는 챔버를 재설계는 재미 있는 미래 수정 될 것 이다. 계 집 아이-에서-조 난의 불리는 그것이 prosocial 행동을 측정 하기 위한 새로운 평가 패러다임을 사용 하 여 비교 연구의 부재 이다.

계 집 아이-에서-조 난 더 사교 성 (다른 마우스와 함께 시간을 보내고 성향으로 정의 된)을 평가 하기 위해 수정할 수 사회 참신 (익숙한 마우스에 비해 새로운 마우스를 조사 하기 위해 경사), 대 한 환경 설정을 짝짓기 또는 공격적 (여성 발 정기에 또는 상공 회의소에서 소설 남자 트랩), 하는 행동과 진화 생물학 문제,이 타 적인 행동 경향 (갇혀 비 littermate에 비해 갇혀 littermate에 응답에 공유 유전 배경의 영향 등 마우스)19.

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Disclosures

저자는 공개 없다.

Acknowledgments

Hampden 시드니 대학에서 우리에 게 승인 및 감사 숀 월 든, 자크 Leitner, 사냥꾼이, 그리고 안톤 Kheirani 반 즈 미로 계 집 아이-에서-조 난 실험에 대 한 프로토콜 테스트에 그들의 참여에 대 한. 우리는 또한 반 즈 미로 테스트 공간을 제공 하기 위한 생물학 랜 돌 프-마 콘 대학 부의 건설에 대 한 랜 돌 프-마 콘 대학에서 제임스 포스터를 감사 하 고 싶습니다.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Damsel-in-Distress
50 mL conical tube Fisher Scientific 14-432-22 Any brand of 50 mL conical tube will work
Rubber bands Sprano Brand n/a Size 62, used to keep caps held to plywood
hammer Grainger 6R252 Any standard hammer will work
nail (size 8D) Grainger 4NFE3 Similarly-sized nails should work just as well
opaque, topless plastic box AcmePlastics CUT-TO-SIZE-ACRYLIC-CAST-BLACK-SHEET-2025 Opaque plastic, cut to size (30 cm L x 19 cm W x 3-6 cm H). Step may be added to ensure no more than a 3.5 cm entrance depth for the mouse. 
video camera (smartphone) N/A N/A Any camera-equipped smartphone will work
bite-resistant gloves Kent Scientific GLVDYN02 Any brand offering appropriate protection
transparency sheet Staples 954145 Any brand of clear plastic sheet will work, used for scoring 
Barnes Maze
Petri Dishes Corning 353025 Spray painted and used as covers for Barnes maze holes
Plywood (3/4 in.) LP Building Products 22487 To construct Barnes maze
Spray Paint Krylon 1274937 Used to paint petri dish caps black, white paint used to paint plywood
Cup Hooks (5/8 in.) Ace Hardware 5360615 2 used on either side of ventral hole surfaces; Rubber band wraps around hooks to hold cap flat
Poster Board Creatology n/a Used at edges of maze as extra cues
Light Bulbs Phillips n/a 100W light bulb, used to during the trials
Rubber bands Sprano Brand n/a Size 62, used to keep caps held to plywood
Ultrasonic noisemaker Victor mini PestChaser M753SN Used as aversive stimuli

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References

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동작 문제 141 반 즈 미로 공간 학습 메모리 운동 탐사 계 집 아이-에서-조 난 prosocial 행동 사회 응답 공감 동기 부여
공간 학습 및 반 즈 미로 계 집 아이-에서-조 난 패러다임을 사용 하 여 마우스 Prosocial 동작 분석
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Ingersoll, J., Moody, M., Holland,More

Ingersoll, J., Moody, M., Holland, R., Kuegler, W., Murrah Jr., C., Winslow, J., Reynolds, N., Lloyd, N., Dugan, B., Hammock, M., Houlé, K., Clabough, E. Analyzing Spatial Learning and Prosocial Behavior in Mice Using the Barnes Maze and Damsel-in-Distress Paradigms. J. Vis. Exp. (141), e58008, doi:10.3791/58008 (2018).

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