새로 형성 된 유방암 줄기 세포와 같은 세포 Apoptosis 반전 후 흐름 Cytometric 감지

Yiyue Xu; Chun So; Hon-Ming Lam; Ming-Chiu Fung; Suk-Ying Tsang

doi:10.3791/58642

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방법 논문

새로 형성 된 유방암 줄기 세포와 같은 세포 Apoptosis 반전 후 흐름 Cytometric 감지

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DOI:

10.3791/58642

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2019년 1월 26일

Yiyue Xu¹^,² , Chun So¹ , Hon-Ming Lam¹^,² , Ming-Chiu Fung¹^,² , Suk-Ying Tsang¹^,²^,³^,⁴

¹School of Life Sciences, The Chinese University of Hong Kong, ²State Key Laboratory of Agrobiotechnology, The Chinese University of Hong Kong, ³Key Laboratory for Regenerative Medicine, Ministry of Education, The Chinese University of Hong Kong, ⁴Centre for Novel Biomaterials, The Chinese University of Hong Kong

이 논문에서

요약

여기, 선물이 형광 활성화 된 세포 분류에 의해 유방암 apoptotic 세포를 분리 하 고 추가 cytometry에 의해 apoptosis 반전 후 유방암 줄기 세포와 같은 세포에 유 방 비 줄기 암 세포의 전이 감지 하는 프로토콜.

초록

종양학, 암 재발 오래 공부 되었습니다 기본 메커니즘 불분명 하 게 남아 있는 동안. 최근, 우리와 다른 apoptosis 반전 이라는 현상이 다른 자극 아래 다양 한 셀 모델에서 증가 tumorigenicity 리드 발견. 이전 연구 추적 생체 외에서 그리고 vivo에서;이 과정에 초점을 맞춘 되었습니다. 그러나, 진짜 반전된 셀의 절연은 아직 달성, apoptosis 반전의 결과에 대 한 우리의 이해를 제한 하 한다. 여기, 우리가 활용 Caspase-3/7 그린 감지 염료 활성화 caspases와 레이블 셀 apoptotic 유도 후. 긍정적인 신호와 셀 더 형광 활성화 된 세포 복구 (FACS)를 정렬에 의해 밖으로 정렬 됩니다. Confocal 현미경 검사 법에서 형태학 시험 FACS 전에 apoptotic 상태를 확인 하는 데 도움이 됩니다. Tumorigenicity 증가 암 줄기 세포 (CSC)의 비율에 있는 상승에 종종 표시 될 수 있습니다-세포 처럼. 또한, 유방암의이 주어진,이 CSC 같은 세포의 출처를 식별 것입니다 암 치료에 중요 한. 따라서, 우리는 apoptosis를 트리거링, caspase 활성 세포를 분리 하 고 apoptosis 반전 절차를 수행 하기 전에 유방암 비 줄기 세포를 준비 합니다. 교류 cytometry 분석이 보여준다 유 방 CSC 같은 셀 유 방 CSC 같은 세포는 apoptosis 반전 동안 유방암 비 줄기 세포에서 통과할 나타내는 반전된 그룹에 다시 나타납니다. 요약 하자면,이 프로토콜 cytometry apoptotic 유방암 세포의 분리 및 반전된 셀에 CSC 비율에서 변경의 탐지를 포함 한다.

서론

암 국가 전세계¹무거운 부담을 일으키는 죽음의 주요 원인이 되었습니다. 유 방 암 암¹의 모든 종류 중에서 여성 환자에서 모두 발생률 및 사망률 높은 순위. 암이 성분으로 인해 약물의 조합으로 암 세포 죽음²^,^,³⁴를 달성 하기 위해 화학 요법에 사용 됩니다. 그러나, 일반적인 화학요법 약물은 종종 DNA⁵^,⁶대상, 이후 단백질 합성⁷^,는⁸ 또는 microtubule 역학⁹, 빠르게 성장 하는 세포는 영향을 받는 동안 대부분 암 줄기 세포 (CSC) s 등 무부하 세포는 일반적으로 덜 영향을 받는¹⁰. 따라서, CSCs는 약물 내성 및 암에는 나중에 리드¹⁰^,