방법 논문

광학 일관성 단층 조영술 혈관 조영술에 의해 평가된 망막 혈관 반응성

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DOI:

10.3791/60948

2020년 3월 26일

이 논문에서

요약

이 기사에서는 망막 이미지를 획득하면서 혈관 활성 자극을 전달하기 위해 가스 호흡 도발 기술을 사용하여 인간 피험체와 함께 생체 내에서 망막 혈관 반응성을 측정하는 방법을 설명합니다.

초록

망막에 혈관 공급은 망막의 신진 대사 요구를 수용하기 위하여 혈관 수축 및 혈관 확장을 통해 동적으로 적응하기 위하여 보였습니다. 망막 혈관 반응성 (RVR)이라고 불리는이 과정은 당뇨병 성 망막병증과 같은 망막 혈관 질환에서 매우 일찍 손상된 신경 혈관 커플링에 의해 중재됩니다. 따라서, 혈관 기능을 평가하는 임상적으로 실행 가능한 방법은 연구 및 임상 설정 모두에서 상당한 관심을 가질 수 있습니다. 최근, 모세관 수준에서 망막 혈관구조의 생체 내 이미징은 FDA의 광학 적응성 단층 조영술(OCTA) 승인에 의해 가능해졌으며, 모세관 수준의 분해능을 이용한 비침습적, 최소한의 위험 및 염색이 없는 혈관 조영법 방법. 동시에, RVR에 있는 생리적 및 병리학적인 변경은 몇몇 조사자에 의해 보였습니다. 이 원고에 나타난 방법은 임상 영상 절차 또는 장치를 변경할 필요없이 OCTA를 사용하여 RVR을 조사하도록 설계되었습니다. 그것은 hypercapnic 또는 hyperoxic 조건에 노출하는 동안 망막 및 망막 혈관의 실시간 화상 진찰을 보여줍니다. 시험은 30 분 이내에 두 명의 직원과 함께 쉽게 수행되며 최소한의 피험자 불편 이나 위험을 최소화할 수 있습니다. 이 방법은 다른 안과 이미징 장치에 적응할 수 있으며, 응용 분야는 기체 혼합물 및 환자 집단의 조성에 따라 달라질 수 있다. 이 방법의 강점은 생체 내에서 인간 피험자의 모세관 수준에서 망막 혈관 기능을 조사 할 수 있다는 것입니다. 이 방법의 한계는 주로 OCTA 및 화상 진찰 아티팩트 및 제한된 동적 범위를 포함하여 그밖 망막 화상 진찰 방법의 그것입니다. 이 방법에서 얻은 결과는 망막의 OCT 및 OCTA 이미지입니다. 이러한 이미지는 시판되는 OCT 또는 OCTA 장치에서 가능한 모든 분석을 수행할 수 있습니다. 일반적인 방법은, 그러나, 안과 화상 진찰의 어떤 양식든지에 적응될 수 있습니다.

서론

망막의 신진 대사 수요는 동맥, 모세 혈관 및 정맥1의 잘 조절 된 시스템에서 제공하는 산소의1적절하고 일정한 공급에 의존한다. 여러 연구는 더 큰 구경 인간 망막 혈관의 기능이 다양한 생리학적2,,3,4,4,5 및 약리학6,,7 자극으로 생체 내에서 평가될 수 있음을 입증했습니다. 또한, 이러한 혈관 계통의 비정상적인 기능은 망막 혈관 반응성(RVR)이 초기단계8,,9를 통해 가스 도발9 및 깜박임 광 실험5,,10,,11을통해 감쇠되는 것으로 나타난 당뇨망막병증과 같은 망막 혈관 질환에서 일반적이다. 흡연....

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프로토콜

이 연구는 서던 캘리포니아 대학 기관 검토 위원회에 의해 승인 및 헬싱키 선언의 신조를 준수.

1. 가스 비호흡 장치 설치

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그림 1: 비호흡 장치의 다이어그램. 전체 설정은 자신의 기능과 독립적으로 처리되는 주파수에 따라 세 개의 별도 단위로 세분화되었습니다. 여기에는 공기 제어 장치, 재호흡 방지 장치 및 피사체/이미징 장치 장치가 여기를 클릭하여 이 그림의 더 큰 버전을 확인하십시오.

  1. 장치 어셈블리
    1. 35mm 내경 튜브(#2; 재료 표참조)를 어댑터(#2*)를 통해 선택적 입구 포트의 3방향 밸브(#3 #1)에 더글라스 백(그림....

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결과

이 실험의 출력은 펄스 산소 측정기에서 가져온 수동 판독값, 가스 노출 또는 OCTA 스캐닝에 대해 지적된 타이밍 및 원시 OCTA 이미징 데이터로 구성됩니다. OCTA 이미지는 각 B 스캔과 관련된 OCT B 스캔 및 상관 신호로 구성됩니다. 데이터 매개 변수는 장치의 사양에 의해 제공됩니다. 1040-1060 nm의 중앙 파장을 가진 스윕 소스 레이저 플랫폼 OCTA 기계를 사용했습니다. 이미지는 20 μm의 횡해상도와 6.3 μm의 광학 축 해상도를 제공합니다. 대부분의 경우, OCTA 데이터는 대표적인 그림 2에나타난 바와 같이 2D enface 형식으로 제시된다. 이 데이터를 정량화하기 위한 많은 메트릭이 존재하므로 피사체와 다른 조건 간의 비교가 가능합니다. 대표적인 메트릭, 혈관 골격 밀도(VSD)는 도 2에서전체 망막 혈관조영술과 함께 도시된다. 모세혈관이 가스 노출에 반응하여 혈관 수축 및 혈관 처리됨에 따.......

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토론

방금 설명한 방법론은 OCTA 이미징 장치를 수정하지 않고 대상에 대한 최소한의 불편함이나 위험을 최소화하면서 특정 시점에서 통제된 환경에서 피사체의 RVR을 측정할 수 있는 가스 호흡 도발 실험을 위한 완전한 프로토콜입니다. 이 설정은 연구원의 요구에 맞게 쉽게 수정할 수 있는 방식으로 설명됩니다. 그것은 다른 진료소 방에 맞게 추가 튜브를 수용 할 수 있으며 사내 튜브 또는 팔꿈치 관절과 같은 특정 요소는 생략되거나 다른 구성 요소로 대체 될 수 있습니다. 그림 1은 설정의 핵심 부분인 공기 제어 장치, 재호흡 방지 장치 및 피사체/이미징 장치 장치가 하나의 간단한 연결로 서로 상호 연결하는 방법을 보여 줍니다. 가스 혼합물은 더글라스 백을 저장소로 사용하여 쉽게 제어할 수 있습니다. 또한 추가 모니터는 설정의 여러 지점에 추가할 수 있습니다. 예를 들어, 팔꿈치 관절에는 피험자의 호흡 상태를 보다 정확하게 특성화하기 위해 단면CO2와 같은 피험자의 호.......

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공개 사항

칼 자이스 메디텍은 이 기사의 주제와 관련된 AHK에 보조금, 장비 및 재정 지원을 제공했습니다.

감사의 글

이 작품은 NIH K08EY027006, R01EY030564, UH3NS100614, 칼 자이스 메디텍 (더블린, CA) 및 실명 방지를 위한 연구에서 무제한 부서 자금 지원 (뉴욕, 뉴욕)에 의해 지원되었습니다.

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
5% CO2 가스 [5% CO2, 21% O2, 74% N2] (압축)기관 종속(Praxair)
Bacdown 소독제 세제Decon Labs8001https://deconlabs.com/products/disinfectant-bdd/
Clean-Bor Tubes(35mm 내경)Vacumed1011-108http://www.vacumed.com/zcom/product/Product.do?compid=27&skuid=1197
더글러스 백 충전용 커프 어댑터Vacumed22254http://www.vacumed.com/zcom/product/Product.do?compid=27&prodid=343
더글러스 백(200L 용량)하버드 장치500942
https://www.harvardapparatus.com/douglas-bag.html 엘보 조인트(내경 19mm/외경 22mm), Modified in House
Fingertip Pulse Oximeter (Pro-Series)CMSCMS 500DLhttps://www.walmart.com/ip/Pro-Series-CMS-500DL-Fingertip-Pulse-Oximeter-Blood-Oxygen-Saturation-Monitor-with-silicon-cover-batteries-and-lanyard/479049154
가스 전달 튜브 (22mm 내경) Modified in House
가스 충전 튜브 (압축 가스의 경우 1/8")
과산화수소 클리너 소독 물티슈Clorox Healthcare30824https://www.cloroxpro.com/products/clorox-healthcare/hydrogen-peroxide-cleaner-disinfectants/?gclid=EAIaIQobChMIk-KG4vi15QIVcRh9Ch0NNwLPEAAYASAAEgJIa_D_BwE&gclsrc=aw.ds
윤활제 안약RefreshRefresh Plushttps://www.refreshbrand.com/Products/refresh-plus
수동 방향 제어 밸브: 3방향 T자형 스톱콕 타입(내경 28.6mm, 외경 35mm)Hans Rudolph2100C 시리즈
www.rudolphkc.com Medical O2(압축)기관 종속
마우스피스(실리콘, 모델 #9061)Hans Rudolph602076
www.rudolphkc.com OCTA 이미징 장치(PLEX Elite 9000)Carl Zeiss Meditec, Dublin, CA, USAhttps://www.zeiss.com/meditec/int/product-portfolio/optical-coherence-tomography-devices/plex-elite-9000-swept-source-oct.html
페닐에프린 염산염 안과 솔루션, USP 2.5%Paragon Bioteck, IncNDC 42702-102-15https://paragonbioteck.com/products/diagnostics/phenylephrine-hydrochloride-ophthalmic-solution-usp-2-5/
플라스틱 코 클립 멸균 폼 CS100Sklar 멸균96-2951
https://www.sklarcorp.com/disposables/plastic/plastic-nose-clip-sterile-foam-box-of-100.html 프로파라카인 하이드로클로라이드 안과 용액, USP .5%Bausch + LombNDC 24208-730-06https://www.bausch.com/ecp/our-products/rx-pharmaceuticals/generics
레귤레이터(탱크 의존- 5% CO2: Fisherbrand Mulitstage 가스 실린더 레귤레이터)Genstar Technologies Company10575150https://www.fishersci.com/shop/products/fisherbrand-multistage-cylinder-regulators-22/10575150?keyword=true
레귤레이터(탱크 의존성 - 산소: Fisherbrand 다단 가스 실린더 레귤레이터)Genstar Technologies Company10575145https://www.fishersci.com/shop/products/fisherbrand-multistage-cylinder-regulators-22/10575145?keyword=true
고무 튜브 (내경 19mm, 외경 27mm), 하우스
씰링 테이프 - 파라 필름 랩 (2 "와이드)Cole ParmerPM992https://www.coleparmer.com/i/parafilm-pm992-wrap-2-wide-250-ft-roll/0672050?PubID=VV&persist=True&ip=no&gclid=EAIaIQobChMInY3vqomz5QIVfyCtBh1VSg64EAAYASAAEgJ9n_D_BwE
멸균 알코올 준비 패드MedlineMDS090670https://www.medline.com/product/Sterile-Alcohol-Prep-Pads/Swab-Pads/Z05-PF03816
트로피카미드 점과 용액, USP 1%AkornNDC 17478-102-12http://www.akorn.com/prod_detail.php?ndc=17478-102-12
튜빙 어댑터, 사내
양방향 비재호흡 밸브 (2600 시리즈- 내경 28.6mm, 외경 35mm)Hans Rudolph2600 시리즈, UM-112078www.rudolphkc.com
제작

참고문헌

  1. Country, M. W. Retinal metabolism: A comparative look at energetics in the retina. Brain Research. 1672, 50-57 (2017).
  2. Ashimatey, B. S., Green, K. M., Chu, Z., Wang, R. K., Kashani, A. H. Impaired ....

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재인쇄 및 허가

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태그

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