June 26th, 2011
과학에 국내 및 미니어처 돼지의 사용은 최근 몇 년 동안 크게 증가하고 있습니다. 삽관법, transurethral 방광 catheterization, 대퇴 동맥 및 정맥 catheterization뿐만 아니라 transcardial 재관류를 수행하는 방법을 시연함으로써, 우리는 더 이상 생명 의학 연구에 괴팅겐 minipigs의 가치를 높이는 것을 목표로하고 있습니다.
기관내 삽관은 미니 돼지가 수술을 용이하게 하기 위해 전신 마취를 받을 때마다 시행해야 하는데, 이는 특허받은 기도를 유지하고, 보조 인공호흡을 허용하며, 흡인으로부터 기도를 보호하기 때문입니다. 미니 돼지는 다양한 자세로 삽관할 수 있지만, 보조 인공호흡 외에 유사한 방식으로 기도를 제공하기 때문에 정기적으로 인간 삽관을 수행하는 사람들에게는 동물을 등에 업고 있는 것이 더 쉬운 경향이 있습니다. 기관내 삽관에 필요한 장비로는 입을 벌리기 위한 슬링, 뭉툭한 끝으로 저압 흡입, 17-25cm 길이의 직선 칼날이 있는 수의후두경, 공기 청진기와 접착 테이프가 있는 주사기가 있습니다.
성인 내장 및 미니 돼지용. 5-7mm 크기의 기관내관이 적합합니다. 이 비디오에서는 5.5mm 튜브가 사용되었습니다.
미니 돼지를 등에 눕히고 적절하게 지지합니다. 후두 통로가 곧게 유지되도록 하기 위해, 혀를 약간 내밀고 조수가 턱을 벌립니다. 머리를 과도하게 늘리지 않으면 기도를 회전시키거나 머리를 과도하게 뻗으면 기도를 막아 후두 입구를 식별하기가 더 어려워질 수 있습니다.
후두경은 혀를 누르는 데 사용되며 흡입 끝은 연구개에서 후두개를 대체하는 데 사용됩니다. 그런 다음 후두경의 끝을 사용하여 후두개를 혀 바닥을 향해 위쪽으로 눌러 후두 입구를 드러냅니다. 레티노이드를 열면 연골과 성대가 보이고, 기관내관이 기관으로 약간 회전하면서 부드럽게 전진합니다.
만료되는 동안 튜브 커프는 제조업체의 사양에 따라 팽창됩니다. 기도의 부종과 부종을 유발할 수 있는 과도한 팽창을 피하기 위해 주의하는 동안, 돼지는 오른쪽 두개골 폐엽을 환기시키기 위한 기관지를 가지고 있습니다. 따라서 튜브를 기관 분기점 위에 배치하는 것이 중요합니다.
이것은 올바른 튜브 크기를 사용하고 접착 테이프를 사용하여 튜브의 근위 끝을 높이에 고정함으로써 촉진됩니다. 미니 피그가 적절하게 삽관되면 튜브를 통해 공기가 자유롭게 통과하는 것을 느껴야 하며 흉부 청진을 통해 흉부의 왼쪽과 오른쪽 모두에서 호흡 소리가 드러나야 합니다. 모니터링 시스템이 있는 인공호흡기를 미니 돼지에 연결하면 생리학적 호기, 이산화탄소 값을 측정할 수 있어야 하며 인공호흡기 설정에 의해 결정된 호흡 패턴을 따르는 이산화탄소 곡선을 관찰할 수 있어야 합니다.
미니 돼지의 기관내 삽관은 후두 통로가 좁고 성대의 점막이 쉽게 외상을 입기 때문에 어려울 수 있습니다. 튜브가 너무 크거나 너무 많은 힘이 사용되는 경우 자일로카인 스프레이 또는 근육 이완제를 사용하면 튜브의 도입을 촉진할 수 있습니다. 그러나 신경근 차단제의 사용은 그러한 절차에 대해 잘 훈련된 직원만 수행해야 합니다.
방광 카테터 삽입은 소변 생성을 모니터링하는 방법으로 사용될 수 있으며, 이는 긴 수술 절차 동안 수화 상태와 신장 및 심혈관 기능에 대한 유용한 정보를 제공할 수 있습니다. 요도를 통한 방광의 카테터 삽입은 암컷 돼지에서 쉽게 이루어집니다. 이 절차는 매우 어렵고 성인 미니 돼지의 경우 수컷에서는 불가능할 수 있지만, 외부 요도의 곡률과 크기로 인해 폴리 카테터 프렌치 사이즈 8 또는 10이 적합합니다.
탐침으로 카테터를 여는 것이 좋습니다. 필요한 장비에는 검경 무딘 팁 집게, 식염수 윤활제가 있는 주사기, 폐쇄형 시스템 소변 배출 백이 포함됩니다. 카테터 삽입 중 외부 요도 구멍을 가장 잘 시각화하기 위해 미니 돼지를 요추 부위 아래에 지지대와 함께 등에 눕힙니다.
보조자가 뒷다리를 당기는 동안 여성의 외요도 개구부는 자궁경부까지의 거리의 약 1/3에서 1/2 지점인 질 바닥에 있습니다. 그러나 동물을 뒤쪽에 놓기 때문에 요도 입구의 위치가 거꾸로 된 것처럼 보입니다. 카테터는 뭉툭한 끝 집게로 제어되므로 카테터의 끝은 집게의 연속입니다.
요도 구멍에 카테터를 조심스럽게 삽입합니다. 카테터 삽입 중에 너무 많은 힘을 가하면 요도에 쉽게 외상이 발생하지만, 카테터가 외부 괄약근을 통과할 때까지 처음에는 약간의 저항이 느껴질 수 있습니다. 이 문제가 지속되면 동물이 충분히 깊이 진정되지 않았음을 나타낼 수 있습니다.
해결책은 잠시 기다렸다가 마취가 효과를 발휘하도록 하는 것입니다. 카테터가 방광에 도달하면 스타일을 제거하면 소변이 흐르는 것을 볼 수 있습니다. 제조업체의 사양에 따라 풍선에 식염수를 주입하고 풍선이 방광 목에 걸릴 때까지 카테터를 부드럽게 당겨 빼냅니다.
닫힌 시스템 소변 배출 백을 부착하고 카테터가 우발적으로 변위되는 것을 방지하기 위해 카테터를 꼬리에 테이프로 붙입니다. 적절한 훈련과 경험을 바탕으로 동물을 다룰 때 경요도 방광 카테터 삽입은 거의 어려움 없이 수행할 수 있습니다. 이 최소한의 침습적 절차는 섬세한 의료 기술 장비의 오염과 고통스러운 방광 확장의 오염을 방지할 수 있으며, 이는 미주신경 긴장도 증가 및 생리학적 매개변수 변경으로 인해 동물에게 해를 끼치고 실험에 영향을 미칠 수 있습니다.
동맥 및 정맥 카테터 삽입은 반복적인 혈액 샘플을 얻고 다양한 생리학적 매개변수를 모니터링하는 데 유용합니다. 생존 연구에서 혈관 카테터 삽입을 수행할 때는 감염을 방지하기 위해 엄격한 무균 기술을 사용해야 합니다. 필요한 장비에는 메스, 무딘 끝, 수술 가위, 조직 집게, 작은 뭉툭한 끝, 수술 집게, 작은 자체 유지 조직 견인기, 바늘 홀더 수술 스왑, 카테터 개통성을 유지하기 위해 플러시 유체로 바늘 헤파린 식염수를 사용한 봉합사가 포함됩니다.
2 개의 18 게이지 IV 캐뉼라, 2 개의 4 개의 프렌치 브라이트 팁 칼집, 소개기 및 셀딩거 G 와이어. 마취의 깊이는 지간(interdigital pain reflex)을 검사하여 평가합니다. 대퇴 동맥과 정맥은 미니 돼지를 등에 눕히고 뒷다리를 옆으로 후퇴시켜 접근합니다.
내측 복재동맥의 표재성 부분의 맥동이 사라지는 gracilis와 sartorious muscle 사이의 피부 주름을 확인합니다. 이 지점까지 세로 표재성 피부 절개 두개골을 만들어 내측 복재 혈관이 실수로 손상되는 것을 방지합니다. 뭉툭한 끝 가위를 사용하여 아래에 있는 피하 조직을 절개합니다.
sartorius 근육과 gracilis 근육의 근막 부문은 두개골에서 내측 복재 혈관의 관통 부위로 나뉩니다. 먼저 작고 뭉툭한 끝과 수술용 겸자로, 그 다음에는 대퇴 신경과 혈관이 손상되지 않도록 주의하면서 작은 자체 유지 조직 견인기로 두 근육 그룹을 분리하고, 동맥은 약 1-2cm 길이로 격리됩니다. 뭉툭한 해부를 사용하여 경사진 ven flon 바늘을 회전하여 내강이 위쪽을 향하도록 합니다.
바늘을 약간 구부려 혈관 곡률을 더 쉽게 따라갈 수 있습니다. 바늘이 여전히 앞뒤로 움직일 수 있는지 테스트하는 것을 잊지 마십시오. 동맥에 구멍이 뚫렸습니다.
바늘이 들어가고 셀딩거 가이드 와이어가 벤톤 튜브를 통해 삽입됩니다. G 와이어가 고정되도록 동맥에 부드럽게 압력을 가하면서 벤 플론 튜브를 제거합니다. 도입부가 있는 피복은 솔터 와이어 위에 삽입되고 원하는 위치로 전진한 후 도입자와 시잉 또는 와이어가 제거됩니다.
대퇴 정맥은 동맥 바로 아래 및 내측에 있습니다. 둔기 절제를 사용하여 정맥을 분리한 후, 앞서 동맥에 대해 설명한 대로 정맥을 캐뉼레이션합니다. 동맥과 정맥이 모두 카테터로 올바르게 삽입되었는지 확인하려면 양쪽 칼집에서 혈액을 채취하고 샘플의 색상을 비교합니다.
혈액 샘플을 채취할 때마다 카테터를 헤파린 식염수로 세척하는 것을 잊지 마십시오. 카테터 개통을 유지하기 위해 카테터를 고정하고 피부를 닫습니다. 몇 번의 봉합사로 동맥과 정맥 주위에 혈관 루프를 배치하여 구멍을 뚫기 전에 혈관을 고정할 수 있습니다.
장점에도 불구하고 일반적으로 이 추가 단계는 혈관을 과도하게 해부해야 하고 측면 및 깊은 가지를 손상시킬 위험이 증가하기 때문에 피합니다. 현재 영상은 대퇴 혈관에 카테터를 삽입하는 방법을 보여줍니다. 대퇴 혈관의 카테터 삽입은 접근의 용이성을 위해 목 혈관의 카테터 삽입보다 바람직합니다.
프레임 기반 정위 신경외과 및 뇌 영상과 관련된 실험을 수행할 때 경심 관류는 가장 효과적인 고정 방법이며 탁월한 결과를 산출합니다. 조직학 및 조직화학을 위해 미니 돼지 장기를 준비할 때 절차를 위해 다음 장비가 필요합니다. 관류 시스템 관련 풍력 유체, IV 캐뉼라 주사기, 펜토바르비탈 메스, 무딘 팁, 수술용 가위, 뼈 가위 및 두 개의 큰 자체 고정 집게, 그 중 적어도 하나는 끝이 구부러져 있습니다.
자체 유지 흉골 견인기는 절대적으로 필요한 것은 아니지만 절차를 상당히 용이하게 합니다. 트랜스 카디알 관류는 고출력 흄 추출 시스템과 후속 안전한 폐기를 위해 8가지 액체와 혈액을 충분히 수집할 수 있는 시설을 갖춘 환기가 잘 되는 방에서 수행해야 합니다. 치사량의 펜타 바르비탈을 주사한 후 지간경통 통증 반사를 테스트합니다.
심장과 대동맥에 가장 잘 접근할 수 있는 방법은 정중 흉골 절개술을 통해 이루어집니다. manubrium에서 흉골의 xiphoid process까지 이어지는 깊은 세로 피부 절개를 만듭니다. xiphoid 돌기 바로 아래에 있는 횡격막을 작게 절개하여 흉강에 접근합니다.
뼈 가위를 흉강에 삽입하고 이등분 심장이 흉골 내부의 어느 곳에 부착 될 수 있으므로이 절차를 수행 할 때 흉골 주의가 필요합니다. 흉골이 분할된 후 자체 유지 흉골 견인기에 넣고 흉강이 손상되지 않은 경우 흉강을 열고 심장 정점의 심낭을 작게 절개한 다음 심낭 자루를 디지털 방식으로 엽니다. 좌심실, 우심실 및 대동맥을 식별합니다.
상기혈맥(superior caval vein)과 함께 심장 정점 근처에 작은 표재성 절개를 만들고 끝이 뭉툭한 기구로 심근을 천공하여 좌심실에 접근합니다. 관류 캐뉼러를 좌심실 내부에 삽입하고 캐뉼라 팁 크랜을 대동맥으로 이동합니다. 대동맥에서 두 번째 손가락과 세 번째 손가락 사이에서 캐뉼라가 느껴지면 캐뉼라를 제자리에 고정합니다.
구부러진 집게를 잡고 오른쪽 오라클을 절개하고 관류 캐뉼라를 통해 고정제를 주입하기 시작합니다. 대동맥에서 풍성한 8의 흐름을 느낄 수 있으며 절개된 오른쪽 오라클을 통해 피가 쏟아져 나오면서 Perfuse 8이 미니 돼지 혈관으로 계속 흐릅니다. 파라 포름알데히드의 전신 풍부함이 어떻게 신경과 근육의 알데히드 교차 결합으로 인해 팔다리의 과신전과 표재성 근육 조직의 경련을 유발하는지 주목하십시오.
압축 공기로 구동되는 관류 시스템을 사용하는 경우 캐뉼라를 제거하거나 clamp 공기가 혈관 시스템으로 들어가는 것을 방지하기 위해 캐니스터가 비어 있기 전에 투명 실리콘 튜브를 사용하십시오. 현재 비디오에서는 중력 대신 압축 공기로 구동되는 관류 시스템을 사용합니다. 압축 공기를 사용하는 시스템의 장점은 공정 중에 가해지는 정수압이 일정하여 궁극적으로 최상의 장기 풍부함을 제공한다는 것입니다.
본 기사는 생물의학 연구에서 괴팅겐 미니돼지의 사용이 증가하는 것에 대해 논의하며, 삽관 및 카테터 삽입과 같은 필수 절차에 초점을 맞추고 있습니다. 이는 과학 연구에서 이러한 기술의 이해와 적용을 향상시키는 것을 목표로 합니다.