Name: 괴팅겐 Minipig의 기본 외과 기술 : 삽관법, 방광의 Catheterization, 대퇴 선박 Catheterization, 그리고 Transcardial 재관류 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-06-26T14:00:00.000+00:00
Duration: 13 min 26 s
Description: 학습하세요 괴팅겐 미니피그의 기본 외과 기술을 통해 삽관법, 방광 카테터 삽입법, 대퇴 혈관 카테터 삽입법 및 경심장 재관류 기술을 안전하게 수행하는 방법을. 이 기술들은 생의학 연구에서 미니피그의 활용 가치를 높입니다.

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연구는 재정적 Lundbeck 재단, 카렌 엘리스 젠슨 재단, 중앙 덴마크 지역의 건강 연구 기금 및 임상 의학 오르후스 대학 병원의 연구소에 의해 지원되었다. 우리는 감사 도널드 F 스미스, 앤더스 스틴 Soerensen, 헨릭 Soerensen, Asbjoern Ettrup - 크리스덴슨 및 Paaskehoejgaard의 직원들의 숙련된 도움을 인정합니다.

1. 삽관법 <ol><li> endotracheal 삽관법에 필요한 장비 : 보조 환기, 입, 무딘 팁 낮은 압력 흡입, 17 25cm 길이 사이의 직선 칼날로 수의과 후두경, 탐침, 공기와 주사기, 청진기 및 접착 테이프를 여는 slings을 의미합니다. 성인 괴팅겐가 endotracheal 튜브의 크기를 minipigs에 대한 5-7mm 10 적합합니다. 이 비디오에서는 5.5 mm 튜브 10을 사용했습니다. </li><li> minipig은 후두 통로가 직선 유지되도록하기 위해 자사의 뒤쪽에 위치하고 적절하게 지원됩니다. </li><li> 혀가 약간 꺼내와 턱뼈가 머리를 overextending 않고 조수에 의해 열려 개최됩니다. 기도 또는 머리의 과도한 확장의 회전를 식별하기 위해 후두 여는 더 어렵게하고 튜브 tracheal 위치를 복잡 항공을 막다 수 있습니다. </li><li> 후두경는 pharyngeal 캐비티로 전달하고 혀를 우울하게하는 데 사용, 후두를 표시하고있다. 흡입의 끝은 부드러운 미각의 후두를 치환하는 데 사용됩니다. 후두경의 끝은 다음 후두 오프닝을 공개, 혀의 기본 방향으로 위쪽으로 후두를 눌러하는 데 사용됩니다. </li><li> arytenoids의 연골 및 성대가보기에 와서 endotracheal 튜브가 만료 동안기도로, 약간의 회전과 함께 부드럽게 고급 있습니다. </li><li> 붓기와기도의 부종이 발생할 수 있음을 초과 인플레이션을 피하기 위해주의하면서 튜브 커프스는 제조의 사양에 따라 증가할 수 있습니다. 돼지는 오른쪽 두개골 pulmonal 엽을 환기하는 기관지 있습니다. tracheal 분기점 위에 튜브를 삽입하는 것이 중요하다. 이것은 중요한 접착제 및 테이프를 사용하여 주둥이의 수준에서 튜브의 근위 끝을 고정하여 올바른 튜​​브 크기를 사용하여 용이합니다. </li><li> minipig 제대로 intubated 경우, 공기의 무료 통로가 튜브를 통하여 생각해야하며 가슴 청진은 흉부의 왼쪽과 오른쪽 모두에서 호흡 소리를 공개해야합니다. </li><li> minipig에 모니터링 시스템과 함께 호흡을 연결되면 생리 날숨 이산화탄소 값을 측정하고 6,10를 볼 수 있습니다 환풍기 설정에 따라 결정 호흡 패턴을 다음과 이산화탄소 곡선한다. </li><li> 이산화탄소와 oximetry 값은 처음 premedication 및 마취 유도에 의해 영향을받을 수 있습니다. 그러나이 값을 신속하게 적절한 환기 6,10와 다시 정상으로 되돌릴 것입니다. 인공 이용한 환기에도 불구하고 청색증의 흔적은 튜브의 부적 절한 배치를 나타냅니다. 가장 일반적인 오류는 식도에 튜브의 실수로 배치됩니다. </li></ol> 2. Transurethral 방광 catheterization <ol><li> 이 절차는 여성 돼지입니다. 성인 minipigs 폴리 카테터 프랑스어 크기 8 10 적합합니다. 외부 요도 개통의 곡률 및 크기로 인해, 탐침과 카테터가 바람직합니다. 이상 블레이드와 검경이 큰 동물 유용할 수 있습니다 반면, 비강의 검경 작은 minipigs에서 사용할 수 있습니다. 필요한 장비는 또한 뭉툭한 - 팁 포셉, 호수, 윤활유와 주사기 및 폐쇄 시스템 소변 배수 가방이 포함되어 있습니다. </li><li> 지원자가 cranially 뒷다리를 가져옵니다 동안 가장 catheterization 동안 외부 요도 구멍을 시각화하기 위해 minipig은, 요추 아래 지원의 뒷면에 위치합니다. </li><li> 윤활 검경가 삽입하고 질 벽에을 시각화하기 위해 열립니다. 여성의 외부 요도 오프닝은 약 3 분의 1 자궁 경부 (그림 1A)에 거리의 절반에 질의 바닥에 위치하고 있습니다. 동물 뒷면에 배치되기 때문에 그러나, 요도 개방의 위치가 반전으로 표시됩니다. </li><li> 카테 테르가 야기한 팁 포셉과 제어, 카테터의 끝 포셉의 연속에 있으므로. 요도 오프닝 (그림의 1B)에 카테터를 조심스럽게를 삽입합니다. 너무 힘이 catheterization 동안 사용하는 경우에는 요도 쉽게 상처를 입었어요. 카테 테르는 외부 요도의 괄약근을 통과 때까지 단, 약간의 저항은 처음에는 느낄 수 있습니다. 이 문제가 해결되지 않으면, 이것은 동물 깊게 충분히 진정 아니라는 것을 나타낼 수 있습니다. 이 솔루션은 잠시 기다려 마취가 미치는 영향을 데​​려 가게하는 것입니다. </li><li> 카테터가 방광에 도달로 탐침을 제거하고, 소변이 흐르는 보여줄 것입니다. </li><li> 제조의 사양에 따라 호수로 풍선을 팽창하여 풍선이 방광 목에 발견할 때까지 부드럽게 카테터를 가져옵니다. </li><li> 폐쇄 시스템 소변 배수 가방을 연결합니다. </li><li> 동물을 다룰 때 카테 테르의 실수로 변위를 방지하기 위해 꼬리에 테이프 카테터. </li></ol> 3. 대퇴 동맥과 정맥 catheterizatioN <ol><li> 필요한 장비는 다음과 같습니다 카테 테르의 명백을 유지하기 위해 메스, 야기한 팁 외과 가위, 조직 포셉, 작은 야기한 팁 외과 포셉, 작은 자기 유지 조직 견인기, 바늘 홀더, 수술 스왑, 바늘로 봉합, 플러시 - 액체로 heparinized 호수 두 18 게이지 IV 정맥, 두 introducer 및 Seldinger 가이드 와이어와 4 프랑스어 브라이트 팁 sheaths. </li><li> 마취의 깊이는 절차를 시작하기 전에 인터 고통 반응을 테스트하여 평가해야합니다. </li><li> 대퇴 동맥과 정맥은 그 뒷면에 배치 minipig로 접근하고 뒤쪽 다리는 옆으로 철회 있습니다. 중간 saphenous 동맥의 표면 부분의 맥동이 사라지고 그레이 실리스와 sartorius 근육 사이 피부 접어에서 확인합니다. </li><li> 따라서 실수로 중간 saphenous 혈관 손상을 피하기 위해,이 시점에 두개골 종방향 표면 피부 절개를합니다. </li><li> 기본 피하 조직을 해부하다하는 야기한 팁 가위를 사용합니다. </li><li> sartorius와 그레이 실리스 근육의 근막 부문은 중간 saphenous 작은 야기한 팁 수술 포셉 처음에 선박, 그리고 디지털의 침투 사이트에 두개골 나뉘어져 있습니다. </li><li> 대퇴 신경 및 혈관을 손상하지 않도록주의하면서 두 근육 그룹은 작은자가 유지 조직 견인기로 구분됩니다. </li><li> 동맥은 무딘 절개를 사용하여 약 1-2cm의 길이에 대한 격리됩니다. </li><li> 루멘은 위쪽에 직면 있도록 beveled venflon 바늘을 회전. 더 쉽게 선박 곡률를 따를 수 있도록 바늘 조금 벤드. 바늘 여전히 약간의 노력으로 앞뒤로 이동할 수 있도록해야합니다. </li><li> 동맥이 구멍은, 바늘은 철회하고 Seldinger 가이드 와이어는 venflon 튜브를 통해 삽입됩니다. </li><li> 부드럽게 guidewire의 고정을 보장하기 위해 동맥에 압력을 적용하는 동안 venflon 튜브를 제거합니다. </li><li> introducer와 칼집은 Seldinger 와이어를 통해 삽입 introducer와 Seldinger 와이어를 제거하는 후 원하는 위치로 고급이다. </li><li> 대퇴 정맥은 아래 위치하고 동맥 중간이다. 무딘 절개를 사용하여 정맥을 분리 후, 정맥은 이전에 동맥에 대한 설명으로 cannulated 있습니다. </li><li> 동맥과 정맥 모두가 올바르게 catheterized 있는지 확인하려면 두 sheaths에서 혈액을 그릴 및 샘플의 색상을 비교합니다. 혈액 샘플을 그리기 때마다, 이후 카테 테르의 명백을 유지하기 위해 heparinized 식염수에 카테터를 플러시해야합니다. </li><li> 몇 봉합과 카테터가 확보되고 피부가 닫힙니다. </li><li> 선박 루프 전에 바늘로 혈관을 흥분시키는하기 위하여 동맥과 정맥 주위에 배치하실 수 있습니다. 그 장점에도 불구하고, 우리는 일반적으로 그것이 혈관을 초과 절개를 요구하고 측면과 깊은 지점을 손상의 위험을 증가시킬 수 있기 때문에 이러한 추가 단계를 피할 수 있습니다. </li></ol> 4. Transcardial 재관류 <ol><li> 다음 장비는 절차 필요합니다 : 재관류 시스템 (그림 2), 관련 재관류 유체, 메스, 야기한 팁 외과 가위, 뼈 가위, 그리고 적어도 하나는 곡선 팁을 가지고있는 두 개의 커다란 자기 유지 포셉합니다. 흉골 견인기을 유지 자체가 절대적으로 필요하지 않습니다, 그러나 그것은 상당히 절차를 그칠. </li><li> Transcardial 재관류는 고전력 퓸 추출 시스템 및 그 이후의 안전한 처리에 대한 perfusate 액체의 수집 및 혈액을 있도록 시설 통풍이 잘 방에 수행되어야합니다. </li><li> 정맥 pentobarbital의 치사량 주사 후, 계속하기 전에 인터 고통 반사를 테스트합니다. </li><li> 심장과 대동맥에 가장 좋은 접근은 평균 sternotomy를 통해 제공됩니다. manubrium에서 흉골의 검상 돌기 프로세스에 걸쳐 깊은 세로 피부 절개를합니다. 그냥 칼 모양의 과정을 아래 횡경막의 작은 절개하여 흉강에 액세스합니다. </li><li> 흉강에 뼈 가위를 삽입하고 흉골을 이등분. 이 절차를 수행할 때 마음이 흉골의 안쪽에 어떤 장소에서 자기편 수 있기 때문에주의가, 촬영해야합니다. 따라서 뼈 가위의 칼날은 흉골의 내부에 대한 흉강 내부의 모든 시간에 달려 있는지 확인하십시오. </li><li> 흉골이 분할되고 나면, 자기 유지 흉골 견인기 넣고 흉강을 엽니다. </li><li> 그대로있는 경우, 심장의 꼭대기에있는 심낭에 작은 절개를하고 디지털 pericardial 색을 엽니다. </li><li> 우수한 caval의 정맥 (그림 1C)와 함께 좌심실, 오른쪽 외이와 대동맥을 식별 </li><li> 심장의 꼭대기 근처에 작은 피상적인 상처를 확인하고 야기한 밀고 악기와 myocardium을 perforating하여 좌심실에 액세스할 수 있습니다. </li><li> perfus를 삽입이온 좌심실 내부 정맥 및 cranially 대동맥에 정맥 팁 이동합니다. </li><li> 정맥은 대동맥에서 손가락 사이 생각되면, 스스로 가지고 곡선 포셉과 장소에 정맥을 클램프. </li><li> 오른쪽 외이에 절개를 만들고 재관류의 정맥을 통해 주입 정착액을 시작합니다. 대동맥의 perfusate의 흐름을 느낄 수 있으며 minipig 혈관에 perfusate 흐름이 계속으로 혈액이 베인 오른쪽 외이를 통해 밖으로 부어 것입니다. paraformaldehyde와 함께 체계적 재관류가 사지의 hyperextension을 유도하고 알데히드 신경 및 근육의 상호 결합에 의한 표면 근육의 꿈틀 점에주의하십시오. 압축 공기 대신에 중력에 의해 구동 재관류 시스템을 사용하면, 용기가 비어되기 전에 혈관 계통에 들어가기에서 공기를 방지하기 위해, 정맥을 제거하거나, 맑은 실리콘 튜브를 클램프에 있는지 확인하십시오. </li></ol><img src="/files/ftp_upload/2652/2652fig1.jpg" alt="그림 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 1"> 그림 1. A : 여자 괴팅겐 minipig 외부 요도 오프닝 B :. 카테터 삽입 후 요도 개통 C :. 중간 sternotomy 후 minipig 마음의 복부 볼 수 있습니다. <img src="/files/ftp_upload/2652/2652fig2.jpg" alt="그림 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 2"> 그림 2. A : 재관류 시스템 조정 압력 밸브와 perfusate를 가지고있는 용기에 압축 공기의 유입을 제어하는 데 사용하는 레버로 유입 튜브로 구성되어 있습니다. 클리어 실리콘 튜브는 4mm 강철 파이프로 만든 야기한 팁 정맥에 컨테이너를 연결 B 및 C :.. 유입 레버를 압축하여 압력 용기 및 perfusate의 상승은 정맥 D를 통해 추진됩니다되면 취소 실리콘 튜브 및 정맥이 perfusate 가득 있으며, 흐름은 클램프와 중지하고 시스템 사용을위한 준비입니다.

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모든 절차가 덴마크 실험 동물 검사관의 관할 구역, 법무부 장관의 승인을 덴마크어 있었고 (NIH 간행물 번호 86-23, 1985 개정)의 &quot;실험실 동물 관리의 원칙&quot;에 따라 실시되었다.

이 프레 젠 테이션 연구 12,13을 minipig 네 개의 자주 사용하는 절차를 수행하는 방법에 대한 단계별 지침 시각을 제공합니다. 설명한 기술은 랜드 레이스의 돼지 및 개, 양 14 등 다른 대형 연구 동물에 거의 혹은 전혀 적응과 함께 사용할 수 있습니다. 무균 기술은 생존 연구에서 설명된 절차를 수행할 때, 감염을 피하기 위해 고용해야합니다. 마취의 유도는 동물 복지와 과학적 이유로 중요하고, endotracheal 삽관법을 시도하기 전에, 각막 반사 좋은 근육질 휴식의 부재를 제공해야합니다. 유도에 사용되는 anesthetics가 해결 회에 걸쳐 맞 는다하지만, 원하는 효과가 관찰 때까지 관리하지 않기 때문에 그러나, 그것은, 밀접한 가사의 위험 때문에 동물을 모니터하기 위해 특히 propofol 6,10를 사용하는 경우 중요합니다. tracheal 삽관법 들어, xylocaine 스프레이 또는 근육 이완의 사용은 튜브의 도입을 용이하게 할 수 있지만, 신경근육학 차단제의 사용은 윤리적 요구 사항을 준수하기 때문에 같은 절차에 잘 훈련 요원에 의해 수행되어야합니다. 케어는 tracheal 팽창과 부종을 방지하기 위해, 삽관법 동안 후두 흐름을 ...에 상처​​를 입히다하지 않도록해야합니다. 기도 부종은 NSAID 또는 유사 항염증성 약물 열로 치료하실 수 있습니다. 돼지는 여러 위치에서 intubated,하지만 비슷한 방식 6의기도를 선물로서 뒷면에있는 동물을 가지고하는 것은 정기적으로 인간 삽관법을 수행하는 사람을 위해 쉽게하는 경향이 있습니다. 삽관법 중 가장 일반적인 오류는 동물의 뒷면에 위치 후두 통로 아래에 위치하고있는 식도에 튜브의 실수로 배치됩니다. 참고 튜브 먼저 명확하게 arytenoids의 연골 및 성대를 식별하지 않고 고급해서는 안됩니다. 이 절차는 남성 6, 아마도 불가능 매우 어려운 상태에서 요도를 통해 방광의 Transurethral catheterization 쉽게, 여성의 돼지에서 이루어집니다. 그것은 여성의 요도 구멍이 질로 앞쪽에 있기 때문에, 큰 질구가 잘못 catheterized 수 있다고 지적한다. 살균 및 소독 윤활제의 사용은 생존 연구 좋습니다. 또한, 국소 마취제의 효과 윤활제는 catheterization 절차를 완화 수 있습니다. 대퇴 동맥과 정맥 catherization, 선박 카테터의 선택과 방법을 수행할 때 이들은 카테터는 시간 6의 기간 동안 이식 특히 때 아닌 생존과 생존을 연구 다를 확보하고 있습니다. 만성 이식에 대한 인스턴스 카테터가 높은 biocompatible되어야 들어뿐만 아니라 시간이 지남에 따라 선박의 벽 ...에 상처를 입히다 것만 큼은 아니예요, 따라서 혈전증 또는 침식 6 유도, 고정을위한 보존 구슬이나 수갑을했습니다. 현재 동영상에서 우리는 transcardial 재관류를위한 압축 공기에 의해 구동되는 폐쇄 시스템을 사용합니다. 또 다른 옵션은 중력에 의해 구동 시스템을 사용하는 것입니다. 압축 공기를 이용하여 시스템에 비해 중력 시스템의 장점들은 효율적이고 간단한 것을 있으며, 혈관 계통을 입력 가압 공기의 위험을 제시하지 않습니다. 그러나, 중력 시스템에 의해 끼쳤다 정수압은 재관류 동안 지속적으로 변화하고, 이것이 histological 결과 15에 영향을 줄 수 있습니다. 유형 하나가 수행하고자 histopathological 연구에 따라 먼저 heparinized 생리와 동물을 perfuse에 유리 수 있습니다. 적혈구로 인한 autofluorescence 문제를 방지하기 위해 immunofluorescent 얼룩을 수행할 때 특히 importantance입니다. 관심의 기관이 뇌가있다면 또한, 내림차순으로 대동맥이 정착액 저장 채워 수 있습니다. 그러나, 돼지에서이 단계 해부 추가 수반과 절차를 연장합니다.

<table border="1"><tbody><tr><th> 절차 </th><th> 장비 </th><th> 회사 </th><th> 카탈로그 - 숫자 </th></tr><tr><td> 삽관법 </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td> 마스크 </td><td> Datex - Ohmeda S / S 이동이다, GE 헬스케어 </td><td> 1009-9002-000 </td></tr><tr><td></td><td> 무딘 팁과 흡입 </td><td> Unomedical </td><td> 34091181 </td></tr><tr><td></td><td> 후두경 </td><td> 제분업자 </td><td> 85-0045 (후두경 세트) </td></tr><tr><td></td><td> Endotracheal 튜브 5.5 mm ID를 </td><td> 스미스 의료 국제 회사 </td><td> 100/199/055 </td></tr><tr><td></td><td> 탐침 </td><td> 허드슨 RCI </td><td> 5-151001 </td></tr><tr><td></td><td> 주사기 5ml </td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td> 청진기 </td><td> 흰털 발 제비 </td><td> 17-262-00 </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> 방광 catherization </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td> 글리세린 실리콘 폴리 카테터 탐침 8 - 프랑스어를 AquaFlate </td><td> 로쉬 </td><td> 178003 </td></tr><tr><td></td><td> 검경 비강 </td><td> 흰털 발 제비 </td><td> 36-859-50 </td></tr><tr><td></td><td> 검경 직장 </td><td> 흰털 발 제비 </td><td> 30-613-15 </td></tr><tr><td></td><td> 블런트 - 팁 포셉 </td><td> 흰털 발 제비 </td><td> 13-374-16 </td></tr><tr><td></td><td> 카테 테르의 윤활유 젤 </td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td> Cathejell Lidocain </td><td> Montavit </td><td> CJL08501 </td></tr><tr><td></td><td> Instillagel 빗. </td><td> Farco 제약 </td><td> 08-40-200 </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td> A4 소변의 배수 가방 </td><td> Unomedical </td><td> 38 155 1​​S </td></tr><tr><td></td><td> 접착제 테이프 </td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> 대퇴 동맥과 정맥 catherization </</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td> 외과용 메스 </td><td> 흰털 발 제비 </td><td> 10-295-11 </td></tr><tr><td></td><td> 블런트 - 팁 외과 가위 </td><td> 흰털 발 제비 </td><td> 11-881-18 </td></tr><tr><td></td><td> 조직 포셉 </td><td> 흰털 발 제비 </td><td> 12-100-14 </td></tr><tr><td></td><td> 소형 무딘 - 팁 외과 포셉 </td><td> 흰털 발 제비 </td><td> 13-375-13 </td></tr><tr><td></td><td> 소형 자기 유지 조직 견인기 </td><td> 흰털 발 제비 </td><td> 15-753-13 </td></tr><tr><td></td><td> Needleholder </td><td> 흰털 발 제비 </td><td> 20-634-14 </td></tr><tr><td></td><td> 외과 스왑 </td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td> 바늘로 봉합 </td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td> 식염 </td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td> Heparine </td><td> LEO </td><td> 585679 </td></tr><tr><td></td><td> 18 게이지 venflon </td><td> BD Venflon 프로 </td><td> 393206 </td></tr><tr><td></td><td> introducer 및 Seldinger 가이드 와이어와 4 프랑스어 브라이트 팁 sheaths </td><td> Cordis </td><td> 154-2629-1/0017 </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Transcardial 재관류 </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td> 가압 재관류 시스템 </td><td> 대부분의 전문적인 하드웨어 상점에서 사용할 수있는 부품으로 만들어 홈 </td><td></td></tr><tr><td></td><td> 펌 추출 시스템 </td><td> 그램 A / S </td><td> 01750000과 0303700 </td></tr><tr><td></td><td> Perfusant 5L </td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td> 블런트 - 팁 외과 가위 </td><td> 흰털 발 제비 </td><td> 11-881-18 </td></tr><tr><td></td><td> 본 가위 </td><td> FST </td><td> 16150-24 </td></tr><tr><td></td><td> 대형 곡선 팁 자체 보유 포셉 </td><td> 흰털 발 제비 </td><td> 13-421-18 </td></tr><tr><td></td><td> 흉골 견인기을 유지 자체 </td><td> 루돌프 의료 </td><td> 7520-10 </td></tr><tr><td></td><td> Pentobarbital</td><td> TheRoyal 베티 농업 대학 (KVL) </td><td> 200 MG / ML </td></tr><tr><td></td><td> 22 게이지 venflon </td><td> BD Venflon 프로 </td><td> 393202 </td></tr></tbody></table>

괴팅겐 minipig의 기본 외과 기술 : 삽관법, 방광의 catheterization, 대퇴 선박 catheterization, 그리고 transcardial 재관류

Basic Surgical Techniques in the G&ouml;ttingen Minipig: Intubation, Bladder Catheterization, Femoral Vessel Catheterization, and Transcardial Perfusion

이러한 신경 과학, 독성학, 당뇨병, 비만, 그리고 실험 수술 같은 주제의 연구에서 괴팅겐 minipig의 출현은 인간의 해부학 및 생리학 1-6 이러한 동물의 가까운 닮았를 반영합니다. 괴팅겐 minipig의 크기가 수술의 사용을 허가 인간 6-8에서 사용되는 것과 유사한 장비와 고급 이미징 modalities. 이 교육용 비디오의 목적은 tracheal 삽관법, transurethral 방광 catheterization, 대퇴 동맥 및 정맥 catheterization뿐만 아니라 transcardial 재관류를 수행하는 방법을 시연함으로써, 생명 의학 연구에 minipigs의 가치에 대한 인식을 높일 수 있습니다. 그것이, 특허기도를 유지 지원 환기를 허용하고 aspirates에서기도를 보호하기 때문에 minipig가 전신 마취를 겪습 때마다 Endotracheal 삽관법을 실시하여야한다. Transurethral 방광 catheterization 길이 수술 절차 동안에 대한 수화 상태에 대한 유용한 정보뿐만 아니라 신장과 심장 혈관 기능을 제공할 수 있습니다. 또한, 비뇨기 catheterization는 섬세한 메디코 - 기술 장비와 동물을 손상하고 불필요하게 증가 vagal 색조와 변경 생리적 매개 변수에 의한 실험에 영향을 미칠 수 있습니다 고통스러운 방광 확장의 오염을 방지할 수 있습니다. 동맥과 정맥 catheterization는 반복 혈액 샘플을 구하기 다양한 생리 매개 변수를 모니터링하는 데 유용합니다. 프레임 기반 stereotaxic 신경 외과 및 뇌 이미징과 관련된 실험을 수행할 때 대퇴 혈관의 Catheterization 액세스의 용이성을위한 목 혈관의 catheterization 것이 바람직합니다. 생존 연구에서 혈관 catheterization을 수행하면, 엄격한 무균 기법 감염 6 피하기 위해 고용해야합니다. Transcardial 재관류가 가장 효과적인 고정 방법이며, 조직학 및 histochemistry 2,9에 대한 minipig 장기를 준비할 때 걸출한 결과를 산출. 일반적으로 돼지의 마취, 수술과 실험 기법에 대한 자세한 내용은 우리가 2007 스윈들를 참조하십시오. premedication과 마취의 유도에 대한 보충 정보, 보조 환기, 진통제, 괴팅겐의 minipigs의 - 사전 및 수술에 관심이에서 인터넷을 통해 사용할 수 있습니다 <a href="http://www.minipigs.com">http://www.minipigs.com</a> 10. 돼지의 해부학에 대한 광범위한 정보를 우리는 니켈 외를 참조하십시오. 권. 11월 1일에서 5일까지.

과학에 국내 및 미니어처 돼지의 사용은 최근 몇 년 동안 크게 증가하고 있습니다. 삽관법, transurethral 방광 catheterization, 대퇴 동맥 및 정맥 catheterization뿐만 아니라 transcardial 재관류를 수행하는 방법을 시연함으로써, 우리는 더 이상 생명 의학 연구에 괴팅겐 minipigs의 가치를 높이는 것을 목표로하고 있습니다.

괴팅겐 Minipig의 기본 외과 기술 : 삽관법, 방광의 Catheterization, 대퇴 선박 Catheterization, 그리고 Transcardial 재관류

신경과학, 독성학, 당뇨병, 비만 및 실험 외과와 같은 분야의 연구에서 괴팅겐 미니피그(Göttingen minipig)의 등장은 ...을 반영합니다.

미니 돼지가 수술을 위해 전신 마취를 받을 때는 기도 개방성을 유지하고 보조 환기를 가능하게 하며 흡인물로부터 기도를 보호하기 위해 반드시 기관 내 삽관을 시행해야 합니다. 미니 돼지는 다양한 자세에서 삽관이 가능하지만, 보조 환기 방법을 제외하면 기도의 모습이 인간과 유사하게 나타나므로 인간 삽관을 정기적으로 수행하는 사람에게는 동물을 똑바로 눕힌 자세가 더 수월한 경향이 있습니다. 기관 내 삽관에 필요한 장비는 입을 벌리기 위한 슬링, 뭉툭한 팁이 달린 저압 흡인기, 길이가 17~25 cm인 직선형 블레이드가 장착된 수의용 후두경, 공기가 충전된 스타일렛 주사기, 청진기 및 접착 테이프입니다.성체 거세돈 및 미니 돼기용입니다. 5~7 mm 크기의 기관내 튜브가 적절합니다. 본 영상에서는 5.5 mm 튜브가 사용되었습니다.미니 돼지를 등으로 눕히고 적절하게 지지합니다. 후두 통로가 직선으로 유지되도록 혀를 약간 밖으로 당기고 조수가 턱을 벌린 상태로 유지하게 합니다. 머리를 과하게 회전시키거나 과도하게 신전시키면 기도가 폐쇄되어 후두 개구부를 확인하기가 더 어려워질 수 있으므로 주의하십시오.후두경을 사용하여 혀를 누르고, 흡입기의 팁을 사용하여 후두개물을 연구개로부터 밀어냅니다. 그런 다음 후두경의 팁으로 후두개물을 혀 뿌리 쪽으로 위로 밀어 올려 후두 입구를 노출시킵니다. 윤상연골이 열리며 성대가 보이면, 기관내관을 약간 회전시키면서 조심스럽게 기관 내로 삽입합니다.호기 중에 튜브 커프를 제조사의 사양에 따라 팽창시킵니다. 기도의 부종과 부종을 유발할 수 있는 과도한 팽창을 피하도록 주의해야 하며, 돼지는 우측 전엽 폐를 환기시키는 기관지가 있습니다. 따라서 튜브를 기관 분기점 위에 배치하는 것이 중요합니다.이는 적절한 크기의 튜브를 사용하고, 접착 테이프를 이용해 튜브의 근위단을 코 높이에서 고정함으로써 용이해집니다. 미니 돼지의 기관 삽관이 적절히 이루어지면, 튜브를 통해 공기가 자유롭게 통과하는 것이 느껴져야 하며, 흉부 청진 시 흉강의 좌우 양측 모두에서 호흡음이 들려야 합니다. 모니터링 시스템이 연결된 인공호흡기를 미니 돼지에게 연결하면, 생리학적 호기 이산화탄소 수치가 측정되어야 하며, 인공호흡기 설정에 따른 호흡 패턴을 따르는 이산화탄소 곡선을 관찰할 수 있습니다.미니 피그의 기관 내 삽관은 후두 통로가 좁고 성대 점막이 쉽게 손상될 수 있어 까다로울 수 있습니다. 너무 큰 튜브를 사용하거나 과도한 힘을 가하게 될 경우, Xylocaine 스프레이나 근이완제를 사용하여 튜브 삽입을 원활하게 할 수 있습니다. 다만, 신경근 차단제의 사용은 해당 절차에 충분히 숙련된 인원에 의해서만 수행되어야 합니다.방광 카테터 삽입은 소변 생성량을 모니터링하는 방법으로 사용될 수 있으며, 이는 장시간의 수술 과정 동안 수분 공급 상태뿐만 아니라 신장 및 심혈관 기능에 관한 유용한 정보를 제공할 수 있습니다. 요도를 통한 방광 카테터 삽입은 암컷 돼지에서 쉽게 수행됩니다. 성체 미니피그 수컷의 경우 이 절차가 매우 어렵거나 불가능할 수 있으나, 외요도의 곡률과 크기를 고려할 때 French size 8 또는 10의 Foley 카테터가 적절합니다.스타이렛(stylet)이 포함된 카테터를 사용하는 것이 바람직합니다. 필요한 장비로는 질경(speculum), 둔단 포셉(blunt tip forceps), 식염수 윤활제가 담긴 주사기, 그리고 폐쇄형 소변 배액백이 있습니다. 카테터 삽입 시 외요도구를 가장 잘 관찰하기 위해, 미니돼지를 등 쪽으로 눕히고 요추 부위에 지지대를 받쳐 줍니다.보조자가 뒷다리를 머리 쪽으로 당기는 동안, 암컷의 외요도구는 질 바닥에서 자궁경부까지 거리의 약 3분의 1에서 2분의 1 지점에 위치해 있습니다. 하지만 동물이 등을 대고 누운 자세이므로 요도구의 위치가 반전되어 보일 것입니다. 카테터는 뭉툭한 팁 포셉으로 조절하여, 카테터의 팁이 포셉의 연장선상에 오도록 합니다.카테터를 요도구에 조심스럽게 삽입하십시오. 카테터 삽입 시 과도한 힘을 가하면 요도에 쉽게 외상이 생길 수 있으나, 카테터가 외요도괄약근을 통과하기 전까지는 처음에는 약간의 저항이 느껴질 수 있습니다. 이러한 문제가 지속된다면, 이는 동물이 충분히 진정되지 않았음을 나타낼 수 있습니다.해결 방법은 잠시 기다려 마취제가 효과를 나타내도록 하는 것입니다. 카테터가 방광에 도달하면 스타일을 제거하며, 이때 소변이 흘러나오는 것을 확인할 수 있습니다. 제조사의 사양에 따라 식염수로 벌룬을 팽창시킨 후, 벌룬이 방광경부에 걸릴 때까지 카테터를 부드럽게 잡아당깁니다.폐쇄형 시스템 소변 배출백을 부착하고, 카테터가 우연히 이탈되지 않도록 꼬리 부분에 카테터를 테이프로 고정하십시오. 적절한 훈련과 경험을 통해 동물을 다룰 때, 요도를 통한 방광 카테터 삽입은 큰 어려움 없이 수행될 수 있습니다. 이 최소 침습적 절차는 정밀한 의료 기술 장비의 오염과 통증을 유발하는 방광 확장을 방지할 수 있으며, 이는 미주신경 긴장도 증가 및 생리학적 파라미터의 변화로 인해 동물에게 해를 끼치고 실험에 영향을 줄 수 있습니다.동맥 및 정맥 카테터 삽입술은 반복적인 혈액 샘플 채취와 다양한 생리학적 파라미터를 모니터링하는 데 유용합니다. 생존 연구에서 혈관 카테터 삽입을 수행할 때는 감염을 방지하기 위해 엄격한 무균 기술을 적용해야 합니다. 필요한 장비로는 메스, 뭉툭한 팁, 수술용 가위, 조직 포셉, 소형 뭉툭한 팁, 수술용 포셉, 소형 자가 유지 조직 견인기, 니들 홀더, 수술용 스왑, 바늘이 달린 봉합사와 카테터의 개방성을 유지하기 위한 세척액인 헤파린 식염수가 포함됩니다.18 gauge IV 캐뉼라 2개, 인트로듀서와 셀딩거 G-와이어가 포함된 4 French bright tip 쉬스 2개를 준비합니다. 마취 깊이는 지간 통증 반사를 통해 평가합니다. 미니 돼지를 배와이하게 눕히고 뒷다리를 외측으로 견인하여 대퇴동맥과 대퇴정맥에 접근합니다.박근(gracilis muscle)과 봉지근(sartorius muscle) 사이의 피부 주름에서 내측 복제정맥 동맥(medial saphenous artery) 표층의 박동이 사라지는 지점을 확인하십시오. 이 지점의 두측(cranial) 방향으로 종방향의 표층 피부 절개를 실시하여, 내측 복제정맥 혈관을 실수로 손상시키는 것을 방지하십시오. 뭉툭한 끝의 가위(blunt tip scissors)를 사용하여 하부의 피하 조직을 박리하십시오.봉제근(sartorius)과 박근(gracilis)의 근막 분할은 내측 복제정맥 혈관의 관통 부위보다 두측(cranial)에서 이루어집니다. 먼저 작은 뭉툭한 팁의 외과용 포셉을 사용하고, 이어서 손가락을 이용하여 두 근육군을 분리하며, 이때 대퇴신경과 혈관이 손상되지 않도록 주의하면서 소형 자가 유지 조직 견인기로 고정하고 동맥을 약 1~2 cm 길이로 분리합니다. 둔성 박리를 통해 베벨 모양의 ven flon 바늘을 회전시켜 루멘(lumen)이 위를 향하게 합니다.바늘이 혈관의 곡선을 더 쉽게 따라갈 수 있도록 약간 구부립니다. 바늘이 여전히 앞뒤로 움직일 수 있는지 확인하는 것을 잊지 마십시오. 동맥 천자를 수행합니다.바늘을 후퇴시키고 셀딩거 가이드 와이어를 벤톤 튜브를 통해 삽입합니다. G 와이어가 잘 고정되도록 동맥에 가볍게 압력을 가하면서 벤플론 튜브를 제거합니다. 인트로듀서가 포함된 시스(sheath)를 셀터 와이어 위로 삽입하여 원하는 위치까지 전진시킨 후, 인트로듀서와 세이잉 와이어를 제거합니다.대퇴정맥은 동맥의 바로 아래쪽 및 내측에 위치합니다. 둔성 박리를 통해 정맥을 분리한 후, 앞서 동맥에 적용했던 것과 동일한 방식으로 정맥에 캐뉼라를 삽입합니다. 동맥과 정맥 모두 카테터가 정확하게 삽입되었는지 확인하려면, 두 시스(sheath)에서 혈액을 채취하여 샘플의 색상을 비교하십시오.혈액 샘플을 채취할 때마다 이후에 카테터를 헤파린 처리된 식염수로 세척해야 함을 기억하십시오. 카테터의 개통성을 유지하기 위해 카테터를 고정하고 피부를 봉합합니다. 몇 개의 봉합사를 사용하여, 천자 전 혈관을 고정하기 위해 동맥과 정맥 주변에 베셀 루프(vessel loop)를 배치할 수 있습니다.이러한 장점에도 불구하고, 혈관의 과도한 박리가 필요하고 외측 및 심부 분지(lateral and deep branches)를 손상시킬 위험이 증가하기 때문에 일반적으로 이 추가 단계는 피합니다. 본 영상에서는 대퇴 혈관에 카테터를 삽입하는 방법을 보여줍니다. 접근성이 용이하므로 경부 혈관보다 대퇴 혈관에 카테터를 삽입하는 것이 더 바람직합니다.프레임 기반의 정위적 신경외과 수술 및 뇌 영상 촬영을 포함하는 실험을 수행할 때, 경심장 관류법은 가장 효과적인 고정 방법이며 최상의 결과를 제공합니다. 조직학 및 조직 화학 분석을 위해 미니 돼지의 장기를 준비할 때, 해당 절차에는 다음과 같은 장비가 필요합니다. 관류 시스템, 관련 관류액, IV 캐뉼라, 주사기, 펜토바르비탈, 메스, 둔형 팁, 외과용 가위, 골절단 가위, 그리고 최소 하나는 팁이 굽은 형태인 대형 자가 유지 포셉 2개가 필요합니다.자가 고정식 흉골 견인기가 반드시 필요한 것은 아니지만, 이를 사용하면 시술 과정이 상당히 수월해집니다. 심장 관류는 고성능 흄 추출 시스템과 다량의 체액 및 혈액을 수집하여 추후 안전하게 폐기할 수 있는 시설을 갖춘 환기가 잘 되는 방에서 수행해야 합니다. 펜토바비탈(Penta Barbital)을 치사량으로 투여한 후, 지간 통증 반사를 확인하십시오.심장과 대동맥에 가장 효과적으로 접근하려면 정중 흉골 절개술을 시행합니다. 흉골의 흉골병에서 검상돌기까지 이어지는 깊은 종적 피부 절개를 만듭니다. 검상돌기 바로 아래의 횡격막에 작은 절개를 넣어 흉강에 접근합니다.흉강에 골절단기를 삽입하고 흉골을 이분합니다. 이때 심장이 흉골 내측 일부에 유착되어 있을 수 있으므로 주의하여 수행해야 합니다. 흉골을 분리한 후, 자가 고정식 흉골 견인기를 배치하여 흉강을 개방합니다. 심낭이 여전히 온전하다면 심장 정점에서 심낭에 작은 절개를 가한 후, 손가락을 이용해 심낭낭을 엽니다. 좌심실, 우심방 및 대동맥을 확인합니다.상대정맥과 함께 심장 정점 부근의 표면을 작게 절개하고, 뭉툭한 팁의 도구로 심근을 천자하여 좌심실에 접근합니다. 관류 캐뉼라를 좌심실 내부에 삽입하고 캐뉼라 팁을 대동맥 방향으로 전상방으로 이동시킵니다. 대동맥 내에서 두 번째와 세 번째 손가락 사이에서 캐뉼라가 느껴지면, 캐뉼라를 고정 클램프로 고정합니다.곡선 핀셋을 사용하여 오른쪽 심방을 절개하고 관류 캐뉼라를 통해 고정액을 주입하기 시작합니다. 대동맥에서 강한 박동이 느껴지며, 미니피그 혈관으로의 관류가 계속됨에 따라 절개된 오른쪽 심방을 통해 혈액이 쏟아져 나올 것입니다. 파라포름알데히드를 이용한 전신 관류 시, 신경과 근육의 알데히드 교차 결합으로 인해 사지의 과신전과 표층 근육의 경련이 유도되는 것을 확인하십시오.압축 공기로 구동되는 관류 시스템을 사용할 때는, 공기가 혈관계로 유입되는 것을 방지하기 위해 캐니스트가 비기 전에 캐뉼라를 제거하거나 투명 실리콘 튜브를 클램프로 잠가야 합니다. 본 영상에서는 중력 대신 압축 공기로 구동되는 관류 시스템을 사용합니다. 압축 공기를 이용하는 시스템의 장점은 과정 동안 가해지는 정수압이 일정하게 유지되어, 결과적으로 최적의 장기 관류를 제공한다는 점입니다.

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Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

혈액 - 문의 autologous 세포 및 시험 biocompatibility과 biomaterials 것은 시딩의 티타늄에 대한 방법을 설명합니다. 이 방법은 돼지의 venae cavae에 주입 수술의 분 이내에 씨앗 내피 전구 세포와 티타늄 튜브를 사용합니다. 이 기술은 다른 많은 implantable 생명 의학 장치에 적용할 수 있습니다.

Autologous 내피 전구 세포 - 심는 기술 및 대형 동물 모델에서 순환기 장치에 대한 Biocompatibility 테스트

이 동영상은 초음파 유도를 사용하여 마취된 돼지에서 혈관 접근을 얻는 절차를 보여줍니다. 부위를 소독하고 국소 마취를 실시한 후 초음파 프로브를 사용하여 혈관을 시각화합니다. 초음파 유도 하에, 바늘을 동맥 내강에 삽입하고, 가이드와이어를 삽입하고, 덮개를 삽입하고 항응고제로 씻어냅니다. 마지막으로, 압력 라인이 연결되고 덮개는 안정적인 혈관 접근을 보장하기 위해 봉합사로 고정됩니다.

마취된 돼지의 초음파 유도 혈관 접근 절차

마취 된 돼지의 폐 세척액으로 반복 인간 급성 호흡 곤란 증후군 (ARDS)의 주요면과 유사한 폐 손상을 유도한다. 이를 위해 폐 반복적으로 37 ℃에서 0.9 % 식염수를 세척한다. 프로토콜의 목표는 급성 호흡 곤란 증후군의 연구를위한 가스 교환 및 혈역학의 재현 완화이다.

급성 호흡 곤란 증후군의 모델로서 돼지의 세척에 의한 계면 활성제 고갈 (ARDS)

마취에 의해 유발 된 발달 신경 독성 (AIDN) 연구는 인간에게 광범위하게 적용 할 수없는 설치류에 초점을 맞 춥니 다. 비인간 영장류 모델은 더 적절하지만 비용이 많이 들지 않으며 실험에 사용하기가 어렵습니다. 대조적으로, 돼지는 마취 성 신경 독성의 연구에 이상적이며 임상 적으로 관련이 있고 실용적인 동물 모델입니다.

마취 유발 신경 독성 (AIDN) 연구를위한 돼지 모델의 사용 : 번역 신경 과학적 접근법

선물이 아즈를 유도 하 여 돼지 모델에서 오른쪽 심 실 부전을 만드는 프로토콜. 왼쪽 및 오른쪽 심 실 심장 출력 흐름을 사용 하 여 프로브 대동맥 및 폐 동맥에서 혈압 측정 뿐만 아니라 대동맥과 폐 동맥의 침입 모니터링 설명 합니다.

대동맥 및 폐 동맥 Hemodynamics 아즈의 큰 동물 모델에서의 침략 Hemodynamic 감시

프로토콜은 방광, 전립선, 성기관, 뼈, 근육 및 발 피부를 포함한 마우스 하반신의 시상 수혈에 대해 설명된다.

마우스에서 하복부 장기 및 뒷다리의 시투 폐쇄 회로 관류 에 설립

사구체 여과율(GFR)은 신장 기능을 평가하는 데 이상적인 지표입니다. 그러나 연속 혈액 및 소변 분석과 함께 이눌린 주사를 사용하는 표준 측정 방법은 비실용적입니다. 이 기사에서는 새끼 돼지에서 GFR을 경피로 측정하는 실용적인 방법을 설명합니다.

기계적으로 환기된 새끼 돼지의 사구체 여과율의 경피 측정

이 연구는 바이아트리방 기술을 활용하여 Bama 미니어처 돼지에서 전임상 정소성 심장 이식 모델을 제안합니다. 이 모델은 이식 면역학, 약물 평가 및 수술 기술 최적화에 적용할 수 있으며 임상 심장 이식 응용 분야를 지원합니다.

Biatrial 기술을 사용한 Bama 미니어처 돼지의 정형외과성 심장 이식의 전임상 모델

본 연구는 정상 Bama 돼지에서 경대동맥 접근법을 이용한 표적 조직 절단을 이용한 판막하 대동맥판막 구조 중재의 외과적 방법을 제시합니다.

정상 바마 돼지를 대상으로 한 경대동맥 접근법을 통한 판막하 구조 중재를 위한 외과적 방법

출산 후 monochorionic (MC) 트윈 placentas의 혈관 매핑은 쌍둥이 '순환 사이의 혈관 연결에 대한 자세한 시연을위한 수단을 제공합니다. 이러한 연결의 불균형은 트윈 - 투 - 쌍둥이 수혈 증후군을 포함한 MC의 쌍동이의 합병증의 발전에 중추적인 역할을 생각합니다.

Monochorionic 트윈 Placentas의 혈관 매핑을위한 가이드 와이어 원호 Catheterization과 컬러 염료 사출

학습하세요 괴팅겐 미니피그의 기본 외과 기술을 통해 삽관법, 방광 카테터 삽입법, 대퇴 혈관 카테터 삽입법 및 경심장 재관류 기술을 안전하게 수행하는 방법을. 이 기술들은 생의학 연구에서 미니피그의 활용 가치를 높입니다.

괴팅겐 Minipig의 기본 외과 기술 : 삽관법, 방광의 Catheterization, 대퇴 선박 Catheterization, 그리고 Transcardial 재관류

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