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DOI: 10.3791/54017-v
Caitlin O'Rourke*1, Georgia Shelton*1,2, Joshua D. Hutcheson3,4, Megan F. Burke2, Trejeeve Martyn1, Timothy E. Thayer2, Hannah R. Shakartzi1, Mary D. Buswell1, Robert E. Tainsh1, Binglan Yu1,4, Aranya Bagchi1,4, David K. Rhee2,4, Connie Wu1,2,4, Matthias Derwall5, Emmanuel S. Buys1,4, Paul B. Yu3,4, Kenneth D. Bloch1,2,4, Elena Aikawa3,4, Donald B. Bloch1,5,6, Rajeev Malhotra2,4
1Anesthesia Center for Critical Care Research of the Department of Anesthesia, Critical Care, and Pain Medicine,Massachusetts General Hospital, 2Cardiovascular Research Center and Cardiology Division of the Department of Medicine,Massachusetts General Hospital, 3Cardiovascular Division,Brigham and Women's Hospital, 4Harvard Medical School, 5Department of Anesthesiology,Uniklinik RWTH Aachen, RWTH Aachen University, 6Center for Immunology and Inflammatory Diseases and the Division of Rheumatology, Allergy, and Immunology of the Department of Medicine,Massachusetts General Hospital
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This protocol outlines methods for visualizing and quantifying vascular calcification in cultured primary murine aortic smooth muscle cells and animal aortas. It aims to enhance understanding of the molecular mechanisms underlying vascular disease.
혈관 석회화는 인간의 심혈관 질환을 예측하는 중요한 인자이자 기여자입니다. 이 프로토콜은 근적외선 형광 이미징을 사용하여 배양된 1차 혈관 평활근 세포의 석회화를 유도하고 동물 대동맥의 석회화 및 대식세포 부담을 정량화하는 방법을 설명합니다.
이 절차의 전반적인 목표는 체외에서 대동맥 혈관 석회화를 시각화하고 배양된 1차 쥐 대동맥 평활근 세포를 사용하여 체내 혈관 석회화를 모델링하는 것입니다. 이 방법은 혈관 석회화의 분자 메커니즘을 연구하기 위한 체외 모델을 제공하고 생체 내에서 혈관 석회화 및 대식세포 염증을 평가할 수 있도록 함으로써 혈관 질환 생물학 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 가장 큰 장점은 질병의 초기 상태에서도 죽상경화성 병변의 칼슘 침전물과 함께 대식세포 활성을 민감하게 정량화하고 공동 국소화할 수 있다는 것입니다.
Caitlin과 저 외에 저희 연구실의 기술자인 Robert Tainsh가 이 절차를 시연할 것입니다. 이 절차를 시작하려면 알코올 면봉으로 꼬리를 소독하고 꼬리 정맥을 측면으로 찾습니다. 다음으로, 30게이지 바늘이 저항 없이 꼬리 속으로 들어갈 때 주사기에 약간의 전진 압력을 가합니다.
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