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대동맥 석회화와 염증의 혈관 평활근 세포 및 이미지의 석회화
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JoVE Journal Medicine
Calcification of Vascular Smooth Muscle Cells and Imaging of Aortic Calcification and Inflammation

대동맥 석회화와 염증의 혈관 평활근 세포 및 이미지의 석회화

Full Text
20,508 Views
08:43 min
May 31, 2016

DOI: 10.3791/54017-v

Caitlin O'Rourke*1, Georgia Shelton*1,2, Joshua D. Hutcheson3,4, Megan F. Burke2, Trejeeve Martyn1, Timothy E. Thayer2, Hannah R. Shakartzi1, Mary D. Buswell1, Robert E. Tainsh1, Binglan Yu1,4, Aranya Bagchi1,4, David K. Rhee2,4, Connie Wu1,2,4, Matthias Derwall5, Emmanuel S. Buys1,4, Paul B. Yu3,4, Kenneth D. Bloch1,2,4, Elena Aikawa3,4, Donald B. Bloch1,5,6, Rajeev Malhotra2,4

1Anesthesia Center for Critical Care Research of the Department of Anesthesia, Critical Care, and Pain Medicine,Massachusetts General Hospital, 2Cardiovascular Research Center and Cardiology Division of the Department of Medicine,Massachusetts General Hospital, 3Cardiovascular Division,Brigham and Women's Hospital, 4Harvard Medical School, 5Department of Anesthesiology,Uniklinik RWTH Aachen, RWTH Aachen University, 6Center for Immunology and Inflammatory Diseases and the Division of Rheumatology, Allergy, and Immunology of the Department of Medicine,Massachusetts General Hospital

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This protocol outlines methods for visualizing and quantifying vascular calcification in cultured primary murine aortic smooth muscle cells and animal aortas. It aims to enhance understanding of the molecular mechanisms underlying vascular disease.

Key Study Components

Area of Science

  • Vascular biology
  • Cardiovascular disease
  • Cellular imaging

Background

  • Vascular calcification is a significant factor in cardiovascular disease.
  • Understanding calcification mechanisms can aid in disease management.
  • Macrophage activity is linked to vascular inflammation and calcification.
  • In vitro models are essential for studying these processes.

Purpose of Study

  • To visualize aortic vascular calcification ex vivo.
  • To model in vivo vascular calcification using cultured cells.
  • To assess macrophage inflammation in relation to calcification.

Methods Used

  • Induction of calcification in cultured primary vascular smooth muscle cells.
  • Quantification of calcification in animal aortas.
  • Near-infrared fluorescence imaging for sensitive detection.
  • Co-localization of macrophage activity with calcium deposits.

Main Results

  • Successful visualization of vascular calcification in cultured cells.
  • Quantitative assessment of calcification and macrophage burden.
  • Demonstration of early-stage disease processes.
  • Insights into the relationship between inflammation and calcification.

Conclusions

  • This method provides a valuable tool for studying vascular disease.
  • It allows for the exploration of molecular mechanisms of calcification.
  • Future studies can build on these findings to develop therapeutic strategies.

Frequently Asked Questions

What is vascular calcification?
Vascular calcification is the accumulation of calcium deposits in the vascular system, often associated with cardiovascular disease.
How does this method help in studying vascular disease?
It provides an in vitro model to investigate the mechanisms of vascular calcification and assess inflammation.
What imaging technique is used in this study?
Near-infrared fluorescence imaging is utilized for sensitive quantification of calcification and macrophage activity.
Why is macrophage activity important in this context?
Macrophages play a crucial role in inflammation and can influence the progression of vascular calcification.
What are the implications of this research?
Understanding vascular calcification can lead to better therapeutic strategies for cardiovascular diseases.

혈관 석회화는 인간의 심혈관 질환을 예측하는 중요한 인자이자 기여자입니다. 이 프로토콜은 근적외선 형광 이미징을 사용하여 배양된 1차 혈관 평활근 세포의 석회화를 유도하고 동물 대동맥의 석회화 및 대식세포 부담을 정량화하는 방법을 설명합니다.

이 절차의 전반적인 목표는 체외에서 대동맥 혈관 석회화를 시각화하고 배양된 1차 쥐 대동맥 평활근 세포를 사용하여 체내 혈관 석회화를 모델링하는 것입니다. 이 방법은 혈관 석회화의 분자 메커니즘을 연구하기 위한 체외 모델을 제공하고 생체 내에서 혈관 석회화 및 대식세포 염증을 평가할 수 있도록 함으로써 혈관 질환 생물학 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 가장 큰 장점은 질병의 초기 상태에서도 죽상경화성 병변의 칼슘 침전물과 함께 대식세포 활성을 민감하게 정량화하고 공동 국소화할 수 있다는 것입니다.

Caitlin과 저 외에 저희 연구실의 기술자인 Robert Tainsh가 이 절차를 시연할 것입니다. 이 절차를 시작하려면 알코올 면봉으로 꼬리를 소독하고 꼬리 정맥을 측면으로 찾습니다. 다음으로, 30게이지 바늘이 저항 없이 꼬리 속으로 들어갈 때 주사기에 약간의 전진 압력을 가합니다.

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의학 111 호 혈관 석회화 평활근 세포 기질 단백질 GLA 죽상 경화증 대 식세포 근 적외 형광 영상 혈관 염증

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