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면역학 및 감염병학
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Quantificação de células T antígeno-específicas humanas proliferating de CD4+ usando o éster do Succinimidyl do carboxyfluorescein
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JoVE 신문 면역학 및 감염병학
Quantification of Proliferating Human Antigen-specific CD4+ T Cells using Carboxyfluorescein Succinimidyl Ester

Quantificação de células T antígeno-específicas humanas proliferating de CD4+ usando o éster do Succinimidyl do carboxyfluorescein

DOI:
10.3791/59545-v

•

07:00 min

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June 04, 2019

•

, , ,
1Immunology and Diabetes Unit,St. Vincent’s Institute of Medical Research, 2Department of Medicine,University of Melbourne, St. Vincent’s Hospital

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:41Whole Blood Peripheral Blood Mononuclear Cell (PBMC) Preparation
  • 01:21CD4+ T Cell Preparation
  • 03:16CD4+ T Cell Labeling
  • 04:11Flow Cytometric Analysis
  • 05:31Results: Representative CFSE-labeled, Activated CD4+ T Cell Proliferation
  • 06:21Conclusion

Summary

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É apresentado aqui um protocolo para medir proliferating pilhas de T CD4+ em resposta às proteínas antigénicas ou aos peptídeos usando a diluição da tintura. Este ensaio é particular sensível às pilhas de T antígeno-específicas raras e pode ser modificada para facilitar a clonagem de pilhas antígeno-específicas.

Tags

CD4+ T CellsProliferationCFSEAntigen-specificQuantificationAutoimmune ConditionsType 1 DiabetesPBMCDensity Gradient CentrifugationCell CultureFlow Cytometry

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