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생화학
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대사 표지 및 질량 분광법으로 노화 및 비분할 배양된 세포에서의 단백질 회전율 측정
JoVE 신문
생화학
This content is Free Access.
JoVE 신문
생화학
Measurement of Protein Turnover Rates in Senescent and Non-Dividing Cultured Cells with Metabolic Labeling and Mass Spectrometry
Please note that all translations are automatically generated.
Click here for the English version.
대사 표지 및 질량 분광법으로 노화 및 비분할 배양된 세포에서의 단백질 회전율 측정
DOI:
10.3791/63835-v
•
08:52 min
•
April 06, 2022
•
Matthew Payea
,
Myriam Gorospe
,
Nathan Basisty
1
Laboratory of Genetics and Genomics, National Institute on Aging Intramural Research Program
,
National Institutes of Health
,
2
Translational Gerontology Branch, National Institute on Aging Intramural Research Program
,
National Institutes of Health
Chapters
00:05
Introduction
00:58
Labeling of Cells Pulsed SILAC and Harvest of Lysates
02:29
In-Solution Trypsin Digestion and Sample Clean-Up with Solid-Phase Extraction (SPE)
04:15
Data-Dependent Acquisition Mass Spectrometry Analysis and Calculation of Protein Half-Lives
06:31
Results: Measurement of Protein Turnover Rates in Senescent and Non-Dividing Cultured Cells Using pSILAC Mass Spectrometry
08:13
Conclusion
Summary
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Türkçe (Turkish)
자동 번역
이 프로토콜은 펄스 SILAC를 사용한 노화 및 비분열 세포의 대사 표지, 비표적 질량 분석법 분석 및 단백질 반감기의 간소화된 계산을 위한 워크플로우를 설명합니다.
Tags
Protein Turnover
Senescent Cells
Non-dividing Cells
Metabolic Labeling
Mass Spectrometry
SILAC
Protein Homeostasis
Cellular Stress
Aging
Neurodegenerative Disease
LC-MS
Trypsin
Urea
Ammonium Bicarbonate
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