Methodenartikel

september 2013 - Deze maand in JoVE

2.2K weergaven

⸱

3 september 2013

 , 

In dit artikel

Samenvatting

Hier is een blik op wat komen gaat in de september 2013-uitgave van JoVE: The Journal of Visualized Experiments.

Palatogenees (vorming van het gehemelte) omvat complexe ontwikkelingsprocessen die sterk gereguleerd en geconserveerd zijn onder gewervelde dieren. Daarom gebruiken wetenschappers laboratoriummodellen zoals de zebravis om gespleten gehemelte en gerelateerde ontwikkelingsmisvormingen te bestuderen. Gfrerer et al. onderzoeken zebravis-embryo's met behulp van time-lapse confocale microscopie, waarmee ze de migratie van craniale neurale crestcellen (CNCC's) van de dorsale neurale buis kunnen observeren om craniofaciale structuren te vormen. Deze methode maakt ook live-beeldvorming mogelijk van abnormale craniofaciale ontwikkeling bij zebravissen, die wordt gebruikt om aandoeningen zoals gespleten gehemelte bij mensen te modelleren.

In het laboratorium worden bacteriën, gist en vele andere celtypen vaak gekweekt in schudkolven. Deze klassieke techniek heeft echter veel nadelen die optimale groei kunnen voorkomen, zoals schommelingen in pH, zuurstofconcentratie, voedingsstoffen en temperatuur. In JoVE Bioengineering demonstreren Obom et al. een benchtop-bioreactor compleet met een pH-sonde en zuurstofsonde, reagentievoedingsfles om media aan te vullen, nauwkeurige temperatuurregeling, een gasverspreider en een roerwerk dat de cultuur roert. Dit systeem maakt optimale kweekomstandigheden mogelijk voor de grootschalige groei van recombinante expressiesystemen.

Ook in JoVE Bioengineering hebben we een methode voor live celbeeldvorming in een flow-based celadhesieverhoging. Maar in tegenstelling tot standaardprotocollen die enkele camerasystemen gebruiken, is onze aanbevolen methode een dubbel camera-emissiesplitsysteem dat realtime beelden in twee fluorescentiekanalen tegelijk vastlegt. Carlson et al. gebruiken een parallel plate flowkamer-adhesieverhoging om dit dubbel camerasysteem te demonstreren, dat ze gebruiken om adhesie, rolling en andere celgedragingen te bestuderen.

JoVE Chemistry presenteert een niet zo gebruikelijke diermodel: de oostelijke rode vleermuis, die wijdverbreid is in de Verenigde Staten; echter, in de afgelopen jaren heeft een schimmelziekte genaamd witneussyndroom (WNS) miljoenen van deze vleermuizen gedood. WNS is een grote bedreiging voor de landbouwindustrie, die afhankelijk is van vleermuizen als een vorm van natuurlijke plaagbestrijding. Net als andere zoogdieren hebben vleermuizen talgklieren in hun huid die talg afscheiden, een olieachtig materiaal dat helpt beschermen tegen infecties. Pannkuk et al. demonstreren een methode voor het isoleren van het talg uit het haar en de huid van de vleermuis, en analyseren vervolgens de lipidensamenstelling van het talg met behulp van dunne-laagchromatografie (TLC) gecombineerd met matrix-ondersteunde laserdesorptie/ionisatie tijd-van-vlucht (MALTI-TOF) massaspectrometrie. Het lipidenprofiel van het talg kan immuunprocessen beïnvloeden en kan ook dienen als ziektemarkers; daarom zal deze methode vitale informatie opleveren voor ziektebehandeling en -preventie bij de oostelijke rode vleermuis en andere zoogdieren.

Je hebt zojuist een kijkje genomen in een paar hoogtepunten uit de september 2013-uitgave van JoVE. Bezoek de website om de volledige artikelen te bekijken, plus nog veel meer, in JoVE: The Journal of Visualized Experiments.

Herprints en machtigingen

Meer artikelen verkennen

Palate FormationPalatogenesisZebrafishCleft PalateCranial Neural Crest CellsTime-lapse Confocal MicroscopyBioreactorRecombinant Expression SystemsLive Cell ImagingCell Adhesion AssayDual Camera SystemEastern Red BatWhite Nose SyndromeNatural Pest ControlSebaceous GlandsSebum IsolationLipid Composition Analysis