Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Onderzoeksartikel

Therapeutische werkzaamheid van 308-nm excimerlaser gecombineerd met matrien in vitiligo door modulatie van serumimmunoglobulines en inflammatoire cytokines

368 weergaven

⸱

DOI:

10.3791/70371

⸱

10 maart 2026

 ,  ,  ,  , 
1Department of Dermatology, Xingtai People's Hospital

In dit artikel

Samenvatting

Het gecombineerde gebruik van een 308-nm excimerlaser en orale matrien verbeterde de repigmentatie in vitiligo aanzienlijk door melanocytregeneratie te bevorderen en het immuunevenwicht te herstellen. Deze dual-modaliteit therapie verminderde pro-inflammatoire cytokines, normaliseerde immunoglobulinen, verhoogde IL-10 en bereikte superieure klinische werkzaamheid met uitstekende veiligheid en patiënttolerantie.

Samenvatting

Vitiligo is een chronische auto-immuun depigmentatieve aandoening die wordt gekenmerkt door het verlies van functionele melanocyten en afwijkende immuunactivatie. Ondanks vooruitgang in fototherapie blijven de klinische responsen inconsistent, grotendeels door aanhoudende ontstekingsactiviteit en onvoldoende immuunregulatie. Deze studie onderzocht de therapeutische effectiviteit en immunologische mechanismen van het combineren van 308-nm excimer laserfototherapie met orale matrien, een natuurlijk alkaloïde met ontstekingsremmende en immunoregulerende eigenschappen. In totaal werden 232 patiënten met niet-segmentale vitiligo prospectief toegewezen aan excimerlasermonotherapie of combinatietherapie gedurende 12 weken. De klinische verbetering werd geëvalueerd met behulp van de Vitiligo Area Scoring Index (VASI), en serumimmunoglobulines en cytokines werden geanalyseerd om systemische immuunmodulatie te beoordelen. Beide regimes veroorzaakten significante repigmentatie, maar de combinatietherapie leverde een duidelijkere VASI-reductie op (van 9,72 ± 3,24 bij de uitgangslijn tot 5,76 ± 2,18 na behandeling) dan alleen de excimerlaser (van 9,68 ± 3,37 naar 6,63 ± 2,34, p< 0,001). Het aandeel patiënten met uitstekende of goede repigmentatie was aanzienlijk hoger bij het gecombineerde regime (76,7%) vergeleken met monotherapie (58,7%). Parallel daalden de serum IgG-niveaus aanzienlijk (13,72 ± 2,64 g/L tot 11,85 ± 2,18 g/L, p < 0,001), terwijl de IgA-niveaus bescheiden stegen (2,07 ± 0,68 g/L tot 2,23 ± 0,61 g/L, p = 0,041). Pro-inflammatoire cytokines, waaronder IFN-γ en IL-17, waren significant verminderd (beide p < 0,001), terwijl ontstekingsremmende IL-10 steeg van 8,3 ± 3,2 naar 12,9 ± 3,5 pg/mL (p < 0,001). De verbetering van VASI correleerde omgekeerd met veranderingen in IFN-γ (r = –0,482, p < 0,05) en IL-17 (r = –0,451, p < 0,001), en positief met de IL-10 elevatie (r = 0,503, p < 0,001). Deze bevindingen tonen aan dat matrine de effectiviteit van excimerlasers verbetert door melanocytregeneratie te bevorderen en het immuunevenwicht te herstellen, waarmee een biomarker-gebaseerde dual-modaliteitsstrategie wordt gevestigd voor nauwkeurige en duurzame behandeling van vitiligo.

Inleiding

Vitiligo is een chronische, verworven depigmenterende huidaandoening die wordt gekenmerkt door selectieve vernietiging of disfunctie van epidermale melanocyten, wat leidt tot de ontwikkeling van goed gedefinieerde witte macules van variabele grootte en verspreiding. Het treft ongeveer 0,5%–2% van de wereldbevolking, zonder geslachts- of raciale voorkeur, en doet zich vaak voor vóór de leeftijd van 30 1,2 jaar. Hoewel de ziekte niet levensbedreigend is, legt het een aanzienlijke psychosociale en emotionele last met zich mee, die het zelfbeeld, het sociale functioneren en de kwaliteitvan leven aanzienlijk aantast. De pathogenese van vitiligo blijft multifactorieel en onvolledig opgehelderd, met genetische aanleg, oxidatieve stress, auto-immuunreacties en neurohumorale factoren4. Recent bewijs benadrukt vooral de cruciale rol van immuundysregulatie bij zowel het initiëren als het aanhouden van melanocytenvernietiging 5,6. In de epidermis herkennen autoreactieve CD8⁺ cytotoxische T-lymfocyten melanocytenantigenen zoals tyrosinase en gp100, waarbij perforine en granzyme B vrijkomen om apoptose7 te induceren. Tegelijkertijd versterken pro-inflammatoire cytokines, waaronder interferon-γ (IFN-γ), tumornecrosefactor-α (TNF-α), interleukine-1β (IL-1β), IL-6 en IL-17, de ontstekingscascade, belemmeren ze de overleving van melanocyten en remmen ze de migratie van pigmentcellen8. De disbalans tussen regulerende T-cellen (Tregs) en effector T-cellen draagt verder bij aan aanhoudende immuunactivatie en verlies van melanocyten9. Daarom zijn therapeutische strategieën die gericht zijn op zowel het bevorderen van melanocytregeneratie als het herstellen van immuunhomeostase van groot klinisch belang.

Naast lokale immuunafwijkingen wijst er steeds meer bewijs op dat vitiligo een systemische auto-immuunziekte is. Veranderde serumniveaus van immunoglobulines (IgG, IgA en IgM) zijn gedocumenteerd bij patiënten, wat een gegeneraliseerde B-celactivatie en abnormale humorale immuniteit weerspiegelt 10,11. Ontregelde immunoglobulineproductie kan de vorming van autoantistoffen tegen melanocytspecifieke antigenen bevorderen, wat weefselschade verergert. Bovendien vertoont het cytokinemilieu bij vitiligopatiënten vaak verhoogde IFN-γ, TNF-α, IL-6, IL-17 en IL-23, wat wijst op systemische immuunactivatie buiten de lesiele huid12,13. Deze immuunmediatoren fungeren niet alleen als pathogene factoren, maar correleren ook met ziekteactiviteit en therapeutische respons, waardoor ze potentiële biomarkers zijn voor behandelingsmonitoring14. Daarom kunnen interventies die het immuunevenwicht kunnen herstellen—door zowel cellulaire als humorale immuunresponsen te moduleren—superieure en duurzame klinische resultaten bieden. Ondanks de beschikbaarheid van lokale corticosteroïden, calcineurinremmers, systemische immunosuppressiva en fototherapie, blijft de werkzaamheid van de behandeling voor veel patiënten, vooral voor degenen met uitgebreide of refractaire ziekte15, onbevredigend. Daarom hebben combinatiebenaderingen die zich richten op meerdere pathofysiologische mechanismen de afgelopen jaren aan populariteit gewonnen.

Fototherapie is al lange tijd een hoeksteen in het beheer van vitiligo. Onder de verschillende modaliteiten is de 308-nm excimerlaser (EL) uitgegroeid tot een van de meest gerichte en effectieve opties voor gelokaliseerde vitiligo16,17. Het levert monochromatische UVB-straling bij 308 nm direct aan gedepigmenteerde laesies, waardoor melanocytproliferatie en migratie uit haarzakjes worden gestimuleerd, terwijl de blootstelling van omringend gezond weefsel18 wordt geminimaliseerd. In vergelijking met conventionele smalbandige UVB biedt de excimerlaser voordelen zoals een snelle inzet van repigmentatie, kortere cumulatieve belichtingstijd en een verbeterd veiligheidsprofielvan 19,20. Mechanistisch induceert laag-dosis 308-nm bestraling lokale immunomodulatie door de activiteit van de epidermale Langerhans-cel te verminderen, de Treg-infiltratie te verhogen en de melanogenese te verbeteren via upregulatie van tyrosinase en microfthalmie-geassocieerde transcriptiefactor (MITF)21. De reacties blijven echter variabel en veel patiënten slagen er niet in volledige repigmentatie te bereiken. Overmatige of langdurige bestraling kan paradoxaal genoeg de afgifte van inflammatoire cytokines veroorzaken—zoals IL-1β, IL-6 en TNF-α—en verdere melanocytletsel22,23. Dus hoewel excimerlaserbehandeling melanocytregeneratie effectief stimuleert, kan de werkzaamheid beperkt worden door gelijktijdige ontstekingsactivatie. Deze dualiteit benadrukt de noodzaak van aanvullende therapieën die ontstekingen kunnen verminderen en de immuuntolerantie tijdens fototherapie kunnen verbeteren.

Matrine, een natuurlijk quinolizidine-alkaloïde dat wordt geëxtraheerd uit Sophora flavescens (Ku Shen), heeft recentelijk veel aandacht gekregen als een immunomodulerend en ontstekingsremmend middel met een lage toxiciteitvan 24,25. Experimentele studies hebben aangetoond dat matrine de NF-κB- en JAK/STAT-signaalroutes kan onderdrukken, de productie van pro-inflammatoire cytokines (waaronder IFN-γ, TNF-α en IL-6) kan afzwakken, en de expressie van ontstekingsremmende mediatoren zoals IL-1026 kan bevorderen. Bij immuungerelateerde ziekten heeft matrine effectiviteit aangetoond in het moduleren van Th1/Th17-differentiatie, het verbeteren van de regulatiefunctie van T-cellen en het normaliseren van immunoglobulineprofielen27,28. Bovendien vertoont matrine antioxidante en anti-apoptotische effecten die melanocyten kunnen beschermen tegen door oxidatieve stress veroorzaakte schade29. Hoewel deze eigenschappen matrine aantrekkelijk maken voor auto-immuun huidaandoeningen, hebben weinig studies de rol ervan bij vitiligo onderzocht. De combinatie van matrine met fototherapie biedt een nieuwe therapeutische benadering: matrine kan de ontstekingsmicro-omgeving verzwakken, de melanocytenhomeostase stabiliseren en laser-geïnduceerde melanogenese versterken. Bovendien kan de systemische immunoregulatieve activiteit van de matriene de lokale effecten van de excimerlaser aanvullen, wat resulteert in synergetisch klinisch voordeel. Voor zover wij weten heeft geen enkele eerdere klinische studie het gecombineerde gebruik van 308-nm excimerlaser en matrine in vitiligo grondig onderzocht of de immunologische correlaties ervan geëvalueerd via serumbiomarkerprofilering.

Op basis van deze redenering hebben we de hypothese opgesteld dat de combinatie van 308-nm excimerlaser en matrien een superieure therapeutische effectiviteit zou opleveren in vergelijking met excimerlasermonotherapie, door tegelijkertijd melanocytenregeneratie te bevorderen en abnormale immuunactivatie te onderdrukken. Specifiek stelden we dat het toedienen van aanvullende matreine de klinische repigmentatiesnelheid zou verhogen, het serum-immunoglobulineniveau (IgG, IgA en IgM) zou reguleren richting fysiologische balans, en pro-inflammatoire cytokines zoals IFN-γ, TNF-α en IL-17 zou verminderen, terwijl de ontstekingsremmende cytokines toenemen. In deze studie evalueerden we systematisch klinische uitkomsten, immunologische parameters en hun correlaties bij patiënten met vitiligo die met deze combinatietherapie werden behandeld. De nieuwigheid van dit onderzoek ligt in de dubbele mechanistische focus—lokale fotobiologische stimulatie en systemische immuunmodulatie—en de integratie van kwantitatieve biomarkeranalyse om therapeutische mechanismen te verduidelijken. Door het immunoregulerende effect van matrine in combinatie met gerichte fototherapie te verduidelijken, is ons werk bedoeld om een op bewijs gebaseerde basis te leggen voor een nieuw therapeutisch paradigma in vitiligobeheer. Uiteindelijk kunnen deze bevindingen het veld vooruithelpen richting precisie, immuungestuurde fototherapiestrategieën die niet alleen repigmentatie bereiken, maar ook langdurige stabilisatie van ziekten en terugvalpreventie.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

Deze studie werd uitgevoerd in overeenstemming met de ethische principes van de Verklaring van Helsinki en de institutionele regelgeving voor menselijk onderzoek. De studie werd uitgevoerd in overeenstemming met de ethische principes van de Verklaring van Helsinki en goedgekeurd door de Ethische Commissie van het Xingtai Volksziekenhuis, afdeling Dermatologie (Goedkeurings-ID: 2021[029]). Alle deelnemers gaven schriftelijke geïnformeerde toestemming vóór de deelname.

Patiëntselectie
In totaal werden 232 patiënten met klinisch gediagnosticeerde vitiligo ingeschreven over een periode van 3 jaar van januari 2021 tot december 2023. Alle deelnemers werden gediagnosticeerd met niet-segmentaal vitiligo (gegeneraliseerd of gelokaliseerd type) en geclassificeerd als stabiel of progressief op basis van de afwezigheid of aanwezigheid van nieuwe laesies binnen 3 maanden vóór inschrijving. De duur van de ziekte en de verspreiding van de laesie werden bij de beginlijn geregistreerd. De inschrijvingscriteria omvatten personen van 18 tot 65 jaar met stabiele of progressieve vitiligo bevestigd door dermatologen via klinisch onderzoek, Wood's lamp verlichting en dermoscopie. Uitsluitingscriteria waren zwangerschap, lactatie, fotoallergische aandoeningen, systemische auto-immuunziekte, ernstige lever- of nierfunctiestoornissen, en eerder gebruik van systemische corticosteroïden, immunosuppressiva of fototherapie binnen 3 maanden. Alle procedures werden uitgevoerd onder voortdurende ethische supervisie, zodat patiënt gedurende de hele behandeling comfort en veiligheid werd gewaarborgd.

Studieoverzicht en behandelworkflow
De algemene werkwijze van de studie, inclusief patiëntenregistratie, groepstoewijzing, vervolgbeoordelingen en biomarkeranalyse, wordt geïllustreerd in Figuur 1. In aanmerking komende deelnemers werden in een verhouding van 1:1 toegewezen aan een van twee parallelle studiegroepen: de 308-nm excimer laser monotherapiegroep (excimer laser alleen; n = 116) en de combinatie therapie groep (308-nm excimer laser plus orale matrine; n = 116). Groepstoewijzing werd uitgevoerd met behulp van een computergegenereerde willekeurige volgorde, opgesteld door een onafhankelijk onderzoeksmedewerker die niet betrokken was bij de uitkomstbeoordeling; Toewijzingen werden in opeenvolgend genummerde, verzegelde enveloppen geplaatst en na inschrijving geopend om de toewijzing van de behandeling te bepalen. De therapeutische workflow bestond uit drie hoofdfasen: (1) basisbeoordeling en documentatie, (2) 12 weken actieve behandeling volgens het toegewezen regime, en (3) evaluatie na de behandeling, inclusief laboratoriumtesten van serumimmunoglobulines en inflammatoire cytokines. Elke patiënt kreeg een gestandaardiseerd zorgplan, identieke follow-up intervallen en uniforme laboratoriumanalyseprocedures. Klinische foto's en VASI-scoring werden uitgevoerd door dermatologen die blind waren voor behandelingstoewijzing. Alle procedures werden uitgevoerd in de dermatologische fototherapiesuite van het Xingtai People's Hospital onder gecontroleerde omgevingsomstandigheden (kamertemperatuur 22–24 °C, relatieve luchtvochtigheid 40%–60%).

Voorbereiding van het behandelgebied
Voorafgaand aan elke lasersessie werden de gedepigmenteerde gebieden van het doelwit voorzichtig gereinigd met steriele fysiologische zoutoplossing en drooggedeppt met pluisvrij medisch gaas. De laesiehuid werd onderzocht om de afwezigheid van infectie, excoriatie of korstvorming te bevestigen. Wanneer meer dan één laesie in één bezoek werd behandeld, werd elke laesie voorbereid en achtereenvolgens behandeld. Laesies die een enkel bestralingsveld overschreden, werden onderverdeeld in aangrenzende bestralingsvelden, en de omliggende normale huid werd afgeschermd met een ondoorzichtig UV-blokkerend laken voor elk veld om onnodige blootstelling te minimaliseren. Patiënten kregen de instructie om 24 uur voor de behandeling geen topische middelen, fotosensibiliserende cosmetica of parfums te gebruiken. Beschermende bril werd gedurende de hele procedure gedragen door zowel de patiënt als de operator.

308-nm excimer laserbestralingsprocedure
Er werd een monochromatisch 308-nm xenonchloride (XeCl) excimerlasersysteem gebruikt. Alle lasersessies werden uitgevoerd door twee getrainde dermatologische artsen onder een gestandaardiseerd protocol om een consistente energie-output, bestralingsafstand en reproduceerbaarheid te waarborgen. De output van het apparaat werd voor elke behandelingsdag gecontroleerd met een gekalibreerde UV-vermogensmeter, en alle systemen werden wekelijks gekalibreerd door een gecertificeerde technicus om een foutmarge onder de ±5% te houden. Voor de eerste bestraling werd de minimale erythema-dosis (MED) per patiënt bepaald door incrementele doses (100–400 mJ/cm2) toe te passen op kleine testgebieden op de binnenste onderarm en de erythemarespons na 24 uur te evalueren; De resultaten werden gefotografeerd en vastgelegd in patiëntendossiers. Een representatieve MED-documentatie en een sessie-tot-sessie dosisaanpassingsschema zijn opgenomen in Aanvullende Tabel 1. MED werd gedefinieerd als de laagste testdosis die een duidelijk waarneembare, uniforme erythema bij 24 uur produceert. De initiële behandeldosering werd vastgesteld op 80%–90% van de individuele MED, en de daaropvolgende dosiswijzigingen volgden een vooraf gedefinieerd algoritme gebaseerd op de voorafgaande sessie 24-uur erythemarespons (verhoging met 10%–20% bij afwezige of milde erythema, behoud dezelfde dosis bij matige erythema, en verlaag met 10%–20% bij blaren of significante pijn). De initiële therapeutische dosis werd vastgesteld op 150–250 mJ/cm² (ongeveer 80%–90% van de individuele MED). Elke sessie begon met de patiënt comfortabel zittend op een verstelbare stoel. Het laserhandstuk werd loodrecht (90°) op de huid gehouden op een afstand van 10–15 cm, en cirkelvormige of rechthoekige bestralingsvelden werden uitgelijnd om gedepigmenteerde gebieden volledig te bedekken met minimale overlap. Bestraling duurde 1–3 seconden per belichtingsveld, afhankelijk van de vloeiendheid. De doses werden vervolgens per sessie verhoogd met 10%–20% volgens de eerdere erythemarespons; Als er matige erythema optrad, bleef de vorige dosis behouden, terwijl blaren of pijn een vermindering van 10%–20% rechtvaardigden. De maximale dosis overschreed niet de 2.000 mJ/cm2. Elke sessie bedekte alle zichtbare laesies en duurde 10–20 minuten, afhankelijk van de omvang. De behandelingen werden 2 keer per week uitgevoerd met minstens 72 uur tussen sessies verspreid over een totale periode van 12 weken (24 sessies). Na bestraling werd een dunne laag steriele aloë-gebaseerde gel aangebracht om het lokale erythema te verlichten. Patiënten kregen de instructie om 48 uur lang geen zonlicht te gebruiken en gedurende de behandeling een breedspectrumzonnebrandcrème (SPF >30) te gebruiken. Laesies met >50% repigmentatie bleven onder dezelfde parameters doorgaan totdat stabiele pigmentatie was bereikt.

Orale matrine toediening
In de combinatiegroep werd een steriel waterig extract van Sophora flavescens-wortels bereid volgens de Chinese Farmakapoea (editie 2020)30 en gestandaardiseerd tot een concentratie van 5 mg/mL met ≥98% zuiverheid, geverifieerd door high-performance liquid chromatografie (HPLC). De oplossing werd bewaard bij 4 °C in amberkleurige glazen flessen om fotodegradatie te voorkomen. Willekeurige batchtests bevestigden de alkaloïdeconcentratie (5 ± 0,3 mg/mL) en microbiële steriliteit. Elke patiënt kreeg de matrine oplossing orale toediening in een dosis van 0,3 g (60 mL) tweemaal daags gedurende 12 weken, gesynchroniseerd met het laserbehandelschema. De dosering werd geselecteerd op basis van eerdere farmacologische gegevens die effectieve immunomodulatie met een gunstig veiligheidsprofiel aantoonden bij chronisch inflammatoire dermatosen31,32. Patiënten kregen de instructie om de oplossing 30 minuten na de maaltijd in te nemen om gastro-intestinale ongemakken te minimaliseren en alcohol, sterke thee en pittig eten tijdens de therapie te vermijden om de leverbelasting te verminderen. Lichte misselijkheid of vermoeidheid werd behandeld door het toedienen van een kleine hoeveelheid warm water. De therapietrouw werd beoordeeld via een medicatiedagboek en verificatie van het terugbrengen van de fles bij elk vervolgbezoek. De veiligheid werd bij elk bezoek beoordeeld door gestructureerd symptoomonderzoek en documentatie van bijwerkingen, waaronder gastro-intestinale ongemakken, vermoeidheid en eventuele tekenen die wijzen op leverintolerantie. Er waren geen extra systemische medicijnen, topische corticosteroïden of immunosuppressiva toegestaan tijdens de observatieperiode om verstorende effecten te voorkomen.

Evaluatie van de klinische respons
Pigmentveranderingen werden bij de beginfase en in week 4, 8 en 12 geëvalueerd door twee ervaren dermatologen die blind waren voor behandelinformatie. Gestandaardiseerde digitale foto's werden genomen onder identieke belichting en camera-instellingen (afstand 60 cm, belichting 1/60 s, ISO 200). De mate van repigmentatie werd gekwantificeerd met behulp van de Vitiligo Area Scoring Index (VASI). Laesies werden daarnaast ingedeeld in vier categorieën: Uitstekend (≥75% repigmentatie), Goed (50%–74%), Matig (25%–49%), Slecht (<25%). Patiënten vulden ook een 10-punts Visual Analogue Scale (VAS) in voor tevredenheid en symptoomverlichting. Bij elk bezoek werden bijwerkingen zoals erythema, branderigheid, pruritus, blaarvorming en hyperpigmentatie gedocumenteerd.

Verzameling van serummonsters
Voor biomarkeranalyse werd nuchter perifere bloed (5 mL) bij elke patiënt bij aanvang en aan het einde van week 12 afgenomen met serumseparatiebuisjes. Monsters mochten 30 minuten stollen bij kamertemperatuur en werden 10 minuten bij 4 °C gecentrifugeerd op 800 x g. Het supernatantserum werd gealiquoteerd in 0,5 mL cryovialen en opgeslagen bij −80 °C tot analyse. Alle monsters werden binnen 2 uur na afname verwerkt om de afbraak van cytokines te minimaliseren.

Kwantificering van serumimmunoglobulines
Serum IgG-, IgA- en IgM-concentraties werden bepaald met behulp van geautomatiseerde immunonephelometrie volgens de instructies van de fabrikant. Kalibratiecurves werden opgesteld met seriële verdunningen van referentiestandaarden. Elke assay bevatte kwaliteitscontrole-serum bij hoge en lage concentraties. De metingen werden uitgedrukt in g/L en 2x herhaald om een intra-assay variatie < 5% te waarborgen. De precisie en kalibratie van het instrument werden dagelijks gecontroleerd met behulp van traceerbare controlestandaarden. De resultaten werden elektronisch geregistreerd en beoordeeld door twee onafhankelijke technici die blind waren voor patiëntinformatie.

Meting van ontstekingscytokines
Cytokineprofilering omvatte IFN-γ, TNF-α, IL-1β, IL-6, IL-17 en IL-10, gekwantificeerd met behulp van een multiplex enzym-gekoppelde immunosorbentassay (ELISA) platform. De voorbereiding van reagens volgde het standaardprotocol van de fabrikant. Kort gezegd werd 100 μL verdund serum toegevoegd aan elke met antilichamen omhulde put en 2 uur geïncubeerd bij 37 °C. Na het wassen met fosfaatgeborste zoutoplossing met 0,05% Tween-20 (PBST) werd 100 μL biotinylerend detectieantilichaam toegevoegd en 1 uur geïncubeerd. Daarna werden de putten 30 minuten geïncubeerd met streptavidine-mierikswortelperoxidase, gevolgd door kleurontwikkeling met tetramethylbenzidine (TMB) substraat gedurende 10 minuten in het donker. De reactie werd gestopt met 50 μL 2 mol/L zwavelzuur, en de absorptie werd gemeten bij 450 nm met een microplaatlezer. Standaardcurves werden gegenereerd uit seriële verdunningen van recombinante cytokines, en de concentraties werden uitgedrukt als pg/mL. Alle monsters werden in dubbele opmetingen gemeten. Om reproduceerbaarheid te waarborgen, werd de interassay variatiecoëfficiënt (CV) onder de 10% gehouden. Blanco putten bevatten assaybuffer zonder serum, en negatieve controleputten bevatten een cytokinevrije matrix die identiek aan de monsters werd verwerkt en gelijkwaardig was aan de 0 pg/mL standaard om de assayspecificiteit te bevestigen. Alle gehemolyseerde of lipemische monsters werden uitgesloten van de eindanalyse.

Statistische analyse
Gegevens werden ingevoerd in een speciale elektronische database en gecontroleerd op nauwkeurigheid door twee onafhankelijke datamanagers. De steekproefgrootte werd geschat op basis van de verwachte effectgrootte (Cohen's d = 0,5) met α = 0,05 en kracht (1–β) = 0,8, wat resulteerde in een minimum van 100 deelnemers per groep. Om meerdere vergelijkingen tussen cytokines te controleren, werd de Bonferroni-correctie toegepast wanneer passend. Multivariate lineaire regressie werd waar nodig toegepast om te corrigeren voor mogelijke confounders, waaronder leeftijd, geslacht, ziekteduur en basislaesiegebied. De normale verdeling van continue variabelen werd geverifieerd met behulp van de Shapiro–Wilk-test. Beschrijvende statistieken werden gepresenteerd als gemiddelde ± standaarddeviatie (SD) voor normaal verdeelde gegevens of als mediaan (interkwartielbereik, IQR) voor scheve gegevens. Veranderingen voor en na behandeling werden geanalyseerd met gepaarde t-tests, terwijl vergelijkingen tussen groepen werden geanalyseerd met onafhankelijke t-tests of Mann–Whitney U-tests, afhankelijk van toepassing. Categorische gegevens werden vergeleken met de chi-kwadraat of de exacte test van Fisher. Correlaties tussen cytokineniveaus, immunoglobulinen en pigmentatieverbetering werden beoordeeld met behulp van de Pearson-correlatiecoëfficiënt. Alle analyses werden uitgevoerd met SPSS v26.0 (RRID: SCR_002865), en een tweezijdige p < 0,05 werd als statistisch significant beschouwd.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

Klinische basiskenmerken toonden vergelijkbare demografische en ziekteprofielen tussen groepen
In totaal werden 232 patiënten met niet-segmentale vitiligo ingeschreven en gelijkmatig toegewezen aan de excimergroep (n = 116) of de combinatietherapiegroep die laser plus orale matrien ontvingen (n = 116). Basisdemografische en klinische parameters, waaronder leeftijd (35,8 ± 6,0 vs. 35,4 ± 5,6 jaar), geslachtsverdeling (man/vrouw: 59/57 vs. 59/57), ziek...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

Deze studie introduceert een gecombineerde therapeutische benadering waarbij een 308-nm excimerlaser wordt gecombineerd met orale matrien voor de behandeling van niet-segmentale vitiligo. De centrale stelling is dat dubbele modulatie—lokale fotobiologische stimulatie van melanocyten in combinatie met systemische immunoregulatie—robuustere en duurdere repigmentatie kan bereiken dan de excimergroep. De bevindingen ondersteunen deze hypothese: de combinatietherapie veroorzaakte eerder perif...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

Er zijn geen financiële belangenconflicten om te melden.

Dankbetuigingen

De auteurs willen het hele team van de afdeling Dermatologie bedanken voor hun harde werk gedurende het project.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
308-nm XeCl Excimer Laser SystemSTRATA Skin Sciences (XTRAC)Velocity 400 (Model)Gerichte 308-nm UVB-laser voor vitiligo-laesies; verifieer model op uw locatie; of gelijkwaardig apparaat
–80 °C Ultra-Low FreezerThermo ScientificForma 900 Series (Model 980)Langdurige serumopslag
96-Well ELISA Plates (High-Bind)Corning Costar9018Als u coating in huis of single-plex workflows gebruikt
Instelbare medische stoelMidmark641 Procedure ChairPatiëntpositionering voor consistente bestralingsafstand
Aloe-gebaseerde verzachtende gel3M9236Dunne post-irradiagelaag voor erythemaverlichting; of gelijkwaardige medische gel
Bernsteinglasfles (500 mL)Fisherbrand02-897-2JLichtbeschermde opslag bij 4 °C voor matrine-oplossing
Analytische balans (0,1 mg)METTLER TOLEDOME104EGravimetrische voorbereiding en QC
Geautomatiseerde immunonefelometerSiemens HealthineersBN ProSpec SystemKwantificeert IgG/IgA/IgM per IFU van de fabrikant
Barcodelabels (Cryo-safe)Diversified BiotechCRY-1000Sampletracking en bewijsketting
Biotinylerend detectie-antilichaamsetMSDOpgenomen bij paneelKomt overeen met capture-antilichamen
Breed-spectrum zonscrème SPF ≥30Neutrogena070501017052 (Ultra Sheer SPF 50)Fotobescherming na sessie; poliklinische counseling item
Calibrators voor immunoglobulinenSiemens HealthineersN Protein Standard SLTraceerbare kalibratie voor nefelometrie
Controleserum (hoog/laag) voor Ig-assaysSiemens HealthineersN/T Protein ControlsDagelijkse QC van nefelometrische runs
Cryogene buisjes, 0,5 mLThermo Scientific Nunc375418Serumafvullingen; externe draad; DNase/RNase-vrij
DermatoscoopDermLiteDL4Gepolariseerde handmatige dermatoscoop voor lesie-inspectie
Dermoscopy/Photography Scale Card3GenScale/Color Reference CardZorgt voor kleurconsistentie over tijdstippen heen
Digitale camera voor gestandaardiseerde afbeeldingenCanonEOS 80DVaste afstand 60 cm; belichting 1/60 s; ISO 200; statief aanbevolen
Koelcentrifuge met vaste hoekEppendorf5810 R800 × g, 10 min, 4 °C serumscheiding
HPLC-kolom (C18, 4,6×250 mm, 5 µm)AgilentZORBAX Eclipse Plus C18, 959990-902Routinematige alkaloïde scheiding; of gelijkwaardig
HPLC-systeemAgilent1260 Infinity II (G7111B)Zuiverheidsverificatie en batchstandaardisatie van matrine
Beeldanalyse / MetingImageJ (NIH)1.54 (RRID:SCR_003070)Optionele kwantificering van lesiegebied uit foto's
Lintvrij medische gaas (sterieel)Johnson & Johnson546112Droog behandelgebied na reiniging
Matrine (≥98%, HPLC)MedChemExpressHY-N0156Bereiding van orale oplossing; controleer lokale leverancier en farmacopee-naleving
Microplate Reader (450 nm)BioTek (Agilent)Synergy H1Absorptie bij 450 nm; correctie van de padlengte
Microplate WasherBioTek (Agilent)ELx405Automatische wascycli; vermindert variabiliteit
Multiplex Human Cytokine Panel (Custom 6-plex)Meso Scale Discovery (MSD)U-PLEX Platform (K15067L)Bevat IFN-γ, TNF-α, IL-1β, IL-6, IL-17A, IL-10; of gelijkwaardig
PBS-tablettenGibco18912-014PBS-voorbereiding voor wasbeurten/buffers
Plate Sealer FilmsBio-RadMSB1001Voorkomt verdamping tijdens incubatie
Beschermende UV-bril (operator)Uvex (Honeywell)S0360X Ultra-Spec 2000Oogbescherming voor de operator; gebruik gewijde bril
Beschermende UV-bril (patiënt)Uvex (Honeywell)S0360X Ultra-Spec 2000UV-blokkerende brillen voor patiëntveiligheid tijdens bestraling
Serumscheidingsbuisjes (SST II Advance)BD Vacutainer367955Nuchter bloedafname bij baseline en week 12
Statistisch softwareIBMSPSS Statistics v26.0 (RRID:SCR_002865)Primaire gegevensanalyse volgens protocol
Steriele fysiologische zoutoplossing (0,9%)Baxter2B1324 (500 mL)Lesioonreiniging voorafgaand aan elke laserbehandeling
Stopoplossing (2 M H2SO4)Sigma-Aldrich258105Stopt TMB-reactie
Streptavidine-HRPThermo ScientificN100Detectiereagens; kit-compatibel
TMB-substraat (ELISA)Thermo Scientific34028Chromogeen ontwikkeling; 10 min in het donker
Statief met afstandsmarkeringManfrottoMKCOMPACTLT-BKHoudt constant de camera-tot-onderwerp afstand
Tween-20 (voor PBST 0,05%)Sigma-AldrichP1379Wasbufferoppervlakte-actieve stof
UV-radiometer / vermogensmeterInternational Light TechnologiesILT2400Voor dagelijkse outputverificatie en MED-test; met SED240/NS254 detector of gelijkwaardig
UV-blokkerende ondoorzichtige drape/sheetThorlabsBK5 Blackout FabricBedekt omringende normale huid om onbedoelde blootstelling te voorkomen; of gelijkwaard

Referenties

  1. Brunner, P. M., et al. Transcriptomic profiling of vitiligo patients shows polar immune dysregulation in involved and uninvolved skin. J Allergy Clin Immunol. 156 (4), 993-1007 (2025).
  2. Carbone, M. L., et al. Insight into immune profile associated with vitiligo onset and anti-tumoral response in melanoma patients receiving anti-PD-1 immunotherapy. Front Immunol. 14, 1197630(2023).
  3. Lerner, G., et al. Regulatory T cell dysregulation in vitiligo: A meta-analysis and systematic review of immune mechanisms and therapeutic perspectives. Int J Dermatol. 64 (12), 2247-2256 (2025).
  4. Lu, J., et al. Identification of shared biomarkers and immune infiltration signatures between vitiligo and Hashimoto's thyroiditis. Clin Cosmet Investig Dermatol. 17, 311-327 (2024).
  5. Ma, B., Wang, X. Unravelling the molecular mechanisms and immune landscape of vitiligo: A comprehensive bioinformatics study on melanogenesis-related genes. Ann Hum Biol. 52 (1), 2468692(2025).
  6. Okamura, K., Suzuki, T. Genetics and epigenetics in vitiligo. J Dermatol Sci. 117 (3), 45-51 (2025).
  7. Yang, M., Wang, H., Zhang, R. Bioinformatics analysis of oxidative stress-related genes and immune infiltration patterns in vitiligo. Clin Cosmet Investig Dermatol. 18, 475-489 (2025).
  8. Al Abadie, M. S., Chaiyabutr, C., Patel, K. X., Gawkrodger, D. J. Vitiligo and psychological stress: A hypothesis integrating the neuroendocrine and immune systems in melanocyte destruction. Int J Dermatol. 63 (7), 841-843 (2024).
  9. Hu, Y., Wang, S. B., Wang, K., He, M. J. From phenotype to molecules: Unveiling the genetic and immunological bridges between autoimmune diseases and vitiligo. Clin Cosmet Investig Dermatol. 17, 2475-2486 (2024).
  10. Jin, S., et al. The role of regulatory T cells in vitiligo and therapeutic advances: A mini-review. Inflamm Res. 73 (8), 1311-1332 (2024).
  11. Li, J., et al. The relationship between psoriasis and vitiligo: From a comprehensive study. Skin Res Technol. 30 (7), e13868(2024).
  12. Patel, R., et al. Prevalence of vitiligo among children and adolescents in the United States. Dermatology. 239 (2), 227-234 (2023).
  13. Rao, H., et al. Case report: Immune checkpoint inhibitor-related vitiligo-like depigmentation in non-melanoma advanced cancer: A report of three cases and a pooled analysis of individual patient data. Front Oncol. 12, 1099108(2022).
  14. Sun, C., Ding, H., Zhang, L., Wang, J., Su, M. Co-regulatory mechanisms and potential markers of oxidative stress-related genes in vitiligo and alopecia areata. Skin Res Technol. 30 (8), e70001(2024).
  15. Wang, X., et al. Circulating memory T cells and TCF1 (+) T cells aid in diagnosis and monitor disease activity in vitiligo. J Pharm Anal. 14 (11), 100998(2024).
  16. Wu, L., Han, T., Wang, Y., Li, S., Li, C. Epigenetic regulation in vitiligo: Mechanisms, challenges, and therapeutic opportunities. Curr Opin Immunol. 95, 102580(2025).
  17. Xie, B., Zhu, Y., Shen, Y., Xu, W., Song, X. Treatment update for vitiligo based on autoimmune inhibition and melanocyte protection. Expert Opin Ther Targets. 27 (3), 189-206 (2023).
  18. Chen, J., et al. Mif inhibition alleviates vitiligo progression by suppressing CD8 (+) T cell activation and proliferation. J Pathol. 260 (1), 84-96 (2023).
  19. Kano, S., et al. Differences in the immune microenvironment between improved and non-improved cases of vitiligo after halo nevus excision. J Dermatol Sci. 109 (3), 136-142 (2023).
  20. Liu, H., Wang, Y., Le, Q., Tong, J., Wang, H. The ifn-γ-cxcl9/CXCL10-CXCR3 axis in vitiligo: Pathological mechanism and treatment. Eur J Immunol. 54 (4), e2250281(2024).
  21. Lo, J., Hanania, H. L., Keiser, M. F., Patel, A. B. Immune checkpoint inhibitor-induced vitiligo in cancer patients: Characterization and management. Arch Dermatol Res. 315 (6), 1697-1703 (2023).
  22. Lu, L., et al. Vitiligo associated with type 2 immune inhibitors: Faers analysis and literature review. J Dermatol. 52 (6), 1008-1014 (2025).
  23. Mazzetto, R., et al. Anti-tumor immunity and vitiligo: From immune-related adverse reactions to protection from cancer. Immunotherapy. 16 (13), 841-843 (2024).
  24. Starace, M., et al. Immune checkpoint inhibitor-induced vitiligo-like depigmentation. JAMA Dermatol. 161 (2), 216-218 (2025).
  25. Xin, Y., Yuan, T., Wang, J. Circulating immune cells and vitiligo: A bidirectional two-sample mendelian randomization study. Front Immunol. 15, 1391186(2024).
  26. Yang, P., et al. Single-cell transcriptomics reveals peripheral immune responses in non-segmental vitiligo. Front Immunol. 14, 1221260(2023).
  27. Ezzedine, K., et al. Efficacy and safety of oral ritlecitinib for the treatment of active nonsegmental vitiligo: A randomized phase 2b clinical trial. J Am Acad Dermatol. 88 (2), 395-403 (2023).
  28. Gay-Mimbrera, J., et al. Comprehensive single-cell chromatin and transcriptomic profiling of peripheral immune cells in nonsegmental vitiligo. Br J Dermatol. 193 (1), 115-124 (2025).
  29. Liu, K., et al. Jak inhibitors in immune regulation and treatment of vitiligo. Cytokine Growth Factor Rev. 80, 87-96 (2024).
  30. National Pharmacopoeia Commission. Pharmacopoeia of the People’s Republic of China. Volume I, 2020 Edition, China Medical Science Press. Beijing. (2020).
  31. Huang, P., et al. Matrine regulates Th1/Th2 inflammatory responses by inhibiting the Hsp90/nf-κb signaling axis to alleviate atopic dermatitis. Kaohsiung J Med Sci. 39 (5), 501-510 (2023).
  32. Shi, H. J., et al. Oxymatrine therapy inhibited epidermal cell proliferation and apoptosis in severe plaque psoriasis. Br J Dermatol. 181 (5), 1028-1037 (2019).
  33. Seneschal, J., et al. Worldwide expert recommendations for the diagnosis and management of vitiligo: Position statement from the international vitiligo task force-part 2: Specific treatment recommendations. J Eur Acad Dermatol Venereol. 37 (11), 2185-2195 (2023).
  34. Seong, S. H., Oh, S. H. Up-and-coming drugs for the treatment of vitiligo. Ann Dermatol. 36 (4), 197-208 (2024).
  35. Upadhya, S., Andrade, M. J., Shukla, V., Rao, R., Satyamoorthy, K. Genetic and immune dysregulation in vitiligo: Insights into autoimmune mechanisms and disease pathogenesis. Autoimmun Rev. 24 (8), 103841(2025).
  36. Wang, Y., et al. Innate immune activation in vitiligo: Mechanisms and pathophysiological implications. Front Immunol. 16, 1631074(2025).
  37. Zhang, M., et al. Vitiligo: An immune disease and its emerging mesenchymal stem cell therapy paradigm. Transpl Immunol. 76, 101766(2023).
  38. Luo, L., Zhu, J., Guo, Y., Li, C. Mitophagy and immune infiltration in vitiligo: Evidence from bioinformatics analysis. Front Immunol. 14, 1164124(2023).
  39. Sant'anna-Silva, A. C. B., et al. Vitiligo auto-immune response upon oxidative stress-related mitochondrial DNA release opens up new therapeutic strategies. Clin Transl Med. 14 (8), e1810(2024).
  40. Sibbald, C. Alopecia areata: An updated review for 2023. J Cutan Med Surg. 27 (3), 241-259 (2023).
  41. Wang, L., et al. Advances in psoriasis research: Decoding immune circuits and developing novel therapies. Int J Mol Sci. 26 (18), 9233(2025).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Meer artikelen verkennen

Behandeling van vitiligomatrine-therapieimmuunmodulatieregeneratie van melanocytenfototherapieVASI-scorecytokinenanalyse

Dit artikel is gepubliceerd

Video binnenkort beschikbaar

Neem contact met ons op
Aanbevelen aan de bibliotheek

Privacy

Gebruiksvoorwaarden

Beleidsoverzicht

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. Alle rechten voorbehouden.